熊果酸对胶原诱导性关节炎大鼠关节炎症相关因子mRNA表达的影响

目的 研究熊果酸（ursolic acid,UA）对胶原诱导性关节炎（collageninduced arthritis,CIA）大鼠关节X线及关节炎症相关因子mRNA表达的影响。方法 SD大鼠采取皮下注射牛Ⅱ型胶原加弗氏不完全佐剂法建立CIA模型,取造模成功后大鼠随机分为CIA模型组、UA低剂量组、UA高剂量组、甲氨喋呤（methotrexate,MTX）组、UA+MTX组并予以对应干预。另取6只正常大鼠为对照的空白组。初次免疫30 d断颈处死大鼠,关节行X线摄片,再取下大鼠炎症关节组织匀浆,提取RNA,荧光定量PCR法检测IL-17A、IL-10、IL-6、TNF-α、IL-1β、TGF-β的mRNA表达。结果 与CIA模型组相比,UA高剂量组、MTX组、UA+MTX组X线评分减低（P<0.05或P<0.01）;各治疗组IL-17A、IL-6、TNF-α、IL-1β的mRNA表达降低（P<0.01或P<0.05）;各治疗组IL-10、TGF-β因子的mRNA表达增高（P<0.01或P<0.05）。结论 UA可明显缓解CIA大鼠关节炎症,改善关节X线评分,其机制可能与调节炎症因子的产生,维持组织促炎因子与抑炎因子的平衡有关。     

小鼠Th17细胞分化模型的构建

目的构建小鼠Th17细胞体外诱导分化模型。方法提取小鼠脾淋巴细胞,采用免疫磁珠纯化++CD4 CD62L T细胞(原始T细胞),分对照组及Th17组。Th17组采用CD3、CD28、IFN-、IL-4抗体及IL-6、TGF-1、IL-23培养72 h,采用Real-time PCR检测RORt和IL-17F mRNA表达。结果 Th17组T细胞RORt、IL-17F mRNA表达明显高于对照组(P<0.01)。结论构建Th17细胞体外诱导分化模型可用于T细胞分化研究。     

类风湿关节炎患者关节液中IL-17的定量检测

目的探讨类风湿性关节炎（RA）患者关节液中IL-17的含量与关节炎症损伤的相关性,为研究RA的关节损伤机制提供科学依据.方法应用ELISA方法定量检测RA组40例和对照组40例关节液中IL-17的含量,应用t检验比较两组差异性.结果 RA组关节液中IL-17的含量显著高于对照组（P〈0.01）.结论 RA组关节液中具有较高的IL-17检测值,证实IL-17是RA患者关节滑膜损伤的重要因素之一.     

丙酮酸乙酯对TNBS结肠炎小鼠HMGB1及Th17细胞反应的影响

目的 探讨高迁移率族蛋白1(HMGB1)的抑制剂丙酮酸乙酯(EP)对实验性结肠炎小鼠模型的治疗机制.方法 30只BALB/c小鼠随机分为乙醇对照组、模型组和EP组,利用2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)建立小鼠结肠炎模型,EP组每天按100 mg/kg腹腔注射EP溶液1次,连续6d.造模后每天进行疾病活动指数(DAI)评分;实验第7天处死小鼠,观察结肠组织病理学改变;ELISA法检测血清和结肠组织中HMGB1、IL-17的表达水平;流式细胞术检测脾脏、肠系膜淋巴结中Th17细胞比例变化.结果 与模型组比较,EP组DAI评分下降,镜下组织病理损伤亦明显减轻(P.＜0.01),EP组小鼠血清和结肠组织中HMGB1水平明显降低,伴随血清及结肠局部IL-17表达减少(P＜0.01),同时脾脏和肠系膜淋巴结Th17细胞比例亦明显降低(P＜0.01).结论 EP可能通过阻断内源性免疫刺激剂HMGB1的释放,进而间接抑制Th17细胞及其介导的炎症瀑布反应,从而对IBD小鼠发挥保护作用.     

