高山花椰菜多酚氧化酶特性及酶褐变预防对策

用硫酸铵分级盐析及透析法分离提纯高山花椰菜多酚氧化酶(PPO)。用分光光度法测定PPO活力,分别测定了花椰菜PPO的最适pH、最适温度及vmax和Km值。结果表明,以邻苯二酚为底物,花椰菜的最适pH值为6.7,最适温度为55℃,vmax值为340.1unit.min-1,Km值为4.7mmol.L-1。温度适应范围广泛,与底物亲和力特别高。并据此结合山区气候和栽培特点提出了相应的预防花椰菜酶褐变对策建议。     

牡丹多酚氧化酶的酶学特性

【目的】研究影响牡丹试管苗多酚氧化酶（PPO）酶学特性的因素,为牡丹的高效组培提供参考。【方法】以牡丹品种“乌龙捧盛”为供试材料,采用分光光度计比色法,研究温度、pH值、PPO提取液添加量及底物的类型和浓度对牡丹PPO活性的影响。【结果】以邻苯二酚为底物时,牡丹PPO的最适反应温度与最适pH分别为25 ℃和6.0,最适PPO提取液添加量为1 mL。牡丹PPO的最适作用底物为咖啡酸,其最适浓度为0.08 mol/L。【结论】通过选择合适的pH值和培养温度,同时结合化学抑制剂调控牡丹PPO活性,可以达到在牡丹组织培养中减少褐化现象、提高试管苗生根率的目的。     

红枣多酚氧化酶酶学特性及其钝化动力学研究

本实验以新疆骏枣为原料,邻苯二酚为底物,采用分光光度法研究了红枣中多酚氧化酶（PPO）的酶学特性。结果表明：红枣PPO最适温度为45℃,最适pH值为6．8-7．2,最适底物浓度为0．402mol／L;最大反应速度Vmax=7．164U／min,Km=0．6714mM;当温度大于55℃时,热处理对PPO的钝化效果比较显著,80℃处理20min即可完全钝化红枣PPO;热处理对红枣PPO的钝化符合一级反应动力学,其ZT：32．78℃,Ea=29．658KJ／mol。     

蒲菜多酚氧化酶的酶学性质研究

[目的]研究蒲菜多酚氧化酶（PPO）的酶学性质。[方法]研究蒲菜PPO的吸收光谱和动力学性质,并对温度、pH、底物浓度、抑制剂等因素对蒲菜PPO活性的影响进行探索。[结果]蒲菜PPO催化邻苯二酚的产物在415 nm处有最大吸收峰,动力学方程为：V=0.982[S]/（4.97＋[S]）,其中,V为反应速度;[S]为底物浓度。蒲菜PPO最适温度为30℃,在95℃、2 min条件下可以有效地抑制蒲菜PPO活性;蒲菜PPO最适pH为6.8,当pH（5.4或pH（7.2时可以有效降低蒲菜PPO活性;柠檬酸、亚硫酸钠、抗坏血酸、EDTA-2Na等抑制剂对PPO均有抑制作用。[结论]蒲菜PPO的酶学性质研究结果可为蒲菜的研究开发提供依据。     

红肉桃皮中多酚氧化酶的酶学特性及结构表征

以红肉桃桃皮中多酚氧化酶(polyphenol oxidase,PPO)作为研究对象,采用Tris-HCl缓冲液进行提取并采用硫酸铵盐析法和柱层析法进行纯化,电泳得到单一的条带。根据米氏常数确定桃皮PPO的最适底物为邻苯三酚,采用分光光度计法测定桃皮中多酚氧化酶的活性,其最适温度为45℃、最适p H值为7.0~7.5,PPO在中性p H值环境中以及55℃以下更为稳定。分别应用圆二色谱仪、荧光光谱仪、动态散射光谱仪对PPO的结构进行表征。圆二色谱表明,该PPO二级结构包含α-螺旋、β-折叠、β-转角以及无规卷曲等结构,其含量分别为50.61%、32.47%、10.83%和6.21%。荧光光谱表明,该PPO最大发射波长为352 nm,相对荧光强度为133.9,表明荧光基团处于极性亲水环境中。动态散射光谱显示,该PPO粒径分布集中在255 nm处,表明其在溶液中以聚集形态存在。     

