三种保存昆虫病原线虫共生菌的简易方法

在室温下，用１％ＮａＣｌ溶液、蒸馏水和液体石蜡保存４种２８株昆虫病原线虫的共生菌。结果，所有３种方法都能保持共生菌初生型活力达２年以上。在１０℃、２３℃恒温下，用１％ＮａＣｌ溶液保存的共生菌，保存期亦超过２年。在４℃下，用１％ＮａＣｌ溶液保存的共生菌半数以上可达６个月，而用蒸馏水和液体石蜡保存的共生菌大部分在６个月内即死亡。     

一种昆虫病原线虫共生菌的分离鉴定及致病性研究

从广东省阳江县的土壤中,分离到一种病原斯氏线虫(Steinernema sp.8503),从线虫3龄幼虫体,又分离出8503菌株。此菌为共生菌,革兰氏阴性、非孢子型杆菌,2.0～12.0×0.6～1.3微米,鞭毛为周毛,硝酸盐不产生亚硝酸盐,过氧化氢酶阴性,脲素酶阴性,磷酸脂酶阴性,卵磷酯酶阳性,七叶苷水解阳性,不具荧光,对昆虫有致病性,从一系列的生化特性和线虫的带菌率、细菌囊和细菌的形状、分布等检查,此菌为大肠杆菌科的Xenorhabdus nemalophilus。对促进线虫在人工培养基的繁殖,提高线虫的产量和毒力均有一定的价值。     

昆虫病原线虫的生物反应器培养

本文在摇瓶培养的基础上,应用气升内环流反应器、鼓泡式反应器和机械搅拌通气反应器进行昆虫病原斯氏线虫Ａ２４品系的液体培养研究。结果显示,气升内环流反应器最适合于线虫的培养,不仅产量高而且线虫侵染率亦高。同时在气升式反应器中研究了通气强度对线虫培养的影响,得出最佳培养条件,即前期通气量１．０ｖｖｍ,中期通气量０．８ｖｖｍ,后期通气量１．５ｖｖｍ。     

昆虫病原线虫固体培养系统中主要培养参数的优化

本文根据系统分析方法，利用正交旋转组合设计于固体培养系统中测定培养基的样量、细菌培养时间、接线虫量和线虫培养时间对Ｓｔｅｉｎｅｒｎｅｍａｃａｒｐｏｃａｐｓａｅ 和Ｈｅｔｅｒｏｒｈａｂｄｉｔｉｓｂａｃｔｅｉｐｈｏｒａ产量的综合影响，确定虫的优化培养参数。     

昆虫病原线虫共生菌菌种外面保存技术的改进

用4种斯氏线虫的12个品系和1种异小杆线虫的2个品系的共生菌,在10℃中营养琼酯斜面上作保种历期测定,其活力和抑菌作用在6个月内可以不变。为此,昆虫病原线虫的共生菌可以由原有保种方法改进为10℃、营养琼脂斜面,每半年转管一次。     

几种培养条件对昆虫病原线虫产量和带菌率的影响

近年来,应用昆虫病原斯氏线虫Steinernema spp。防治害虫的工作己取得了一些令人鼓舞的进展(Poinar,1983;Miller,1984)。Bedding(1976,1981)将共生菌接到带有营养物质的海绵碎作为人工培养基,大量繁殖昆虫病原线虫获得成功,大大推进了病原线虫的大面积应用。但人工大量繁殖病原线虫的最优培养条件方面,国内外报导尚少。鉴此,我们在原有工作(徐洁莲等,1989)的基础上,进一步探讨斯氏线虫增殖     

三株昆虫病原线虫共生菌胞外产物的抑菌活性

采用生长速率法、孢子萌发法、活体组织法和盆栽试验对3株昆虫病原线虫共生菌胞外产物甲醇提取物的抑菌活性进行了系统研究.结果表明,3个菌株甲醇提取物对番茄灰霉病菌、辣椒疫霉病菌、油菜菌核病菌的菌丝生长,对番茄灰霉病菌、玉米大斑病菌、稻瘟病菌、白菜黑斑病菌、杨树溃疡病菌、小麦根腐病菌的孢子萌发均有很强抑制作用.其中嗜线虫致病杆菌YL001菌株对辣椒疫霉病菌菌丝生长的抑制作用最强,EC50为35.11mg/L;伯氏致病杆菌YL002菌株对番茄灰霉病菌菌丝生长的抑制作用最强,EC50为 42.16mg/L;嗜线虫致病杆菌TB菌株对油菜菌核病菌菌丝生长的抑制作用最强,EC50为18.95mg/L.3个菌株甲醇提取物对玉米大斑病菌孢子萌发都有很强的抑制作用,EC50分别为28.03、36.77和26.40mg/L.3个菌株甲醇提取物在1000mg/L浓度下,对离体番茄果实灰霉病的治疗和保护效果均在70%以上;对盆栽番茄灰霉病和辣椒疫霉病的治疗和保护效果均在65%以上.     

