枯草芽胞杆菌果糖基转移酶基因的克隆及其序列分析

利用自行设计的引物,在枯草芽孢杆菌基因组内获得果糖基转移酶基因,基因和相应蛋白序列分析发现.该基因共1 422个碱基,编码473个氨基酸,与GenBank注册的sacB基因序列有89%的相似性;全长序列有152突变碱基,共造成18个氨基酸的错义突变,但没引起酶保守活性位点的关键氨基酸突变.这结果为后期表达特异连接α1→2糖苷键的果糖基转移酶或者该基因的定点突变打下基础.     

Pulmonary hemorrhage in hamsters after exposure to proteolytic enzymes of Bacillus subtilis

Single exposures of Syrian hamsters by aerosol inhalation or intratracheal instillation to proteolytic enzymes of Bacillus subtilis produced massive pulmonary hemorrhage within the first week. Of 46 animals exposed, eight died as a result of extensive hemorrhage. The remainder made uneventful recovery with no apparent residual pulmonary disease 6 weeks after exposure.     

顺反子序列bioⅠ-orf 2-orf 3在枯草芽孢杆菌染色体中的整合

将来源于枯草芽孢杆菌的顺反子序列bioⅠ-orf 2-orf 3克隆到含氯霉素基因的大肠杆菌-枯草芽孢杆菌穿梭质粒pE 3中,并在顺反子序列上游插入一个强麦芽糖启动子Pglv,构建成枯草芽孢杆菌整合载体pLHX8,电转化枯草芽孢杆菌受体菌1A747.从5μg/ml的氯霉素抗性平板上挑取两株转化子,通过基因组PCR鉴定,确定顺反子序列已经整合到枯草芽孢杆菌染色体上.     

Regulation of amino acid transport in kidney cortex of newborn rats

After incubation at 37 degrees C the subsequent uptake of alpha-aminoisobutyric acid, cycloleucine, glycine, and L-proline by newborn (as compared to adult) rat kidney cortex slices is enhanced. The effect is abolished by the presence of cycloheximide, actinomycin D, and high concentrations of the above-mentioned amino acids in the medium during the 37 degrees C incubation prior to measurement of uptake. The data suggest that there is an adaptive control mechanism which is expressed on incubation at 37 degrees C and which can regulate amino acid transport in newborn rat kidney cortex.     

枯草芽孢杆菌硫氧还蛋白还原酶的原核表达及活性分析

硫氧还蛋白还原酶(TrxR)是一种NADPH依赖的、含硒的黄素蛋白,在细胞增殖和分化、维持细胞内外氧化还原平衡中起重要作用。通过基因特异性引物从枯草芽孢杆菌BS04菌株中扩增TrxR编码基因,亚克隆至pET-28a(+)原核表达载体并转化大肠埃希菌BL21(DE3),经过IPTG诱导表达后采用Ni离子亲和层析进行重组蛋白纯化及活性分析。结果表明,枯草芽孢杆菌BS04菌株的TrxR基因全长1 011 bp,编码336个氨基酸,与已知枯草芽孢杆菌TrxR氨基酸同源性达99%。SDS-PAGE电泳和Western-blotting分析发现,重组蛋白分子量约37 ku,与预期相符。DTNB还原法测定TrxR活性及酶动力学常数结果表明,其对DTNB具有较高的还原活性,其K_m和K_cat值分别为3.06 mmol·L^-1和324.71 min^-1。该研究结果为进一步了解TrxR的功能提供了参考依据。     

枯草芽孢杆菌在对虾生产中的应用

枯草芽孢杆菌作为饲料添加剂可改善养殖水质环境,增强对虾体质和提高对虾生产性能。文章就枯草芽孢杆菌在对虾生产中的应用作以简述。     

鹌鹑核酸序列中的微卫星标记分析

在已公布的鹌鹑核酸序列和EST序列总计635条序列的1～6核苷酸重复SSR的分布中,共发现120条SSR,检出率为18.9%.二核苷酸重复基元的SSR占40.0%,三核苷酸重复基元的SSR占35.8%,五核苷酸重复基元和四核苷酸重复基元的SSR分别占14.2%和10.0%,没有发现六核苷酸重复基元的SSR.组成这些SSR的主要基序有AT/TA、CA/GT、GA/CT、CAG/GTC、AGG/TCC、TAA/AAT、GGC/CGG、GAC/CTG、CGA/GCT、GCA/CGT、GAG/CTC、ACC/CCA、TCTT、TTTG、TCCA、ATGAT/ATCAT、TCCCT、TTCCC.SSR的重复次数都在5以上,由此可以推测利用鹌鹑核苷酸序列和EST序列中的SSR序列将有可能开发一批有价值的SSR分子标记供各种研究所用.     

