犬精液冷冻与人工授精的研究——Ⅱ稀释液和冻精剂型对犬冻精解冻后活力的影响

从6条公犬采集其浓份精液36次.分别在稀释液Ⅰ和Ⅱ中冷冻成三种剂型的冻精(颗粒0.5ml细管和安瓿),根据解冻后活力比较其优劣.研究表明:稀释液Ⅰ中三种剂型的平均解冻后活力(0.35±0.04)显著高于稀释液Ⅱ(0.23± 0.05;P<0.01);两种稀释液中颗粒冻精的平均冻后活力(0.34±0.08)显著地高于细管(0.26±0.09;P<0.01)和安瓿(0.26±0.08;P<0.01);细管和安瓿之间差异不显著(P>0.05).     

公鸡精子冷冻保存后活率和顶体破损率的相关关系

用BPSE为稀释液,以终浓度为11%(V/V)的甘油作低温保护剂,冷冻洪山公鸡精液。测定了细管型和颗粒型2种类型的冷冻精液解冻后的精子存活率和顶体破损率,并对冻后存活率和顶体破损率进行了相关和回归处理。测定结果表明,细管型冷冻精液解冻后的精子存活率和顶体破损率分别为0.451±0.056和0.392±0.054(n=20)。颗粒型冷冻精液解冻后的精子存活率和顶体破损率分别为0.339±0.040和0.543±0.052(n=20)。前者解冻后的活率极显著高于后者,而顶体破损率则极显著低于后者。相关分析结果表明,细管型冷冻精液解冻后精子存活率与顶体破损率之间的回归方程为y=0.7293-0.7126x,相关系数r为-0.697(P<0.01),而颗粒型冷冻精液解冻后的精子存活率与顶体破损率之间的相关系数为-0.0625(P>0.05),表明两者之间无显著相关。本研究为输入相等数量的活精子时细管型冷冻精液受精率显著高于颗粒型冷冻精液的试验结果提供了一定的理论解释,也为将保存家畜冷冻精液的方法应用于家禽方面作了有益的探索。     

不同温度解冻精液对母牛受胎率影响的试验

近年来,颗粒精液逐渐被细管精液所取代,细管精液携带方便,解冻操作简单,便于上门服务,故我们用70℃、90℃、40℃和体温不同温度的解冻细管精液对母牛情期受胎率作了试验,试验表明,体温解冻受胎率为34%,40℃解冻受胎率为44%,70℃与90℃解冻差异不大,但比40℃解冻受胎率提高34%和36%,比体温解冻提高44%和46%,差异极显著,现将试验结果报道如下:     

犬精液冷冻实验研究

以豫西土犬为实验材料,以改进犬冻精的品质为目的,进行了犬精液冷冻研究。实验1,采集6条公犬的浓份精液36次,分别在稀释液Ⅰ和Ⅱ中冷冻成三种剂型(颗粒、0.5mL细管和安瓿),根据解冻后活率比较优劣。研究表明,稀释液Ⅰ中三种剂型的平均解冻后活率(0.35±0.04)显著高于稀释液Ⅱ(0.23±0.05;P<0.01);两种稀释液中颗粒冻精的平均冻后活率(0.34±0.08)显著高于细管(0.26±0.09;P<0.01)和安瓿(0.25±0.08;P<0.01),细管和安瓿冻后活率差异不显著(P>0.05)。实验2,分别将6条公犬每次采集的精液(每条采6次),按同样的方法稀释、平衡、分装,而后将分装的细管分为两组,分别采用程序Ⅰ和程序Ⅱ进行冷冻,其冻后活率分别为0.47±0.10和0.34±0.05(P<0.01);复苏率分别为57.86±8.85和42.27±3.80(P<0.01);顶体完整率分别为34.47±5.20和29.77±4.37(P<0.01)。结果表明:程序Ⅰ的冷冻效果明显优于程序Ⅱ。     

