北沙参外植体消毒方法研究

分别以北沙参田间栽培苗及温室盆栽苗的幼嫩叶片、田间高畦栽培苗的幼嫩根尖和温室水培苗的幼嫩叶柄为外植体,研究不同消毒组合对外植体污染率的影响。结果表明,75%酒精消毒20 s后再用0.1%升汞消毒5 min,接种外植体的存活率较高,且污染率较低。     

山桃外植体的安全消毒方法研究

以甘肃山桃为材料,采用75%的乙醇、0.1%的氯化汞(HgCl2)、消毒片(有效氯500 mg/片)、新型植物组织培养防污染杀菌剂植培灵和益培隆,对材料茎段消毒效果行进比较,以筛选出合理有效的消毒方法来替代氯化汞消毒。结果表明:采用0.1%的氯化汞(HgCl2)与75%乙醇组合使用的消毒效果要明显好于消毒片,植培灵和益培隆的污染率均为0%,其中益培隆的死亡率高于植培灵。综合考虑污染率、死亡率、对植物生长的影响以及废液对环境的影响等因素,植培灵为替代传统氯化汞(HgCl2)消毒的最佳选择。     

水果型番木瓜外植体灭菌方法研究

以水果型番木瓜成龄株顶芽和侧芽为外植体,研究不同灭菌剂组合和灭菌时间、抗生素组合对外植体的灭菌效果。结果表明,3种灭菌剂组合对外植体的灭菌效果优于两种灭菌剂组合;3种灭菌剂组合中以采用0．1％KMnO4浸泡10min→5％NaClO浸泡10min→0．1％HgCl2浸泡8min的灭菌效果最好,外植体成活率最高,为47．27％。经不同抗生素组合灭菌,外植体平均污染率和成活率分别为28．57％～45．16％、54．84％～71．43％,灭菌效果明显优于对照,说明抗生素组合可以有效降低水果型番木瓜外植体的内源菌污染,提高其成活率,其中以MS＋6-BA1．5rag／L＋庆大霉素80mg／L＋头孢噻肟钠500mg／L的效果最好,利于获得番木瓜无性系。此外,以幼苗顶芽作为外植体进行灭菌培养的效果优于侧芽,利于促进外植体的萌动生长和形成丛生芽。     

红花山玉兰组织培养外植体的选择及其消毒方法

为筛选出红花山玉兰组织培养适宜的外植体类型及其消毒方法,为红花山玉兰的无性繁殖提供技术支持,对灭菌时间、外植体类型和取材时间等进行研究。结果表明：茎段和顶芽的存活率分别为40．0％和33．33％,较叶片和叶柄的存活率高,且茎段和顶芽的存活率较叶片的存在显著差异,二者的死亡率均与叶柄和叶片的存在显著差异;茎段和顶芽为适宜的外植体。茎段在6月取材优于12月,且采用0．1％的升汞消毒10 min,其存活率为40．0％;顶芽在6月和12月取材均可,消毒后去除托叶能够有效地降低顶芽的污染率,提高其存活率。最佳消毒组合：先用75％的酒精表面喷洒预处理,再用0．1％的升汞消毒10 min,之后去除顶芽的托叶。该方法污染率和死亡率低,存活率最高,依次分别为6．67％、7．78％和85．55％,且芽启动率高。     

费约果外植体消毒处理方法

[目的]获得无菌、生长正常的费约果外植体,从而进行组培快繁。[方法]通过选用费约果不同组织部位作为外植体,采用不同消毒方法及不同预培养的培养基来进行费约果的外植体制备试验,从中筛选出适合的条件。[结果]采用费约果新梢为外植体,用0.1%HgCl2消毒4 min后,在含有羧苄青霉素、硫酸链霉素附加DTT、Vc的1/2MS培养基上预培养21 d获得的外植体消毒效果最好。[结论]获得了生长健壮的费约果外植体,为其快速繁殖提供了技术依据。     

辣木外植体消毒试验研究

[目的]探讨辣木茎段的最佳消毒方法。[方法]以辣木茎段为外植体,用不同消毒剂(升汞、次氯酸钠),选用不同浓度,在不同消毒时间下对辣木茎段进行消毒处理。[结果]次氯酸钠最佳消毒组合为浓度15 g/L消毒20 min,污染率为26%,成活率为34%。升汞最佳消毒组合为0.20 g/L消毒液消毒5 min,污染率为2%,成活率达84%。[结论]辣木茎段最佳消毒方法为:在75%酒精中浸泡30s后,用0.20 g/L升汞处理5 min,污染率为2%,成活率达84%。     

