金桂芳樟醇合成酶基因的克隆与序列分析

以金桂的花器官为试材,设计芳樟醇合成酶基因简并引物,通过逆转录PCR、快速扩增cDNA末端技术和Blastn分析等,获得金桂芳樟醇合成酶基因的全长cDNA序列,命名为OfLis(Osmanthus frangrans vat.thunbergii linaiool synthase,GenBank登录号FJ645727).OfLis,基因全长cDNA长度为2 003 bp,包含1个1 731 bp的开放阅读框,编码576个氨基酸.序列分析表明:OFLis具有单萜烯类合成酶基因典型的保守结构域,即DDXXD和(N,D)D(L,I,V)X(S,T)XXXE;具有多数单萜烯类合成酶活性必需的RR(X)8W功能基团.OfLis推导氨基酸序列的预测分子质量和等电点分别为67.29 ku和5.26;疏水性分析结果表明其大部分氨基酸区域为亲水结构.氨基酸水平上,OfLis与薰衣草芳樟醇合成酶基因的相似性最高,为63.6%,与山字草芳樟醇合成酶基因的相似性最低,为19.0%.逆转录PCR结果表明:整个花期内OfLis基因在花瓣、雌蕊和雄蕊中均有表达,而在萼片和叶片中不表达.研究结果为香味植物的育种、品种改良及香味成分的调控提供理论基础.     

杨树木质素合成酶hct基因的克隆及核苷酸序列分析

根据毛果杨全序列（AC185363.2）中唯一具有转移酶功能的保守区设计引物,以正在分化的2年生欧美杨107次生木质部总RNA为模板经RT-PCR扩增出hct基因片段,与pMD20-T载体连接,重组质粒经特异引物扩增、限制性内切酶酶切和测序鉴定。结果表明,扩增片段长度为709bp,包含一个708bp的开放阅读框,与毛果杨全序列及HCT2（EU603314）的同源性均为98%,编码的氨基酸序列与毛果杨HCT2氨基酸（ACC63883.1）的同源性为98%,断定我们克隆的cDNA为hct,属于转移酶超家族,GenBank登录号为FM202091,该重组质粒命名为pMD20-T-hct。     

宁夏枸杞主要经济性状的分析

为了准确评定各品种的经济价值，笔者对10多个宁夏枸杞品种的经济性状进行了调查，并对调查要进行了分析，分析结果是：宁夏枸杞品种中，以大麻叶枸杞，宁杞1号，宁杞2号，和白条枸杞的各项性状表现最好，可作为好品种大力推广；大黄果枸杞和72007表现尚较好，可适当加以发展；小麻叶枸杞表现一般，可考虑在其适宜地段发展，72001，园果枸杞和72004表现欠佳，应该考虑及时淘汰换种。     

杉木木质素合成酶基因CCR的克隆和序列分析

以杉木(Cunninghamia lanceolata)茎叶为材料,根据已报道的肉桂酰辅酶A还原酶(Cinnamoyl-CoA reductase,CCR)基因保守区设计简并引物,采用RT-PCR结合RACE的策略克隆获得杉木CCR基因的全长cDNA(命名为CLCCR),该基因cDNA序列全长1 379 bp,具有一个975 bp的开放阅读框(Open Reading Frame,简称ORF),编码324个氨基酸,序列分析表明:杉木CCR基因核苷酸序列与已报道的欧洲云杉(Picea abies,CAK18610.1)CCR基因具有87%的相似性;与其他植物氨基酸序列聚类分析显示杉木与松科植物欧洲云杉、马尾松(Pinus massoniana)、火炬松(P.taeda)的亲缘关系较近。     

张掖引种宁夏枸杞的结果分析

宁夏中宁枸杞通过在本地多年的定植栽培,形成一大富民强县的支柱产业,盛名远扬。由于中宁枸杞抗干旱、耐瘠薄、抗盐碱能力强、生长温度范围广,因此成为盐碱地改良、绿化的先行生态型树种,     

