HPLC法测定猪血浆中帕托珠利的方法学建立

建立了HPLC法测定猪血浆中帕托珠利含量的方法。色谱柱为安捷伦ZORBAX Eclipse XDB-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相0.2%乙酸水溶液-乙腈(47∶53),柱温35℃,流速为1 m L/min,检测波长为250 nm。在本方法条件下,帕托珠利在0.1～10μg/m L浓度范围内线性关系良好(r0.999),检测限(LOD)为0.04μg/m L,定量限(LOQ)为0.1μg/m L,批内和批间回收率均大于90%,批内和批间精密度RSD均小于9%。本方法简单、准确、快速,可用于测定猪血浆中帕托珠利的含量。     

高效液相色谱法检测鸡血浆中IgY含量

文章建立了高效液相色谱(HPLC)检测鸡血浆中免疫球蛋白(IgY)含量的方法,检测用柱为蛋白G柱。通过优化缓冲液流速和调节离子强度,获得最佳参数为:结合缓冲液0.02M、pH7.0PBS(流速0.2mL/min);洗脱缓冲液0.1M、pH2.7Gly-HCl(流速0.4mL/min)。     

鸡柔嫩艾美耳球虫对托曲珠利的耐药性检测

为研究鸡柔嫩艾美耳球虫对不同剂量托曲珠利的耐药性,从张家口地区规模化养鸡场采集未使用过抗寄生虫药物鸡只的粪便并进行球虫卵囊分离和复壮。试验设5个感染用药组（Ⅰ组,25 mg/L剂量;Ⅱ组,50 mg/L剂量;Ⅲ组,75 mg/L剂量;Ⅳ组,100 mg/L剂量;Ⅴ组,125 mg/L剂量）和2个对照组（Ⅵ组,感染不用药组;Ⅶ组,不感染不用药组）,Ⅰ～Ⅴ组采用托曲珠利饮水给药方式,Ⅵ组和Ⅶ组的鸡正常饲喂日粮,Ⅰ～Ⅵ组进行球虫感染,检测耐药虫株。结果显示,25 mg/L剂量组和50 mg/L剂量组的托曲珠利产生耐药,75 mg/L剂量组、100 mg/L剂量组和125 mg/L剂量组的托曲珠利不耐药。结果表明,张家口地区鸡柔嫩艾美耳球虫耐托曲珠利的浓度为50 mg/L,为张家口地区鸡球虫病的防治提供了参考。     

帕托珠利混悬液对靶动物仔猪的安全性评价

为研究帕托珠利混悬液对靶动物仔猪的安全性,本试验选取32只3～5日龄哺乳仔猪,分为4个剂量组,每组8头,公母各半.其中各剂量组按体重给药剂量分别为1倍(15 mg/kg)、3倍(45mg/kg)和5倍(75mg/kg)最大推荐剂量,经口灌服5％帕托珠利混悬液,连用3次,每次间隔3d;另一组为空白对照组,给予相当于5倍最...     

高效液相色谱法测定鸡肌肉中地克珠利、妥曲珠利及其代谢物的残留量

建立了一种高效液相色谱法同时测定鸡肌肉中地克珠利、妥曲珠利、妥曲珠利砜及妥曲珠利亚砜残留量的方法。试样经乙腈涡旋提取,正己烷脱脂,经碱性氧化铝小柱净化,浓缩,流动相定容,高效液相色谱分离,紫外检测器检测,以保留时间定性,以峰面积定量。结果表明:该方法在0.05~5μg/m L浓度范围内线性关系良好,相关系数r均大于0.999。在50~500μg/kg添加浓度范围内,方法回收率在70%~110%之间,批内和批间变异系数均小于15%。方法简便、灵敏度高、稳定性好。     

