银杏愈伤组织细胞中总黄酮提取工艺的比较

为探索从药用植物细胞中提取黄酮类活性物质,用简单、易工业实现的低成本工艺获得较大的总黄酮提取率,为工业生产提供理论依据和实践指导,以银杏愈伤组织为材料提取总黄酮并测定含量。利用乙醇提取、超声波提取和水提取3种方法对银杏愈伤组织中黄酮类化合物进行提取,以络合分光光度法测定的黄酮得率为衡量指标,得到各自最佳的提取条件。结果表明：利用乙醇法提取愈伤组织中总黄酮提取最佳条件是：80%的乙醇作为提取剂,料液比为1∶7（m∶v）,于60℃提取3次,总黄酮得率为3.67%;超声波法提取最佳条件为60%的乙醇作为提取剂,料液比为1∶34（m∶v）,提取65 min总黄酮,得率为4.57%;水提法的最佳条件是：水温90℃,料液比为1∶30（m∶v）,提取3.5 h,总黄酮得率为2.95%。3种优化后的提取方法黄酮得率依次为：超声法＞乙醇法＞水提法。     

光果甘草不同愈伤组织中总黄酮含量的比较

目的:研究不同激素组合、激素水平及添加物(水解乳蛋白)对光果甘草6种外植体愈伤组织中总黄酮含量的影响.方法:通过组织培养的方法获得愈伤组织,以芦丁为标准品,采用分光光度法于500 nm处测定愈伤组织中总黄酮的含量.结果:在附加6-BA 4.0 mg/L+ NAA 1.0 mg/L的MS培养基中,节间愈伤组织中总黄酮含量最高,为2.316%±0.015%.培养基中添加水解乳蛋白500 mg/L后极显著地增加了所有外植体愈伤组织中的黄酮含量;在附加了6-BA 1.0 mg/L+ NAA1.0 mg/L+水解乳蛋白500 mg/L的MS培养基中,节间愈伤组织中总黄酮含量最高,为2.376%±0.003%.结论:6-BA与NAA的激素组合,以及水解乳蛋白的添加,均有利于光果甘草愈伤组织总黄酮的生产.     

‘乐都紫皮大蒜’多倍体的诱导与鉴定

‘乐都紫皮大蒜’因其风味独特并具有高含量的碳水化合物,市场价值和开发利用前景广阔。利用多倍体诱导技术,可促进优良大蒜种质的创制。本研究通过秋水仙素浸泡‘乐都紫皮大蒜’的愈伤组织进行四倍体诱导,并利用流式细胞仪及农艺性状测定等方法进行鉴定。结果表明:在含有0.5 mg/L6-BA+1.5 mg/L2,4-D的B5培养基上培养大蒜愈伤组织的诱导率最高,愈伤组织长势最佳。以0.2%的秋水仙素浸渍4 h,愈伤组织的四倍体细胞诱导率最高,达39.42%。在此条件下,处理愈伤组织后诱导再生试管苗,愈伤组织存活率为54.44%,多倍体再生植株的诱导率为28.89%。与二倍体植株相比,四倍体试管苗的株高、叶长、叶宽、假茎长显著增加了183.44%、181.18%、133.33%和58.33%。本研究为培育大蒜新种质提供了技术方法与科学依据。     

响应面法优化金花葵花总黄酮提取工艺及抗氧化活性分析

以金花葵花为原料,采用响应面法优化超声提取金花葵总黄酮提取工艺。以总黄酮提取率为考察指标,在单因素试验基础上,研究乙醇浓度、浸泡时间及颗粒大小3因素对总黄酮得率的影响。通过测定金花葵花提取物的还原能力和对DPPH自由基、羟自由基及超氧阴离子的清除能力来评价金花葵花提取物的抗氧化活性。结果表明,超声提取的最佳工艺为乙醇浓度75%,浸泡时间2.1 h,颗粒大小为45目,该条件下总黄酮提取率的预测值为18.64%,实测平均值为18.03%。金花葵花提取液抗氧化活性良好,并随着提取液浓度的增加而逐渐增强。     