一种新的昆虫病原线虫固体培养基及其参数优化研究

以昆虫病原线虫Steinernema carpocapsae HB310为试虫,针对已有的2种线虫固体培养基配方进行改良,得到一种更为经济、高效的线虫固体培养基配方。结果表明,该配方在培养S.carpocapsae HB310第8天时线虫产量达到高峰(侵染期幼虫4.00×10~4条/g),扩繁的线虫对5龄大蜡螟致病力高于已有的固体培养基配方。针对该固体培养基的培养参数进行优化筛选,得出最佳培养条件参数为共生菌接菌量为2.26×10~7 cfu/瓶,接线虫量为侵染期幼虫1×10~3条/g,培养周期为12 d。     

昆虫病原线虫和共生细菌培养系统中噬菌体的检测

本文利用紫外照射、温度、pH、盐度诱导五株溶源性共生菌株Xenorhabdus和Photorhabdus同时测定斯氏和异小杆属线虫Steinernema carpocapsae A24,S.carpacapsae ALL,S.feltiae English,S.feltiae SN,Heterorhabditis bacterophora H06在体外培养过程中是否存在感染共生细菌的噬菌体。结果未发现噬菌斑，说明实验菌株在实验诱导条件下以及昆虫病原线虫固体培养系统中不可能诱发噬菌体的危害。     

我国昆虫病原线虫的田间试验研究进展

作为害虫的自然天敌,昆虫病原线虫的寄生特性引起了人们的重视,认为是生物防治中的一支新的力量。自从八十年代引进国外大量繁殖技术以来,我国有关研究得到很大的发展,已有不少单位进行了田间应用试验,初步打开了应用研究的局面.主要情况是:1.利用线虫在土壤中比较活跃的特性,大量开展防治某个虫态生活在土中的害虫的试验,取得了防治桃小食心虫大面积试验的良好效果。桃小食心虫在我国主要为害苹果,造成重大经济损失.该虫产卵在果实表面,卵孵后幼虫钻入果心取食,幼虫老熟时随烂果落地入土化蛹。1981～1983广东省昆虫研究所和中国农科院郑州果树所根据该虫在果园土壤中化蛹、虫源地比较集中和昆虫病原线虫     

昆虫病原线虫的应用近况

昆虫病原线虫(Entomopathogenic nematodes)是害虫的天敌,是害虫生物防治中的一个重要因子。它的研究应用从30年代发现距今已有50多年的历史,其中携带共生细菌的斯氏线虫属Steinernema Travassos和异小杆线虫属Heterorhabditis Poinar是在害虫生物防治中最有潜力的类群。各国科学家已发表了不少线虫的生物学、生态学、大量繁殖方法和防治效果的研究报告。利用昆虫病原线虫防治害虫有以下优点:①线虫的寄主范围广,可以利用线虫防治多种害虫;②可以人工培养基大量繁殖线虫;③线虫可以主动地寻找寄主,对土栖和隐蔽的钻蛀害虫效果高;④线虫体内带有共生细菌,具高的杀虫能力,能在16至48小时内杀死寄主昆虫;⑤线虫对环境安全,有一定的抵抗力,可与一些杀虫剂混用。本文拟就日前线虫的生产、应用,影响线虫效用的因素和线虫应用的前景浅淡。     

昆虫病原线虫侵染鳞翅目幼虫的血淋巴病理学

菜青虫经口感染斯氏线虫后,２０小时左右在其血淋巴中出现杆状的共生细菌,并开始大量增殖,４８小时的细菌数已达出现初期的１万倍以上。用３种不同品系线虫 结果显示：经分别感染不同线虫的大蜡螟幼虫,其血细胞数总的增减变化趋势是一致的,在感染初期血细胞数较健康虫体明显降低,４￣６小时达最低值;随后逐渐增加,１２小时后血细胞数达到高峰;随后不迅速下降。感染线虫的家蚕１２小时后其血淋巴的蛋白质含量较对照明显降低     

我国昆虫病原线虫的研究与应用现状

本文就昆虫病原线虫的分类地位、生物学和生态学特征进行了介绍,并重点对昆虫病原线虫以及其共生菌防治靶标害虫的研究和应用进展进行了综述,最后探讨了现有的应用研究存在的问题和解决办法。     