帕托珠利混悬液在仔猪体内的药代动力学及生物利用度研究

为研究帕托珠利混悬液在仔猪体内的药动学特征及生物利用度,采用平行实验设计方法,将16头 40 日龄健康仔猪随机分成两组,每组8头（公母各半）,分别进行单剂量静脉注射（6mg/kg bw）和单剂量口服给药（15mg/kg bw）,所有猪给药前禁食12h,给药2h后恢复正常饮食。给药后按预定的采血点采集血样,血浆中帕托珠利的含量采用经验证的 HPLC检测方法进行测定。实测血药浓度数据采用Graphad prism 8.0拟合药时曲线图,并用 Winnonlin5.2计算药动学参数。结果显示,单剂量静脉注射帕托珠利注射液后帕托珠利在仔猪体内主要药动学参数如下：平均消除半衰期（T1/2?）为136.98h,平均滞留时间（MRT）为165.92h,平均药时曲线下面积（AUC0-t）为1570.97 h?μg/mL,平均表观分布容积（Vz）为695.59 mL/kg,平均血浆清除率（CL）为3.77 mL/h?kg;单剂量口服帕托珠利混悬液后帕托珠利在仔猪体内主要药动学参数如下：平均消除半衰期（T1/2?）为134.05h,平均达峰时间（Tmax）为42.00h,平均峰浓度（Cmax）为14.03μg/mL,平均滞留时间（MRT）为173.19h,平均药时曲线下面积（AUC0-t）为2831.00 h?μg/mL,帕托珠利混悬液口服给药绝对生物利用度为72.08%。结果表明,帕托珠利在猪体内分布较差,消除缓慢;仔猪口服帕托珠利混悬液达峰时间较长,但吸收良好。     

高效液相色谱法测定猪血浆中阿莫西林含量

建立了高效液相色谱法测定猪血浆中阿莫西林含量的方法.采用Agillent1100HPLC系统,色谱柱为SB C18,流动相为0.05 mol/L磷酸二氢钾-0.1 mol/L三乙胺-乙腈(800:120:7,pH 2.5),流速1.0 mL/min,柱温30℃,检测波长220 nm.猪血浆样品经高氯酸溶液变性处理,取上清液直接进样测定.阿莫西林的色谱峰面积对其浓度的线性关系范围在0.5～20.0μg/mL之间,相关系数为0.999 7.阿莫西林低、中、高(0.5,5.0,20.0μg/mL)三种添加浓度猪血浆样品的平均加样回收率分别为100.7%、105.1%、103.3%(n=3),变异系数分别为3.0%、0.1%、3.3%(n=3).该法可用于猪血浆中阿莫西林含量的测定和相关的药代动力学研究.     

高效液相色谱法测定猪血浆中氟苯尼考的含量

建立了猪血浆中氟苯尼考含量测定的高效液相色谱法(HPLC)。采用C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),以乙腈-水(24:76)为流动相,流速1.0mL/min,检测波长223nm,进样量20μL,柱温为25℃。氟苯尼考浓度在0.1～16μg/mL时,标准曲线线性关系良好(r0.9998),无杂质干扰,回收率高于94%,批内变异系数和批间变异系数均低于5%。本方法操作简便,分析快速,结果准确,适用于猪血浆中氟苯尼考含量的测定及相关药代动力学研究。     

帕托珠利和妥曲珠利在肉鸡体内残留消除的比较研究

<正>妥曲珠利(toltrazuril)是禽类和猪常用的抗球虫药物。帕托珠利(panazuril,描述体内代谢物时称为妥曲珠利砜)是妥曲珠利在机体内主要代谢产物之一,也是妥曲珠利的药效形式。与妥曲珠利相比,帕托珠利易于通过血脑屏障[1]。2001年,美国FDA批准帕托珠利(商品名Marquis)的口服糊剂上市,用于治疗马原生动物性脑脊髓炎(EPM)。目前,帕托珠利尚未被批准用于禽类球虫病的防治,也未见帕托     