细管冻精配种操作技术

细管冻精是用直径小,管壁薄的无毒塑料管盛装精液后冷冻而成。由法式凯苏输精枪输精。与颗粒冻精比较,具有冷冻时受冻均匀、解冻时受热一致、解冻方便、输精时不易污染、避免精液和液氮的直接接触、精子活力好,受胎率高的优点。     

不同解冻温度对精子活力的影响

温度是精子最敏感的外界因素之一。人们的注意力多集中在稀释液和冷冻方法的研究,对冷冻精液的解冻方法和技术的研究不足。但实践证明,牛精液冷冻效果好坏与解冻温度有很大关系。长期以来,人们沿用冷冻精液的解冻温度38～40℃解冻冷冻精液。为此,可以通过本试验了解不同解冻温度对牛冷冻精子复苏的影响,找出适宜牛细管冷冻精液的最佳解冻温度。     

DMA和甘油对公鸡精子冷冻保护作用的比较

比较了6%的DMA和11%的甘油冷冻洪山公鸡精液后精子在存活率、顶体完整率方面的差异.结果表明,用DMA做冷冻保护剂的颗粒型冷冻精液解冻后的精子存活率和顶体完整率分别为0.320±0.041和0.600±0.049,用甘油做冷冻保护剂的颗粒型冷冻精液解冻后的精子存活率和顶体完整率分别为0.313±0.036和0.597±0.040,两者差异不显著.用DMA做冷冻保护剂的细管型冷冻精液解冻后的精子存活率和顶体完整率分别为0.388±0.034和0.652±0.042,用甘油做冷冻保护剂的细管型冷冻精液解冻后的精子存活率和顶体完整率分别为0.433±0.054和0.750±0.048,前者在精子存活率(P＜0.05)和顶体完整率(P＜0.01)方面都显著低于后者.     

浅谈奶水牛冻精输精配种的关键技术

印度摩拉水牛是较好的乳用水牛品种,它与我国本地水牛杂交的杂种较本地水牛体型大,生产发育快,役力强,产奶量高.细管冷冻精液是目前一种理想的剂型,具有冷冻时受冻均匀、解冻时受热一致、解冻方便、输精时不易污染、避免精液和液氮的直接接触、精子活力好、受胎率高的优点.笔者长期从事印度摩拉水牛与本地母水牛的杂交改良工作,积累了奶水牛细管冻精人工授精经验,本文总结母牛发情时间、细管冻精的解冻与装枪、适时输精和输精等关键技术环节,供参考.     

辽宁绒山羊胚胎冷冻保存方法与技术研究

本研究探讨了不同冷冻方法、不同冷冻液和冷冻前CB处理对辽宁绒山羊胚胎低温保存效果的影响,以筛选适合于辽宁绒山羊胚胎冷冻保存的方法与技术.常规冷冻时以1.5 mol/L EG为保护液的保护效果较好,解冻后胚胎发育率为62.86%,孵化率为54.29%;玻璃化冷冻(细管法和OPS法)以EFS40为保护液可以获得较好的冷冻效果,玻璃化细管法和OPS法解冻后胚胎的发育率分别为65.79%和57.89%;冷冻前CB处理能改善辽宁绒山羊胚胎低温保存的效果.     

使用细管冷冻精液提高授胎率的几个问题

目前，我们所使用的细管冷冻精液较过去用的颗粒精液在应用上更方便、更卫生、更快捷、受胎率更高。为冷冻精液配种提供了优越的条件。但是，在现时实际操作过程中，由于家畜人工授精操作技术人员的技术水平等级差异，改良配种设施不齐备，一家一户串门或是上门配种输精方式，不同程度的降低了细管精液的优势，就此，作者就从事改良配种工作的切身体会，对细管冷冻精液使用方法，提出自己的看法。     