苏云金芽孢杆菌几丁质酶基因chiA在枯草芽孢杆菌中的分泌表达

[目的]研究来源于苏云金芽孢杆菌的几丁质酶基因chiA在枯草芽孢杆菌中的表达情况。[方法]以苏云金芽孢杆菌染色体DNA为模板,PCR扩增获取几丁质酶基因chiA,将其与枯草芽孢杆菌表达载体pHSG连接,构建重组菌,经IPTG诱导后,检测培养液中的几丁质酶活性。[结果]扩增得到几丁质酶基因chiA大小为2.5 kb。构建的重组菌对底物[4-MU-(GlcNAc)3]显示出一定的水解活性,培养液酶活约为2.8 U/ml,而pHSG空质粒转化子在同样条件下其培养液没有明显酶活。该重组酶的最适pH值为6.5,最适反应温度为50℃,与苏云金芽孢杆菌自身产生的几丁质酶性质一致。[结论]几丁质酶基因chiA能在枯草芽孢杆菌中成功表达,表达产物可成功分泌到细胞外。     

饥饿和再投饲对点带石斑鱼幼鱼脂肪酸和氨基酸组成的影响

在水温（29．2±0．2）℃条件下,研究了饥饿和再投饲对点带石斑鱼幼鱼脂肪酸和氨基酸的影响？结果表明：随着饥饿时间的延长,饱和脂肪酸和单不饱和脂肪酸下降,但多不饱和脂肪酸上升（P〈0．05）,氨基酸总量和必需氮基酸总量显著下降,与对照组差异显著（P〈0．05）。说明饥饿胁迫后产生了饥饿效应;恢复投饲后,实验组鱼体内的脂肪和能量百分含量与对照组不再存在显著差异。各实验组的氨基酸总量和必需基酸均显著高于对照组（P〈0．05）。结合体重变化为判断指标,饥饿2d的点带石斑鱼幼鱼具有完全补偿生长的能力,饥饿4～10d具有部分补偿生长的能力;以氨基酸为指标,饥饿2～10d的点带石斑鱼幼鱼均具有完全补偿生长的能力。     

饥饿和再投饲对点带石斑鱼幼鱼脂肪酸和氨基酸组成的影响

在水温（29．2±0．2）℃条件下,研究了饥饿和再投饲对点带石斑鱼幼鱼脂肪酸和氨基酸的影响？结果表明：随着饥饿时间的延长,饱和脂肪酸和单不饱和脂肪酸下降,但多不饱和脂肪酸上升（P〈0．05）,氨基酸总量和必需氮基酸总量显著下降,与对照组差异显著（P〈0．05）。说明饥饿胁迫后产生了饥饿效应;恢复投饲后,实验组鱼体内的脂肪和能量百分含量与对照组不再存在显著差异。各实验组的氨基酸总量和必需基酸均显著高于对照组（P〈0．05）。结合体重变化为判断指标,饥饿2d的点带石斑鱼幼鱼具有完全补偿生长的能力,饥饿4～10d具有部分补偿生长的能力;以氨基酸为指标,饥饿2～10d的点带石斑鱼幼鱼均具有完全补偿生长的能力。     

猪乳中氨基酸含量的动态分析

采集杜洛克母猪分娩后1、3、5、11、15、20 d的乳汁,通过高效液相法分析氨基酸的含量变化.结果表明,随着泌乳时间的延长,猪乳中17种氨基酸的含量均呈下降趋势,各种氨基酸之间谷氨酸含量最高,而胱氨酸和蛋氨酸的含量最低.     

Herpes-type virus and chromosome marker in normal leukocytes after growth with irradiated Burkitt cells

Cultured cells derived from male patients with Burkitt's lymphoma and harboring herpes-type virus particles were lethally irradiated. These irradiated cells induced normal peripheral leukocytes of female infants to grow within 2 to 4 weeks after mixed cultivation. Cells of a line free of this agent failed to stimulate growth. If either type of cell was cultured separately, it did not survive under the experimental conditions. Herpes-type viral antigen and C-group chromosomal marker previously described in cultured Burkitt cells were found in all of the female cell cultures that were obtained.     

