马胚胎附植及其分子调控研究进展

胚胎附植是处于活化状态的囊胚滋养层细胞与处于接受态的母体子宫上皮细胞之间逐步建立组织和生理上联系的过程。马（马属动物）在该过程中先后存在侵入性的绒毛膜带（子宫内膜杯）和非侵入性的尿囊绒毛膜（微子叶型上皮绒毛膜胎盘）,是一种集侵入性与非侵入性胚胎滋养层于一体的哺乳动物。多种分子共同调节妊娠母马的胚胎附植过程。作者综述了马胚胎附植特点、过程与相关分子调控的研究进展,对减少母马妊娠早期胚胎丢失与流产具有重要参考价值。     

动物胚胎附植的机理及其在畜牧业中的指导作用

动物胚胎附植（着床）问题一直为许多畜牧工作者所探讨，以便能搞清其机制，为提高动物繁殖率，控制繁育机能寻求一条可能的新途径，本文旨在通过阐述动物胎附植过程中发生的一系列复杂的形态学，生理学和生物化学方面的变化与调节机理，为在畜牧业中动物保胎，控制性比，提高繁殖性能提供一定的理论依据。     

猪胚胎附植部分因子研究进展

产仔数性状是养猪业中一个重要的经济性状,而胚胎附植对猪产仔数的高低有重要的影响。胚胎附植的调控涉及到多个生物学过程,在其中发挥作用的物质（附植因子）很多。作者针对孕酮、孕酮受体、雌二醇、雌激素受体α（ESR1）和促红细胞生成素产生肝细胞受体配体（Eph-ephrin）系统这几种附植因子的相关研究进行了归纳总结,重点阐述了这些因子在母胎对话过程中的时空表达、功能、突变、调控等方面的研究进展。其中,孕酮及其受体在猪胚胎附植活动中全程发挥着重要作用,黄体分泌的孕酮与母猪子宫内膜腔上皮、腺上皮、基质和肌细胞中的孕酮受体结合发挥作用,使这些组织细胞分泌多种附植因子,这些附植因子进一步参与胚胎附植过程。雌二醇是雌激素中含量最多、活性最强的一种激素,主要由卵巢颗粒细胞分泌,雌激素受体α是子宫内雌二醇的主要受体,二者结合可使母猪发情;此外,附植中处于游离状态的胚泡也分泌雌二醇,其是一个让母猪子宫内膜得以识别的信号,允许胚泡附植。Eph-ephrin系统作用广泛,其在人、小鼠和猪的胚胎附植过程中发挥着重要作用。系统中的EphA1、ephrin A1、EphA4等基因在猪的胚胎附植期表达量显著高于空怀猪,它们在子宫内膜附植点的表达量显著高于附植点间的部位,且ephrin A1的抑制表达会降低子宫内膜上皮细胞的迁移和黏附能力。这些附植因子都在猪胚胎附植活动中发挥着重要作用,对它们的深入研究将有利于明确猪胚胎附植调控机理,进一步揭示猪高繁机理。     

哺乳动物胚胎附植与中药保胎作用机制研究进展

附植是指哺乳动物囊胚滋养层细胞与母体子宫上皮细胞之间逐步建立组织生理上联系的过程。成功的附植有赖于胚泡与母体相互识别,胚泡发育与母体子宫变化的同步以及抑制母体的免疫排斥反应和母体接受性等一系列事件。这些事件又受到母体和胚泡的激素以及一些因子的调控。传统中药可通过提高孕酮的含量、类雌激素样作用、治疗子宫内膜炎的作用以及影响白血病抑制因子和白细胞介素1的表达量来促进山羊胚胎附植。文章主要论述了哺乳动物胚胎附植的机制以及中药对胚胎附植的影响,这有助于进一步阐明中药保胎的作用机理。     

小鼠胚胎附植前后瘦素与脂肪细胞变化的相关性试验

1994年,Zhang Y等[1]首次克隆到肥胖基因(obese gene,Ob),并发现其编码产物为多功能分泌型蛋白质激素-瘦素(leptin).leptin由167个氨基酸构成,在分泌入血的过程中去除21个氨基酸组成的N端信号肽形成功能型瘦素.     