中华寿桃多酚氧化酶的特性研究

 【目的】对分离纯化后的中华寿桃果肉多酚氧化酶的酶学性质进行研究,探讨中华寿桃果肉褐变机理。【方法】以邻苯二酚为作用底物,用分光光度法在420 nm下测定不同pH、反应温度、底物浓度条件下桃果肉的多酚氧化酶（PPO）活性。【结果】中华寿桃果肉66 kD的PPO最适pH约为6.5,最适反应温度为60℃左右,该酶对温度有较强稳定性;该酶最适作用底物为绿原酸、儿茶酚和对羟基苯甲酸;FeSO4、EDTA和抗坏血酸等化合物可以抑制PPO活性,CaCl2、CuSO4和MnSO4等则起促进作用。【结论】该酶耐热能力强,适度低温、酸性条件、抗坏血酸处理等可以抑制该酶活性。     

菊苣根多酚氧化酶的酶学特性研究

【目的】研究菊苣根多酚氧化酶(PPO)酶学特性的影响因素,为菊苣根加工过程中酶促褐变的控制提供参考。【方法】以菊苣新鲜根为材料,从供试的3种三元酚、5种二元酚和4种单元酚底物中选出最佳反应底物,分析所选择底物的浓度、PPO提取液添加量、pH、温度及抑制剂对菊苣根PPO活性的影响,同时研究PPO的酶促动力学特征。【结果】菊苣根PPO的最适底物为焦性没食子酸,其最佳浓度为40mmol/L,菊苣根PPO的最适粗酶液添加量为0.4mL,最适pH和反应温度分别为7.0和35℃。PPO酶促反应动力学符合米氏方程,酶促反应的动力学米氏常数为0.39mmol/L,最大反应速率为217.39U/min。控制pH在4.8以下,采用0.4mmol/L柠檬酸和0.8mmol/L L-抗坏血酸复配,90℃处理10min或者100℃处理6min,均可基本抑制菊苣根PPO的活性。【结论】通过选择合适的pH和温度,同时结合化学抑制剂调控菊苣根PPO活性,可以减少菊苣根加工过程中的酶促褐变,从而提高加工产品的品质。     

褐蘑菇多酚氧化酶特性及其抗褐变剂的研究

采用分光光度法研究了褐蘑菇组织中多酚氧化酶(PPO)的酶学特性,柠檬酸、抗坏血酸、亚硫酸钠等抗褐变剂对PPO活力的影响.结果表明:褐蘑菇中PPO测定的最大吸收波长为420 nm,最适温度为45℃,最适pH值为6.55,在此条件下亚硫酸钠可强烈地抑制PPO的活性,有效防止褐变,抗坏血酸也有很好的抗褐变效果,而柠檬酸只有在高浓度时才对褐蘑菇的褐变有一定抑制作用.     

赛买提杏多酚氧化酶特性的研究

[目的]多酚氧化酶(PPO)会对杏加工生产产生重大影响,它不仅影响杏加工产品如杏酱等的色泽,而且也影响其品质,特别是在制作杏茶、杏汁饮料的过程中更为突出.所以,准确测定PPO活性,具有重要的生理和现实意义.[方法]以新疆主栽赛买提鲜杏为原料,对杏组织中PPO的特性进行了研究.[结果]杏多酚氧化酶最适反应pH为6.0,最适反应温度为25℃;杏多酚氧化酶的最适反应波长为400 nm,最适反应时间为6 min,当酶加入量为0.4 mL时,酶活性最大;60～80℃处理10 min,酶基本失活.[结论]丙酮粉与pH为6.0的磷酸缓冲液反应6 min,离心后制得粗酶液;一定量的磷酸缓冲液和邻苯二酚在25℃下保温10 min,添加0.4 mL酶液,在400 nm波长下,测定的PPO活性较为准确.     

