右旋糖苷修饰酵母蔗糖酶条件的筛选及修饰酶性质的研究

以低分子右旋糖苷(Dextran)为修饰剂,选用L16(45)正交试验方案,研究了不同修饰条件对酵母蔗糖酶(Yeast invertase)化学修饰效果的影响以及修饰前后酶的性质变化.结果表明,pH 5.0、20 ℃、反应8 h为最佳的修饰条件.与天然酶相比,修饰酶的酶比活力、糖含量、酶活力回收率分别提高56.7%、35.05%和14.61%,蛋白含量下降22.66%,氨基修饰率为39.55%.酶学性质研究表明,修饰后酶的最适pH在4.0～5.0范围内,最适温度55～60 ℃,在pH 3.5缓冲液中稳定性上升,在pH 6.5缓冲液中稳定性下降,在60 ℃缓冲液中稳定性下降.动力学研究表明,修饰后酶的Km和vmax均上升,光谱分析表明,修饰后酶的构型构象均发生变化.     

EDTA和金属离子对多聚半乳糖醛酸酶酶活力的影响及其动力学研究

实验以EDTA和不同金属离子为效应物,果胶为反应底物,研究不同浓度的EDTA,Na+,K+,Ca2+,Cu2+,Zn2+,Mn2+,Fe2+,Fe3+,Ag+和Ba2+对多聚半乳糖醛酸酶(PG)催化活性的影响。结果表明,一定浓度的Cu2+,Zn2+,Mn2+,Fe2+和Fe3+对PG有激活作用,对PG产生最大激活作用的浓度分别为0.3mmol/L,0.4mmol/L,0.3mmol/L,0.3mmol/L和0.6mmol/L,EDTA,Ca2+,Ag+和Ba2+对PG有抑制作用,Na+和K+对PG活性没有影响。动力学研究表明,0.3mmol/LNa+和K+处理后,PG的Km和Vmax基本没有发生变化,2mmol/LEDTA和0.3mmol/LCa2+处理后,PG的Km和Vmax均下降,0.3mmol/LCu2+,Zn2+,Mn2+,Fe2+,Fe3+处理后,PG的Km和Vmax都上升,0.3mmol/LAg+和Ba2+处理后,PG的Km上升,Vmax下降。     

不同肥料对土壤蔗糖酶和过氧化氢酶活性的影响

采用L(9)(3(4))正交设计,对不同肥料和施肥水平下土壤蔗糖酶、过氧化氢酶活性进行了较系统的研究.结果表明:和对照相比,尿素、鸡粪、秸秆在本试验的I施肥水平上,使土壤蔗糖酶活性分别增加8.91%、2.02%、24.70,土壤过氧化氢酶活性分别增加8.28%、67.59%、59.31%;在Ⅱ施肥水平上使土壤蔗糖酶活性分别增加25.51%、18.83%、56.68%,使土壤过氧化氢酶活性分别增加84.14%、113.10%和166.90%;在Ⅲ施肥水平上使土壤蔗糖酶分别增加43.52%、36.84%、61.13%,土壤过氧化氢酶活性分别增加115.17%、183.45%和204.14%.3种肥料不同施肥水平对土壤蔗糖酶活性影响顺序依次是秸秆、尿素、鸡粪.对土壤过氧化氢酶活性的影响大小在第I施肥水平上依次是鸡粪、秸秆、尿素,在第Ⅱ、Ⅲ施肥水平上依次是秸秆、鸡粪、尿素.     

超声破碎酵母细胞提取蔗糖酶条件优化

采用单因素试验和L9(33)正交试验确定酿酒酵母的最佳超声破碎条件。结果表明,酿酒酵母的最佳超声破碎条件为:破碎功率350 W、总工作时间25 min、工作时间/间歇时间15 s/25 s。     

甜菜块根中蔗糖酶的若干动力学性质

根据蔗糖酶在甜菜块根中存在的形态和最适pH值,可将其分为细胞壁酸性蔗糖酶,可溶性酸性蔗糖酶,细胞壁中性蔗糖酶和可溶性中性蔗糖酶4种。前二种蔗糖酶最适pH值为5.5,后二种为7.5。4种蔗糖酶在测定条件下反应最适温度为35℃,可溶性中性蔗糖酶对温度的稳定性较差。4种蔗糖酶的km值大小依次为24.5、66.7、89.5和49.0mmol L~(-1)。V_(max)值大小依次为0.96、1.66、1.84和1.47mg还原糖mg~(-1)蛋白h~(-1)。本文还研究了抑制剂对酶活性的影响。     