高效液相色谱法测定鸡体内的替硝唑

建立了鸡血浆和肌肉中替硝唑 (Tinidazole,TNZ)的高效液相色谱 (HPL C)测定法。采用 Shim adzu L C- 6 A型高效液相色谱系统 ,YWG- C1 8柱 ,UV检测器 ,以甲醇 /水 (32∶ 6 8)为流动相 ,流速 0 .8m L/ m in,波长 318nm,室温测定。用二氯甲烷萃取血浆和肌肉中 TNZ。结果表明 ,TNZ的最低检出限为 0 .0 12 5 mg/ L,在血浆和肌肉中的最低定量限分别为 0 .0 2 5 mg/ L和 0 .0 2 5μg/ g。其质量浓度在 0 .0 2 5～ 6 4mg/ L范围内与色谱峰高呈良好线性关系 (r=0 .9999)。TNZ质量浓度为 0 .0 2 5、1.6、6 4mg/ L 时 ,日内相对标准差小于 5 % ,日间相对标准差小于 10 % ,在血浆和肌肉中的回收率分别为 98.0 0 %、91.88%、96 .17%和 90 .0 0 %、99.0 6 %、92 .5 4%。该方法灵敏、快速、简便 ,适用于 TNZ在鸡体内的药物动力学和组织中残留研究     

高效液相色谱法测定二硝托胺含量

建立高效液相色谱(HPLC)法测定二硝托胺的含量.色谱柱为Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18柱(150 mm×1.6 mm,5 μm),流动相为甲醇-水(40∶60),流速1.0 mL/min,柱温25 ℃,检测波长240 nm.二硝托胺对照品浓度在20 μg/mL～100 μg/mL范围内与峰面积呈线性关系,线性回归方程A＝31.20C-9.79,r＝0.999 9(n＝5);平均回收率为99.71%,RSD＝0.32%(n＝5).HPLC法快速、简便,重现性好,准确度高,可用于二硝托胺原料的含量测定.     

高效液相色谱法测定鸡血浆中二氟沙星的浓度

通过对 30只健康鸡单剂量口服和静注二氟沙星 ,建立了测定不同时间血浆二氟沙星浓度的反相高效液相色谱分析方法。以 VP— ODSC18(5 μ) (15 0× 4 .6 mm)为分析柱 ,流动相为乙腈∶ 2 %四丁基溴化胺 (13∶ 87,V/ V) ,流速 1.5 ml· min-1,紫外检测波长为 2 80 nm,最低检出浓度是 0 .0 5 μg/ ml,回收率 (95± 0 .6 ) %。     

健康鸡血浆中cAMP和cGMP的含量测定

以放射免疫法测得21只健康鸡血浆中 cAMP、cGMP 的平均含量分别为25.81±8.76pmol/ml,9.92±3.96pmol/ml;cAMP/cGMP 值2.903±1.077。本检测结果可为禽类疾病转归、机体对药物反应等提供参考依据。     

高效液相色谱法测定猪血浆中多西环素的含量

建立了高效液相色谱法测定猪血浆中多西环素含量的方法.采用Agillent 1100 HPLC系统,分析柱为ZORBAX SB C-18,流动相组分为超纯水(含0.6 mmoL/L EDTA·2Na,0.15%三氟乙酸,10 mmoL/L草酸)和乙腈,梯度洗脱,柱温15℃,检测波长350 nm.猪血浆样品经EDTA-McIlvaine缓冲液和20%(V/V)高氯酸的混合液缓中变性处理,取上清液直接进样测定.结果表明,血浆中多西环素的线性范围为0.10～12.80μg/mL,其方程为y=49.846 x-0.289,相关系数为0.999 2(n=8);空白血浆添加低、中、高浓度多西环素(0.10、0.80、6.40μg/mL)样品的平均回收率分别为94.0%、98.2%、100.5%(n=4);平均批内变异系数分别为2.8%、4.1%和1.2%(n=4),批间变异系数分别为6.5%、9.4%和3.4%(n=16).本方法样品前处理简单、快速,结果准确、可靠,适用于猪血浆中多西环素含量的测定及相关药代动力学研究.     

鸡可食性组织中尼卡巴嗪残留的测定高效液相色谱法

为建立鸡可食性组织(皮脂、肌肉、肝脏、肾脏)中尼卡巴嗪的高效液相色谱(HPLC)检测方法,本研究采用乙腈提取组织样品中尼卡巴嗪,正己烷除脂;流动相为乙腈:超纯水(55:45,v/v);紫外检测波长347 nm.结果显示:各组织中尼卡巴嗪浓度在50~1000μg/kg范围内呈良好线性关系(R^2≥0.9992);各组织中检测限和定量限均分别为10μg/kg和50μg/kg;组织中尼卡巴嗪添加浓度为50、200、400μg/kg时,皮脂中药物平均回收率为(87.18±3.85)%,肌肉中药物平均回收率为(93.33±3.76)%,肝脏中药物平均回收率为(80.77±3.63)%,肾脏中药物平均回收率为(85.27±6.58)%;日内和日间变异系数分别小于4.20%和4.30%.该方法前处理简单省时,无需使用固相萃取,节约了试验成本与时间,为尼卡巴嗪的检测提供了方法学基础.     