曲美他嗪联合中药对风湿性心脏病患者的治疗作用及对Th17细胞的影响

目的 探讨曲美他嗪联合中药治疗风湿性心脏病(RHD)合并心力衰竭(HF)的临床疗效及对Th17细胞的影响.方法 选取RHD合并HF患者90例纳入研究,随机分为观察组和对照组各45例.2组均给予常规治疗,并口服曲美他嗪20 mg/次,3次·d-1;观察组在常规治疗的基础上联合自拟中药方口服,1剂·d-1,水煎分早晚温服;...     

熊果酸对大鼠CIA模型关节TNF-α、IL-17、PGE2表达的影响

目的 探讨熊果酸（UA）对胶原诱导性关节炎（CIA）模型大鼠关节中TNF-α、IL-17、PGE2表达的影响。方法 首先随机选取8只作为正常对照组,其余复制SD大鼠CIA模型,造模成功后随机分为模型对照组、熊果酸组、甲氨蝶呤组、地塞米松组并给予相应处理。于给药35天后处死大鼠,取关节制作切片,进行HE染色,观察关节骨质的病理改变,免疫组化法检测关节中炎症因子TNF-α、IL-17、PGE2的表达。结果 与CIA模型组比较,UA大鼠组关节炎症因子TNF-α、IL-17、PGE2的表达明显降低（P<0.01）,UA组效果不如甲氨蝶呤组、地塞米松组（P<0.01）。结论 UA能明显缓解CIA大鼠关节炎症及损伤,减少关节中相关炎症因子的表达。     

护卵汤配合补佳乐及安宫黄体酮对卵巢早衰模型小鼠卵巢Th17和Treg的影响

目的观察护卵汤配合补佳乐及安宫黄体酮对卵巢早衰(POF)模型小鼠卵巢Th17和Treg表达水平的影响。方法采用透明带多肽(PZP3)及弗氏完全佐剂(CFA)和弗氏不完全佐剂(IFA)建立POF模型小鼠,随机分为空白组、模型组、护卵汤+补佳乐+安宫黄体酮组(护补安组)、补佳乐+安宫黄体酮组(补安组)、护卵汤组,护卵汤分别给药对POF模型小鼠进行干预后,采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测各组小鼠的血清促卵泡生成素(FSH)、雌二醇(E2)含量;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测小鼠卵巢的Th17和Treg表达水平;光镜下观察各组卵巢组织形态学变化。结果与模型组比较,护补安组、补安组、护卵汤组对致衰小鼠有治疗作用,差异具有统计学意义(P<0.01);护补安组、补安组在降低小鼠血清FSH含量方面优于护卵汤组(P<0.05);但护卵汤组在降低小鼠卵巢Th17水平上优于补安组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论护卵汤配合补 佳乐及安宫黄体酮可通过降低小鼠卵巢Th17而升高小鼠卵巢Treg水平治疗卵 巢早衰模型小鼠,且在降低小鼠血FSH含量上优于单纯护卵汤组。     

黄芪虫藤饮对类风湿关节炎大鼠关节滑膜细胞生长增殖的影响

目的 探讨黄芪虫藤饮对类风湿关节炎大鼠关节滑膜细胞增殖的影响。方法 无菌条件下分离正常大鼠和类风湿关节炎（RA）模型大鼠关节滑膜组织,制成单个滑膜细胞,流式细胞术鉴定后,取培养第三代的关节滑膜细胞进行药物干预,用MTT法测定药物对细胞增殖抑制作用;用流式细胞术检测细胞凋亡率以及细胞周期。结果 正常组大鼠关节滑膜细胞增长率与RA空白组（0.00 mg/L）比较,差异有统计学意义（P<0.05）;不同浓度（100.0,50.0,25.0,12.5,6.25,0 mg/L）黄芪虫藤饮对RA大鼠关节滑膜细胞增殖均有明显的抑制作用,细胞凋亡率明显高于空白组（P<0.05）,并能诱导滑膜细胞G0/G1期的细胞生长停滞,且呈现典型的剂量依赖性。结论 黄芪虫藤饮能抑制RA关节滑膜细胞的活性,促进细胞凋亡,可以较好地应用于临床。     

