奶牛能量状态对血清FGF-21水平的影响

为了明确能量代谢负平衡奶牛血清中成纤维细胞生长因子(FGF-21)浓度的变化规律以及与奶牛能量代谢负平衡特征性指标之间的关系。研究从某千头奶牛场选取选择非妊娠、非泌乳、健康奶牛10头,随机分成2组,每组5头。在实验期间,一组牛饲喂120%维持(1.48 Mcal·kg~(-1))日粮,另一组饲喂30%维持能量(0.37 Mcal·kg~(-1))日粮(NRC标准),每天采集血液样品,检测能量代谢特征性指标,其中,血清理化指标采用全自动血液生化分析仪进行测定,激素指标Elisa试剂盒进行检测。所有检测数据均采用统计学方法进行分析与统计。结果显示:摄入30%维持能量(0.37 Mcal·kg~(-1))日粮的牛血清FGF-21水平同时显著升高;饲喂120%的维持日粮的牛血清FGF-21水平同时显著降低。实验检测指标中血清FGF-21指标与瘦蛋白(LP)为正相关,与血糖(Glu),β羟丁酸(BHBA)为负相关。结论:实验表明FGF-21与能量密切相关并且在奶牛能量代谢平衡状态的调控中发挥作用,为今后深入探究能量负平衡的发生机理和新的防治策略奠定了基础。     

蛋白激酶C抑制剂Staurosporine对血小板聚集,蛋白磷酸化和？…

目的：进一步研究蛋白激酶Ｃ抑制剂Ｓｔａｕｒｏｓｐｏｒｉｎｅ在血小板聚集，肌动蛋白聚合中的作用，方法：以＾３２Ｐ－Ｎ２ＨＰＯ４标记血小板；以血小板集仪测定血小板聚集，以ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分离蛋白质，进行放射自显影，以Ｔｒｉｔｏｎ－Ｘ－１００抽提法沉淀骨架蛋白，结果：（１）１μｍｏｌ／ＬＳｔａｕｏｐｓｏｒｉｎｅ完全抑制０．５Ｕ／ｍｌ凝血酶成１０μｍｏｌ／ＬＰＭＡ诱导的血小板聚集，大部分抑制２０μｍｏｌ／     

柚皮素单硫酸酯钠盐对血栓形成和血小板聚集的影响

目的 观察柚皮素单硫酸酯钠盐(SNMS)对血栓形成和血小板聚集的影响.方法 将30只SD大鼠随机分为5组:SNMS1组、SNMS2组、血栓通组、肝素组和对照组,每组6只,麻醉大鼠,静脉注射药物后,用血栓生成仪观察大鼠颈动脉血栓形成情况;取兔血与药物孵育5min,凝血酶(500 U/L)作用1 min后,用全血血小板聚集...     

蛋白激酶C抑制剂Staurosporine对血小板聚集、蛋白磷酸化和肌动蛋白聚合的影响

目的：进一步研究蛋白激酶C抑制剂Staurosporine在血小板聚集、蛋白磷酸化、肌动蛋白聚合中的作用。方法：以32P－Na2HPO4标记血小板；以血小板聚集仪测定血小板聚集；以SDS－PAGE分离蛋白质，进行放射自显影；以TritonX－100抽提法沉淀骨架蛋白。结果：（1）1μmol／LStaurosporine完全抑制0．5U／ml凝血酶或10μmol／LPMA诱导的血小板聚集，大部分抑制20μmol／LA23187诱导的血小板聚集。（2）1μmol／LStaurosporine几乎完全抑制0．5U／ml凝血酶、或10μmol／LPMA、或20μmol／LA23187诱导的血小板40kD和20kD蛋白磷酸化。（3）1μmol／LStaurosporine完全抑制0．5U／ml凝血酶或10μmol／LPMA诱导的血小板肌动蛋白聚合。结论：Staurosporine抑制蛋白激酶C的活性．从而抑制血小板的聚集和肌动蛋白聚合；蛋白激酶C在血小板聚集和肌动蛋白聚合中起着重要调控作用。     