杉木CCoAOMT基因部分cDNA克隆与序列分析

利用CODEHOP设汁CCoAOMT基因的简并引物,通过RT-PCR的方法,从杉木茎段中克隆到1个长度为614 bp的PCR产物,产物经pMD18-T载体克隆转化至DH5α大肠杆菌中,序列通过同源性比对后显示该片段与其它植物的CCoAOMT基因具有较高的同源性.利用生物信息学方法分析发现,该序列在112～651 bp片段上有一个开放性阅读框,该序列编码的是一个酸性蛋白,亲水性较弱.疏水性较强;信号肽序列为第23位至第45位,二级结构以α-螺旋(40.62%)与不规则盘绕(45.31%)为主,没有发现β转角区域.     

马尾松纤维素合成酶基因PmCesA2的克隆及其植物表达载体的构建

为了探究马尾松木材形成的分子机制,以马尾松嫩枝的总RNA反转录得到的cDNA为模板,利用反转录PCR和RACE技术克隆得到马尾松CesA2基因的全长cDNA序列(命名为PmCesA2),序列长度为3 500 bp,包含一个长为3 174 bp的开放阅读框(open reading frame,ORF),编码1 057个氨基酸.序列分析表明:PmCesA2序列与已报道的火炬松CesA2基因(AY789651.1)的相似性达98％.将全长基因克隆到载体pBI121质粒的SnaBI,Sacl双酶切位点之间,构建正义表达栽体pBI121-PmCesA2.     

柳树SjMIPS基因的克隆及其表达分析

肌醇磷酸合成酶(MIPS)以葡萄糖-6-磷酸为合成前体,是肌醇合成过程中关键酶。MIPS生成的肌醇在耐盐植物的耐盐机制中起到渗透压调节物的作用。该研究从柳树(Salix Jiangsuensis 2345)叶片中成功克隆出MIPS基因,命名为SjMIPS。对扩增的基因进行生物信息学分析显示柳树SjMIPS基因包含1 533 bp的开放阅读框,编码1个511个氨基酸的蛋白质。蛋白质结构域分析显示SjMIPS基因含有4个保守的结构域,结构域1(GWGGNNG),结构域2(LWTANTERY),结构域3(NGSPQNTFVPG)和结构域4(SYNHLGNNDG),属于典型的MIPS基因。系统进化树分析表明柳树SjMIPS基因与杨树Pt MIPS基因亲缘关系较近。实时荧光定量PCR结果显示柳树SjMIPS基因在171 m M Na Cl盐胁迫处理24—48 h后上调,表明柳树MIPS基因是盐胁迫诱导型基因。该研究表明柳树SjMIPS基因为盐胁迫应答基因,在参与肌醇的生物合成、调节渗透压方面起着重要作用。     

基于照相技术的枸杞地上生物量模型研究

以内蒙古托克托县枸杞灌木作为研究对象,利用照相技术和图像处理软件获取各植株侧面宽度D、植株高度H、侧面照相面积S等参数,建立起基于这些参数或参数组合的枸杞地上生物量拟合方程。经过检验,以植株侧面照相面积S为自变量的幂函数回归模型可用来估算枸杞地上生物量。侧面照相面积S与植株的生长状况密切相关,通过照相技术和图像处理软件获取S等参数相对简便、准确,在实际操作中能提高工作效率。     

枸杞容器硬枝扦插基质筛选研究

为了缩短枸杞育苗周期,加快繁殖速度,寻找适宜的扦插基质,通过设5种基质配比S1(细绵沙1∶森林土5∶黄绵土1)、S2(细绵沙1∶森林土4∶黄绵土2)、S3(细绵沙1∶森林土3∶黄绵土3)、S4(细绵沙3.5∶森林土0∶黄绵土3.5)、S5(细绵沙0∶森林土0∶黄绵土7)试验,观测统计扦插苗的生根时间、萌芽率、成活率、新梢生长量及苗干基径等成活及生长指标,比较分析5种基质配比对枸杞硬枝扦插成活及生长的影响,结果表明:温棚条件下,枸杞硬枝扦插适宜的扦插基质为S1(细绵沙1∶森林土5∶黄绵土1)的无菌营养土。     

