产纤维素酶微生物发酵转化虎杖提高白藜芦醇收率的研究

用微生物发酵法酶解虎杖,可以提高从虎杖中获取白藜芦醇的得率。通过从传统发酵食品中筛选含纤维素酶菌株,获得一株可以直接作用于虎杖的优良菌株。分别对固体堆积发酵条件:菌龄、温度、接种量、湿度进行单因素优化,与植物虎杖中白藜芦醇含量相比,发酵后白藜芦醇提取率提高至1.45%。     

微波程序控温控压辅助双水相萃取虎杖果实中白藜芦醇与大黄素的研究

以虎杖果实为原料,采用微波程序控温控压辅助乙醇-硫酸铵双水相萃取白藜芦醇与大黄素,对比了该方法与微波辅助提取、微波辅助双水相萃取对提取得率和纯度的影响,并进一步通过红外光谱分析产物结构。结果表明:料液比1∶20(g∶m L)、相分离系数0.5的乙醇-(NH4)2SO4双水相体系,程序控温分为5级,依次为室温、40、50、60和70℃,对应控压为137.9、344.75、689.5、1 034.25、1 379 k Pa,每级微波辐射1.2 min后间歇5 min,进行微波功率自动连续调整,在此条件下虎杖果实中白藜芦醇与大黄素得率为0.694%与2.067%,纯度分别为82.68%与87.25%,提取效果明显优于微波辅助提取和微波辅助双水相萃取,且不会引起生物活性物质失活或变性。该方法能显著提高虎杖果实中白藜芦醇与大黄素提取得率,稳定性好、重复性好、精密度高、回收率高,同时又能简化其分离纯化工艺,降低生产成本,因此该方法适合用于虎杖果实中白藜芦醇与大黄素的提取分离。     

微波法从虎杖中提取白藜芦醇工艺

研究了微波法提取虎杖中的白藜芦醇,通过正交实验初步确定微波功率、乙醇浓度、料液比、提取时间4个因素对提取效果的影响并确立最佳的提取工艺条件为：微波功率700W ,乙醇浓度70％,料液比1∶20,微波时间20min。     

中压柱层析法分离白藜芦醇的研究

对虎杖(Polygonum cuspidatum Sieb．et Zucc．)中的白藜芦醇进行了提取分离和含量测定。考察了浸提温度、浸提液浓度、浸提时间和次数、料液比等5个因素对白藜芦醇提取的影响，确立了白藜芦醇最佳提取条件为：浸提液体积分数为95％，浸提温度60℃，料液比11:1，回流提取3次，每次60min。采用中压硅胶柱层析法分离白藜芦醇，产物经重结晶后用高效液相色谱测定含量达99．28％。结果表明所建立的制备及分离纯化工艺可用于白藜芦醇的生产。     

虎杖酶解液中白藜芦醇萃取工艺初步研究

为了对虎杖(Polygonum cuspidatum Sieb.et Zucc.)酶解液中白藜芦醇的萃取工艺进行研究,以白藜芦醇的含量和萃取率为考察指标,筛选虎杖酶解液中白藜芦醇的萃取溶剂,对pH值、液-液比、萃取次数进行考察,采用正交试验优化白藜芦醇的萃取工艺。结果得出,在pH值为6、液-液比为1∶3、萃取3次,白藜芦醇得率达到90.54%。该优化工艺适用于虎杖酶解液中白藜芦醇的萃取。     

松针多糖的提取工艺优化

对从松针中提取多糖的工艺条件进行了研究.在提取过程中,比较了水、醇两种溶剂对3种松针提取的多糖得率的影响.并通过单因素法分析了5个主要因素:料液比、提取温度、提取时间、pH值及提取次数对湿地松松针水提多糖得率的影响.在单因素试验的基础上,通过正交试验设计方法对水提湿地松松针多糖的工艺条件进行了优化.试验表明,湿地松松针多糖的最佳提取工艺条件为:料液比1∶14(g∶mL),提取温度100℃,浸提时间3h,pH值6.在此最佳工艺条件下,湿地松松针多糖得率为4.024%±0.017%.     