田七总皂苷对兔全血血小板聚集的影响

目的观察田七总皂苷对凝血酶或ADP诱导的兔全血血小板聚集的影响。方法兔全血与田七总皂苷孵育5min,然后用凝血酶或ADP作用1min,用全血血小板聚集仪观察兔全血血小板聚集情况。结果田七总皂苷50、100和200μmol/L作用兔血小板后,用凝血酶诱导时对血小板聚集的抑制率分别为39%、60%和61%;用ADP诱导时抑制率分别为65%、79%和60%。结论田七总皂甙对凝血酶和ADP诱导的兔全血血小子板聚集都有抑制作用。     

四种槲皮素水溶性衍生物对凝血酶诱导兔血小板聚集的影响

目的 :研究四种人工半合成槲皮素水溶性衍生物 ,即乙氧基槲皮素、槲皮素磷酸酯 (B)、槲皮素单硫酸酯和槲皮素二硫酸酯对凝血酶诱导兔血小板聚集的影响。方法 :用比浊法检测血小板聚集。结果 :乙氧基槲皮素对血小板聚集无影响 ;槲皮素磷酸酯 (B)、槲皮素单硫酸酯和槲皮素二硫酸酯对血小板聚集有抑制作用 ,IC5 0 分别为 80μ mol/ L、95μ mol/ L和 1 85μ mol/ L。结论 :槲皮素磷酸酯 (B)、槲皮素单硫酸酯和槲皮素二硫酸酯具有抗血小板活性     

SUMO融合系统高效表达可溶性鼠源FGF-21及其活性的研究

利用SUMO表达载体在大肠杆菌中高效可溶性表达鼠源成纤维细胞生长因子(FGF-21)成熟蛋白,并研究其调节血糖的功能。将鼠源FGF-21成熟蛋白基因亚克隆至SUMO表达载体上,在大肠杆菌Rosetta(DE3)中诱导表达,并用镍离子螯合柱(Ni-NTA)纯化重组蛋白,透析后利用SUMO蛋白酶I切割融合蛋白,获得纯度较高的成熟蛋白。将3T3-L1成纤维细胞分化成脂肪细胞,经微量化的GOD-POD法检测培养基中葡萄糖含量,统计学分析葡萄糖消耗率。结果表明,在SUMO表达体系中鼠源FGF-21成熟蛋白基因以可溶形式表达,且可被SUMO蛋白酶I有效地切割,获得纯度较高的成熟蛋白。与未经处理的脂肪细胞对照组相比,经鼠源FGF-21成熟蛋白处理后脂肪细胞对葡萄糖的摄取利用显著增加,残存在培养基中的葡萄糖含量明显减少;两样本比较的t检验,P<0.001,差异极显著。     

Wortmannin对凝血酶诱导的人血小板聚集和3┐磷酸化肌醇磷脂累积的影响

Ｗｏｒｔｍａｎｎｉｎ是能引起动物出血的真菌代谢产物,它是肌醇磷脂－３－激酶的不可逆抑制剂。Ｗｏｒｔｍａｎｎｉｎ对血小板的多种抑制作用已被广泛研究。用比浊法分析血小板聚集;用［γ－３２Ｐ］标记磷酸化肌醇磷脂;用氯仿和甲醇抽提磷酸化肌醇磷脂;用ＴＬＣ和放...     

