诱导子对雷公藤悬浮细胞中雷公藤甲素积累的影响

[目的]雷公藤甲素是雷公藤主要药用活性成分之一,具有抗肿瘤、免疫抑制和抗炎等多种作用.应用植物细胞培养技术生产雷公藤甲素具有重要意义,而诱导子是提高植物细胞培养中次生代谢产物积累的有效途径之一.研究通过探究非生物和生物诱导子对雷公藤悬浮细胞中雷公藤甲素积累的影响,以期提高雷公藤甲素产量,为雷公藤悬浮细胞规模化生产雷公藤甲素等药用活性物质提供基础.[方法]以水杨酸(SA)、LaCl3以及雷公藤内生真菌NS-5、NS-17作为诱导子,研究不同类型及不同浓度诱导子添加对雷公藤悬浮细胞中雷公藤甲素积累及细胞活力、细胞生长、总糖消耗、PAL活性的影响.[结果]SA、LaCl3和内生真菌NS-5、NS-17诱导子均可促进雷公藤悬浮细胞培养物中雷公藤甲素的积累.非生物诱导子的效应大小受其浓度的影响,0.1 mg/L的SA诱导作用最好,可提高细胞活力,促进细胞生长,总糖消耗增加,升高PAL活性,雷公藤甲素产量最高是对照的3.5倍.随着浓度的降低,LaCl3对雷公藤甲素的诱导作用增强,20 mg/L LaCl3诱导下的最高含量是对照的2.0倍,同时20 mg/L LaCl3也提高了PAL活性和总糖消耗,但对细胞活力和细胞生长影响不大.内生真菌诱导子的效应大小即与诱导子种类和添加时间有关.细胞培养第4天添加NS-5、NS-17菌丝体提取物,第8天添加任一内生真菌诱导子均提高了雷公藤甲素的积累,其中NS-5菌丝体提取物的诱导效果相对最强,细胞培养第8天添加时雷公藤甲素产量最高,是对照的2.4倍,但雷公藤甲素的积累与细胞生长及PAL活性无明显的关联.[结论]诱导子的添加能够提高雷公藤悬浮细胞中雷公藤甲素的积累,诱导效应的大小与诱导子种类、添加浓度及添加时间有关.本研究中的0.1 mg/L SA、20 mg/L LaCl3及内生真菌NS-5菌丝体提取物显示了良好的诱导效果,在利用细胞培养技术进行雷公藤甲素生产中具有较好的应用前景.     

欧美山杨毛状根生长特性研究

研究了欧关山杨毛状根的生长情况。发现：在培养过程中,毛状根一直处于旺盛的生长状态,POD活性呈现逐渐上升趋势;正常根呈现缓慢上升然后下降趋势;二者的SOD活性均呈现先上升后下降的趋势;可溶性蛋白含量均呈现先上升后下降的趋势。     

怀牛膝悬浮培养细胞生理生化特性研究

为了研究怀牛膝悬浮培养细胞生理生化特性,对细胞生长曲线、多糖含量、可溶性蛋白含量、POD活性、SOD活性、培养液p H值、电导率进行了测定。结果表明:细胞生长曲线呈"S"型,可分为延迟期(0~6 d)、指数生长期(6~12 d)和缓慢生长期(12~21 d)3个阶段;多糖含量在6 d达到第1个高峰后即呈现下降趋势,在15 d达到第2个高峰(比第1个峰值低);可溶性蛋白含量在9 d达到峰值;POD活性在15 d达到高峰;SOD活性在12 d达到峰值,之后下降并维持在一定水平;悬浮培养液的p H值先下降后上升;培养液的电导率在12 d降至最低点,与细胞生长呈现一定的相关性。怀牛膝悬浮培养细胞生理生化特性的变化存在一定规律性。     

