不同口蹄疫疫苗免疫效果及检测方法评估

为更好地了解猪口蹄疫O型合成肽疫苗与猪口蹄疫O型灭活疫苗的免疫效果与合理的检测方法,广西农垦永新畜牧集团有限公司良圻原种猪场在某肥育场进行了此次试验。试验猪分3组,分别注射不同厂家生产的猪口蹄疫O型合成肽疫苗和猪口蹄疫O型OS／99株灭活疫苗,并采用猪O型口蹄疫VP1抗体检测试剂盒和正向间接血凝试验（HI）分别对使用上述口蹄疫疫苗免疫效果进行检测。结果表明,猪注射口蹄疫O型合成肽疫苗后,用猪0型口蹄疫VP1抗体检测试剂盒检测,抗体阳性率达到100％;用正向间接血凝试验方法检测不到注射合成肽疫苗后产生的抗体效价。免疫猪口蹄疫O型OS／99株灭活疫苗后,用VP1抗体检测试剂盒检测,抗体阳性率只有30％;用HI方法进行检测,抗体阳性率为60％。     

不同方法检测猪O型口蹄疫疫苗抗体效价与攻毒保护相关性研究

为评价不同检测方法检测的口蹄疫疫苗抗体效价与免疫保护率的相关性,使用O型液相阻断ELISA、正向间接血凝试验、VP1结构蛋白抗体ELISA三种检测方法对免疫不同类型O型口蹄疫疫苗的60头猪进行血清抗体跟踪测定,免疫21 d后,分别用OZK/93和O/(XJ/10-11/MYA/98)毒株进行攻毒保护实验.数据统计和分析结果显示,0型液相阻断ELISA试验测定的抗体效价与攻毒保护率存在着极显著的正相关性(P＜0.01),相关系数为0.75;正向间接血凝试验测定的抗体效价以及VP1结构蛋白抗体ELISA法测定的S/P值与攻毒保护率之间均不存在线性相关关系(P＞0.05).试验表明,O型液相阻断ELISA抗体检测方法可作为田间猪O型口蹄疫疫苗免疫效果的评价方法.     

猪口蹄疫O型合成肽疫苗免疫效果试验

为了更好地了解猪口蹄疫O型合成肽疫苗与灭活疫苗免疫后抗体水平之间的差异．在梅小市选择2个规模化养猪场,每个猪场分2组,对试验猪分别免疫猪口蹄疫O型合成肽疫苗和猪口蹄疫O型灭活疫苗．对接种疫苗的试验猪进行免疫应激观察,结果显示：注射合成肽疫苗试验猪未出现不良免疫副反应．说明用合成肽疫苗临床使用的安全性较高;采用猪O型口蹄疫VP1抗体检测试剂盒和正向间接血凝试验分别对使用上述两种口蹄疫疫苗免疫21d后的猪血清进行检测,结果表明：免疫猪口蹄疫O型合成肽疫苗用猪O型口蹄疫VP1抗体检测试剂盒检测．抗体阳性合格率达到92．50％,免疫猪口蹄疫O型灭活疫苗用正向间接血凝试验检测,免疫合格率为35．83％,说明猪口蹄疫O型合成肽疫苗接种后的免疫效果明显优于传统灭活疫苗。     

口蹄疫抗体免疫金标快速检测试纸法的建立

应用免疫学原理与胶体金层析技术，采用双抗原夹心ELISA建立了检测口蹄疫(O型)抗体水平的“口蹄疫抗体(O型)免疫胶体金快速检测试纸法”。应用该法与“口蹄疫正向间接血凝抗原法”对300份猪、鸡、鸭、牛、羊等血液或血清进行口蹄疫抗体水平检测试验，符合率达100％。试验结果显示，该法与间接血凝法一样，具有微量、特异、准确等优点，且操作简易，不需要任何仪器，检测时间短，结果直观，容易判定，适用于基层兽医站、养猪场使用和大面积口蹄疫抗体普查。     

O型口蹄疫正向间接血凝试验的应用研究

<正>正向间接血凝试验(IHA)是检测口蹄疫流行和免疫抗体水平的一种简单、快速、准确、经济的检测方法,此方法常用于检测免疫口蹄疫疫苗后能否产生抗体或抗体滴度能否达到免疫保护,以利于指导生产。该方法操作简便、快速,不需要昂贵的仪器设备,很适合在基层应用;缺点是结果受操作技术人员的主观性影响较大,存在一定的"不确定性"。1材料与方法1.1材料接种免疫使用口蹄疫病毒:"O型"、"亚I"双价     