不同剂量阿司匹林和波立维对阿司匹林抵抗患者血小板聚集功能的影响及护理

目的 观察不同剂量阿司匹林和波立维对冠心病阿司匹林抵抗患者血小板聚集功能的影响,并提出相应护理对策.方法 筛选出冠心病患者中发生阿斯匹林抵抗的患者48例入选本研究,随机分为3组,分别给予阿司匹林100、300 mg和阿司匹林100 mg 波立维75 mg,14 d后采用全血电阻法检测血小板聚集功能.结果 阿司匹林100 mg和阿司匹林300 mg患者的血小板聚集功能比较差异均无统计学意义(P＞0.05);加服波立维可使二磷酸腺苷诱导的血小板聚集功能显著抑制(P＜0.01),但对花生四烯酸诱导的血小板聚集无明显影响.结论 加大阿司匹林剂量或合用波立维不能明显改善冠心病患者的阿司匹林抵抗,对该类患者应加强临床观察和护理.     

半边旗中二萜类化合物5F对凝血酶诱导兔血小板聚集的影响

目的：研究半边旗中二萜类化合物５Ｆ（１１α－羟基－１５－氧－１６－烯－对映贝壳核烷－１９酸）对凝血酶诱导兔血小板聚集的影响。方法：血小板悬液与５Ｆ孵育１ｍｉｎ，然后用聚血酶（５０Ｕ／Ｌ）作用５ｍｉｎ，用血液凝集仪记录血小板聚集情况。结果：半边旗中二萜化合物５Ｆ对凝血酶诱导的兔血小反聚集有抑制作用。结论：半边旗中二萜类化合物５Ｆ具有抗血小板的作用。     

FGF-21促进HepG2细胞摄取葡萄糖研究

肝脏是代谢的中枢性器官,在糖脂代谢中扮演重要角色。FGF-21是近年来发现的一种治疗糖尿病新型药物,研究其对肝脏糖代谢影响及机制将为FGF-21成药性提供理论依据。以Hep G2细胞为肝细胞模型,探究FGF-21对Hep G2细胞葡萄糖吸收影响及作用机制。FGF-21处理Hep G2细胞,采用葡萄糖氧化酶-过氧化物酶(GOD-POD)法检测细胞对葡萄糖摄取情况,并检查胰岛素与FGF-21协同作用,蒽酮法检测细胞内糖原含量,半定量和实时荧光定量PCR检测FGF-21对葡萄糖转运蛋白(GLUTs)m RNA表达影响。结果表明,FGF-21可促进Hep G2细胞摄取葡萄糖,与胰岛素具有一定协同作用,增加糖原合成。半定量PCR结果显示在FGF-21作用下,仅GLUT1m RNA表达有所增加。实时荧光定量PCR检测FGF-21作用时间对GLUT1 m RNA表达量影响,发现FGF-21作用6 h时GLUT1 m RNA表达量倍数增加最大。说明FGF-21可通过增加GLUT1 m RNA表达促进Hep G2细胞消耗葡萄糖,参与糖原合成。     

用分光光度计测血小板的聚集性

利用分光光度计测定了赖氨酸、P-转移因子、孕酮、Bio-plus等几种生物及非生物制剂在不同浓度下几种动物的PRP聚集率变化规律及影响。     

SUMO-cFGF-21发酵工艺优化及其降糖效果研究

研究旨在优化SUMO-cFGF-21发酵工艺,同时检测cFGF-21蛋白对糖尿病小鼠和犬血糖的降糖效果。通过SDS-PAGE电泳分析发酵条件(菌种、工程菌OD600、诱导时间、诱导温度、诱导剂IPTG浓度)对SUMOcFGF-21蛋白表达的影响。结果表明,22号菌种蛋白表达量最高,达到上清蛋白30.5%,可作为一级菌种。发酵过程中,当工程菌OD600值约为2、诱导时间6 h、诱导温度23℃、诱导剂IPTG终浓度1 mmol·L~(-1)时,上清中SUMOcFGF-21蛋白表达量最高,达到上清蛋白19.7%。经Ni柱亲和层析,酶切去掉SUMO标签后成功制备cFGF-21蛋白。将不同剂量cFGF-21持续注射糖尿病小鼠两周,以有效剂量cFGF-21持续注射糖尿病犬两周,观察降糖效果。结果表明,与模型对照组相比,有效剂量cFGF-21均可极显著降低糖尿病小鼠和犬的血糖(P0.01)。研究成功优化SUMO-cFGF-21蛋白中试发酵工艺,并检测cFGF-21蛋白对糖尿病小鼠和犬血糖的降糖效果,为临床应用cFGF-21治疗犬糖尿病提供依据。     