雷公藤内生真菌对Fusarium nisikadoi NS-1雷公藤甲素合成的影响

为了解雷公藤内生真菌的雷公藤甲素合成能力以及内生真菌间互作对雷公藤甲素合成的影响,本试验从雷公藤中筛选出1株产雷公藤甲素的内生真菌NS-1,鉴定为Fusarium nisikadoi;通过NS-1与其它内生真菌共培养,发现青霉菌属(Penicilliumn)内生真菌NS-8能够显著促进NS-1的雷公藤甲素合成(P<0.05),是对照的1.6倍.以此为基础,通过制备和添加NS-8菌丝体提取物和发酵液诱导子,进一步研究内生真菌NS-8诱导子对NS-1雷公藤甲素合成的影响.结果表明,NS-8发酵液诱导子促进了NS-1的糖消耗速率,提高了NS-1生物量和培养液pH值,明显促进了NS-1胞外雷公藤甲素的积累,最高含量是对照的4.2倍;NS-8菌丝体提取物诱导子对培养液pH值的影响不显著,NS-1糖消耗速率略有下降,对NS-1生长有一定的抑制作用,胞外雷公藤甲素含量低于对照.两种诱导子对NS-1胞内雷公藤甲素合成均未呈现明显的促进作用.因此,NS-8主要通过其代谢产物强化NS-1雷公藤甲素的合成.     

雷公藤愈伤细胞悬浮培养生产雷公藤甲素的研究

对雷公藤叶愈伤组织进行悬浮培养,研究不同营养条件对雷公藤愈伤细胞生长及其雷公藤甲素质量分数的影响.结果表明：悬浮细胞在White培养基上增殖最快,而在MS培养基上生长最慢;White和MS培养基中悬浮细胞在第6天时雷公藤甲素质量分数最高,分别为7.14 mg/g和4.77 mg/g,而N6培养基中雷公藤甲素最大产量为6.34 mg/g,出现在第9天;3组细胞培养悬浮液中的雷公藤甲素峰值产量分布规律为White（28.13μg/mL）〉N6（21.27μg/mL）〉MS（16.27μg/mL）,同时培养基的pH随细胞的生长有波动现象.     

牛角瓜组培快繁过程中生理生化指标的变化

以牛角瓜组培苗为材料,对牛角瓜组培快繁过程中不同阶段的几种生理生化指标进行了测定,为其组培器官发生的调控提供依据。结果表明:牛角瓜增殖和生根过程中的形态变化与SOD、POD、CAT活性、可溶性糖和可溶性蛋白含量存在一定的相关性;在增殖过程中SOD活性变化先升后降,POD活性变化规律总体呈现下降趋势,CAT的活性变化呈现上升趋势,可溶性蛋白含量变化先降后升,可溶性糖含量呈上升趋势。在生根过程中SOD、POD和CAT酶的活性变化趋势基本一致,总体呈现"上升—下降—上升",可溶性蛋白含量总体变化趋势为"升高—下降—缓慢升高",可溶性糖含量总体变化趋势为先缓慢升高,后又缓慢下降。     

温度对香蕉不定芽生长及抗氧化酶活性的影响

为探明温度对香蕉不定芽生长及根系活力的影响,以巴西香蕉(Musa paradisiaca)为材料,在人工气候箱条件下研究温度对香蕉不定芽生长及抗氧化酶活性的影响。结果表明:SOD活性呈现上升-下降波动变化,POD活性先上升,培养15~20d达到最高后下降,培养45d后又缓慢上升,CAT活性整体先下降,培养45d后上升;在30℃以内,随温度升高,根系活力逐渐增加,培养20d后游离脯氨酸含量随温度升高而上升,培养50d开始下降,MDA含量先逐渐下降后上升,培养20d和45d较低;30℃最适宜香蕉不定芽生长,此条件下培养25d根系活力达最高(11.92mg/g·h),游离脯氨酸(58.76μg/g)和MDA含量(7.15nmol/g)都较低,根茎叶生长旺盛(苗高5.02cm、叶数3.64片、根数4.63条、根长4.91cm),是最适宜移栽的时间;培养45d根系活力为2.33mg/g·h,游离脯氨酸(94.83μg/g)和MDA含量(9.83nmol/g)都较低,根茎叶生长旺盛(苗高6.15cm、叶数4.97片、根数6.01条、根长6.06cm),是次适宜移栽的时间。30℃最适宜香蕉不定芽的生长,培养25d是最适宜移栽的时间。     