超临界流体提取金银花中总黄酮研究初报

为探讨采用超临界CO2萃取技术萃取金银花中总黄酮的工艺条件;采用分光光度法测定总黄酮的含量,考察压力、温度、时间和夹带剂对总黄酮提取率的影响,并同热醇浸泡提取法、微波提取法和超声提取法的得率进行比较;得到超临界CO2萃取最佳条件为：压力30Mpa、温度40℃、时间120min和夹带剂用量4.5ml/g时,提取得率最高。同热醇浸泡提取法、微波提取法和超声提取法相比,其总黄酮得率分别为8.92%、9.56%、9.32%、和10.24%;超临界CO2提取方法同其他方法相比,得率高、时间短,是一种合适的提取金银花中总黄酮的方法。     

春砂仁中总黄酮提取工艺的优化

为确定春砂仁中总黄酮的最佳提取工艺条件,以春砂仁为原料,用甲醇提取春砂仁中总黄酮,利用紫外分光光度计对提取液的总黄酮含量进行测定。以总黄酮提取率为指标,探讨了甲醇体积分数、提取时间和提取温度3个单因素对总黄酮提取率的影响,在单因素试验的基础上,采用Box-Behnken响应面法对春砂仁总黄酮的提取工艺条件进行优化,得到春砂仁总黄酮提取的最佳条件为提取时间101 min,提取温度73℃,甲醇体积分数85%。在此条件下,春砂仁总黄酮的提取率为11.11%。     

苍耳子、田基黄中黄酮类物质提取含量测定及对比研究

为考察苍耳子和田基黄中黄酮提取优化的研究和总含量的测定,及对两者黄酮总含量的对比研究。通过芦丁作为标准物测定总黄酮含量,采用L9(34)正交试验法确定乙醇浸提回流法的最佳浸提工艺条件。试验结果显示,苍耳子最佳浸提条件为乙醇浓度为60%,提取温度70℃,提取时间4 h,料液比为1:30 (g/mL),此条件下苍耳子总黄酮提取率为3.89%。田基黄最佳浸提条件为：乙醇浓度为50%,提取温度为80℃,提取时间为1 h,料液比为1:50 (g/mL)。以总黄酮浸提率作为考察指标,苍耳子最佳浸提工艺下总黄酮的提取率为3.89%;而田基黄总黄酮提取率为4.31%。结果表明田基黄中黄酮含量较于苍耳子高。本工艺简单可行,有较好的参考价值。     

响应曲面法优化荞麦糊总黄酮的提取工艺

以荞麦糊为原料,采用响应曲面试验设计优化超声辅助提取荞麦糊总黄酮的工艺条件。选取乙醇体积分数、提取温度、提取时间、料液比和提取功率作为影响因素,在单因素基础上利用响应面分析法确定最佳提取工艺。在乙醇体积分数69%,提取温度67℃,料液比1∶16,提取时间60 min的条件下,得到的实际总黄酮得率为1.527 6%,总黄酮得率的预测值为1.596 5%,二者基本吻合,表明此方法应用于荞麦总黄酮提取工艺的优化筛选可行。     

红花绿绒蒿中总黄酮的含量测定及提取工艺优化

为检测藏药红花绿绒蒿中总黄酮的含量,在单因素试验的基础上,采用正交设计试验优化红花绿绒蒿中总黄酮的提取工艺,并用紫外分光光度法测定提取的红花绿绒蒿中总黄酮的含量。结果表明,可使用60%乙醇提取红花绿绒蒿中的总黄酮,提取时间为1.5h,料液比为1∶40,测得样品中总黄酮含量为1.06 mg/g。表明所建立的红花绿绒蒿中总黄酮的提取工艺简便可行、重现性较好,可作为红花绿绒蒿药材质量评价的依据。     

