桑叶功效成分与指纹图谱分析技术研究进展

桑叶不仅是养蚕的饲料,也是传统的中药材之一。桑叶中含有丰富的蛋白质、多糖、黄酮类、生物碱类、游离氨基酸以及挥发性化合物等具有特殊生理活性的功效成分,是开发药物或功能食品的天然原料。我国的桑品种资源丰富,分布范围广泛,桑叶中的营养与功效成分及其含量同桑品种、植株部位、采收季节和产区都有关系,桑叶指纹图谱可以鉴别由上述因素造成的营养与活性成分差异,进而科学评价桑叶的药、食用品质。已有研究者采用色谱法对桑叶中的功效成分进行测定,并初步建立了桑叶相关功效成分指纹图谱。本文归纳气相色谱、高效液相色谱、超高效液相色谱3种常见的用于构建桑叶指纹图谱的方法,为今后建立更加丰富、完整的桑叶指纹图谱库提供技术参考。     

蜂胶HPLC指纹图谱真伪鉴别初探

从蜂胶的功效成分—黄酮类化合物着手,测定了真品蜂胶、杨树胶和搀假蜂胶的HPLC指纹图谱。结果发现:真品蜂胶含有19个特征峰中的18个特征峰,缺6号峰;杨树胶含有19个特征峰中的17个特征峰,缺7号和11号峰;搀了杨树胶的搀假蜂胶,含有6号峰,而7号峰和11号峰的峰面积显著降低。通过上述HPLC指纹图谱可以对蜂胶的真伪进行初步鉴别。     

乳脂肪甘油三酯测定与分析方法研究进展

脂类是极其复杂多样的生物分子,仅已报道的乳脂肪甘油三酯（triacylglycerol,TAG）就达400多种,其中,乳脂中含量高于1%的近60种。目前液相色谱—质谱联用技术（liquid chromatography-mass spectrometry,LC-MS）是分离和鉴定TAG分子的主要手段,分离技术有反相高效液相色谱（reversed-phase high-performance liquid chromatography,RP-HPLC）、银离子高效液相色谱（silver ion high-performance liquid chromatography,Ag⁺-HPLC）、二维高效液相色谱（two-dimensional high-performance liquid chromatography,2D-HPLC）和超临界流体色谱（supercritical fluid chromatography,SFC）,分子电离常用电喷雾电离（electrospray ionization,ESI）和大气压化学电离（atmospheric pressure chemical ionization,APCI）。质谱分析可以确定分子量和脂肪酸位置,但分子异构体鉴定仍面临挑战。我国针对牛、山羊、马、骆驼、牦牛和水牛等家畜的TAG缺乏系统研究。TAG谱的建立不仅可以评价乳脂肪的营养特征,指导饲养方式科学改进,也有助于建立物种、饲养方式、产地和加工方式的鉴定模型。对乳脂肪甘油三酯测定与分析方法的研究进展进行综述,以期为乳制品质量控制以及食品完整性和真实性鉴定提供理论依据。     

白僵蚕高效液相色谱指纹图谱的研究

建立白僵蚕甲醇提取物高效液相色谱指纹图谱,可较完整地反应白僵蚕内在化学信息,全面评价白僵蚕的质量。采用梯度洗脱高效液相色谱法对获取的指纹图谱数据进行相似度分析,建立了白僵蚕的指纹图谱。以主要的7个共有峰的相对保留时间和相对峰面积作为白僵蚕指纹图谱的相关技术参数,对10份白僵蚕样品测定得出的7个主要共有峰的相对保留时间重现性好,相对峰面积有明显差别。白僵蚕高效液相色谱指纹图谱可用于评价白僵蚕的质量。     

指纹图谱技术在六安瓜片茶上的研究进展

介绍了六安瓜片茶叶的历史及优良的品质,并综述了指纹图谱技术在茶叶上的利用,以及六安瓜片茶指纹图谱技术建立的意义。通过前期的研究认为六安瓜片指纹图谱技术可以作为评判六安瓜片茶品质优劣等级的方法,以达到控制茶叶的质量安全。     