施氮量对单季稻甬优17穗粒结构和产量的影响

对单季稻甬优17的不同施氮量进行试验,结果表明,甬优17施氮肥水平以300 kg·hm-2左右最好,产量可达1323 t·hm-2。氮肥用量过多,叶片披,叶色深绿,易倾斜,碰上雨天或大风天极易引起倒伏,且病虫害随施肥量增加而增加,从而影响产量。     

不同肥力下施氮量对济宁17产量和品质的影响

在不同肥力条件下,研究氮肥用量对济宁17产量和品质的影响,结果表明:在0～300 kg/hm2的氮肥用量范围内,随着氮肥用量的增加,小麦产量、籽粒蛋白质含量先增加后降低,以氮肥用量240 kg/hm2的处理小麦产量、籽粒蛋白质含量最高。随着施氮量的增加,穗数和穗粒数均呈现先增加后降低的趋势,粒重呈增加的趋势。     

不同肥力下施氮量对济宁17产量和品质的影响

在不同肥力条件下,研究氮肥用量对济宁17产量和品质的影响,结果表明:在0～300 kg/hm2的氮肥用量范围内,随着氮肥用量的增加,小麦产量、籽粒蛋白质含量先增加后降低,以氮肥用量240 kg/hm2的处理小麦产量、籽粒蛋白质含量最高。随着施氮量的增加,穗数和穗粒数均呈现先增加后降低的趋势,粒重呈增加的趋势。     

维生素B 17对HepG2细胞体内外生长的影响

分别通过体外培养和体内接种试验,探讨维生素B-17对HepG2细胞体内外生长的影响。结果表明:体外试验中,当维生素B-17的添加量为1.3 g/L时,HepG2细胞生长抑制率仅为5.62%;当添加量为10.5 g/L时,抑制率增加到30.99%;当添加42 g/L时,抑制率达到56.30%。体内试验低质量浓度和中质量浓度组瘤块生长抑制均不明显,与对照组相比差异不显著(P>0.05);高质量浓度组对肿瘤生长抑制作用最好,与对照组相比差异显著(P<0.05)。说明高质量浓度的维生素B-17对HepG2细胞体内外生长均有抑制作用。     

三七总皂甙对TGF-β1诱导的HK-2细胞总胶原分泌及细胞生长的影响

目的：探讨三七总皂甙（PNS）对转化生长因子β1（TGF-β1）诱导的人肾小管上皮细胞（HK-2）总胶原分泌及细胞生长的影响。方法：采用消化法检测细胞培养上清液中羟脯氨酸的含量,换算成总胶原分泌量;采用流式细胞仪（FCM）检测PNS对TGF-β1诱导的HK-2细胞周期、细胞增殖指数（PI）的影响。结果：消化法示：TGF-β1组羟脯氨酸的含量及总胶原分泌量均高于正常对照组,PNS 200～800mg／L可降低细胞培养上清中羟脯氨酸的含量及总胶原分泌置,且随着PNS浓度的升高而降低（P〈0.01）;流武细胞仪（FCM）示：TGF-β1组G1期细胞低于正常对照组,PI高于正常对照组（P〈0.01）,PNS 400～800mg／L使G1期细胞显著升高,PI显著降低,且呈剂量依赖性。结论：PNS可通过抑制TGF-β1诱导的肾小管上皮细胞总胶原分泌及细胞增殖,从而参与延缓肾间质纤维化的进程,改善肾脏功能。     