槲皮素单硫酸酯和5’-氯-5’-脱氧腺苷单用与合用对凝血酶诱导兔血小板聚集的影响

目的：研究槲皮素单硫酸酯和5’-氨-5’-脱氧腺苷合用对凝血酶诱导兔血小板聚集的影响。方法：用比浊法检测血小板聚集。结果：槲皮素单硫酸酯和5’-氨-5’-脱氧腺苷对凝血酶诱导的兔血小板聚集都有抑制作用，两者合用作用增加。结论：槲皮素单硫酸酯与5’-氨-5’-脱氧腺苷具有协同抗血小板聚集的作用。     

声音对不同体长鲤的诱集效果

用400Hz正弦波连续音对不同体长鲤Cyprinus carpio进行音响驯化,探讨声音对不同体长鲤的诱集效果。结果表明：体长30—40cm和20—30cm的鲤,驯化第8d聚集率达到100％;体长10～20cm的鲤,驯化第6d聚集率达到100％;体长5～10cm的鲤,驯化第5d聚集率达到100％。平均聚集时间,体长30～40cm的鲤为50．01S,20～30cm的鲤为49．37S,10～20cm的鲤为48．77S,5～10cm的鲤为47．25s。400Hz正弦波连续音对不同体长鲤均具有明显的诱集效果,但对体长较小的鲤的聚集效果相对好于体长大的鲤。     

昼夜节律对大鼠血液流变学的影响

目的 :观察昼夜节律对大鼠血液流变学的影响。方法 :SD大鼠 2 0只 ,按完全随机化分为两组 :白天组 1 1只 (采血时间在上午 9:0 0～ 1 0 :0 0 ) ;夜间组 9只 (采血时间在晚上 9:0 0～ 1 0 :0 0 )。流变学指标采用 NXE- 1型锥板式粘度计检测 ;检测温度 2 5℃。结果 :夜间组与白天组比较 ,夜间组的ηb(m Pa· s,2 2 5 s- 1 )、ηb(m Pa· s 1 1 .2 5 s- 1 ) ,均比白天组为低 (P<0 .0 5) ,而红细胞压积、ηb(1 1 .2 5 s- 1 ) /ηb(2 2 5 s- 1 )差异无显著性 (P>0 .0 5)。结论 :昼夜节律对 SD大鼠血液流变学有影响     

苯甲酸雌二醇对L-谷氨酸单钠损毁弓状核雌性大鼠血脂代谢的影响

目的观察苯甲酸雌二醇（EB）对L广谷氨酸单钠（MSG）损毁弓状核雌性大鼠体质量、脂肪湿质量及血脂代谢的影响。方法皮下注射MSG建立新生SD雌性大鼠弓状核损毁模型。造模大鼠于30日龄时分别肌肉注射EB0．24mg／kg（MSG＋EBL组）、0．48mg／kg（MSG＋EBH组）,隔天1次,共30次;停止注射后15d处死大鼠,检测体质量、脂肪湿质量、血脂、血清雌二醇（E2）。结果模型组大鼠体质量、脂肪湿质量／体质量、血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL—C）都明显升高（P〈0．05）,而E2、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）显著降低（P〈0．05）。EB处理后大鼠的体质量、脂肪湿质量／体质量、TC、TG、LDL-C均显著回降（P〈0．05）,而E2、HDL—C显著回升（P〈0．05）;MSG＋EBH组与MSG＋EBI组比较,其各项指标差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论EB对弓状核损毁的雌性大鼠血脂代谢紊乱有治疗作用。