牛奶中乳铁蛋白含量的影响因素及调控机制研究进展

乳铁蛋白是一种铁结合性糖蛋白,广泛存在于哺乳动物的分泌物中。研究表明,乳铁蛋白具有多种生物学功能。本文就牛奶中乳铁蛋白含量的影响因素及其基因调控特点方面的研究做简要综述。     

乳制品中乳铁蛋白的测定

采用高效液相色谱法建立了乳制品中乳铁蛋白测定的分析方法。试样中的乳铁蛋白经磷酸盐缓冲液提取,提取液经肝素亲和柱净化后,采用反相高效液相色谱柱分离,以二极管阵列检测器于280 nm处检测,采用外标法定量。结果表明:乳铁蛋白在10.0~1 000.0 ug/mL范围内线性良好,添加回收率为75%~110%,相对标准偏差(RSD)小于20%。该方法具有灵敏度高、准确度高、重现性好的特点,适合检测机构或乳品企业日常样品中乳铁蛋白的检测。     

不同条件下乳铁蛋白对铁溶解度的影响

文章通过不同条件下乳铁蛋白对铁溶解度影响的测定,结果表明,随着加热温度升高和时间延长,乳铁蛋白对铁吸收逐渐降低,加热温度在75℃以下时,对铁溶解度影响不明显,加热温度75℃以上时,铁溶解度明显下降;当溶液pH11或pH3时都会影响乳铁蛋白对铁结合能力,随时间延长,铁溶解度逐渐降低,中性条件下有利于铁结合。试验表明,在中性条件下,巴氏杀菌对乳铁蛋白吸收铁影响最小。     

不同泌乳期小鼠乳腺乳铁蛋白基因的表达

选取昆明小鼠为研究对象,以看家基因GAPDH为内参,用RT-PCR法对不同泌乳期小鼠乳腺组织乳铁蛋白基因的表达进行了研究。结果显示:不同泌乳期小鼠乳腺均有乳铁蛋白基因的表达,表达水平随泌乳过程的进行呈下降趋势,泌乳早期与中期和晚期差异显著。提示乳铁蛋白在泌乳期对小鼠乳腺免疫具有一定的调节作用。     

常乳中牛乳铁蛋白的纯化及抗菌活性研究

[目的]研究从常乳中纯化牛乳铁蛋白的工艺条件,探讨牛乳铁蛋白的抗菌活性。[方法]选用SP sepharose HP作为强阳离子交换介质,利用AKTApurifier10高效液相色谱仪纯化牛乳铁蛋白。[结果]结果表明,牛乳铁蛋白在pH值7.5、浓度0.85 mol/L的NaCl洗脱液中可以被洗脱下来,且产品纯度为90%以上。牛乳铁蛋白浓度为5 mg/ml时对大肠杆菌的生长具有显著的抑制作用。[结论]该研究建立了从常乳中纯化牛乳铁蛋白的方法,为大规模生产具有活性的牛乳铁蛋白奠定了基础。     

千里光超微粉对仔猪腹泻的防治效果及对 血清IgG、IgA和IgM的影响

为了探究千里光超微粉对仔猪腹泻的防治效果及对仔猪血清IgG、IgA 和IgM 的影响,选取40 日龄杜伊 长伊大三元杂交商品代瘦肉型仔猪90 头,设6 个处理,每个处理设3 个重复,每个重复5 头仔猪。处理1 为对照,处 理2、处理3、处理4、处理5 分别在基础日粮中按质量比添加0.3%、0.6%、0.9%、1.2%的千里光超微粉,处理6 在基础 日粮中按质量比添加1.2%千里光普通粉,试验期为30 d。结果发现,在试验期3 个阶段,添加不同量的千里光超微粉 对仔猪腹泻频率、腹泻指数均有降低作用,以添加1.2%千里光超微粉效果最明显;千里光超微粉能显著提高仔猪血 清IgG、IgA、IgM 水平;一定量的千里光超微粉防治仔猪腹泻的效果优于千里光普通粉。     

小白鼠乳铁蛋白基因片段克隆及不同泌乳阶段乳铁蛋白基因表达的差异

从泌乳期小白鼠乳腺组织中提取总RNA,用反转录酶反转录为cDNA后,根据已报道的小白鼠乳铁蛋白(LF) cDNA设计一对引物,采用聚合酶链式反应(PCR)进行扩增,获得一条897 bp的片段,克隆于pGEM-T Vector后进行序列分析表明,该片段为LF基因cDNA的部分序列,编码299个氨基酸组成的多肽,是成熟肽的主体部分.本研究得到的基因片段与已报道的小白鼠子宫LF cDNA部分序列的同源性达到99%.以LF基因片断的成功克隆为基础,本实验室构建了一优化的半定量RT-PCR法,以β-actin为内标,研究不同泌乳阶段小白鼠乳腺组织LF基因表达的差异.结果显示,不同泌乳阶段小白鼠LF基因表达有差异,在泌乳第1日,LF基因的表达量较高,从泌乳第1日到泌乳第10日和第18日,LF基因表达量呈下降趋势,到乳腺组织退化的干乳期(泌乳第25日),LF基因表达量又明显升高.     