磁场处理对土壤蔗糖酶和淀粉酶活性的影响

本文较为系统地研究了不同磁处理对黑土、白浆土及棕壤的蔗糖酶和淀粉酶活性的影响。研究结果表明磁处理可提高这两种酶的活性，但适宜的磁场强度随土壤类型、土壤湿度（风干土及２０％含水量的湿土）及处理时间的不同而差别较大。磁处理对土壤蔗糖酶活性的影响大于淀粉酶，但对淀粉酶活性的影响有较好的规律性。蔗糖酶磁处理效果是风干土样＞２０％湿度土样，淀粉酶磁处理效果则是２０％湿度土样＞风干土。     

蔗糖酶的固定化及其条件的优化

通过比较各种固定方法确定固定化蔗糖酶的最佳载体,并优化反应条件,确定明胶包埋法为固定化蔗糖酶的适宜载体,并结合交联法,采用戊二醛为交联剂.按此法制备的固定化蔗糖酶在较高pH及较高温度下都保持活力,且其储存稳定性及操作稳定性比游离酶都有显著的提高.

Abstract：

The methods of immobilized sucrase and the optimized conditions were studied in this paper. The results indicated that the best sorbent is the glutin with glutaraldehyde as crosslinking agent. The optimal conditions for immobilization of sucrase were: ratio of 20% glutin to sucrase 2 : 1, 2% CaCl2 solution for 1 hour, 5 % glutaraldehyde for 1 hour. The optimal pH and temperature for immobilized enzyme were 5.0 and 55 ℃. the reserve stability and reusing stability have prominent improved after immobilization.     

金属离子对蜜蜂球囊菌几丁质酶活力的影响

探讨了不同金属离子对蜜蜂球囊菌几丁质酶活力的影响.结果表明:在0-100 mmol.L-1范围内,一价金属离子Na+、K+随离子浓度的增大,对几丁质酶活力的影响表现为先促进后抑制;在1-10 mmol.L-1范围内,二价金属离子Mg2+、Mn2+起抑制作用,Zn2+基本没有影响,Ca2+、Fe2+起促进作用;在1-10 mmol.L-1范围内,三价金属离子A l3+起促进作用,Fe3+基本没有影响.     

蔗糖酶的提取工艺及性质研究

采用SDS抽提法从酵母中提取蔗糖酶,通过正交试验对SDS摩尔浓度、pH值、提取温度、提取时间进行优化,确定最佳提取工艺条件是SDS摩尔浓度为0.5mmol/L,温度40℃,提取时间10h,pH值5.5。制得的粗酶经醇沉后,采用Q-琼脂糖凝胶FF阴离子交换层析方法得到纯化的酵母蔗糖酶,纯化倍数为18.7倍,对蔗糖酶的性质也进行了研究。     

金属离子对4PCA饲料酶中木聚糖酶活性的影响

[目的]为酶制剂的稳定性研究及其在饲料工业中的应用提供依据。[方法]选取K+、Na+、Ca2+、Mg2+、Zn2+、Mn2+、Cu2+和Fe2+8种金属离子,浓度设计为1×10-4、1×10-3、1×10-2mol/L,研究金属离子对4PCA饲料复合酶中木聚糖酶活性的影响。[结果]浓度为1×10-4mol/L时,8种金属离子对木聚糖酶活性无明显影响。浓度为1×10-3mol/L时,Cu2+使木聚糖酶活增至125.8%,Mn2+使木聚糖酶活降至54.5%。浓度为1×10-2mol/L时,Zn2+使木聚糖酶活增至121.5%,Mn2+、Cu2+、Fe2+分别使木聚糖酶活降至40.6%、67.7%、88.9%。[结论]K+、Na+、Ca2+、Mg2+对木聚糖酶活性无特别影响,Zn2+有激活作用,Mn2+、Fe2+有抑制作用,Cu2+随着浓度的增加有先激活后抑制作用,3种离子的抑制作用由大到小依次为:Mn2+>Cu2+>Fe2+。     

不同复合酶制剂对麦芽中PYF因子酵母超前絮凝活力的影响

选取2种不同复合酶制剂,采用乙醇沉淀法提取出麦芽中PYF因子,通过模拟糖化条件及添加不同酶量来考察外加酶是否对PYF因子具有水解能力。结果发现,与对照组PYF活力值(F=78.79)相比,不同添加量的2种复合酶与PYF因子作用后PYF活力值没有发生显著变化(P>0.05),即PYF因子是一种结构特殊、复合酶不能水解的多糖大分子。     

北方粳稻籽粒灌浆特性及其蔗糖代谢酶的活性研究

以常规稻品种“辽粳9号”和杂交稻品种“9158”为试验材料，对其灌浆过程中强、弱势粒的灌浆速率、蔗糖和淀粉含量以及蔗糖合成酶与蔗糖酶的活性进行了分析。结果表明：2个水稻品种的强势粒由于起始生长势高，进入灌浆盛期早，蔗糖酶和蔗糖合成酶活性强，蔗糖含量高，因而灌浆明显优于弱势粒。在蔗糖代谢过程中，蔗糖合成酶的活性显著高于蔗糖酶，说明蔗糖由源向库的输入主要由蔗糖合成酶来调控。     