高效液相色谱法测定鸡血浆中恩诺沙星和环丙沙星含量

为了研究雏鸡血浆中恩诺沙星和环丙沙星含量及代谢规律,建立了本HPLC方法。血浆样品中的药物采用乙腈提取和净化,荧光检测器检测,激发波长278nm,发射波长450nm;流动相为0.05mol/L磷酸/三乙胺-乙腈(82:18,V/V)溶液。结果表明,血浆中恩诺沙星和环丙沙星的含量在0.05～10mg/L浓度范围内呈良好的线性关系,相关系数大于0.999。在低、中、高三个添加浓度(0.05、0.5、10mg/L)下平均回收率在87.26%～106.36%之间,日内变异系数低于8.97%,日间变异系数低于7.92%,检测限和定量限分别为0.01mg/L和0.05mg/L。本方法建立的血浆提取净化和检测条件可用于准确测定鸡血浆中恩诺沙星和环丙沙星的含量。     

妥曲珠利在鸡组织内的残留研究

研究鸡单剂量喂服(50 mg/kg·d,100mg/kg·d,连服2 d)妥曲珠利后在肝脏、肾脏、肌肉组织中的残留量,以便制定妥曲珠利预混剂的休药期.用乙腈-乙酸乙酯(3/2,v/v)提取组织中的药物,利用高效液相色谱法测定组织中妥曲珠利的浓度.试验结果表明,100mg/kg饲料添加妥曲珠利在鸡体内休药期为14 d,50 mg/kg时休药期为8 d.该结果与农业部制定的无公害食品饲养兽药使用准则中所规定的75～100 mg/kg鸡饮水妥曲珠利的休药期一致.     

高效液相色谱法测定首乌散中大黄素含量

建立了首乌散中大黄素含量的HPLC测定方法。采用Waters C18色谱柱（10μm，250mm×4．6mm），检测波长254nm，流动相为甲醇-水-磷酸（850：150：1），流速1mL/min。结果显示，大黄素在1．0～40．0μg／mL范围内，含量与峰面积呈良好的线性关系，相关系数为0．9999（n=8），平均回收率95．5％，RSD为2．0％。本方法简便、重现性好，结果准确可靠，可有效地控制首乌散的质量。     

高效液相色谱法测定鱼饲料中甲基睾丸酮含量的研究

试验建立了鱼饲料中17α-甲基睾丸酮的液相色谱检测方法。该方法以甲醇提取样品中的甲基睾酮,3β-甲基-17β-羟基-5-雄烯-7-酮为内标;梯度洗脱,流动相分别为水-乙腈溶液(80:20,V/V),流速0.5 ml/min;柱温40℃,DAD检测器检测,内标法定量,甲基睾酮的平均保留时间为11.29 min(R.S.D=0.20%),内标为8.68 min(R.S.D=0.19%)。结果表明,在7.5～60.0μg/ml范围内线性关系良好,拟合度为0.999 8,回收率在94%～100%之间,相对标准偏差为1.97%～3.21%。     

高效液相色谱法测定血浆蛋白粉中免疫球蛋白IgG

采用高效液相色谱法,建立了血浆蛋白粉中免疫球蛋白IgG测定方法。样品经磷酸盐缓冲溶液提取,以Pharmacia HI-Trap ProteinG柱分离,紫外检测器测定。用保留时间定性及外标法定量。结果表明:在所选择的色谱条件下,其峰面积与质量浓度有良好的线性关系,样品加标回收率在96.06%～109.12%范围内,相对标准偏差为2.71%～8.06%,最低检出质量浓度为0.1mg/mL。该方法简便快速、重现性好及灵敏度高,适合批量样品的测定。