柱前衍生HPLC法测定猪乳中游离谷氨酰胺的动态变化

目的在于建立一种准确、简便、快速的高效液相色谱法,测定乳中Gln的含量;研究猪乳中游离Gln水平的动态变化规律。反相C18柱为固定相,异硫氰酸苯酯为柱前衍生剂,50mmol/L醋酸缓冲液(pH6.50)-乙腈(97.7∶2.3)为流动相,进行单泵洗脱,在波长254nm处检测Gln的含量。结果:线性范围25~500μmol/L,相关系数r=0.9987,批内变异系数为3.64%,高低2种浓度的回收率分别为(104.6%)和(99.9%)。猪乳中游离Gln含量在产后第1天为29.22μmol/L,随时间推移呈上升趋势,至产后27d(593.74μmol/L)达到高峰。结论:本法简便、快速、无需梯度洗脱,分离效果好,适用于有关动物的乳中Gln的检测和研究;缺乏Gln可能是仔猪断奶后腹泻的一个重要原因。     

UPLC和HPLC法检测猪肉中磺胺类药物残留的比较

比较了超高效液相色谱法与高效液相色谱法测定猪肉中磺胺类药物残留的结果。采用农牧发[2001]38号动物源食品中磺胺类药物残留的检测方法有关标准,将原高效液相色谱方法转换并优化为超高效液相色谱方法。高效液相色谱方法色谱柱为Waters Symmetry C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相:乙腈-甲醇-水-乙酸(2∶2∶9∶0.2),流速:1 mL/min,进样量:50μL;超高效液相色谱方法色谱柱为Waters Acquity UPLC BEH RP18柱(2.1 mm×50 mm,1.7μm),流动相:乙腈-甲醇-水-乙酸(2∶2∶10∶0.2),流速:0.4 mL/min,进样量:5μL。结果表明超高效液相色谱方法能够替代高效液相色谱分析方法测定猪肉中磺胺类药物残留,既加快了分析速度,达到了样品分析的高通量,减少有机溶剂的使用,又得到更高的分析灵敏度。     

抗球虫中药复方TF-103指纹图谱的建立

采用高效液相色谱法(HPLC)建立了新型抗球虫中药复方TF-103的指纹图谱。实验采用Dia-monsil C18色谱柱(250mm×4.6mm5μm i.d.);流动相:A相为0.2%磷酸和0.1%三乙胺的水溶液,B相为乙腈,梯度洗脱;柱温:30℃;流速:1.0ml/min;紫外检测波长:330nm。以内标物香兰素、总峰面积以及峰面积最大的9个共有峰为评价指标,并采用“中药色谱图分析和数据管理系统”软件进行了相似度计算。结果表明,该法操作简单,精密度和稳定性良好,有助于该中药复方的质量控制和谱效关系的研究。     

藏药刺柏HPLC指纹图谱及穗花杉双黄酮含量测定

试验旨在建立藏药刺柏的HPLC指纹图谱,运用2种统计方法分析不同产区的刺柏药材质量差异。采用HPLC-DAD技术,色谱柱为Agilent Eclipse Plus C18色谱柱,以乙腈为流动相A,0.1%磷酸为流动相B,梯度洗脱,建立刺柏药材的指纹图谱并对指标性成分进行测定含量。对6批不同藏药刺柏进行相似度评价,并运用聚类分析(CA)、主成分分析(PCA)对HPLC指纹图谱进行分类分析。结果表明,刺柏药材HPLC指纹图谱共有峰16个,对14号峰进行指认为穗花杉双黄酮;6批刺柏药材的相似度均>0.90;CA将不同产地刺柏药材分为3类,反映了6个不同产区刺柏药材的质量特征;PCA结果显示前4个主成分的累积贡献率达到96.13%,6个化学成分代表刺柏药材质量。说明建立的HPLC指纹图谱结合含量测定、CA、PCA方法可有效控制刺柏的质量,为药材质量控制提供科学依据。     