绵茵陈中绿原酸的提取工艺研究

【研究目的】研究并优化乙醇提取绵茵陈中绿原酸的最佳操作参数;【方法】以绵茵陈为原料,通过单因素试验、正交试验和方差分析确定最佳提取工艺;【结果】结果表明:乙醇提取绵茵陈中绿原酸的效果较好;确定的最佳工艺参数乙醇浓度为60%、料液比1:25、提取温度60℃、提取时间1.5h;【结论】采用60%乙醇可以很好提取绵茵陈中的绿原酸。     

超声波提取桑叶中总黄酮的工艺研究

采用醇提法、超声提取法探讨了从桑叶中提取总黄酮类物质的最佳工艺。试验结果表明:通过单因素试验和正交试验,超声提取效果最好。其最佳条件是:用浓度为70%、按料液比1:15的比例的乙醇浸泡3h,再用超声提取45min,其桑叶中总黄酮类物质的提出率可达2.18% 采用聚酰胺树脂为层析柱填充料,对桑叶黄酮的提取液进行了纯化。还通过样品的总黄酮与FeCL3、浓H2SO4等试剂的特征反应对所得提取物进行了定性分析,确定了所得提取物为黄酮类物质。     

紫外分光光度法测定玫瑰花和玫瑰花渣中的总黄酮含量

以芦丁为标样,用紫外分光光度法分别对玫瑰花和提取过精油的玫瑰花渣中的黄酮类化合物含量进行了测定。结果表明,玫瑰花和玫瑰花渣中总黄酮含量(以芦丁计)分别为3.30%和3.13%,测定的平均回收率为98.2%,RSD为0.95%。此法操作简便、快速、准确,可作为检测玫瑰花中总黄酮含量的一种方法。     

响应面法优化超声辅助提取桑叶总黄酮工艺研究

为研究不同提取条件对桑叶总黄酮提取率的影响,以便优化桑叶总黄酮的提取工艺条件。选取液料比、超声时间和超声温度为影响因子,在单因素试验的基础上,进行3因素3水平的Box-Behnken中心组合试验设计。以桑叶总黄酮提取率为响应值,进行响应面分析,优化超声辅助提取桑叶总黄酮的提取条件。试验结果表明,超声辅助提取桑叶总黄酮的最佳工艺条件为：75%乙醇,在液料比为50:1、超声温度64℃,超声45 min后,桑叶总黄酮提取率理论值可达到4.29%,验证值为4.23%。实验结果为确定桑叶总黄酮的超声辅助提取工艺提供了实验依据。     

Content Determination of Total Flavonoids in Food Products of Fagopyrm tataricum(Linn) Gaench

[Objective] To detect the total flavonoids content in food products of Fagopyrm tataricum(Linn) Gaench by UV spectrophotometry.[Methods] Reflux method was used for extraction. Absorbance value was detected by Na NO2- Al(NO3)3method; and the total flavonoids content was calculated with rutin as the reference. [Results] Rutin concentration had good linear relationship with absorbance value when the concentration range was 0. 003- 0. 161 mg / m L,with R2= 0. 995 9. The average recovery rate was 98. 305% and RSD was 1. 62%.[Conclusions]There were significant differences in the total flavonoids contents in twenty F. tataricum foods; their contents were in the order of buckwheat breakfast cereal(3. 813 mg / g) buckwheat rice(3. 115 mg / g) buckwheat noodle(0. 178- 2. 186 mg / g) buckwheat sachima(0. 228- 0. 573 mg / g) buckwheat biscuit(0. 015- 0. 065 mg / g). This method was rapid,simple,accurate and repeatable,and could be used for the content detection of total flavonoids in F. tataricum foods.     

Medium-Genotype-Interaction on Androgenetic Haploid Production in Wheat

The present study investigates the effects of media on the rate of green plantlet formation from anther cultures of five different winter and spring wheat cultivars. An increased number of embryos and calli were produced on Ficoll-containing liquid potato-2 medium, whereas the addition of 0.2 M/l maltose increased the rate of regeneration. The genotypes had strong effect on the formation of plantlets, but the developed procedure allows also the regeneration of recalcitrant genotypes. On the best medium sequence, a total of 2430 anthers over all genotypes were plated which developed 1325 macroscopic structures (55 %) of which 159 green plants have developed, i.e. 12 % from the structures and 7 % from the plated anthers, respectively.     

