国产商品化无血清培养基

上海旭太生物工程有限公司最近成功自行试制了在BHK21细胞和非洲绿猴肾Vero细胞的无血清培养基。这二种培养基在各自的细胞上按中国生物制品的操作规程的要求，在少血清时（1％～2％的血清）传代培养，而后用无血清培养基作维持培养。目前技术传代培养已可传到7代，无血清培养可维持2代，这样满足了疫苗生产目前的工艺要求。     

哺乳动物细胞无血清培养基研究进展

随着哺乳动物细胞培养种类、规模和应用范围的不断扩大以及安全性能要求的不断提高,无血清培养基的研制已经成为细胞工程领域的重要课题.许多类型的哺乳动物细胞无血清培养基配方得到了研究开发和优化,且有些已经进入第3代无蛋白无血清培养基研制阶段.论文重点概述了无血清培养基在添加因子作用机制、细胞分化条件、细胞和组织移植以及肿瘤治...     

Vero细胞无血清培养基研究进展

Vero细胞是世界卫生组织和我国生物制品规程认可的生产人和动物疫苗的细胞系。为了避免外来污染和血清中不确定成分对细胞生长及其下游工作带来的影响,用无血清培养基或化学成分明确的培养基培养Vero细胞已成为病毒疫苗生产的一个重要发展趋势。Vero细胞无血清培养基的组成包括基础培养基和添加因子两大部分,常见的添加因子有转铁蛋白、胰岛素、微量元素、生长因子和维生素等。论文对Vero细胞无血清培养基的研究进展做一综述,以期为Vero细胞的无血清培养基研制及疫苗的生产提供参考。     

昆虫细胞无血清培养基研究进展

随着昆虫杆状病毒表达载体系统的广泛应用,昆虫细胞大规模无血清培养已成为一种发展趋势。目前的昆虫细胞培养基中主要有糖类、维生素、氨基酸、脂类、无机盐、有机酸等基础成分,此外还需要添加血清或酵母提取物和水解乳蛋白等血清替代物。然而使用血清会带来诸多难以解决的问题,因此开发使用血清替代物和无血清培养基已成为生物制品行业关注的主要方向。论文综述了昆虫细胞无血清培养基的研究进展,包括研究历程、研究现状、基础成分和其他添加物等。     

不同细胞培养基细胞培养动力学比较试验

应用宜兴赛尔生物化工厂产１９９、Ｆ－１０、１６４０和ＤＭＥＭ细胞培养基与美国Ｓｉｇｍａ公司产１９９、Ｆ－１０、１６４０和ＤＭＥＭ细胞培养基分别配制细胞培养液，培养ＳＰ２／０和Ｖｅｒｏ细胞系及原代鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦ），做细胞培养动力学比较试验。比较这两种来源的细胞培养基对细胞生长的形态、分裂速度及鸡马立克氏病毒（Ｍａｒｅｋ＇ｓｄｉｓｅａｓｅｖｉｒｕｓ．ＭＤＶ）疫苗毒株ＨＶＴ－ＦＣ１２６和ＲｉｓｐｅｎｓＣＶＩ９８８在ＣＥＦ单层上增殖量的差异。研究结果表明，四种国产细胞培养基与对应的四种进口培养基对细胞生长及病毒增殖的影响无显著差异     

昆虫细胞无血清培养基的研究

为开发昆虫细胞无血清悬浮培养基,以基础培养基Grace's Insect medium为基础,添加葡萄糖、水解乳蛋白、酵母粉和PF-68等组份后,分别接种Sf-21、Hi-five两种昆虫细胞进行无血清悬浮培养。结果显示:两株昆虫细胞生长均较好,均能够很好的全悬浮生长,Sf-21细胞最高密度可达(39.8±2.6)×105/ml,Hifive细胞最高密度可达(44.4±1.0)×105/ml。本研究为昆虫细胞培养提供一种无血清悬浮培养基配方,为我国利用昆虫细胞杆状病毒表达系统生产生物制品提供基础保障。     

S1640细胞培养基培养效果观察

用从废弃猪肉里提取的复合氨基酸配制的S1640细胞培养基,进行了淋巴细胞和组织培养,并与从国外进口的RPMI1640和国产1640细胞培养基作了比较.细胞遗传学指标检测的结果表明,S1640和日本、美国RPMI1640细胞培养基的细胞培养结果基本一样,而与国产干粉1640存在显著性差异,比国产干粉1640的效果好.     

培养基对MDCK细胞贴壁率的影响

为确定培养基种类对犬肾细胞(MDCK)贴壁率的影响,用DMEM、MEM、M199和RPMI1640四种培养基加10%新生牛血清后分别以10个/cm2的密度接种培养MDCK细胞,培养14 d计数每种培养基培养后形成的细胞集落数,并计算贴壁率。结果表明,四种培养基对MDCK细胞均能形成明显的细胞集落,贴壁率分别为78.56%、60.23%、41.13%和39.61%,以DMEM培养基培养MDCK的贴壁率最高。     

用低血清培养基和常规培养基培养细胞对FMDV增殖影响的比较

对15批用低血清培养基培养的细胞与用常规培养基培养的细胞进行口蹄疫病毒增殖培养对比试验,结果表明:两者之间在FMDV增埴指标上,LD50和TCID50无明显差别;低血清培养基比常规培养基病变时间短1h.     