火龙果果肉的酶促褐变及其抑制措施

以品种为红皮白肉的火龙果果肉为材料,对火龙果果肉中的多酚氧化酶(PPO)的特性进行了初步研究.通过其催化邻苯二酚氧化后产物的吸光度值的测量,分别研究了pH值、温度、反应时间以及肉桂酸、L-半胱氨酸、柠檬酸和抗坏血酸4种抑制剂等条件对PPO活性的影响.结果表明,以0.2 mol·L-1的邻苯二酚为底物时,其最适波长为410 nm,最适pH值为6.8,最适温度为30℃,温度超过50℃时该酶的活性明显降低,反应时间不宜超过15 min.在较短时间内几种添加剂对火龙果PPO的活性均表现出不同的抑制作用,其中以L-半胱氨酸的效果最为理想,而且2种添加剂协同作用时以L-半胱氨酸 抗坏血酸的效果最为理想.     

甘蓝型油菜黄籽与黑籽种皮多酚及PPO的比较

比较了相同遗传背景下的甘蓝型黄籽和黑籽油菜在种子形成过程中的多酚含量和多酚氧化酶(PPO)活性的动态变化,对种皮中的多酚氧化酶进行了同工酶分析.结果表明,黑籽的多酚含量和PPO活性明显高于黄籽.3对材料的6个样品均有4条相同酶带,其中黄籽均有5条谱带,黑籽比黄籽多1～3条谱带,且有1条Rf值为0.41的特异酶带.     

小麦多酚氧化酶研究进展

小麦面粉和面食品的色度是小麦磨粉品质和面食品的主要评价指标。特别是面条、馒头、饺子、烙饼等中式食品对白度的要求相当高。多酚氧化酶(PPO)与小麦面粉及其面食品在加工、贮藏中的褐变直接相关。同时,多酚氧化酶种类的遗传变异和表达差异也决定小麦籽粒中的PPO总活性高低,从而直接或间接影响面粉的白度。笔者综述了近年来小麦多酚氧化酶生化机理、分布和分子生物学遗传分析以及与品质关系等方面的研究进展,并且根据多酚氧化酶的表达特性,讨论了小麦高白度新品种选育的策略。     

外源乙烯胁迫对枇杷果实若干品质及PPO活性的影响

以“解放钟”枇杷（Eriobotrya japonica Lindl．cv．Jiefangzhong）果实为材料,研究浓度为10～20mg·L^-1、50～60mg·L^-1的外源乙烯胁迫对果肉硬度、可滴定酸（TA）、可溶性总糖（TS）等品质及多酚氧化酶（PPO）活性的影响。结果表明,50～60mg·L^-1外源乙烯处理贮藏20d、40d的硬度分别仅增加11．0％和35．7％,而对照增加了29．9％和49．4％;外源乙烯胁迫抑制了糖和酸的消耗,处理组贮藏40d的糖和可滴定酸均高于对照组;10～20mg·L^-1外源乙烯处理在贮藏前期会激发PPO活性,而50～60mg·L^-1外源乙烯则对PPO有抑制作用。     

磁场处理小白菜种子对其种子活力及叶片中PPO、SOD酶活性的影响

[目的]研究磁场处理小白菜种子对其种子活力及叶片中PPO、SOD酶活性的影响,为磁生物学的深入研究和探究磁场处理在小白菜生产中的应用及生物机制提供一定的理论依据。[方法]用梯度为0.4、0.8、1.2、1.6、2.0T的磁场强度处理小白菜种子,处理时间分别为5、10、15、20min,另设一个非磁场处理作对照（CK）。将各处理分成2组,一组用于种子活力的测定,另一组用于酶活的测定。[结果]经过磁场处理后,小白菜种子的发芽率在一定的磁场强度范围内随着磁场强度的加强而提高,其活力指标及小白菜叶片中PPO和SOD酶活性以1.2T15min和1.2T10min为最高。表明通过适度的磁场处理,可以提高小白菜种子的发芽率、活力指数和叶片中的酶活性,进而提高小白菜的抗病性。[结论]适宜的磁场强度和适当时间的磁处理可以提高小白菜种子的发芽率,且显著提高叶片中PPO、SOD酶活性。     

杏果实生长发育生理学研究

对大曹杏果实生长发育过程中呼吸速率、乙烯释放量、过氧化物酶（ＰＯＤ）、多酚氧化酶的变化规律研究表明,呼吸速率与乙烯释放量在落花后较高,而在果实发育过程中则保持较低水平,在果实进入核层硬化期,ＰＰＯ和ＰＯＤ活性均较强,这可能与木质素的大量形成有关。     