硫酸铵处理下茶园土壤氮素转化和交换态金属离子含量的动态变化

采用室内静态和动态土壤培养试验方法,研究了施用硫酸铵对新、老茶园土壤pH值、氮素转化和8种交换态金属离子含量的影响。静态试验结果表明:两种土壤pH值均随硫酸铵浓度增加而缓慢降低,且新茶园土壤pH值均高于老茶园土壤;新茶园土壤交换性铝含量随硫酸铵浓度增大而缓慢下降,而老茶园土壤受其影响较小。动态试验结果表明:经硫酸铵处理后,两种土壤pH值先下降至最小值后缓慢上升;新茶园土壤pH值与交换性铝含量呈负相关,而老茶园土壤交换性铝含量随时间延长而逐渐下降;两种土壤中交换性Cu、Se、Ca、Mg、Pb含量有着相同的变化趋势,即先降低后逐渐上升,且与pH值呈正相关;Mn含量与pH值呈负相关;新茶园土壤Fe含量在整个培养过程中变化不明显,而老茶园土壤中Fe含量先缓慢降低再升高。短期和长期动态试验结果表明:新、老茶园土壤铵态氮含量先下降后上升(短期)或者先上升后下降(长期);新、老茶园土壤硝态氮含量的短期和长期变化趋势与铵态氮相反。施用硫酸铵处理不同耕作时间茶园土壤pH值、氮素转化、金属离子含量的动态变化趋势基本一致,但新茶园土壤pH值和交换性铝含量的变化幅度高于老茶园土壤;在整个培养过程中新、老茶园土壤Fe含量的变化趋势不一致。     

硫酸铵处理下茶园土壤氮素转化和交换态金属离子含量的动态变化

采用室内静态和动态土壤培养试验方法,研究了施用硫酸铵对新、老茶园土壤pH值、氮素转化和8种交换态金属离子含量的影响.静态试验结果表明:两种土壤pH值均随硫酸铵浓度增加而缓慢降低,且新茶园土壤pH值均高于老茶园土壤;新茶园土壤交换性铝含量随硫酸铵浓度增大而缓慢下降,而老茶园土壤受其影响较小.动态试验结果表明:经硫酸铵处理后,两种土壤pH值先下降至最小值后缓慢上升;新茶园土壤pH值与交换性铝含量呈负相关,而老茶园土壤交换性铝含量随时间延长而逐渐下降;两种土壤中交换性Cu、Se、Ca、Mg、Pb含量有着相同的变化趋势,即先降低后逐渐上升,且与pH值呈正相关;Mn含量与pH值呈负相关;新茶园土壤Fe含量在整个培养过程中变化不明显,而老茶园土壤中Fe含量先缓慢降低再升高.短期和长期动态试验结果表明:新、老茶园土壤铵态氮含量先下降后上升(短期)或者先上升后下降(长期);新、老茶园土壤硝态氮含量的短期和长期变化趋势与铵态氮相反.施用硫酸铵处理不同耕作时间茶园土壤pH值、氮素转化、金属离子含量的动态变化趋势基本一致,但新茶园土壤pH值和交换性铝含量的变化幅度高于老茶园土壤;在整个培养过程中新、老茶园土壤Fe含量的变化趋势不一致.     

一起羊中毒病例的诊治

雷公藤甲素,来源于卫茅科雷公藤植物,为植物源农药。雷公藤甲素是最具药理活性的物质,具有显著的抗生育作用,主要是损伤鼠类睾丸生精细胞,减少精子,为雄性不育杀鼠剂,对各种害鼠均有效。现介绍一起羊雷公藤甲素中毒的病例,以供同行参考。     

切花秋菊‘神马’花芽分化与内源激素的关系

 【目的】研究短日处理下菊花（Chrysanthemum morifolium）花芽分化与内源激素的关系。【方法】以切花秋菊‘神马’为试材,通过对短日处理下花芽的形态解剖观察及顶芽和叶片中内源激素的测定,研究花芽分化过程中内源激素的动态变化。【结果】花芽分化过程中顶芽中GA3含量下降且大多时期保持在较低水平,叶片中GA3变化与之相反;顶芽中IAA含量先下降,在小花原基分化初期达到最小值,到花冠形成中期达到最大,叶片内源IAA含量在总苞鳞片分化初期前呈上升趋势,随后逐渐下降,到花冠形成期趋于平稳;内源CTK含量大幅增加,均高于未分化期;顶芽中ABA含量先下降,后期呈现上升趋势,叶片中ABA含量变化与顶芽相反,呈现先积累,经短暂平稳期后逐渐减少的趋势。花芽分化开始后CTK/IAA、CTK/GA3、ABA/IAA和ABA/GA3的比值均增大。【结论】高水平的CTK和ABA与菊花花芽分化相关联。在花芽分化初期,顶芽中低浓度IAA、GA3,以及叶片中高含量的IAA、GA3关系到菊花由营养生长向生殖生长转变;在花芽分化后期,顶芽中GA3和IAA的积累关系到花冠形成。从激素平衡来看,维持高比率的CTK/IAA、CTK/GA3、ABA/IAA和ABA/GA3有利于菊花的花芽形成。     