鸭瘟弱毒疫苗诱导IgA、IgM和IgG产生规律的研究

【目的】探讨鸭瘟弱毒苗诱导鸭局部黏膜和系统免疫中抗体发生的规律。【方法】将DPV弱毒苗Cha株经皮下、口服和滴鼻途径免疫20日龄樱桃谷鸭后60 d内定时随机剖杀5只鸭,采集血清、气管和消化道（食道、十二指肠、空肠和直肠）分泌液,应用间接ELISA检测抗DPV的IgA、IgM和IgG抗体滴度（以lg表示）。【结果】所有免疫鸭检测样品中均可检测到DPV特异性IgG、IgM和IgA抗体。血清中抗体滴度由高到低均为IgG、IgM和IgA,其中IgM检出时间最早,IgG存留时间最长。皮下免疫DPV弱毒苗可更早诱导鸭血清中生成特异性IgG,且抗体滴度最高;气管和消化道分泌液中抗体滴度由高到低均为IgA、IgM和IgG,其中IgA和IgM检出时间最早,IgA存留时间最长。口服和滴鼻途径免疫鸭消化道和气管分泌液中IgA滴度较皮下免疫鸭高。【结论】不同途径免疫鸭瘟弱毒疫苗均可迅速诱导免疫鸭体液免疫介导的黏膜免疫和系统免疫。以DPV特异性IgA为主要抗体的黏膜免疫在预防DPV强毒早期对鸭消化道和呼吸道等局部黏膜的感染中具有十分重要的作用,使DPV弱毒疫苗快速产生免疫保护的机制从黏膜免疫的角度得到一定程度解释。     

鼠伤寒沙门氏菌对小鼠IgA、IgM和IL—6产生细胞分布的影响

用免疫荧光和原位杂交技术检测经口感染鼠伤寒沙门氏菌的C57B16／H^b2小鼠脾、小肠肠系膜淋巴结内产生IgA、IgM和IL－6阳性细胞的分布规律。结果表明感染48h后小肠绒毛内IgA阳性细胞数量增多，IgM阳性细胞数量略降低，在小肠粘因有层非淋巴滤泡区域强阳性IL－6细胞数量增多，提示IgA产生细胞在效应区增生和分泌IgA时需某些细胞因子加IL－6的参与，在抗沙门氏菌早期感染中IL－6和IgA有重要作用。     

不同条件下乳铁蛋白对铁溶解度的影响

文章通过不同条件下乳铁蛋白对铁溶解度影响的测定,结果表明,随着加热温度升高和时间延长,乳铁蛋白对铁吸收逐渐降低,加热温度在75℃以下时,对铁溶解度影响不明显,加热温度75℃以上时,铁溶解度明显下降;当溶液pH>11或pH<3时都会影响乳铁蛋白对铁结合能力,随时间延长,铁溶解度逐渐降低,中性条件下有利于铁结合。试验表明,在中性条件下,巴氏杀菌对乳铁蛋白吸收铁影响最小。     

春、夏播对不同大豆种质生育期的影响

以来自国内不同生态区的57份大豆种质和来自国外的10份大豆种质为试材,分春、夏两季进行播种,研究播期对不同大豆种质生育期的影响。结果表明,春播条件下,与原生育期相比,16份种质的生育期缩短,12份相差5 d之内,39份生育期延长。生育期缩短的种质中,绥农6号缩短天数最多,达33 d;生育期延长的种质中,盘石豆延长天数最多,达54 d。夏播条件下,与原生育期相比,27份种质的生育期缩短,28份相差5 d之内,12份生育期延长。生育期缩短的种质中,吉育30缩短天数达55 d。与春播相比,夏播时,大豆全生育期缩短,主要是生育前期的缩短,即播种至结荚阶段的缩短。从积温角度来说,夏播大豆比春播大豆全生育期所需积温减少,主要是开花和结荚期减少,而在其他发育阶段两者差异不显著。     

安徽省规模化养殖场鲜奶中氟喹诺酮类药物残留的分析检测

建立了固相萃取-高效毛细管电泳同时分离达氟沙星、恩诺沙星和培氟沙星3种氟喹诺酮类药物的方法,并对来自于安徽33个牧场的165组牛奶样品进行检测.研究了缓冲液离子浓度、pH、分离电压以及温度等电泳参数,最终通过正交试验得到最佳分离条件:紫外检测波长215 nm,缓冲液为40 mmol·L-1磷酸氢二钾～ 20mmol·L-1柠檬酸冲溶液体系,pH8.10,检测电压20 kV,检测温度25℃.结果表明,3种药物在7 min内完全分离,各组分浓度与峰面积呈良好的线性关系,R2为0.9977～0.9997;试验平均回收率在71.00％～84.58％之间,RSD为0.22％～0.67％(迁移时间)和5.41％～9.75％(峰面积).165组鲜牛奶中3种氟喹诺酮类药物的检出率为9.1％.安徽省奶源存在一定程度的氟喹诺酮药物残留,需要加强对牧场的监测和管理力度.     