甲基磺酸乙酯对草莓愈伤组织的生理效应

用不同浓度甲基磺酸乙酯对草莓愈伤组织进行诱变处理,测定了愈伤组织中的保护酶和氧化酶活性、总酚含量、MDA含量的变化以及愈伤组织的死亡率。结果表明,随着EMS处理浓度的增加和时间的延长,愈伤组织死亡率呈上升趋势;随着EMS处理浓度的增加,保护酶SOD,CAT和氧化酶PPO,POD活性升高,而后快速下降;随着处理时间的延长,SOD活性逐渐下降,CAT,PPO活性先上升后下降,POD活性则表现为先降后升再降;随着处理浓度的增加和时间的延长,总酚含量变化为先升后降,但上升和下降都比较缓慢,而MDA含量则逐渐上升;处理后的愈伤组织在培养过程中,PPO,POD活性迅速下降并维持在相对稳定的水平,总酚和MDA含量逐渐下降,而总酚含量与PPO,POD活性呈显著正相关。由此认为,在用EMS对草莓愈伤组织进行诱变时,较适宜的剂量为0.1%~0.2%浓度处理1.0~1.5 h,在处理完成后的前12 h培养中,应采取措施以减轻褐变。     

Content Detection of Total Flavonoids in Melastom adodecandnun Lour.

[Objective] To establish a content detection method for the total flavonoids in Melastom adodecandnun Lour. [Methods]Content of total flavonoids in M. adodecandnun was detected by UV-Vis spectrophotometry. [Results]When the content of total flavonoids in M. adodecandnun was detected by UV-Vis spectrophotometry,there was good linear relationship(r = 0. 999 6) within the range of 0. 004 16- 0. 066 59mg/mL. The average recovery rate was 98. 85% and RSD was 2. 75%. [Conclusions]This method was accurate,simple and could be used for the content detection of total flavonoids in M. adodecandnun.     

关键因子对棉花利用农杆菌介导法导入外源基因的影响

用5～6d的棉花无菌苗下胚轴切段与农杆菌共培,将Bt基因和tfdA基因导入棉花。菌株质粒中GUS基因为标记基因,NPTⅡ基因为选择基因。在含有0.1mg/L2,4-D和0.1mg/LKT的MS培养基上共培48h,转移到添加头孢霉素500mg/L、卡那霉素50mg/L培养基中诱导和筛选抗性愈伤组织。70～80d时,进行GUS检测,选择GUS阳性愈伤组织,经体细胞胚     

甘薯胚性细胞悬浮培养系的建立

地甘薯胚性细胞悬浮增减系的进行了研究。将１２个基因的长约０．５ｍｍ的茎尖培养在含有０．２ｍｇ／Ｌ或２．０ｍｇ／Ｌ２，４－Ｄ的ＭＳ培养基上，形成了胚性愈伤组织。胚性愈伤组织的形成率因基因型和２，４－Ｄ深度不同而很大差异，为０－７５．７％。一方面，将胚性愈伤组织继续增减在含有２，４－Ｄ的ＭＳ培养基上，它们形成了处于各发育时期的体细胞胚。将具有体细胞胚的胚性愈伤组织转移到ＭＳ基本培养基上，体细胞胚发育成     

Detection of Quercitrin and Quercetin Contents in HERBA TAXILLI by RP-HPLC

[Objective] To establish a rapid,fast and accurate high performance liquid chromatographic analysis for HERBA TAXILLI.[Methods]Quercitrin and quercetin were extracted from HERBA TAXILLI by acid hydrolysis and ultrasonic extraction. Quercitrin and quercetin contents were detected by RP-HPLC. [Results] Quercetin was the main component extracted by acid hydrolysis. There were few free quercetins by ultrasonic extraction; and they were mainly existed in the form of quercitrin. [Conclusions] Quercitrin extracted by ultrasonic extraction was used as the index for quantitative determination; detection was carried out by RP-HPLC. This method could rapidly and accurately reflect the quality of HERBA TAXILLI.