细胞外囊泡调控哺乳动物胚胎附植研究进展

细胞外囊泡(extracellular vesicles,EVs)作为一种细胞交流媒介,能够通过其携带的miRNA、蛋白质等分子作用于靶细胞/靶组织,影响靶细胞/靶组织的功能和表型.最近研究表明,来自于胚胎、子宫内膜与子宫微环境等的细胞外囊泡参与了哺乳动物胚胎附植过程,通过影响子宫内膜的容受性和滋养层细胞的黏附能力,进...     

体细胞克隆的小鼠胚胎在附植前后发育的研究

采用成年小鼠的卵丘细胞核、胎儿成纤维细胞作核供体细胞来进行核移植,研究小鼠卵母细胞的去核程序和影响重构胚附植前发育的激活条件;随后将重构胚与供体细胞系共培养后获得囊胚阶段的小鼠重构胚,并将其移植到受体鼠体内后获得了24%克隆胚胎。结果表明,小鼠卵母细胞质能够进行重编程来支持早期的胚胎发育。     

外泌体在哺乳动物胚胎附植中的作用研究进展

外泌体的分泌是不同类型的细胞间信息交流的一种重要方法,近几年发现外泌体在胚胎附植中介导胚胎与母体的信息交流起重要作用。本文综述了外泌体的主要释放机制和分离鉴定方法、子宫内膜细胞和胚胎来源的外泌体在哺乳动物中调节胚胎附植的重要作用,为提高动物胚胎附植的成功率提供新依据,也为人类体外受精、辅助生殖技术的改进提供参考资料。     

长链非编码RNA在哺乳动物胚胎附植中的作用研究进展

胚胎附植是一个复杂的生物过程,在哺乳动物的妊娠环节中至关重要,其发生受到很多转录调控因子的影响。长链非编码RNA(Long Non-coding RNA,lncRNA)是一类长度大于200核苷酸（nt）的转录本,基本不编码蛋白质,但其参与胚胎发育、肌肉发育、性别决定与分化等多种生物学过程和疾病的调控。本文简述lncRNA的研究现状,主要介绍了lncRNA通过影响子宫内膜容受性、调节蜕膜、调节子宫内膜增殖、调节激素水平等途径促进胚胎附植,以期为哺乳动物胚胎附植期中lncRNA的功能研究提供参考。     

转录组测序筛选山羊妊娠早期胚胎附植相关基因

旨在通过胚胎附植前、后的山羊子宫角组织高通量测序筛选妊娠早期胚胎附植的关键基因。本研究选取2～4岁体重相近((44.76±3.49)kg)的经产努比亚母山羊16只,在同期发情-人工输精配种后的第15(D15)和第30天(D30)分别随机选取3只羊颈动脉放血处死。采集子宫角组织利用Illumina HiSeq进行高通量转录组测序(RNA-Seq),筛选差异表达基因(differentially expressed genes, DEGs)并对DEGs进行功能注释,基因功能查询进一步筛选与胚胎附植直接相关的调控基因,荧光定量PCR(qRT-PCR)对筛选的基因进行表达量验证分析。D15和D30子宫角组织转录本比较分析发现了 2 000个DEGs,其中上调基因620个,下调基因1 380个。GO功能聚类分析共分为3大类52组,其中细胞组分17组,生物过程23组,分子功能12组,获得细胞连接与增殖,生物粘附与调节,分子活性与转导等重要生物途径。以D15表达量高低为排序标准,从表达量最高的10个基因中筛选出了与胚胎附植有关的基因MGP和TAGLN;从上调和下调幅度最大的前10个差异表达基因中,获得参与妊娠相关糖蛋白合成与分泌的基因PAG-3、PAG-8、PAG-12,参与生长因子结合与生长激素释放激素受体活性相关基因GHRHR和胰岛素样生长因子结合蛋白基因IGFBP1。qRT-PCR结果显示,随机选取的6个基因在D15和D30子宫角中表达变化趋势与RNA-Seq结果一致。获得的基因MGP、TAGLN、PAG-3、PAG-8、PAG-12、GHRHR、IGFBP1在努比亚山羊胚胎附植中具有重要作用。     

猪子宫腔液外泌体来源的TIMP2蛋白对胚胎附植的影响

旨在研究猪子宫腔液外泌体来源的TIMP2蛋白对妊娠早期胚胎附植的影响.本研究采用超速离心法分离妊娠第9天(n=3)和第12天(n=3)大白猪子宫腔液外泌体,利用Western blot(WB)检测外泌体中TIMP2蛋白的变化,并通过免疫组化试验研究TIMP2蛋白在子宫中的表达定位.进一步用外泌体与猪胚胎滋养层细胞(po...     