清温并用法对慢加急性肝衰竭大鼠结肠组织调节性T淋巴细胞/辅助性T淋巴细胞17细胞因子的影响

目的 研究清温并用法对慢加急性肝衰竭（acute-on-chronic liver failure,ACLF）大鼠结肠组织Treg/Th17相关型细胞因子表达的影响,探讨其抗ACLF肠源性内毒素血症（intestinal endotoxemia,IETM）的可能调控机制。方法 140只SD大鼠随机分为正常组、模型组、清法组、温法组及清温并用法组。牛血清白蛋白致敏法建立免疫性肝纤维化大鼠模型,腹腔注射D-氨基半乳糖+脂多糖急性攻击建立ACLF大鼠模型,各组予以相应干预,观察24 h内各组大鼠外周血内毒素、外周血Treg/Th17细胞比值、结肠组织Treg/Th17型细胞因子变化。结果 与正常组比较,模型组大鼠在各时间点内毒素明显升高（P<0.01）、Treg/Th17型细胞因子明显升高（P<0.01）、Treg/Th17比值明显降低（P<0.01）;与模型组比较,清法、温法、清温并用法组在1、12、24 h各个时间点内毒素、Treg/Th17相关细胞因子表达均降低（P<0.05）,以清温并用法组下降最显著（分别与清法组、温法组比较,P<0.05）;各组与模型组比较,仅清温并用法组Treg/Th17比值明显升高（P<0.05）。结论 清温并用法抗肝衰竭IETM的机制可能与调节结肠组织Treg/Th17型细胞因子失衡,促使Treg/Th17细胞恢复平衡有关。     

布地奈德对成年过敏性鼻炎患者调节性T细胞功能的影响

目的 观察布地奈德对成年过敏性鼻炎(AR)患者CD8+CD28-调节性T细胞(Treg)功能的影响.方法 AR患者70例,随机分为观察组及对照组,每组35例,均以孟鲁斯特作为基础治疗,观察组给予布地奈德鼻喷雾剂128 μg/(鼻孔·天),对照组不给予布地奈德喷鼻.另选择32例健康志愿者作为健康对照组.检测健康对照组及AR患者治疗前及治疗12周后的外周血Treg及其胞内细胞因子白介素10(IL-10)、转化生长因子β1(TGF-β1)的含量,以及IgE、IgG4和嗜酸性粒细胞(EOS)含量.结果 (1)与健康对照组比较,AR患者CD8+CD28-Treg、IL-10、TGF-β1及IgG4均显著降低(P＜0.01),而IgE及EOS均显著升高(P＜0.01).(2)治疗后观察组CD8+CD28-Treg、IL-10、TGF-β1及IgG4均高于治疗前及对照组(P＜0.01),IgE及EOS均低于治疗前及对照组(P＜0.01或0.05).(3)CD8+CD28-Treg、IL-10及TGF-β1三者当中任意一者,均与IgE及EOS当中任一者呈负相关(P＜0.01或o.05),但前三者与IgG4均呈正相关(P＜0.05或0.01).结论 CD8+CD28-Treg及其细胞因子下降是AR的重要表现,布地奈德可提高该细胞及IgG4含量,降低ⅠgE及EOS含量.     

抗原浓度和DC数量对OT-I小鼠CD8+ T细胞分化与增殖的影响

【目的】探讨细胞毒性T细胞(CTL)表位肽SIINFEKL浓度和树突状细胞(DC)数量对CD8+T细胞活化和增殖的影响。【方法】用小鼠重组粒细胞集落刺激性生物因子(GM-CSF)和IL-4诱导骨髓细胞来源的DC增殖和分化,将所得成熟树突状细胞(maDC)和SIINFEKL抗原肽,与免疫磁珠法分离的OT-I小鼠CD8+T细胞共培养。用不同质量浓度的SIINFEKL(100,10,1,0.1,0.01和0.001 ng/mL)或不同数量的DC(DC/T比例分别为1/20和1/5)与CD8+T细胞共培养,刺激CD8+T细胞增殖分化。于共培养不同时间收集细胞,流式细胞术测定CD8+T细胞的数量、分裂速度、细胞表面活化分子的表达丰度,碘化丙叮(PI)染色测定细胞活力。【结果】在任一DC/T比例下,SIINFEKL浓度过低,均不能引起CD8+T细胞的充分增殖,而高于CD8+T细胞最佳增殖浓度的SIINFEKL则导致CD8+T细胞数量减少;在SIINFEKL质量浓度为0.001~0.1 ng/mL时,增加DC数量能促进CD8+T细胞的扩增;而SIINFEKL质量浓度为1~100 ng/mL时,提高DC数量反而导致CD8+T细胞数量减少;高浓度抗原和DC数量能有效诱导CD8+T细胞的活化和分裂增殖,但过量刺激会使细胞死亡,导致CD8+T细胞数量减少。【结论】CD8+T细胞的增殖受DC数量和抗原肽浓度的共同调节,要获得持久有效的CD8+T细胞免疫,必须保证CD8+T细胞得到足够的抗原信号,同时避免抗原信号过强导致的细胞活化后死亡。     