枸杞温棚容器育苗技术

在河西走廊枸杞造林多采用春季造林,但由于春季易受干旱缺水等自然因素的影响,造林难度较大,因此采用枸杞插穗电热温床催根和日光温室营养袋容器育苗,能够有效延长造林时间,提高造林成活率.     

宁夏枸杞春季霜冻指标研究

为给枸杞春季霜冻预报和预警提供参考,以3年生盆栽宁夏枸杞‘宁杞1号’为研究对象,于2016、2017、2018年在MSX-2F型霜冻箱内进行人工模拟霜冻试验,处理温度为-3、-4、-5、-6、-7、-8℃,处理时间为1、2、3h,研究不同温度和持续时间处理下宁夏枸杞花蕾期、初花期、盛花期的霜冻率,最终确定宁夏枸杞的霜冻等级。结果表明:根据霜冻率,将霜冻程度划分为3个等级,轻度为霜冻率低于40%,中度为霜冻率40%~80%,重度为霜冻率高于80%;不同低温和持续时间对宁夏枸杞花蕾期、初花期、盛花期的影响程度不同,温度越低、持续时间越长,宁夏枸杞的霜冻率越大;同一温度和持续时间处理下,花蕾期的耐霜冻性最强,初花期的次之,盛花期的最弱。     

大气CO_2浓度倍增对宁夏枸杞生长的影响

以大气CO_2浓度和温度升高为主要特征的全球气候变化对农业生态系统、森林生态系统产生显著的影响。自20世纪90年代以来,气候变化,特别是大气CO_2浓度升高对植物的生理影响及植物的响应已成为一个重要的生理生态学研究热点问题(张晶晶等,2006;邓可洪等,2006;贾夏等,2005;     

宁杞一号全光照喷雾嫩枝扦插试验

应用正交试验方法,对宁杞一号进行了全光照喷雾嫩枝扦插试验.结果表明,影响生根率大小因素的排序为:激素种类＞激素浓度＞处理时间,以GA处理生根率最高;对生根数量影响大小排序为:激素浓度＞处理时间＞激素种类,其中以激素浓度为500mg/kg效果最好,处理时间对生根数量也有显著影响,以0.5 h处理效果最好.处理浓度为500...     

CO_2浓度倍增对宁夏枸杞叶绿素荧光参数的影响

为了了解气候变化对枸杞光合作用的影响,以宁夏枸杞苗木为试验材料,采用开顶式气室模拟控制CO2浓度,设置倍增CO2浓度(720±20μmol/mol)和自然环境大气CO2浓度(360±20μmol/mol,对照)处理,测定2种处理下枸杞叶片叶绿素荧光参数,分析其变化。结果表明:CO2浓度倍增处理对宁夏枸杞叶片的初始荧光(F0)无显著影响,而最大荧光(Fm)、PSII的潜在光化学活性(Fv/F0)、PSII的最大光化学效率(Fv/Fm)、表观光合电子传递速率(RET)、PSⅡ实际光化学量子产量(ΦPSII)均显著增加,说明CO2浓度倍增可以提高枸杞叶片的光能转化效率以及光能利用率,增强其光合能力。     