O型口蹄疫疫苗与猪瘟疫苗同步免疫后免疫抗体群体合格率监测

猪口蹄疫和猪瘟均是严重危害养猪业生产的重大动物疫病,目前我国对猪口蹄疫和猪瘟最有效的预防和控制措施就是进行免疫接种。本研究采用O型口蹄疫液相阻断ELISA试验和猪瘟正向间接血凝试验方法对猪O型口蹄疫疫苗、猪瘟疫苗单独免疫及猪O型口蹄疫疫苗与猪瘟疫苗同步免疫后O型口蹄疫免疫抗体和猪瘟免疫抗体群体合格率分别进行监测,以期摸索出沈阳地区猪口蹄疫和猪瘟疫苗同步分点免疫后抗体群体保护率     

2020年山东省春季口蹄疫和高致病性禽流感免疫抗体检测

为了解山东省口蹄疫、高致病性禽流感两种重大动物疫病的免疫效果,按照山东省动物疫病监测计划,采集全省98个场(户)2909份血清样品,应用液相阻断ELISA和血凝抑制试验(HI)检测方法进行血清抗体检测.结果显示:O型口蹄疫抗体样品合格率为83.73％,A型口蹄疫为77.5％,高致病性禽流感H5亚型Re-11、H5亚型R...     

规模猪场不同日龄仔猪O型和A型口蹄疫母源抗体消长规律及免疫效果监测

猪O型口蹄疫是政府强制免疫的动物疫病之一,而A型口蹄疫也明确规定根据各省的评估结果进行自行免疫。对猪场进行科学免疫是防控猪口蹄疫病毒感染的重要途径,为确定猪场口蹄疫疫苗的首免时间,以及掌握猪口蹄疫O/A二价灭活苗(O/HB/HK/99株+AF/72株)的免疫效果及应用,试验采用口蹄疫病毒O型/A型特异性抗体固相竞争ELISA(SPCE)检测试剂盒对不同日龄阶段仔猪母源抗体进行检测。结果显示:猪O型口蹄疫在7日龄后抗体水平可达到有效保护,21日龄左右达到最高水平,持续到50日龄左右抗体阳性率下降到50%;猪A型口蹄疫的母源抗体变化规律同O型,但同一日龄抗体水平均低于O型,在43日龄左右抗体阳性率便下降到了50%。结合两种母源抗体检测情况,在45日龄左右进行首免比较合适。同时通过对免疫后抗体水平的检测显示,90日龄后两种抗体阳性率均持续在77.8%以上,但口蹄疫O型在58～70日龄抗体阳性率只有66.7%,可能是该场首免时间太早,因此建议将该场首免时间调整到45日龄,同时3次免疫可确保猪对猪口蹄疫O型和A型野毒的抵抗力,能较好防止口蹄疫疫情的发生。     

三种试剂盒检测猪口蹄疫O型抗体的对比试验

使用三种猪口蹄疫O型抗体检测试剂盒分别检测接种猪口蹄疫O型合成肽疫苗和猪口蹄疫O型灭活疫苗的免疫抗体,以探讨三种抗体检测试剂盒的相关性。结果发现,猪口蹄疫病毒VP1结构蛋白抗体ELISA试剂盒和猪口蹄疫O型液相阻断ELISA试剂盒都可检测猪口蹄疫O型合成肽疫苗,两种试剂盒的相关性达90.8%,而间接血凝试剂盒不能用来检测猪口蹄疫O型合成肽疫苗;猪口蹄疫O型液相阻断ELISA试剂盒和间接血凝试剂盒可用来检测猪口蹄疫O型灭活疫苗,两种试剂盒的相关性达93.7%,而猪口蹄疫病毒VP1结构蛋白抗体ELISA试剂盒不能用来检测猪口蹄疫O型灭活疫苗。     