不同施氮措施对枸杞园土壤NH3挥发和N2O排放的影响

为明确适宜氮肥用量配施硝化抑制剂对柴达木枸杞园土壤NH₃挥发和N₂O排放的影响,在柴达木地区枸杞园开展研究,共设置9个处理:N667、N534、N400、N267、N133、N0处理分别表示施用纯氮667、534、400、267、133、0 kg·hm^-2,N400I2.00、N267I1.33、N133I0.67处理分别表示在N400、N267、N133处理基础上配施2-氯-6(三氯甲基)-吡啶(nitrapyrin)2.00、1.33、0.67 kg·hm^-2,采用通气法和静态暗箱法采集NH₃和NO₂,连续流动分析仪和气相色谱仪测定气体含量。结果表明:NH₃挥发速率与累积量均随施氮量的增加而增加,相同施氮量下配施硝化抑制剂对NH₃挥发无显著影响。N667处理2019年及2020年的NH₃挥发速率峰值分别为0.48 kg·hm^-2·d^-1和0.57 kg·hm^-2·d^-1,NH₃挥发累积量分别为34.49 kg·hm^-2和35.11 kg·hm^-2,显著高于其他处理。两年相同施氮量处理下配施与未配施硝化抑制剂处理的NH₃挥发累积量均无显著差异;N400I2.00、N267I1.33、N133I0.67处理较农民习惯施氮(N667)处理显著降低了N₂O排放。2019年和2020年N667处理的N₂O累积排放量较N400处理分别增加了43.10%、16.11%,N400I2.00、N267I1.33、N133I0.67处理的N₂O累积排放量较N400、N267、N133处理降低了28.52%~41.37%。2019年和2020年N400I2.00处理的产量较N667处理显著提高了9.26%及6.67%,且净收益提高了9.80%、7.10%。研究表明,与农民习惯施氮量相比,减施氮肥且配施硝化抑制剂可显著降低NH₃挥发和N₂O排放,同时可提高枸杞产量与经济效益。施氮量为400 kg·hm^-2且配施nitrapyrin 2.00 kg·hm^-2为柴达木高肥力枸杞园较优的施氮组合。     

虾青素对脂多糖通过TLR4/MyD88/NF-κB信号通路诱导的IPEC-J2细胞炎症的影响

【目的】研究虾青素(AST)对脂多糖(LPS)通过TLR4/My D88/NF-κB信号通路诱导的IPEC-J2细胞炎症的影响。【方法】采用MTT法确定虾青素和LPS对IPEC-J2细胞和转染IPEC-J2细胞的最佳处理浓度和处理时间,在处理后采用实时荧光定量PCR检测IPEC-J2细胞和转染IPEC-J2细胞炎症因子NF-κB、TNF-α、IL-6和IL~(-1)β的m RNA相对表达量,采用ELISA检测上述炎症因子的分泌量。【结果】当处理3 h,虾青素浓度达到150μmol·L~(-1)时,IPEC-J2细胞和转染IPEC-J2细胞活力达到峰值;当处理6 h,LPS质量浓度达到100 ng·m L~(-1)时,IPEC-J2细胞和转染IPEC-J2细胞活力达到峰值。与对照组相比,LPS组IPEC-J2细胞NF-κB、TNF-α、IL-6、IL~(-1)β的m RNA相对表达量和分泌量显著升高(P0.05);与LPS组相比,AST+LPS组NF-κB、TNF-α、IL-6、IL~(-1)β在IPEC-J2细胞中的m RNA相对表达量和分泌量显著降低(P0.05),而在转染IPEC-J2细胞中的炎症因子m RNA相对表达量和分泌量均无显著变化(P0.05)。【结论】虾青素可以抑制细胞炎症反应,且对细胞的保护作用与TLR4/My D88/NF-κB信号通路相关。