四种金属离子对地图幼鱼淀粉酶活性的影响

以酶学分析的方法研究了4种金属离子Na＋、K＋、Ca2＋、Mg2＋分别在单因子和双因子条件下对地图幼鱼淀粉酶活性的影响。结果表明：在设定的浓度梯度内,单因子条件下,除Ca2＋对淀粉酶活性起强烈的抑制作用外,其余3种离子对淀粉酶活性均起促进作用,其中Mg2＋的促进作用最强。双因子条件下,Na＋和K＋互作对淀粉酶的激活作用高于2者单独作用,Na＋和Mg2＋在一定浓度下互作对淀粉酶的激活作用高于2者单独作用,而K＋和Mg2＋互作则会抑制Mg2＋的激活作用。     

共存离子对固定化改性酿酒废酵母吸附 Pb 2＋动力学及等温吸附影响研究

通过静态吸附试验,以固定化改性酿酒废酵母作为吸附剂,研究了 Cu2＋、Ni2＋及 Cu2＋和 Ni2＋共存时对其吸附 Pb2＋动力学以及等温吸附的影响.结果表明,Cu2＋和 Ni2＋的存在降低了固定化改性酿酒废酵母对 Pb2＋的吸附量,与 Pb2＋形成竞争吸附.用准二级动力学方程和 Langmuir 方程对 Pb2＋吸附过程进行了拟合,发现在本试验条件下可以用准二级动力学方程(R 2为0．9901~0．9969)和 Langmuir 方程(R 2为0．9831~0．9869)对酿酒废酵母竞争吸附 Pb2＋的动力学及吸附平衡进行描述.     

不同浓度金属离子对酸性蛋白酶活性的影响

[目的]探寻不同浓度金属离子对黑根霉产酸性蛋白酶活性的影响,为酸性蛋白酶的应用提供理论依据。[方法]以黑根霉作为研究菌株,研究了Cu2＋,Mn2＋,K＋,Ca2＋,Li＋,Zn2＋,Fe2＋和Na＋对酸性蛋白酶活性的影响。[结果]Cu2＋,Mn2＋,K＋,Ca2＋和Na＋5种离子在一定浓度范围内对酸性蛋白酶活性起激活作用;Li＋,Zn2＋和Fe2＋3种离子对酸性蛋白酶活性起抑制作用。[结论]不同浓度金属离子对酸性蛋白酶活性影响不同,可优先选择激活作用强的金属离子来促进酸性蛋白酶活性。     

不同氮源和金属离子对玉米秸秆发酵产沼气的影响

[目的]用自行设计的厌氧发酵装置,以玉米秸秆粉末作为发酵物料,探究在中温条件下添加不同氮源和金属离子对沼气产生过程及产生量的影响.[方法]用排水集气法收集产生的气体量,用点燃法来测定沼气产量.[结果]碳酸氢铵、尿素和酵母浸粉对沼气产量均有提升作用,其中碳酸氢铵为最佳氮源,磷酸二氢铵对沼气产生有抑制作用;物料中添加NaCl、KCl、MgCl2和CaCl2后,对提高沼气产量效果明显,其中,以添加NaCl效果最好.[结论]单纯以玉米秸秆作为发酵物料来生产沼气不利于产甲烷菌群的生长发育,通过添加外源氮源来降低物料组成的碳氮比可以提高沼气产量;在保持适宜的碳氮比条件下,添加适宜适量的电解质可以显著提高沼气产量;产甲烷菌群对NaCl和KCl有较高的耐受性,NaCl不仅可以显著提高沼气产量,而且可缩短产甲烷菌群的产气启动时间,从而缩短产气周期.     

水分胁迫对燕麦各生育时期保护酶活性的影响

[目的]研究燕麦各生育期保护酶活性生理指标,确定各生育时期的最佳供水量。[方法]采用称重法。[结果]随着胁迫强度的增加,超氧化物歧化酶、过氧化物酶活性先增加后降低,脯氨酸积累、丙二醛含量明显增加。[结论]60%供水量是作物生长所需水分的下限;75%供水量是最适宜的水分,经济效益最好。     

不同栽培环境对甘草生长量和保护酶活性的影响

[目的]研究甘草在北京地区不同栽培环境下的生长特点及品种间的差异性。[方法]以乌拉尔甘草和胀果甘草为试验材料,测定在自然陆地和温室2种栽培环境下甘草的生长量和抗氧化酶活性。[结果]自然栽培下甘草的抗氧化酶活性高于温室栽培下,乌拉尔甘草在自然栽培模式下所表现出来的生长优势及较高的自然抗性有利于今后的生产研究。[结论]该研究为北京地区甘草品种的选择和生产提供理论支持。