高产和低产奶牛不同泌乳阶段养分表观消化率、瘤胃发酵参数和乳品质的比较研究

试验研究泌乳性能与泌乳阶段对奶牛养分表观消化率、瘤胃发酵参数和乳品质的影响。试验采用双因素试验设计,两个因素分别为泌乳性能(高产、低产)和泌乳阶段(泌乳前期、中期、后期)。将健康状况良好,体重、胎次、饲养管理相似的36头奶牛按泌乳性能和泌乳阶段分成6组,分别为高产泌乳前期组、高产泌乳中期组、高产泌乳后期组、低产泌乳前期组、低产泌乳中期组和低产泌乳后期组,每组6头牛。结果显示,高产奶牛瘤胃氨态氮(NH_(3)-N)、丙酸、异丁酸浓度以及干物质(DM)、粗脂肪(EE)和中性洗涤纤维(NDF)表观消化率显著高于低产奶牛(P<0.05),而瘤胃乙酸、丁酸浓度和乙酸/丙酸值显著低于低产奶牛(P<0.05)。奶牛泌乳后期瘤胃丁酸、异丁酸、异戊酸浓度和乙酸/丙酸显著高于泌乳中期(P<0.05),泌乳中期丙酸浓度显著高于泌乳前期和后期(P<0.05),泌乳前期戊酸浓度显著高于泌乳中期和后期(P<0.05)。泌乳中期DM、EE和酸性洗涤纤维(ADF)消化率显著高于泌乳后期(P<0.05)。高产奶牛乳脂率有低于低产奶牛的趋势,乳糖和乳蛋白率无显著差异(P>0.05)。研究表明,泌乳性能的提高可以改善奶牛的养分表观消化率,使瘤胃发酵模式偏向丙酸发酵;泌乳后期奶牛产奶量显著下降,但是乳脂率显著上升。     

超高效液相色谱检测乳及乳制品中柠檬酸的含量

建立超高效液相色谱方法测定乳及乳制品中柠檬酸的含量。样品经亚铁氰化钾和乙酸锌沉淀,超声提取,低温冷冻离心沉淀蛋白和脂肪,取上清液,Poroshell 120 Aq-C18(4.6 mm×100.0 mm,2.7μm)分离,以磷酸二氢铵溶液和甲醇为流动相进行梯度洗脱,运用紫外检测器进行检测,外标法定量。结果表明：标准曲线线性良好,相关系数在0.999 9以上,平均加标回收率为95.3%～104.8%,检出限为100 mg/kg,相对标准偏差为0.16%～2.41%。该方法简便、快速、分离效果好,适用于乳及乳制品中柠檬酸的定量分析。     

HPLC指纹图谱在蜂蜜种类识别中的应用研究

本文主要介绍了指纹图谱技术在蜂蜜种类识别和蜂蜜活性物质研究中的应用，并提出了我国开展蜂蜜指纹图谱研究的意义。     

桑树不同品种及取材部位中的主要芪类成分含量测定

芪类物质是桑树的次生代谢产物之一,具有多种生物活性功能。采用反相高效液相色谱-紫外检测法,测定不同桑树品种及同一品种不同取材部位的桑皮苷A、氧化白藜芦醇、白藜芦醇等主要芪类成分含量。芪类成分含量相对较高的桑树品种有中生火桑、黑鲁桑、塘10、小鸡冠桑等,4个桑树品种样品中芪类成分的质量比分别为3 228.3、3 162.7、3 049.7、2 462.4μg/g。桑树不同取材部位中,以1年生枝条中的芪类成分含量较高,新梢和桑叶中的含量较低,3个部位样品中的芪类成分质量比分别为3 879.0、813.2、501.6μg/g。检测结果可作为筛选芪类成分含量高的桑树药用材料的依据。     

湖南现行家蚕品种AFLP指纹图谱的构建

利用AFLP分子标记技术,对湖南省现行使用的6对家蚕品种（正反交）进行分析,从36对引物中筛选出带型多、分布均匀、清晰可辨且多态性高的引物5对,并构建了其DNA指纹图谱,扩增出各个品种的特异带。通过分析表明：6对家蚕品种的多态性比率达19．52％,在遗传相似系数和UPGMA聚类上的分析与在形态学上的分析相一致。利用此图谱可以对各个家蚕品种进行快速准确的鉴定,且为家蚕品种选育奠定了理论基础。     

超高效液相色谱—串联质谱法测定生鲜乳中6种农药的残留

本试验建立了生鲜乳中西草净、枯草隆、西码津、莠去津、乙草胺和丁草胺残留量的超高效液相―串联质谱检测方法。牛奶样品用乙腈提取,经固相萃取柱净化,C₁₈色谱柱分离,以0.1%（V/V）甲酸―水/乙腈为流动相,采用梯度洗脱方式进行液相色谱分离,多反应监测模式,外标法进行定量。结果发现,西草净、枯草隆、西码津、莠去津、乙草胺和丁草胺的检测限分别为0.1、1.0、0.2、0.1、4.0和4.0 μg/L,线性范围分别为1.0～50.0、10.0～500.0、1.0～50.0、1.0～50.0、20.0～1000.0和20.0～1000.0 μg/L。表明该方法专属性强、灵敏度高、分离度好,适用于生鲜乳中西草净、枯草隆、西码津、莠去津、乙草胺和丁草胺残留量的测定。     