不同磷营养水平对2种沉水植物在Cd·Zn复合污染下的影响

[目的]揭示富营养化和重金属污染共同存在时对沉水植物的影响,为水生生态系统的健康评价和治理提供理论依据和手段。[方法]比较研究了不同磷营养水平对Cd、Zn复合污染下伊乐藻（Elodea nuttallii）、黑藻（Hydrilla verticillata）2种沉水植物叶绿素含量和叶绿素a/b比值、MDA含量、GSH含量、POD活性、CAT活性等生理生化指标的影响。[结果]随着培养时间延长,2种植物的叶绿素含量基本呈下降趋势,MDA含量呈先上升后下降趋势,POD活性及可溶性蛋白含量呈先下降后上升趋势,GSH呈缓慢上升趋势,当不存在磷水平时CAT活性无明显变化;但是黑藻比伊乐藻对胁迫更敏感,并且耐性优于伊乐藻。[结论]不同磷营养水平对受重金属胁迫植物的影响不一样,其中低磷水平（0.05 mg/L）可在一定程度上缓解重金属的毒害,与重金属产生拮抗作用;而高磷水平（5 mg/L）则加重了重金属对植物的伤害,产生协同作用。     

Hg2+对条斑紫菜毒害作用的研究

研究分析了不同浓度Hg2 对条斑紫菜光合作用强度、SOD、CAT、总抗氧化能力及可溶性蛋白质含量的影响。结果表明,藻胆蛋白对Hg2 的作用较为敏感,首先被破坏;叶绿素a的含量、光合作用强度、SOD、总抗氧化能力及可溶性蛋白质含量随Hg2 处理浓度的增加而先升后降,CAT活性则表现出总体下降的趋势。     

雾培与液培对黄瓜根系氮代谢相关酶活性的影响

采用雾培和液培(深液流)栽培系统,研究了不同无土栽培方式对津绿‘21-10’和迷你黄瓜‘22-405’根系氮代谢的影响。结果表明,在整个生育期,雾培和液培黄瓜根系硝态氮(NO3--N)和铵态氮(NH4+-N)含量、根系活力、硝酸还原酶(NR)活性、谷氨酰胺合成酶(GS)活性、谷氨酸脱氢酶(GDH)、谷草转氨酶(GOT)活性、谷丙转氨酶(GPT)活性、游离氨基酸和可溶性蛋白质含量总体上均呈现出先升高后降低的变化特点,其中在处理的前20 d液培处理的各项指标均大于雾培,且在处理的第20天达到最大,而雾培处理的各项指标最大值是在处理的第30天,且在处理的30 d之后,雾培根系各项指标均比较高。在不同基因型品种之间,津绿‘21-10’根系各项指标变化幅度大于迷你黄瓜‘22-405’,但品种之间无显著差异。结果说明在生育前期液培黄瓜植株根系氮的吸收和代谢能力比较强,而在生长中后期雾培黄瓜根系氮的吸收和代谢能力增强。     

涝渍胁迫对圆齿野鸦椿苗期生长及其叶片生理的影响

以1年生圆齿野鸦椿幼苗为试材,研究涝渍胁迫对圆齿野鸦椿苗期生长及其叶片生理的影响。结果表明:随着胁迫时间的延长,叶片相对含水量逐渐下降;质膜相对透性和可溶性糖、游离脯氨酸、丙二醛的含量均是先逐渐增大后减小;苗木总生物量呈下降趋势。     