番木瓜(Carica papaya L.)含硼量与果实瘤状病关系的研究

番木瓜果实瘤状病由于缺硼引起。通过田间施硼防治瘤状病试验和对病株、健株的壮叶、嫩叶、花(子房)、幼果,近成熟果实和种子含硼量的测定,得到肯定的证实。在比较健、病株壮叶、嫩叶、果实的正常值和缺乏值(出现病状时含量)之后,提出:以完全展开的第4～5片壮叶的含硼量作为合理施肥的依据。在20.56～50.74ppm时,植株表现正常。6.53～16.55ppm时,果实发生瘤状病。故当其含硼量在16.55ppm～20.56ppm时、就要即时施用硼肥。 土壤中的全硼量似乎与瘤状病出现关系不大。在水溶性硼肥供应充足的情况下,番木瓜的花(子房)、幼果、近成熟果含硼量均在24(土1)ppm水平。由于香木瓜果实成批迅速发育,为维持果实正常发育,要不断的从外部吸取硼素。当花(子房)、幼果及果实含硼量分别为8.41,9.41和5.16ppm,就会出现果实瘤状病。在植株开花前,每株穴施硼酸或硼砂两克,能有效的预防该病发生。     

兰花外植体消毒试验初探

以兰花新芽为组培材料,进行外植体消毒试验。结果表明:外植体用70%酒精浸30s后,于10%次氯酸钠溶液中消毒15～20min或0.5%升汞溶液中消毒5～8min,能有效降低外植体污染率,提高成活率。     

柴胡组织培养外植体消毒条件的研究

[目的]筛选柴胡外植体组织培养的最佳消毒条件。[方法]选择饱满的"川北柴1号"种子,经25、100、200 g/L Na Cl O分别消毒处理5、10、30 min,接种于MS培养基中,考察其污染率及存活率。[结果]柴胡种子作为外植体组织培养最佳消毒条件是100 g/L Na Cl O处理30 min,污染率仅为6.7%,存活率为86.7%。[结论]为柴胡进一步的组织培养研究提供依据。     

不同处理对凤梨和油梨的外植体消毒效果

植物组织培养中外植体消毒是首要环节,选用不同的消毒剂对外植体消毒,除需考虑消毒效果外,还需考虑消毒剂对环境的影响。影响植物外植体消毒关键因素包括消毒剂的种类和消毒时间。为提高凤梨和油梨的繁殖率提供参考依据,用凤梨裔芽和油梨茎段作为外植体,设置不同消毒剂和处理时间,比较分析外植体的污染率和成活率,以探明不同种类消毒剂处理对凤梨和油梨的外植体消毒效果。结果表明：使用0.1%HgCl₂对凤梨和油梨的外植体消毒,适合的处理时间均为10 min,其污染率较低分别为19%、62%,而成活率均为57%。使用5%NaClO对凤梨和油梨的外植体消毒,随着消毒时间延长,凤梨污染率明显下降且外植体成活率高于油梨外植体。合适的处理时间均为16 min,凤梨污染率为57%、成活率为67%,油梨污染率为71%、成活率为48%,外植体消毒效果较好,且受影响较轻。由于凤梨外植体受NaClO影响较小,因此凤梨外植体应选择对环境危害较小的NaClO作为消毒剂。油梨受NaClO影响较大,成活率较低,因此油梨外植体可选择HgCl₂作为消毒剂。     

转番木瓜环斑病毒复制酶基因番木瓜的多重定性检测

为监测和管理转基因番木瓜华农1号的商品化生产、销售,建立了相应的转基因定性检测方法.选用木瓜蛋白酶作为番木瓜的内源对照基因,建立对转基因番木瓜PRSV-Rep基因、外源CaMV35S启动子序列、NOS终止子序列和NPTⅡ基因的常规PCR检测体系.退火温度为40～60℃时,都分别扩增出了清晰的目的基因.单基因常规PCR检测转基因模板量的下限为5×10-7g.建立的三重PCR检测技术,检测了包括NPTⅡ、Rep和CaMV35S;NPTⅡ、Rep和Nos;NPTⅡ、Rep和Papain等3个组合.建立了NPTⅡ、ReP、CaMV35S和Nos4个基因的四重PCR检测技术.     

番木瓜茎尖离体培养研究

番木瓜(Carica papayaL.)是一种重要的热带亚热带水果。以番木瓜茎尖为试验材料,研究番木瓜茎尖离体培养的影响因素。试验结果表明,茎尖在MS BA 0.5 mg/L NAA 0.1 mg/L ADS 40 mg/L GA31.0 mg/L的培养基上生长较好,增殖系数每4周可达6.8倍,将该无菌芽继代到MS IBA 1.5 mg/L 活性碳(AC)2.0 g/L的生根培养基上,可正常生根并形成完整植株。     

不同消毒处理对竹芋组培无菌外植体获得的影响

以过渡栽培植株的侧芽或顶芽为外植体,研究了不同消毒处理对竹芋组培无菌外植体获得的影响。结果表明:采用抗菌素浸泡5h、熏蒸12min并配合常规消毒处理(75%酒精浸泡1min;3.0%～5.0%的次氯酸钠和0.1%升汞1∶1混合溶液浸泡10～12min)对外植体进行综合灭菌,能较快地杀灭竹芋外植体表面细菌,使初次接种污染率控制在20%以下。     