四种试剂盒检测猪口蹄疫O型合成肽疫苗抗体的对比试验

使用国产的4种猪口蹄疫病毒VP1结构蛋白抗体ELISA诊断试剂盒(VP1-ELISA)、猪口蹄疫O型液相阻断ELISA检测试剂盒(LB-ELISA)、猪口蹄疫正向间接血凝试剂盒、猪O型口蹄疫病毒ELISA抗体检测试剂盒(O-ELISA)同时检测猪口蹄疫O型合成肽疫苗免疫后的50份血清样品,阳性率分别为98.0%、94.0%、54.0%、90.0%。同时使用农业部规定的3种试剂盒分别检测20份血清样品的抗体滴度发现,VP1-ELISA试剂盒和LB-ELISA试剂盒阳性符合率为95%,平均抗体滴度相差0.7,与IHA试剂盒符合率为55%,平均抗体滴度相差3.8,故LB-ELISA试剂盒可以用来评价合成肽疫苗免疫的抗体,而IHA试剂盒不能用来检测合成肽疫苗免疫的抗体。     

猪O型口蹄疫母源抗体测定及疫苗免疫效果评价

为科学评价猪O型口蹄疫灭活疫苗的免疫效果,并合理制定猪群O型口蹄疫免疫程序,采用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)方法对猪群母源抗体及疫苗免疫抗体进行了检测与分析。结果显示,仔猪42日龄时母源抗体回落近临界值,猪群首次免疫后28 d抗体水平达到高峰,42～49 d抗体水平下降至临界值;二次免疫后21～28 d抗体水平达到高峰,随后抗体水平逐渐下降,120 d抗体水平下降至临界值。根据上述试验结果,建议免疫程序如下:仔猪40日龄首免O型口蹄疫灭活疫苗,首免后45 d进行二免,以后每4个月加强免疫1次。     

两种口蹄疫疫苗不同免疫组合的试验效果比较

本试验选用50日龄的长大/大长二元保育猪120头作为实验动物,试验猪分三组。在50日龄、80日龄和120日龄时,分别选用JY O型口蹄疫高效纯化疫苗和JY O型口蹄疫普通灭活疫苗进行交叉免疫接种。在首次免疫后25天、55天和100天分别检测口蹄疫苗抗体效价。抗体检测结果表明,使用高效纯化疫苗并接种两次的免疫效果较好。     

间接血凝试验在家畜口蹄疫免疫抗体检测中的应用

为了节省IHA（间接血凝试验）血凝抗原,扩大家畜O型口蹄疫免疫抗体检测数量,在不影响检测效果（合格率）的基础上,探索和改进原正向间接血凝试验检测方法。试验分别用口蹄疫O型-Asia 1型二价灭活苗和猪O型口蹄疫苗对天水地区几个养殖场的家畜进行了免疫注射,免疫后（牛免疫21 d、猪免疫28 d）随机抽样采血,常规分离血清,采用简化后的正向间接血凝试验进行牛和猪口蹄疫O型免疫抗体检测试验。结果表明：免疫合格率分别达到97.5%和92.5%;改进后的IHA既加快了操作速度、节省诊断抗原,又降低了检测成本。在家畜O型口蹄疫检测工作中具有推广应用价值。     

奶牛口蹄疫O型-亚洲Ⅰ型二价灭活疫苗免疫效果对比试验

为了解兰州地区奶牛口蹄疫O型-亚洲Ⅰ型二价灭活疫苗的免疫效果,科学评价免疫质量以及合理制定口蹄疫疫苗免疫程序,本研究应用液相阻断ELISA和O型正向间接血凝检测方法分别对目前兰州地区使用的4种口蹄疫二价灭活疫苗的免疫效果进行了对比。结果表明,兰州地区使用的4种口蹄疫O型-亚洲Ⅰ型二价灭活疫苗的O型和亚洲Ⅰ型口蹄疫保护性抗体诱导能力参差不齐,其中以B公司O型-亚洲Ⅰ型二价灭活疫苗的抗体诱导能力最强,其他3个公司的疫苗则相对较差。     