外源钙对盐胁迫下匍枝萎陵菜生长及生理特性的影响

采用盆栽试验法,对匍枝萎陵菜进行盐胁迫处理,同时施用不同浓度氯化钙,通过对新梢生长量,叶片中丙二醛(MDA)、可溶性糖、脯氨酸(Pro)的含量以及超氧化物歧化酶(SOD)活性等指标进行测定分析,来探讨其耐盐能力及氯化钙的作用。结果表明:随盐浓度升高,匍枝萎陵菜新梢生长量下降,叶片中MDA和Pro含量增加,叶片中SOD活性、可溶性糖含量均呈先升后降趋势。各盐浓度处理下,随外源钙浓度的增加,新梢生长量、SOD活性、可溶性糖含量、脯氨酸含量基本呈现先升后降趋势,MDA含量在低盐浓度下(3,4mg·g-1)呈下降趋势,在高盐浓度下(5,6mg·g-1)呈现先降后升趋势。综合各测定指标及外部形态的表现认为:匍枝萎陵菜可以在含盐量4.00mg·g-1及以下的土壤中正常生长;氯化钙对匍枝萎陵菜遭受盐胁迫有一定缓解作用,在较低盐浓度下(3~4mg·g-1),CaCl2缓解作用较明显,以20mmol·L-1的浓度较适宜;较高盐浓度下(5~6mg·g-1)CaCl2的作用不明显。     

不同生长年限中药材泰山参中常量元素和微量元素含量测定分析

为了研究不同生长年限泰山参中元素含量的变化规律,本研究选用硝酸作为消解剂进行微波消解,分别用原子吸收光谱法和电感耦合方法对泰山参中的K、Ca、Na、Mg等4种常量元素以及Cu、Zn、Mn、Fe、Ni、Co、Cr、Cd、Pb、V、Sn等11种微量元素含量测定,对不同生长年限泰山参中的常量元素和微量元素进行比较分析。结果显示,大量元素Ca和Mg含量随着生长年限的延长不断增加,Na含量随着生长年限的延长先增加后减少,K含量随着生长年限的延长无明显变化规律,2年生中含量最高,达到20.94 g/kg。微量元素Cu、Cd、Sn的含量随着生长年限的延长表现出先增加后减少的变化规律;Zn、Mn、Ni的含量随着生长年限的延长表现出逐渐减少的变化趋势;Fe、Cr的含量随着生长年限的延长表现出先减少后增加的变化趋势;Co、Pb、V的含量随着生长年限的延长呈出“低—高—低—高”波浪状的变化规律。     

Pb 胁迫对圆叶无心菜(Arenaria rotumdifolia Bieberstein)生长和生理特征的影响

通过室内水培圆叶无心菜幼苗,研究不同浓度Pb对圆叶无心菜生长、叶绿素含量、丙二醛含量和细胞膜透性的影响。结果表明,随着Pb处理浓度的增加,植物生长受到抑制,叶绿素含量呈现先上升后下降的变化趋势,丙二醛含量和细胞膜透性均呈上升的变化趋势。铅浓度为50 mg.L-1时,圆叶无心菜株高、根长以及生物量和叶绿素含量均比对照含量有所增加;铅浓度大于100 mg.L-1时,植株株高和根长的生长受到抑制,地上部鲜重和地下部鲜重均减少,叶绿素含量降低,丙二醛含量和细胞膜透性都显著增加。     

Cu^2＋和Cd^2＋对条斑紫菜丝状体生长和生理的影响

分别用不同浓度的Cu^2＋和Cd^2＋处理条斑紫菜丝状体,测定其叶绿素a含量、过氧化物酶（POD）活性以及可溶性蛋白含量随时问变化的情况。结果表明,随着Cu^2＋和Cd^2＋浓度的增加,除Cu^2＋0．1mg／L浓度组外,其他各浓度组对条斑紫菜丝状体叶绿素a含量、POD活性和可溶性蛋白含量的影响。基本上表现为先上升后下降的时间效应关系,且同一重金属离子浓度越大越早出现下降。     

施用鸡粪肥对土壤Cd、Pb、As 生物有效性 及蔬菜生长的影响

通过田间小区试验,研究了种植木耳菜、茄子和不种菜处理条件下,鸡粪肥不同施用量对土壤重金属Cd、 Pb、As 全量、有效态含量,蔬菜对重金属的吸收及蔬菜生长的影响。结果表明,鸡粪肥中Cd、As含量较高,能增加或保 持土壤重金属全量,含量较低的Pb 也能在种植蔬菜时在土壤中累积,无外源添加时,土壤As 全量会随种植过程显著 降低。施肥量为12 000 kg/hm2时,种植蔬菜处理土壤Cd 有效性增加最为明显,施肥量为8 000、12 000、16 000 kg/hm2 时,3 种种植处理土壤As 有效性均会降低。木耳菜中Cd、Pb 随着施肥量增加呈先减少后增加趋势,As呈先增加后减少 趋势。木耳菜产量随施肥量增加呈先升高后降低趋势,在12 000 kg/hm2时达到最高,施肥量对茄子产量和生物量影响 不显著。