热应激对小鼠附植前早期胚胎HSP70的诱导表达

选择超数排卵后怀孕昆明小鼠75只,以注射人绒毛膜促性腺激素(hCG)后的胚胎发育阶段为标准,分别在合子、2细胞、4细胞、8~16细胞和囊胚期对孕鼠进行了37℃、39℃、41℃和43℃热应激4 h。热应激后取胚,用免疫荧光细胞化学法检验胚胎热休克蛋白70(HSP70)的诱导表达。结果表明,HSP70在4细胞以上胚胎内呈阳性表达,相对高温时其表达量增加,囊胚时最显著。可见,附植前早期胚胎HSP70的热诱导表达与细胞期和温度密切相关。     

小鼠的胚胎冷冻保存研究

随着生物工程技术的进步，出现了许多生物工程小鼠品系，促使小鼠胚胎冷冻保存技术得到了广泛的应用，采用胚胎冷冻的方法来长期的保存这些品系，可以节省大量的人力和物力，目前，在小鼠胚胎冷冻方面的研究主要是围绕提高存活率和简化操作过程，本文综述了在小鼠胚胎冷冻保存方面的国内外研究进展。     

小鼠胚胎的玻璃化冷冻研究

用不同冷冻载体(玻璃管、塑料管和0.25 mL细管)及不同冷冻方法(程序化冷冻和玻璃化冷冻)对小鼠3.5 d~4 d桑椹胚和囊胚进行冷冻保存,并与不做任何冷冻保存处理直接培养进行对比。结果表明,使用玻璃管、塑料管和0.25 mL细管作为胚胎的承载材料进行玻璃化冷冻,效果差异不显著;采用程序化冷冻与OPS玻璃化冷冻法,对小鼠胚胎进行冷冻保存可以取得较好的结果。从而得出,用不同材质的冷冻载体进行玻璃化冷冻,可以获得与程序化冷冻相同的良好效果。     

FVB和EIIa-Cre小鼠胚胎冷冻保存研究

为探索FVB和EIIa-Cre小鼠的最佳超排及胚胎冷冻方法,对4～6周龄FVB和EIIa-Cre小鼠进行超数排卵效果比较。结果表明,FVB和EIIa-Cre的超排数量分别为每鼠平均33.71枚和24.23枚,发育至2-细胞期的数量分别为30.43枚和17.08枚,EIIa-Cre的胚胎数明显少于FVB。FVB和EIIa-Cre的胚胎复苏率、妊娠率和产仔率均存在较大差异,分别为77.7%和63.0%、80.0%和57.1%、13.6%和8.2%,FVB小鼠均高于EIIa-Cre小鼠。     

附植前小鼠胚胎上H-Y抗原表达的研究

用８～１２周龄ＢＡＬＢ／ｃ公鼠采取皮肤移植和脾细胞腹腔注射２种方式免疫同日龄纯系ＢＡＬＢ／ｃ母鼠,制备Ｈ－Ｙ抗血清。经精子微量细胞毒性试验,筛选的抗血清用于胚胎体外培养,以鉴定附植前小鼠胚胎上Ｈ－Ｙ抗原的表达。选用８ｃｅｌｌ－早期囊胚进行体外培养,分别于５～６、１８和２４ｈ观察胚胎发育情况。５～６ｈ后,Ｈ－Ｙ抗血清培养的胚胎退化率高达４０％,且发育迟缓,与自然性比例差异不明显（Ｐ〉０．０５）。正常     

细胞因子在猪胚胎附植期的作用及机制

猪胚胎的附植是通过广泛的细胞运动和重塑发生。胚胎的成功附植主要取决于胚胎延伸和滋养外胚层与子宫内膜上皮紧密连接的成功,这种紧密连接保证了孕体摄取其存活所必需的子宫腺上皮分泌物质。这些过程需要子宫和胚胎来源的细胞因子完成子宫内膜和滋养外胚层之间的细胞重塑,营造胚胎附植时的促炎微环境,维持附植阶段免疫系统的平衡,协调子宫和胚胎之间的相互作用等。本文主要综述了猪胚胎附植时期,由子宫和胚胎来源的细胞因子包括白细胞介素-1β(IL-1β)、干扰素（IFN）、成纤维细胞生长因子（FGF）、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β(TGF-β)发挥的作用及其作用机理,以期为胚胎附植及发育调控相关研究提供参考。