O型口蹄疫抗体金标检测试纸条判定标准的确立

本试验旨在迅速、准确检测口蹄疫阴性血清和阳性血清,确立O型口蹄疫抗体金标检测试纸条的判定标准。通过3批次O型口蹄疫抗体金标检测试纸条,对180份猪、牛、羊口蹄疫阴性血清,197份猪、牛O型口蹄疫弱阳性血清,317份猪、牛、羊O型口蹄疫阳性血清,223份牛Asia 1、A型口蹄疫阳性血清,600份田间血清样品进行检测,同时用O型口蹄疫液相阻断ELISA和O型口蹄疫正向间接血凝2种方法检测相同的血清样品。对3种方法检测的结果进行分析,并且将试纸条的检测线和质控线的显色情况与O型口蹄疫液相阻断ELISA的抗体滴度相比较。确立了试纸条的诊断标准:试纸条抗体滴度1∶2-为口蹄疫抗体阴性;试纸条抗体滴度1∶8+为O型口蹄疫阳性血清。根据试纸条的显色结果与液相阻断ELISA的结果的关系,绘制了比色卡。试纸条的判定标准检测血清结果与液相阻断ELISA和正向间接血凝结果分别进行统计学分析,试纸条与液相阻断ELISA和正向间接血凝相关性分别为y=1.142x+0.7421,y=1.1845x+0.8623;相关系数(r)分别为0.9221和0.9033。结果显示,O型口蹄疫抗体金标检测试纸条的判定标准的确立和比色卡的绘制,实现半定量分析,更加迅速、准确,适于实验室、基层兽医站和养殖场使用。     

不同抗体检测方法对猪口蹄疫疫苗临床免疫效果的评估

口蹄疫依然是危害我国养猪业的重大动物疫病之一,我国目前主要采用以免疫控制为主的策略防控猪的口蹄疫。口蹄疫临床免疫效果主要通过群体免疫抗体合格率进行评价,检测方法和试剂盒种类繁多。为了解猪口蹄疫0型、A型二价灭活疫苗的免疫效果及不同抗体检测方法（试剂盒）的差异,本试验选用临床常用的5个品牌的ELISA抗体检测试剂盒（液相阻断法、固相竞争法和间接法）及病毒中和试验共4种检测方法,检测猪场免疫的口蹄疫0型和A型疫苗的抗体,结果显示疫苗免疫效果良好,不同检测方法抗体阳性率变化趋势相似,说明目前各ELISA检测方法具有良好的适用性,同时,本文也分析了不同试剂盒检测结果存在差异的原因,为生产一线评估口蹄疫免疫效果提供数据参考。     

羊O型口蹄疫首免与再免后抗体水平的监测

采用正向间接血凝试验分别对25只首免O型口蹄疫和46只再免O型口蹄疫的羊只进行抗体水平监测。监测结果表明，再免疫抗体效价明显高于首免抗体效价，进一步说明增强免疫有利于对口蹄疫的预防。     

猪O型口蹄疫免疫抗体检测方法的比较

试验采用口蹄疫O型间接血凝试验和O型口蹄疫抗体液相阻断ELISA 2种试验方法检测了60份血清中猪O型口蹄疫免疫抗体.研究结果显示,60份被检血清口蹄疫O型间接血凝试验检测合格率为93.3％,O型口蹄疫抗体液相阻断ELISA试验检测的合格率为73.3％,口蹄疫O型间接血凝试验检测合格率明显高于O型口蹄疫抗体液相阻断ELISA试验检测的合格率（相差20个百分点）;2种方法的总符合率为66.7％、＜25（＜2^6）的符合率为28.6％,≥2^5（≥2^6）的符合率为82.1％.2种方法检测出的整体免疫效果较好,平均合格率远高于农业部规定的70％.     

五省牛、羊和猪口蹄疫疫苗免疫效果的试验

为了监测O、A和AsiaⅠ型口蹄疫疫苗免疫后引起的抗体水平,采用口蹄疫液相阻断ELISA法和病毒非结构蛋白3ABC-ELISA法对我国云南、内蒙古、甘肃、新疆和西藏的部分地区牛、羊和猪的血清样品共65591份进行三型口蹄疫抗体水平监测。液相阻断ELISA方法显示加强免疫后各地合格率均能达到100%;非结构蛋白3ABC-ELISA方法显示五省抗体检测合格率分别为91.13%、88.38%、78.04%、88.15%和85.15%;不同动物口蹄疫分型抗体检测结果以云南最高(均在85%以上),其它四省抗体检测合格率均在70%以上。结果表明,该疫苗免疫可产生较好的免疫效果。     

新疆昌吉州羊口蹄疫与小反刍兽疫单独与联合免疫抗体检测效果评价分析

试验旨在探讨羊口蹄疫与小反刍兽疫疫苗单独与联合免疫对动物保护情况,为缓解动物应激、提高免疫效果提供研究依据.选取2 106只昌吉州辖区7个地区的散养羊,采用液相阻断ELISA方法检测口蹄疫O型、A型抗体效价,ID Screen小反刍兽疫病毒抗体检测试剂盒检测小反刍兽疫抗体效价,分析各地区不同年份羊口蹄疫O型、A型和小反...