Marc-145细胞的无血清悬浮培养基开发

为开发适合Marc-145细胞生长的无血清悬浮培养基,试验将贴壁Marc-145细胞转入Celer-S001培养基中进行悬浮适应,通过混料试验和水解物筛选试验获得适应Marc-145细胞快速扩增的无血清悬浮培养基,对悬浮培养的Marc-145细胞进行猪繁殖与呼吸综合征病毒感染并检测病毒效含量,评价悬浮培养的Marc-145细胞的病毒扩增能力。结果表明：Marc-145细胞可以在Celer-S001培养基中悬浮培养,其比生长速率为(0.25±0.06)/d;适应Marc-145细胞快速扩增的最优无血清悬浮培养基由B3和B8培养基以0.54∶0.46比例混合,并添加2 g/L的水解物H3构成,Marc-145细胞的比生长速率为(0.51±0.03)/d,密度为3.73×10⁶ cells/mL;细胞接毒后的病毒含量最高可达(5.25±0.25)lgTCID₅₀/mL,表明细胞仍然保持着病毒扩增能力。说明试验成功开发了适合Marc-145细胞生长的无血清悬浮培养基,Marc-145细胞在该培养基中生长良好,具有病毒扩增能力。     

商品细胞培养基中谷氨酰胺和氨的浓度

氨基酸谷氨酰胺是培养细胞的一种必需营养成分。水溶液中被液体培养基谷氨酰胺自发地分解成氨。本研究检查了氨对两株不同细胞系的毒性作用。在鼠杂交瘤细胞培养物中，外源氨浓度达到１００μｍ时，活细胞数就减少。在人前髓细胞系中，外源氨浓度为３００μｍ时，活细胞数就减少。我们测定了１１种商品培养基在分装时的氨和谷氨酰胺的浓度。发现所有培养基所含谷氨酰胺明显低于规定的量，而氨浓度都高达１０００μｍ。在４℃和２０℃     

细胞培养基MLM-45及培养条件对不同发育时期柞蚕卵巢细胞生长的影响

选择柞蚕5龄幼虫以及前滞育期、滞育期和解除滞育后发育前期、中期、后期的柞蚕蛹分离卵巢细胞,利用新研制的柞蚕细胞培养基MLM-45,在不同温度、pH值及渗透压条件下进行柞蚕卵巢细胞的体外培养,探究最佳培养条件及卵巢细胞取材的最佳发育时期。用台盼蓝染色活细胞计数方法,测定不同条件下用MLM-45培养基培养的不同发育时期柞蚕卵巢细胞的活力,当在27℃、pH 6.3、渗透压325 mOsm/kg的条件下培养30 d时,上述各发育时期柞蚕卵巢细胞的存活率最高,并且5龄幼虫、前滞育期和解除滞育后发育前期的卵巢细胞出现了增殖,其增殖率分别为54%、64%和2%,滞育期及解除滞育后发育中期和后期的卵巢细胞存活率也分别达到99.6%、96.6%和92.4%。在此最佳培养条件下,各发育时期柞蚕卵巢细胞培养2个月后其形态以圆形和椭圆形为主,尤以5龄幼虫和前滞育期蛹卵巢细胞的培养效果最好,细胞增殖7～8倍,是适于以MLM-45培养基培养的最佳发育时期柞蚕卵巢细胞。     

天然培养基与合成培养基灭菌方式的研究

试验选择5种天然培养基和5种合成培养基。每类培养基分装到20个三角瓶中,天然培养基分为2组(天然培养基Ⅰ组和Ⅱ组),合成培养基分为2组(合成培养基Ⅰ组和Ⅱ组)。天然培养基Ⅰ组、合成培养基Ⅰ组和天然培养基Ⅱ组、合成培养基Ⅱ组,在高压灭菌15min后,分别自然冷却降至压力为0和慢慢放气降至压力为0,然后放置培养箱中培养,并记录污染情况。结果显示,天然培养基适合自然降压灭菌,而合成培养基适合慢慢放气降压灭菌。     

固体培养基与液体培养基在培养微生物中的应用

固体培养基的产生为人们在体外模拟体内条件进而以固体培养基代替液体培养基培养细菌,较好地反映体内条件,缩小体内外环境的差异,增强体内外试验的可靠性提供了条件。１原生质体的某些特征与培养基的物理状态密切相关。细菌在体外和体内的生长情况是不同的,有的细菌在...     

新型酸奶机通过鉴定

最近，由天津科技大学与天津特斯达食品机械科技有限公司合作研制的液压式高压均质机、智能型酸奶机通过天津市科委科技成果鉴定，这标志着天津科技大学食品新装备科研成果在实施产业化方面迈出重要一步。天津科技大学研制的高压均质机是食品、化工行业及科学研究中使用的一种通用机械。