春玉米套种夏大豆不同模式对大豆产量的影响

[目的]研究春玉米后期套种夏大豆不同种植模式对大豆产量的影响,为春玉米合理套种夏大豆提供科学依据.[方法]以广西夏大豆主推品种桂夏1号和玉米品种正大619为供试材料,于2011年在广西3个有代表性的夏大豆产区进行春玉米套种夏大豆不同模式试验,研究适宜与春玉米后期套种夏大豆的最佳种植模式.[结果]垄上双行种植平均产量最高为2754.87 kg/ha,垄沟单行种植(CK)平均产量为2466.57 kg/ha,最低为垄上双行隔行种植,产量为2160.70kg/ha.[结论]春玉米后期套种夏大豆最为适宜的种植模式为春玉米后期垄上双行套种夏大豆.     

CpG-ODN对山羊实验性乳腺炎乳中NAGase、MPO及乳铁蛋白的影响

选择同处于泌乳初期的睢宁白山羊6头,产后第5、8灭分别向左、右乳区灌注等体积的灭菌PBS和10 μg·kg-1CpG-ODN(cytosine-phosphate-guanosine dinucleotides) ,第9天于左、右乳区经乳导管灌注大肠杆菌(2 × 109CFU·mL-1) 和金黄色葡萄球菌(2 × 109CFU·mL-1) 混合菌液3 mL.分别于灌注细菌前0 h,灌注后8、16、24、48和72 h采集乳样,动态监测乳中N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase) 和髓过氧化物酶(MPO) 的活力及乳铁蛋白含量变化.灌注72 h后处死动物,取乳腺组织进行组织学观察.结果显示:灌注细菌后72 h,灌注PBS的乳腺腺泡内仍有大量嗜中性粒细胞浸润,但灌注CpG-ODN的乳区已无明显细胞浸润.灌注CpG-ODN侧乳中NAGase、MPO活性均随时间变化先上升后下降,在24 h达到最大值,乳铁蛋白含量则在16 h达到最高.灌注PBS的侧乳中NAGase、MPO活性随时间变化表现出相同的规律,但NAGase峰值高于灌注CpG-ODN的一侧,MPO峰值低于灌注CpG-ODN的一侧;乳铁蛋白含量在24 h达到最大,峰值也有所升高.上述结果表明,CpG-ODN可以增强乳腺对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌联合感染诱导的山羊实验性乳腺炎的非特异性防御能力,减轻乳腺L皮细胞的损伤.     

春夏玉米氮肥施用技术

分别介绍了春玉米、麦田套种玉米和夏直播玉米氮肥施用方法、时间及施用量。     

转人乳铁蛋白基因山羊乳对大鼠生长及代谢机能的影响

选用30只100 g左右清洁级SD大鼠,雌雄各半,随机均分为3组,转基因乳组每天2次灌胃转人乳铁蛋白基因(hLF)波尔山羊乳1 mL(蛋白含量0.93 g·mL-1),普通乳组灌胃未经任何处理的普通波尔山羊乳1 mL(蛋白浓度0.93 g·mL-1),生理盐水组灌胃等量灭菌生理盐水;自由采食、饮水,连续15 d;颈部静脉采血致死,收集血清.结果显示:灌胃转hLF基因山羊乳显著提高了雌、雄大鼠的日增重,与生理盐水组相比差异极显著(P<0.01),与普通乳组相比差异显著(P<0.05),而普通乳组与生理盐水组相比差异不显著;灌胃转基因和普通山羊乳对其他表观及生化指标均无显著影响(P>0.05).试验结果表明:短期灌胃转hLF基因山羊乳能够促进大鼠的生长,但对大鼠的代谢机能没有显著影响.     

天津海域春夏季鱼卵、仔稚鱼的种类组成与数量分布

于2008年5—8月对天津海域的鱼卵、仔稚鱼进行了4个航次的调查,共采集到鱼卵26 654粒,仔稚鱼20 534尾,隶属于7目12科25种。鱼卵和仔稚鱼的平均密度分别为1.70、1.18 ind./m3;5月份鱼卵和仔稚鱼最多,6月份次之,8月份最少;与历史资料比较,5月份仍是天津海域鱼类的产卵高峰期,但5月份鱼卵和仔稚鱼所占比例有所下降;南部中心产卵场位置变化不大,北部中心产卵场向北移动。本研究结果表明,近年来天津海域鱼卵、仔稚鱼的种类和数量呈减少趋势,产卵场出现退化现象。