凝结芽孢杆菌药敏实验的研究

从我国农业农村部公告《饲料药物添加剂使用规范》中选取16种添加剂药物,根据他们在饲料中的实际添加量范围,配制了"低剂量、中剂量、高剂量"3个抑菌浓度,创新采用牛津杯法对一株凝结芽孢杆菌(菌株编号:YNAU 3127)进行药敏实验,药敏性判定标准依据抑菌圈直径(diameter of inhibition zone, DIZ)执行如下:"不敏感",DIZ=0 mm;"中敏感",0 mmDIZ≤16 mm;"敏感",DIZ16 mm。结果显示:该株凝结芽孢杆菌对金霉素、土霉素、甲基盐霉素和莫能菌素,判定为"敏感"水平。该菌对高剂量的盐霉素判定为"敏感",而对低、中剂量的盐霉素只达到"中敏感"水平。此外,该株凝结芽孢杆菌对实验中的其他药物"不敏感"。研究表明:实验创新采用的牛津杯法,能够科学、准确、便捷地评估凝结芽孢杆菌的药敏性,完善了凝结芽孢杆菌在畜禽无抗养殖领域的关键应用技术。     

鸡肌肉组织中盐霉素残留的微生物法检测研究

建立了鸡肌肉组织中盐霉素残留的微生物检测方法。采用枯草芽孢杆菌作为工作菌摸索条件,制备标准曲线,测定最低检测限以及回收率。结果表明:在磷酸盐缓冲液中制备五组工作曲线,其变异系数为5.1%,相关系数为0.9923,最低检测限为0.25μg/ml;在肌肉组织中制备五组工作曲线,其变异系数为6.0%,说明本方法重现性较好,相关系数为0.9981,说明本实验有良好的线形关系,最低检测限为0.4μg/g,低于国标规定的肌肉组织中盐霉素的最高残留限量0.6μg/g;方法平均回收率为75.9%。研究表明采用枯草芽孢杆菌检测肌肉组织中盐霉素残留,其灵敏度高、可靠、快速、简便、易推广。     

莫能菌素微生物检测法的比较研究

用微生物法测定莫能菌素并筛选出合适的工作菌,分别选用短小芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌作为工作菌摸索条件、制备标准曲线、测定最低检测限。结果表明,采用枯草芽孢杆菌的最低检测限为1μg/ml,较短小芽孢杆菌的1.25μg/ml要低;枯草芽孢杆菌标准曲线的相关系数为0.9983,较短小芽孢杆菌的0.994要高,说明实验有良好的线形关系;五组工作曲线的变异系数分别为5.1%和1.7%,说明本方法重现性较好。因此,应提倡采用枯草芽孢来检测莫能菌素。     

生牛乳中芽孢杆菌的分离鉴定及其耐热性

生牛乳杀菌后残留少数芽孢具有极强耐受性,在一定条件下芽孢大量繁殖,使牛乳发生变质,严重影响产品品质和消费者健康。采集并选择含有芽孢杆菌的生牛乳样品,进行需氧芽孢杆菌和嗜热需氧芽孢杆菌的分离,通过形态学、生理生化和分子生物学方法对分离菌株进行鉴定,同时对分离到的嗜热需氧芽孢杆菌进行耐热性研究。结果表明：共分离出10?株芽孢杆菌,其中3?株为嗜热需氧芽孢杆菌,7?株为需氧芽孢杆菌,其中能耐受115?℃/15?min热处理的有凝结芽孢杆菌和克劳氏芽孢杆菌,121?℃/20?min热处理可以将生牛乳中芽孢杆菌全部杀灭,致死率达100%,芽孢数下降4?个数量级;生牛乳中芽孢杆菌的优势菌有枯草芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、环状芽孢杆菌、明胶芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌和克劳氏芽孢杆菌;耐热性较强的有凝结芽孢杆菌和克劳氏芽孢杆菌,最高能耐受115?℃/15?min热处理。     

混合菌固态发酵制备发酵鱼粉的研究

试验旨在研究不同发酵条件对发酵鱼粉小肽含量和挥发性盐基氮的影响,确定发酵鱼粉生产工艺条件。以嗜酸乳杆菌和枯草芽孢杆菌为发酵菌株,以发酵产物小肽含量和挥发性盐基氮含量为指标,优化了混合菌固态发酵制备发酵鱼粉的生产工艺条件,并对发酵鱼粉的总抗氧化能力和氨基酸组成进行了分析。试验结果表明,适宜的发酵鱼粉生产工艺条件为:菌种接种比(嗜酸乳杆菌枯草芽孢杆菌)12、料水比11、接种量5%、发酵温度35℃、发酵时间24 h。此条件下,发酵鱼粉小肽含量达到24.77%,挥发性盐基氮仅为42.5 mg/100 g,总抗氧化能力提升70%以上,限制性氨基酸的含量提升27.75%以上,发酵鱼粉较传统的普通鱼粉有巨大的优势,应用于饲料中具有广阔的市场前景。     