番木瓜发生瘤肿病原因的探讨

通过果园调查、室内化验分析以及大田验证试验,结果表明,番木瓜发生瘤肿病的原因主要是过量施用石灰,使土壤中C a/B过高,引起番木瓜缺B所致。合理施用B肥和石灰,可以有效防治番木瓜瘤肿病。     

成龄番木瓜组培快繁技术研究

对番木瓜芽的消毒方法、增殖培养、生根培养等进行了研究。结果表明,番木瓜外植体采用热水处理10 min、75%酒精消毒30 s、15%次氯酸钠消毒5 min、0.1%升汞消毒17 min后的消毒效果最好;在番木瓜生根前利用壮苗培养基培养较高、较粗壮的番木瓜幼苗,可以提高生根率;生根后须及时转入未添加IBA的培养基中进行培养,才能获得质量较好的木瓜生根苗,从而提高木瓜苗的移栽成活率。     

番木瓜实生苗茎段组培快繁条件的优化

【目的】探讨不同激素对番木瓜实生苗茎段分化的影响,为提高番木瓜繁育效率提供参考依据。【方法】番木瓜种子采用直接接种、无菌水处理18 h后接种等4种方式预处理获得最佳种子处理方式;再以获得的实生苗茎段为外植体进行芽诱导培养基、增殖壮苗培养基、生根培养基的优化筛选。【结果】经6-BA 1.0 mg/L与GA31.0 g/L等体积混合液浸泡18 h后接种的番木瓜种子发芽率高达93.3%,接种培养后污染率低至3.3%;适合番木瓜茎段芽诱导培养基为MS＋6-BA 0.5 mg/L＋NAA 0.2 mg/L,增殖壮苗培养基为MS＋6-BA 0.2 mg/L＋NAA 0.1 mg/L＋蔗糖40.0 g/L,增殖系数最高达4.3,生根诱导培养基为MS＋IBA 1.0 mg/L＋KT 0.05 mg/L＋AC 2.0 g/L。【结论】MS＋6-BA 0.5 mg/L＋NAA 0.2 mg/L、MS＋6-BA 0.2 mg/L＋NAA 0.1 mg/L＋蔗糖40.0 g/L和MS＋IBA 1.0 mg/L＋KT 0.05 mg/L＋AC 2.0 g/L分别作为番木瓜实生苗茎段芽诱导、增殖壮苗和生根诱导培养基,可提高番木瓜实生苗茎段组培育苗效率。     

我国番木瓜育种研究进展与展望

阐述了我国番木瓜育种研究进程的3个主要转折阶段,以及我国育成的主要品种与育种技术,初步建立了“杂交选育”和“生物信息技术”相结合的育种模式。提出了今后番木瓜育种与应用研究的方向:提高番木瓜品质和综合抗性;生物信息技术与杂交品种选育相结合,加速新品种的选育研究;番木瓜诱变育种与太空育种;番木瓜抗低温育种。     

番木瓜摘取的接触力学模型构建与试验

【目的】实现番木瓜稳定无损伤摘取。【方法】采用三指对称夹持后扭断的摘取方案,构建摘取接触力平衡方程,依据三指内力汇交原理进行抓取稳定性分析,制定摘取接触力学模型求解方案,并对番木瓜进行摘取试验。【结果】样本表面无明显变形、压痕与裂纹,夹持处果肉室温静置24 h后无明显的颜色变化和伤痕,最大夹持力远小于成熟番木瓜横径方向受压弹性变形阶段压力极限值;质量和摘取扭转力矩与横径、纵径、果柄长度、果柄扭断直径有密切依存关系,质量多元线性回归达极显著水平,扭转力矩多元线性回归达显著水平;依据接触力学模型和回归模型计算的理论夹持力与测量夹持力对比,测量夹持力均高于理论夹持力,两者最大偏差小于20%,两者在趋势上具有较好一致性。【结论】摘取方案能稳定无损伤摘取番木瓜,摘取接触力学模型具有正确性与实用性,可为番木瓜摘取末端执行机构设计与力度控制提供依据。     

番木瓜幼叶原生质体分离研究

【目的】探讨番木瓜幼叶原生质体的最佳分离条件。【方法】以20～30日龄番木瓜无菌苗幼叶为材料,对原生质体分离过程中酶液组合、酶解时间、纯化离心速度（500～1500rpm）及离心时间（6～10min）进行探讨。【结果】随着酶解液中纤维素酶和果胶酶含量的提高,番木瓜原生质体产量逐渐升高,而其活力逐渐降低,其中以为2.0%纤维素酶＋0.5%果胶酶组合的效果较好,解离时间以8h为宜。随着酶解液中甘露醇浓度的升高,原生质体的产量呈现先增加后降低的趋势,在0.55mol/L时达到最大（2.48×106个/gFW）。在悬浮纯化原生质体时,以1000rpm离心6～8min的效果较好。【结论】适宜原生质体分离的酶解液为2.0%纤维素酶＋0.5%果胶酶＋25mmol/LMES＋0.55mol/L甘露醇,最适酶解时间为8h;在原生质体纯化时,使用1000rpm离心6~8min,有利于获得产量及活力较高的原生质体。