浅谈农村规模猪场提高母猪泌乳量的措施

母乳是仔猪出生三周内的主要营养来源,是仔猪生长的物质基础,其它饲料很难代替,原因是仔猪消化器官发育不健全,消化酶分泌不足,消化机能不完善。养好泌乳母猪,分泌充足的乳汁,才能使仔猪健康生长,获得理想的断奶窝重,并保证母猪有良好体况,断奶后能及时配种受胎进入下一个繁殖周期。给养猪户带来更高的经济效益。农村规模猪场对母猪的饲养管理水平有待提高,现就母猪泌乳量的影响因素及提高措施总结如下:1影响泌乳量的因素影响母猪泌乳量的因素包括遗传和环境两大类:品种(系)、年龄(胎次)、窝带仔数、体况及哺乳期营养水平等。     

提高哺乳期母猪采食量和泌乳力的新方法

哺乳母猪是一个猪场管理的核心，它的管理水平直接影响全场生产效益的高低。首先，要考虑哺乳母猪营养需要的特点。母猪除维持机体正常代谢和增长体组织外，还要泌乳哺育仔猪。泌乳量和乳中的组成成分取决于饲料中营养成分的供给数量，而泌乳量和乳的质量又直接影响仔猪断奶体重和存活率。大量科学研究和实践表明，最大限度地提高泌乳期饲料采食量可以提高泌乳量和以后的繁殖性能。因此，多数营养学家和养猪生产者致力于开发提高母猪采食量的措施。本文将阐述饲料采食量对母猪及其繁殖性能的影响以及如何提高饲料采食量等问题。     

不同乳制品中α-乳白蛋白、β-乳球蛋白和乳铁蛋白的测定

建立高效液相色谱-串联质谱法测定牛乳和婴幼儿配方乳粉中α-乳白蛋白、β-乳球蛋白和乳铁蛋白含量的方法。样品中加入超纯水溶解,经过二硫苏糖醇和碘代乙酰胺溶液反应打开二硫键并保护巯基后,加入胰蛋白酶溶液进行酶解,反应结束后用乙腈水溶液定容,离心,移取上清液待测,外标法定量。结果表明：α-乳白蛋白、β-乳球蛋白和乳铁蛋白标准曲线在0～100 μg/mL范围内线性良好,相关系数均大于0.995;α-乳白蛋白、β-乳球蛋白和乳铁蛋白在生乳中的平均加标回收率为93.5%～117.1%,相对标准偏差为1.4%～6.7%。该方法前处理操作简便,分析速度快,灵敏度高,可用于牛乳和乳粉中α-乳白蛋白、β-乳球蛋白和乳铁蛋白含量测定。     

18个早熟禾品种SSR指纹图谱的构建

利用从草地早熟禾(Poa pratensis)基因组中开发出来的3对多态性SSR引物,对18个早熟禾品种进行分子指纹图谱鉴别研究。结果表明:3对引物在18个品种中共检测出16个多态性片段,每对引物可以检测到4至6个数目不等的片段,平均为5.33个,片段大小介于152至227bp。利用单一引物可将18个品种区分为5~11种类型,平均为8.33个类型。利用这3对SSR多态性引物指纹图谱可以将18个品种完全区分开。研究构建的指纹图谱可作为对文中18个早熟禾品种进行区分的重要参考依据,同时筛选出的对核心引物也可以用来构建其他早熟禾品种的指纹图谱。     

基于UPLC-MS/MS同时测定猪粪便中5种兽药残留量的研究

为了建立同时测定猪粪便中二甲氧苄啶、磺胺对甲氧嘧啶、恩诺沙星、金霉素、泰乐菌素5种兽药残留量的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)分析方法,样品经McIllvaineNa_2EDTA缓冲溶液提取,C18粉吸附杂质,HLB固相萃取小柱净化,浓缩富集后用0.1%甲酸甲醇溶液复溶,过滤上机,基质液外标法定量。结果显示,5种兽药在10~500μg/kg的质量浓度范围内线性良好,在添加浓度50~500μg/kg,平均回收率为53%~85%,RSD为1.87%~18.81%。该方法具有较好的准确度与精密度,能快速、准确测定猪粪便中5种兽药残留,为养殖环节实时监测兽药使用情况提供了技术支持。