烟草PGIP基因在枯草芽孢杆菌中的表达

根据Gen Bank数据库报道的林烟草(Nicotiana sylvestris)PGIP基因c DNA序列,设计特异性引物,从普通烟草(Nicotiana tabacum)种植品种小黄金中分离得到了其g DNA序列,分析结果发现烟草PGIP基因没有内含子序列。信号肽分析结果表明,烟草PGIP基因含有一段长28个氨基酸的信号肽。将去除信号肽的烟草PGIP基因片段亚克隆至枯草芽孢杆菌表达载体p HT43中,转化枯草芽孢杆菌菌株WB600并进行IPTG诱导。SDS-PAGE电泳表明,重组菌株可成功表达目的蛋白质,分子质量符合预期大小;琼脂扩散试验结果发现,表达的烟草PGIP蛋白质能够明显抑制辣椒疫霉PGs的活性。     

Expression of a Lysine-rich Gene in Bacillus subtilis 168

Lysine-rich protein gene (lys) was cloned from winged bean (Psophocarpus tetragonolobus (L.) DC), and cloned into prokaryotic expression vector pHT43, the recombinant plasmid pHT43/lys were constructed and then transferred into Bacillus subtilis168, upon IPTG induction, the recombinant protein was expressed, and the content of lysine was detected by HPLC. The result showed that lysine content increased by 9.85%. It was suggested that introducing lys gene into Bacillus subtilis 168 was an effective way to improve its nutrition quality.     

枯草芽孢杆菌在农业领域的应用研究进展

本文综述了近年来枯草芽孢杆菌在农业中的应用研究进展,包括提高作物抗性、促进作物生长、改良土壤、改良作物品质等方面内容,以期为枯草芽孢杆菌未来在农业上的应用提供一定的参考。     

枯草芽孢杆菌的研究与应用

枯草芽孢杆菌是革兰氏阳性细菌,能形成芽孢,是一些重要工业酶制剂的生产菌。由于其具有非致病性、分泌蛋白能力强的特性和良好的发酵基础,所以应用十分广泛。文章通过总结归纳其在医药、农业和其他研究领域的应用现状,分析其应用中存在的问题和产生问题的原因,希望能够为从事此领域研究的人员提供参考。     

枯草芽孢杆菌HAS中TasA基因的克隆与分析

为弄清枯草芽孢杆菌HAS对甘蔗黑穗病菌的抑制作用机理,选取可对多种植物病原真菌有抑制作用的抗菌蛋白TasA基因进行克隆与分析。结果表明:在HAS菌株中含有TasA基因,克隆编码抗菌蛋白TasA的基因全长,序列分析其有786个碱基组成,该序列与GenBank上登录的TasA(AJ871386.1)序列同源性达99%,推测蛋白分子量大小大约28KD,其中第104、164、169、250、399、623、627位等7个碱基发生碱基转换或颠换,而且这些变异分别发生在密码子的第2、2、3、1、3、2、3位碱基上,引起多肽链氨基酸的错义突变。经氨基酸序列比对,同Bacillus subtilis subsp.subtilis str.168编码的TasA蛋白(NP_390342.1)在第150位和第209位上的氨基酸发生变化,由苏氨酸、天冬酰胺分别代替丙氨酸和谷氨酸。     

Transforming Activity in Both Complementary Strands of Bacillus subtilis DNA

Under conditions favoring single-strand transformation, the two complementary strands of Bacillus subtilis DNA, separated by differential complexing with polyriboguanylic acid, have identical transforming activity. Moreover separated single strands, upon renaturation with unmarked (recipient) DNA, form heteroduplex molecules with similar double-strand transformin activity. These findings bear upon the mechanism of DNA integration.     

响应曲面法在枯草芽孢杆菌优化培养中的应用

基于Plackett-Burman设计及结果,采用响应曲面法研究了影响枯草芽孢杆菌生长的关键因素和最佳水平.结果表明,当牛肉膏为7.3 g/L,蛋白胨为7.1 g/L,温度33.5 ℃,pH值6.1时,菌体生长量最大.进而分析2因素间交互作用的等高线图表明:牛肉膏5.7～8.0g/L,蛋白胨5.2～8.0 g/L,温度33～34 ℃,pH值5.4～6.8时,可得到较高的菌体量.     

芽孢杆菌植酸酶基因在毕赤酵母中的分泌表达

根据枯草芽孢杆菌WHNB02植酸酶phyC基因全序列设计一对引物,采用PCR法从含有该基因的pUC18-phyC质粒上获得不含有信号肽序列的phyC基因表达片段,亚克隆到毕赤巴斯德表达载体pPIC9K的多克隆位点,并电转化毕赤巴斯德酵母GS115.经MD和MM平板筛选、酶活性测定,获得了阳性转化子PP9KC.首次在毕赤巴斯德酵母中实现了有生物学活性芽孢杆菌植酸酶的分泌表达,去糖基化试验表明该植酸酶的分子量为53.5 kD和50.9 kD糖基化程度不同的两种糖蛋白.用麦芽汁半合成培养基对PP9KC进行诱导培养,培养48 h后酶活可达到2453 U/mL,表达量为出发菌株的10.5倍.酶学性质分析表明,其酶促反应最适pH值为7.0,最适反应温度为65℃,经90℃处理10 min,残留酶活性为37℃时的78.2%.