用昆虫病原线虫液相培养早期发育指标预测产量的研究

对液相培养繁殖昆虫病原线虫的早期发育指标与最终产量的相关性进行研究，探讨利用早期发育指标预测最终产量的可能性。试验中采用４项早期发育指标：（１）接种代发育比（培养第４天）；（２）接种代繁殖倍数（培养第９天）；（３）子１代发育比（培养第１３天）；（４）子１代繁殖倍数（培养第１８天）。回归分析结果表明，４项发育指标与最终产量均有显著相关性，可以用作预测最终产量的指标。     

昆虫病原线虫斯氏线虫科的分类研究概况

斯氏线虫科(Steinernematidae)线虫的肠道具有共生细菌,侵染昆虫后能引起寄主昆虫的败血病,而迅速死亡,对人畜安全,是有应用前景的天敌类群,已经受到世界各国的重视,近十多年来,我国许多单位也先后开展了旨在应用于害虫生物防治和资源利用的研究,取得了很大的成绩,但由于线虫形态结构比较简单,过去描述的一些种类也因研究工具的限制,观察得不甚清楚,所以在过去一个时期出现分类上的混乱状态。尽管人们悉心注意,也难免存在一些错误,这在一定程度上影响着资源的发掘和有关应用性的研究。     

昆虫病原线虫共生菌YL001细胞内代谢产物抑菌作用研究初报

以生物活性跟踪法测定了菌株代号为YL001的昆虫病原线虫共生菌Xenorhabdus nematophilus细胞内代谢产物的不同溶剂提取物及其不同馏分的抑菌活性。结果表明,YL001细胞内代谢产物的乙醇提取物和甲醇提取物的抑菌活性均高于石油醚提取物、乙酸乙酯提取物和正丁醇提取物,前两种提取物对番茄灰霉病菌Botrytis cinerea和辣椒疫霉病菌Phytophthora capsici的72 h菌丝生长抑制作用最强,在0.4 mol/mL浓度时抑制率均达100％。乙醇提取物经硅胶柱层析分离,洗出液合并后收集得到8个馏分。测定了各馏分对番茄灰霉病菌菌丝生长的抑制作用,结果表明:馏分F6的抑菌活性最高,在0.5 mol/mL浓度时,96 h的菌丝生长抑制率可达96.09%;提取物的活性段主要集中在馏分F6、F7和F8。活体组织法测定结果表明,其乙醇提取物在10 mg/mL的剂量下对番茄灰霉病的保护效果为64.81%,治疗效果为62.03%。     

影响昆虫病原线虫共生菌发酵液杀虫活性相关因子研究

应用生物测定法,研究了甘肃省3种土著昆虫病原线虫的4个优良品系共生菌的杀虫活性,及日光和紫外照射、温度对杀虫活性的影响。结果表明,不同线虫及品系共生菌对大蜡螟的胃毒活性存在显著差异,异小杆线虫共生菌HMP0627对大蜡螟的胃毒活性最高,校正死亡率和体重抑制率分别为22.20%和36.02%,斯氏线虫共生菌SAX0664对大蜡螟也有较高的致死作用。4个线虫品系共生菌对日光和紫外光照射都有较强的适应性,1.999 mmol/(m2·s)日光下照射1 h和18 W紫外灯照射30 min仍具有胃毒毒力。不同共生菌对温度的适应性存在显著差异,随着温度的升高,共生菌的胃毒毒力显著下降。到50 ℃时,异小杆线虫共生菌HMP0627仍有较高的致死率和体重抑制率,斯氏线虫共生菌SKX0657仍有较高的体重抑制率。     

昆虫病原线虫应用的生态学问题

昆虫病原线虫寄主广泛,仅slinernema feltiae DD—136品系,寄主就超过一千多种,不但能有效地防治农作物的许多害虫,对于一些用化学药剂难以除去的钻蛀性害虫以及土壤害虫,也有一定的防治效果。近年来,由于人工廉价培养基的突破,可以大量培养昆虫病原线虫,使生产商品化,为大面积的田间应用提供了基础,因此昆虫病原线虫其有很广泛的应用前景。昆虫病原线虫的田间应用面临的主要问题是能否在相当长的时间内保持一定的密度     

昆虫病原斯氏和异小杆线虫人工大量培养的研究概况

昆虫病原斯氏和异小杆线虫的大面积田间应用要求线虫有效地生产，本文介绍业已建立线虫大量培养方法及合适于大规模生产线虫的工厂化培养系统及有关的技术参数，并讨论其优化管理问题。