复合芽孢杆菌对桑叶发酵品质的影响

现有的饲料添加剂目录中,枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌均被允许用于养殖动物。因此,本研究选择实验室收藏的枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌按不同比例制成复合菌液协同发酵桑叶饲料,并检测发酵第7天、第28天和56天的桑叶品质。桑叶青贮发酵后,发现枯草芽孢杆菌/地衣芽孢杆菌都具有降解纤维、分解脂肪,提高粗蛋白含量的能力,其中,H2组的粗纤维含量在发酵第56天较对照组下降了12.69%,只占(12.217±0.039)%,说明地衣芽孢杆菌分解纤维的能力可能相对较强,H3组的粗脂肪含量在发酵第56天较对照组下降了20.99%,只占(5.884±0.003)%,说明枯草芽孢杆菌分解脂肪的能力可能相对较强,不同比例的复合芽孢杆菌H1、H2和H3组的粗蛋白含量在发酵第56天分别增加8.96%、7.24%和3.72%,说明两种芽孢杆菌均具有提高青贮桑叶蛋白质含量的能力,能够提高饲料营养品质的效果。     

3株芽孢杆菌对不同饲料组合的消化对比研究

选择3株益生芽孢杆菌,研究其对于玉米-菜粕、玉米-豆粕、玉米-麸皮和玉米-棉粕4种饲料组合的消化效果。研究发现,3株芽孢杆菌对饲料纤维素的降解均不明显,但对半纤维素消化降解明显,半纤维素降解最高可达到23.5%;芽孢杆菌作用后还原糖含量增加显著,处理后还原糖含量最高可达28.2 mg/g;芽孢杆菌对饲料蛋白质分解亦有明显效果。试验结果表明:芽孢杆菌可以促进饲料的消化,芽孢杆菌对饲料的消化效果与饲料组合有关,也与菌株本身有关。     

产有机酸芽孢杆菌的筛选、鉴定及产芽孢条件优化

试验旨在筛选一株高产有机酸的芽孢杆菌,并对其芽孢形成条件进行优化。从实验室保藏的200株芽孢菌株中筛选能够使溴甲酚紫平板变黄的菌株。利用液相色谱对筛选所得的菌株发酵液中有机酸的种类、含量进行测定。根据目的菌株的形态特征和生理生化试验以及16S r DNA序列分析结果对菌株进行种属鉴定。利用单因素试验和正交试验结合的方法,考察不同的碳源、氮源、无机盐、p H值、培养时间、接种量对菌株芽孢形成的影响。结果表明,菌株R42-16发酵液中乙酸、乳酸的含量较高,分别为221、174μg/ml。经鉴定菌株R42-16为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amy-loliquefaciens)。本试验条件下,菌株R42-16的最佳培养基组成为:玉米粉1%、酵母浸粉2%、Mn SO4·H2O 0.01%、Ca Cl2·H2O 0.01%,培养基最佳初始条件为:发酵时间48 h、接种量4 ml、p H值6、装液量50 ml/250 ml。在此优化条件下,发酵液中菌株R42-16的活菌数达到3.19×109cfu/ml,芽孢形成率达到93.76%。     

微生物制剂对奥尼罗非鱼生长及饲料表观消化率的影响

选用192尾初始体重34.50 g左右的健康奥尼罗非鱼,在基础饲料中分别添加相同剂量(活菌含量为3.0×1011 cfu/kg 饲料)的汉逊德巴利酵母、枯草芽孢杆菌和凝结芽孢杆菌,研究其对奥尼罗非鱼生长和营养物质表现消化率的影响.试验期为56 d.试验结果表明:枯革芽孢杆菌和凝结芽孢杆菌,可使臭尼罗非鱼的增重率分别提高12.27%和8.56%(P<0.05),饵料系数分别降低10.92%和8.18%(P<0.05);饲料干物质表现消化率分别提高10.54%和10.07%(P<0.05).蛋白质表现消化率分别提高4.18%和3.63%(P<0.05);汉逊德巴利酵母对生长性能和饲料表现消化率无影响.结果显示,饲料中添加剂量为3.0×1011 cfu/kg饲料的枯草芽孢杆菌和凝结芽孢杆菌能显著促进奥尼罗非鱼的生长和其对饲料营养物质的利用.     

一株产赖氨酸芽孢杆菌的筛选

87株芽孢杆菌经过2次菌液上清液赖氨酸含量测定,筛选出1株赖氨酸产量较高的菌株YB83,其在LB上清发酵液中赖氨酸含量达186.85μg/mL,比对照组提高27.68%,该菌通过菌落形态、生理生化特征和分子生物学鉴定为枯草芽孢杆菌。