细管冻精腹腔镜子宫角输精技术在哈萨克羊品种改良中的应用

细管冻精由于具有不易污染、便于解冻、受胎率高等优点,已成为冷冻精液的主导产品。本研究采用同期发情技术、腹腔镜子宫角输精技术、早期B超孕检技术开展哈萨克羊的品种改良工作。结果显示:采用此技术可以较大幅度提升哈萨克羊的受胎率,加快哈萨克羊品种改良速度。     

牛冷冻精液保存与使用方法(下)

三、牛冷冻精液解冻与镜检注意事项 1.细管精液解冻首先将水浴 锅内水温加热到370℃～39℃,然后用镊子取1支冷冻后的细管精液迅速浸泡入37℃～39℃温水中并晃动,待溶解后取出,用卫生纸或纱布擦掉细管上的水珠,再用细管剪剪去超声波封口端,挤2小滴精液于载玻片上,盖上盖玻片进行冻后活力检测.     

猪精液0.5 ml细管快速冷冻和解冻方法的优化

 【目的】优化冷冻-解冻方法,提高0.5 ml细管快速冷冻保存猪精液的质量。【方法】冷冻方法：分别将细管水平置于液氮面上方3、5、7、9和11 cm处,每一水平位置细管分别熏蒸3、5、10、15和20 min后投入液氮保存,37℃×30 s水浴解冻,确定最优冷冻方法;在选择最优冷冻方法的基础上,分别采用37℃×30s(对照组)、42℃×25 s、47℃×20 s、52℃×15 s、57℃×10 s和62℃×5 s共6种方法水浴解冻,确定最佳解冻方法。【结果】采用3 cm×10 min冷冻方法,解冻0、8 h精液中精子活率、质膜完整率和顶体完整率均最高。采用相对“高温短时”解冻,精子活率、质膜完整率、顶体完整率和线粒体膜电位均较高,同时丙二醛浓度降低;57℃×10 s和62℃×5 s解冻的精子各项指标无显著差异（P＞0.05）,但前4项指标显著高于对照组（P＜0.05）,丙二醛浓度显著降低（P＜0.05）。【结论】优化猪精液0.5 ml细管快速冷冻的冷冻和解冻方法可以显著提高解冻质量,采用3 cm×10 min冷冻、57℃×10 s或62℃×5 s解冻方法效果最佳。     

驴冷冻精液的品质和配马受胎率试验报告

本试验的目的是为提高优良种公驴的利用率,和采用冷配繁殖马骡提供一定的科学依据。精液冷冻所采用的稀释液的配方和制作的工艺流程是成功的。从冷冻保存24小时和8个月的颗粒解冻后检查,活力为0.48—0.55,与国内先进水平——山东蓬来县1982年制作的冻精活力0.35—0.525相比略高一些。精液冷冻前后几项品质指标的变化,精子活力由0.835降到0.537,精子顶体破坏2.1％;碱性磷酸酶和谷草转氨酶在精液冻前浓缩(离心去掉精清)后变化很大。如做到冻精解冻后尽快输精,对受胎率没有不良的影响。1984年配马209匹,经两次妊检,其受胎率为72.25％。     

波尔山羊细胞冷冻精液保护保存效果研究

通过对4种波尔山羊细管冷冻精液保护液保存效果对比试验，筛选出稀释后精子活力，解冻后精子活力及解冻后室温保存12h精子活力较好的保护液，并且用于细管冷冻精液的批量生产和推广。     