枸杞不同成熟期鲜果营养成分与土壤肥力因子间的关系

为给枸杞整个生长期的合理施肥提供参考依据,以新疆博州精河县不同试验地点、同一品种‘精杞1号’不同成熟期果实(夏果、秋果)为试材,对其各营养成分含量及同期土壤中有机质及N、P、K等肥力因子含量进行了测定,并对不同成熟期鲜果各营养成分含量的差异性与同期土壤各肥力因子间的相关性进行了分析。结果表明:各试点夏、秋同期枸杞鲜果中,除各试验点秋果水分和脂肪含量差异不明显外,其他各营养成分含量间均存在不同水平显著性差异,各试验点枸杞夏果中,除VC、总酸和水分含量高于秋果外,其余各营养成分含量多低于秋果;各试验地土壤中的有机质、速效氮、速效磷和速效钾含量与枸杞夏、秋鲜果中各营养成分含量不同程度地存在着正、负相关性,说明这几个肥力因子是影响枸杞果实品质的关键肥力因子,生产管理中应注意适时合理地施肥。     

模拟CO2浓度升高对宁夏枸杞营养生长与果实品质的影响

【目的】研究宁夏枸杞对大气CO2浓度升高的生理生态响应机制,为探究枸杞及其他木本经济林植物在气候变化背景下优质高效栽培与育种提供理论依据。【方法】以‘宁杞1号’扦插苗为材料,采用开顶气室(open-top chamber,OTC)及自动监控系统模拟控制CO2浓度,测定宁夏枸杞在升高CO2浓度环境下植株营养生长指标与果实糖分含量、主要活性物质含量和蔗糖代谢相关酶活性的变化。【结果】 1) CO2浓度升高,促进宁夏枸杞植株生长发育,苗高增长量较对照分别高11.67%和18.65%,地径分别高55.09%和62.58%,新梢加长和加粗生长均呈增加趋势。2) 2种CO2浓度升高处理下,宁夏枸杞果实横径较对照分别增加4.56%和7.71%,单果质量分别增加15.05%和34.53%,果实更加饱满。3) CO2浓度升高处理下,夏果(处理90天左右)果实中果糖含量较对照略高,秋果(处理120天后)含量比对照分别低1.39%和3.98%。试验处理期间,果实中葡萄糖和总糖含量均低于对照,且CO2浓度升高1倍[(760±20)μmol·mol^-1 ]处理下降最为明显。夏果果实蔗糖含量均低于对照,秋果在CO2浓度升高1倍[(760±20)μmol·mol^-1 ]下较对照略高。4)果实中枸杞多糖含量低于对照,黄酮含量在秋果期比对照分别低16.62%和18.35%,且CO2浓度升高1倍[(760±20)μmol·mol^-1 ]处理对果实活性物质含量影响较大。5) CO2浓度升高增加了酸性转化酶和中性转化酶活性;夏果蔗糖磷酸合成酶较对照明显增加,但秋果酶活性低于对照;蔗糖合成酶分解方向与合成方向酶活性变化趋势相同,夏果均高于对照,秋果酶活性低于对照,CO2浓度升高1倍[(760±20)μmol·mol^-1 ]处理下差异极显著。【结论】长期高CO2浓度处理促进宁夏枸杞植株营养生长,果实单果质量与纵横径增大,有利于改善果实外观品质;但果实中糖分含量和枸杞多糖、黄酮等生物活性物质的含量明显降低,相关酶活性发生变化,影响果实营养品质。     

固相萃取-液相色谱串联质谱测定枸杞中有机磷农药残留

采用固相萃取-液相色谱串联质谱仪,建立枸杞中9种有机磷农药的快速测定方法。样品经乙腈提取,过Carbon/NH2固相萃取柱净化,氮吹至干,残留物用乙腈-水（3：2,V/V）溶解后测定,采用正离子扫描方式进行仪器方法学研究,确定监测离子对,进行SRM模式定性定量分析。该方法的检出限（LOD）为0.12～9.8μg/L;在10～200μg/L范围内线性关系良好（r〉0.9961）。在20～100μg/L的添加水平上,9种有机磷农药的平均回收率在80.7%～122.4%之间,相对标准偏差（RSD）为2.75%～14.7%。该方法操作简单,灵敏度高,可用于枸杞中9种有机磷农残的测定。