HPLC法测定虎杖白藜芦醇的含量及其稳定性研究

白藜芦醇已被列为抗心血管、抗癌最有前途的药物之一。由于白藜芦醇对光、热不稳定,本研究建立了一套简单而提取率高的从虎杖中提取白藜芦醇的样品处理方法,研究了高效液相色谱法测定虎杖白藜芦醇的条件。采用色谱柱:岛津Shim parkCLC ODS(150mm×6.0mm,i.d.5μm),以乙腈∶水(体积比为41∶59)溶液为流动相,流速1.0mL/min,检测波长306nm。在此条件下,样品溶液进样质量浓度范围在500～1000μg/mL时,白藜芦醇含量与峰面积呈良好的线性关系。检出限为10ng/mL,且回收率高。     

响应面法优化虎杖中虎杖苷和白藜芦醇的匀浆提取

根据虎杖(Polygonum cuspidatum)中主要活性成分虎杖苷和白黎芦醇提取过程中效率低、耗时长等问题研究了匀浆提取虎杖苷和白藜芦醇工艺。以虎杖苷和白藜芦醇的提取总得率为指标,在单因素试验的基础上,利用响应面法设计了以乙醇体积分数、匀浆时间和液料比为影响因素的试验,获得了匀浆提取虎杖苷和白藜芦醇的优化工艺为提取溶剂64%乙醇溶液,匀浆时间5min,液料比14∶1(mL∶g),在此条件下虎杖苷和白藜芦醇的一次提取总得率为1.830%。与超声辅助提取和浸提法相比,匀浆提取具有绿色高效、速度快、能耗低等优点,在虎杖等中药活性成分的大规模提取方面具有应用前景。     

白僵菌孢子粉工业化生产工艺技术研究

本文对利用载体进行砖式半固体开放培养法机械化生产白僵菌孢子粉和液体深层发酵的工艺中有关技术问题作了多方面试验研究,结果表明:1％麦皮+1.5％黄豆粉+0.5％玉米粉和1％麦皮+1.5％黄豆粉+1％玉米粉是理想液体培养基配方,平均产孢量分别达9.16亿/ml和8.51亿/ml,比土法生产常用5％麦皮浸出液提高1.65—1.85倍。筛选出C号半固体发酵培养基配方,平均产孢量达890.7亿/g,比常规土法生产提高7.91倍;选择出半固体发酵培养的理想载体R质粒;筛选出培养基、载体、接种量优化组合配比为1:3:6;载体平铺厚度以6cm为宜,其产孢量为125.7亿/cm~2,比4cm、2cm厚的分别提高0.86和3.1倍;不同菌龄菌液接种与固体发酵培养产孢量关系,以菌丝状态接种(含孢量806.2亿/g)比节孢子状态接种(含孢量573.1亿/g)提高41％;半固体发酵以13—15天为宜。     

固态发酵法制备榛仁肽工艺优化及其生物活性

为探索固态发酵榛仁粕制备蛋白肽的最佳工艺条件,以水解度和多肽得率为指标进行单因素和正交试验,优化混菌固态发酵工艺条件,并对其不同发酵时间产物的抗氧化性及血管紧张素转化酶(ACE)抑制率进行比较。结果表明,最佳发酵条件为:枯草芽孢杆菌与米曲霉接种比例1∶1、接种量15%、水分含量70%、发酵温度40℃。在此条件下发酵48 h的产物还原力最高,DPPH自由基(DPPH·)的清除率可达94.76%,羟基自由基(OH·)的清除率可达67.32%,超氧阴离子自由基(O_2~-·)的清除率可达98.75%,发酵60 h的产物对ACE的抑制率可达25.28%。该研究表明通过固态发酵制备的榛仁肽具有较强的抗氧化活性及一定的降压活性。