猪0.5 mL细管冷冻精液的人工授精试验

【目的】制备猪0.5mL细管冷冻精液,并对其输精效果进行检测。【方法】制备猪0.5mL细管冷冻精液,解冻后对其品质(活力、快速直线游动精子比例、质膜完整率、顶体完整率)进行检测。将36头母猪随机分为8组:A-1、A-2组(各5头)均输新鲜精液精子4×109个,稀释至80mL,其中A-1组采用常规输精,A-2组采用子宫内人工输精;B-1、B-2组(各4头)均采用子宫内人工输冷冻精液,精子数量分别为1×109和2×109个,均稀释至20mL;C-1、C-2组(各5头)均采用子宫内人工输冷冻精液精子2×109个,C-1组稀释至60mL,C-2组稀释至80mL;D-1、D-2组(各4头)均采用子宫内人工输冷冻精液精子4×109个,D-1组稀释至60mL,D-2组稀释至80mL。人工授精后记录妊娠率、受胎率及产仔数量。【结果】制作的猪0.5mL细管冷冻精液解冻后,活力最高的达到(42.4±0.9)%,质膜完整率为(47.2±0.3)%,顶体完整率为(46.8±0.4)%。新鲜精液平均妊娠率为100%,产仔数为9.00±0.63;冷冻精液平均妊娠率为72%,产仔数为6.64±0.82,新鲜精液妊娠率和产仔数均显著优于冷冻精液。【结论】新鲜精液人工输精效果优于冷冻精液;冷冻精液采用60和80mL稀释液体积对产仔率、产仔数没有明显影响;冷冻精液通过子宫内人工输精,效果最佳的精子数为2×109个,稀释液体积为60mL。     

制备牛细管冻精的无菌操作

细管冷冻精液的质量对母牛的受胎率具有很大的影响,精液中受细菌污染程度的高低,是判定冻精质量优劣的标准之一。在牛冷冻精液国家标准中规定,精液解冻后每一剂量中细菌菌落数不超过800个．细菌菌落超标会使冻精质量下降,而且会影响母牛繁殖生产和身体健康,要降低精液中的细菌数,保证冻精质量,提高母牛受胎率,在牛冻精生产过程中．从采精前的准备、精液采集、精液稀释、降温平衡、精液分装到制冻,各个环节都必须严格做到无菌操作。     

牛细管冷冻精液人工授精关键技术

随着牛冷冻精液改良配种技术的推广,牛细管冻精因使用方便、受胎率高等优点被广泛采用.如何正确使用牛细管冻精,关系到配种员配种技术水平高低,是决定受胎率高低的关键.     

绵羊腹腔内窥镜子宫角深部冷冻精液输精试验

采用人用黄体酮 ,PMSG对绵羊进行同期发情处理 ,46只绵羊 48h同期发情率为 95 .6 5 % (4 4/ 46 ) ,用解冻后活力仅 0 .2的冷冻精液 ,借助腹腔内窥镜子宫角深部输精 ,情期受胎率 72 .73% (32 / 44 ) ,与澳大利亚Salamoan教授腹腔内窥镜子宫角冷冻精液输精情期受胎率 74.0 4% (77/ 10 4)且冻后活力 0 .5 ,仅差 1.31个百分点 ,差异不显著 (P <0 .0 5 ) ,而与常规冷冻精液输精的情期受胎率 5 5 .45 % (178/ 32 1)相比 ,高出 17.78个百分点 ,差异极显著 (P <0 .0 1)。     

两种不同冷冻方法对犬冷冻精液品质的影响

本试验以德国牧羊犬的精液为材料,采用液氮熏蒸法和细管炸熏法两种冷冻方式进行细管冷冻试验,用精子活力、顶体完整率和畸形率,作为判定精子冷冻品质的指标,确定两种冷冻方法对犬冷冻精液效果的影响。结果表明:(1)液氮熏蒸法冷冻后的精子活力为0.30±0.12,细管炸熏法冷冻后的精子活力0.38±0.08,细管炸熏法优于液氮熏蒸法,且差异显著(P<0.05);(2)液氮熏蒸法冷冻后精子顶体完整率42.20±3.51,畸形率25.60±7.03,细管炸熏法冷冻后精子顶体完整率43.50±4.64,畸形率24.50±5.94,细管炸熏法稍优于液氮熏蒸法,差异不显著(P>0.05)。