小麦两种主要防御酶的变化与抗白粉病的关系

对3个不同抗性小麦品种接种白粉菌前后,其POD、PPO酶活性及其同工酶的变化进行了研究.结果表明,接种前POD活性免疫品种最高,高感品种最低;接种后三者POD活性均有先升高后下降的趋势.免疫与高感品种接种1d后POD活性最高,中抗品种接种2d后POD活性最高.3个不同抗性品种接种前PPO活性无明显差异,免疫、中抗、高感品种分别在接种1d、2d、3d后,其PPO活性最高,且高感品种PPO活性出现先升高后降低的趋势.小麦叶片POD同工酶共出现5条酶带,免疫品种接种前后无酶带数目增减,只有一些酶带活性变化,中抗品种接种1d新增1条酶带e5,高感品种接种1d酶带e3缺失;PPO同工酶共出现8条酶带,接种1d时均有不同酶带缺失,接种5d时高感品种的PPO同工酶谱带新增1条酶带且E5和E8酶带变宽.     

不同基质对葛萝槭叶片生理指标的影响

为探索出适宜葛萝槭移植的最佳生长基质,以不同基质栽培的葛萝槭叶片为材料,采用生化测试的方法,对不同基质栽培的葛萝槭叶片中的PPO、POD活性及可溶性蛋白的变化进行测定分析,结果表明:处理2(主要成分为松针、菇渣、粉煤灰、羊粪)不仅有利于葛萝槭生长发育,而且有利于提高植物的抗性,为最佳基质配方。     

SO2对龙眼冷藏效果及货架寿命的影响

ＳＯ２处理结合低温贮藏,显著降低了龙眼果实的呼吸强度和果皮ＰＰＯ（多酚氧化酶）活性,出库后,仍能维持这种抑制效果,从而抑制了果皮褐变,改善了果实外观,延长了货架寿命。     

籽用南瓜苗期接种辣椒疫霉菌对POD、PPO活性影响的研究

先对29份材料进行抗性鉴定后,对抗性不同的籽用南瓜材料进行酶活性分析。结果表明,在健康植株中,过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)活性在抗、感品种中差异不明显;病菌侵染后POD活性在感病材料中增长幅度大于在抗病材料中的增长幅度,但感病品种酶活性下降的幅度比抗病品种下降的快;PPO活性在抗病材料中的增长幅度大于在感病材料中的增长幅度。接种后POD、PPO活性均是抗病品种高于感病品种,与抗病性呈正相关趋势。     

部分新疆小麦材料多酚氧化酶活性基因分布规律研究

[目的]了解新疆小麦材料多酚氧化酶(PPO)活性基因的等位变异组成和分布以及与PPO活性的关系,为小麦PPO活性的分子标记辅助选择奠定基础.[方法]利用PPO基因的功能标记PPO18、PPO29和PPO16对445份新疆冬春小麦材料进行2A和2D染色体上PPO等位基因Ppo -A1a、Ppo - A1b、Ppo - D1a和Ppo - D1b的检测,分析不同等位变异与PPO活性的相关性及变化趋势.[结果]PPO18在等位基因Ppo-A1a(高PPO)和Ppo - A1b(低PPO)中的分布频率为73.03;和26.97;,PPO16和PPO29在等位基因Ppo-D1a(低PPO)和Ppo - D1b(高PPO)中的分布频率76.63;和23.37;.Ppo -A1a与Ppo -A1b基因型的PPO活性平均值差异达极显著水平(P＜0.01).而Ppo- D1a与Ppo - D1b两者基因型的平均PPO活性差异不显著(P0.05);两个PPO基因的等位基因组合类型分布频率为:Ppo -A1a/Ppo - D1a(54.38;)、Ppo - A1a/Ppo-D1b( 18.65;)、Ppo -A1b/Ppo - D1a(22.25;)和Ppo -A1b/Ppo -D1b(4.72;);同时冬春小麦材料间PPO活性基因分布存在明显差异,总体来看,新疆小麦材料中高PPO活性的等位变异类型所占比例较高.[结论]PPO18、PPO16和PPO29标记可以作为小麦材料PPO活性鉴定有效工具.可直接利用此标记进行标记辅助选择.