进境船舶食品库面粉中携带小麦印度腥墨穗病菌的检验方法

天津口岸首次从进境船舶的食品库面粉中检出小麦印度腥黑穗病菌。本文结合进境船舶现场检疫，通过实验室内一系列的摸索试验，找到了进境船舶的食品库面粉中携带小麦印度腥黑穗病菌快速有效的检验方法，即直接镜检法。     

进境美国小麦中黑麦草腥黑穗病菌的检测和鉴定

从进境美国小麦洗涤液中发现一种类似小麦印度腥黑穗病菌的冬孢子,冬孢子大小为25.0~33.8(29.5±2.3)μm,球形至近球形,淡黄褐色至暗红褐色,半透明至不透明,外胞壁具深褐色疣状突起,突起表面观为锥形至平截状,有时呈不完全脑纹状,外被淡色透明胶质鞘。冬孢子处理后经通用引物Til1/Til4和U2/U10扩增,其扩增产物用黑麦草腥黑穗病菌Tilletiawalkeri的特异性引物W1/W4再次扩增可以得到760bp的产物,产物测序得到的序列和GenBank中黑麦草腥黑穗病菌菌株YRG-001(AF218063)的序列相似性为99%(717/719),和GenBank中小麦印度腥黑穗病菌菌株Bpop(AF218060)的序列相似性为96%(694/719)。实时荧光检测的结果表明黑麦草腥黑穗病菌的探针TWAL能得到阳性扩增曲线。根据冬孢子形态特征、PCR分析、实时荧光检测和序列分析的结果,将这种腥黑穗病菌冬孢子鉴定为黑麦草腥黑穗病菌(T.walkeri)。     

防城局截获小麦印度腥黑穗病菌

1999年3月13日,防城局检疫人员在对进境船舶“多宝”轮实施检疫时,发现食品舱中有来自印度西部“ＭＯＩＭＯＧＯＯ”港的加工粗糙、色泽灰黄、并略带鱼腥味的面粉,即取样回实验室检验。经室内检验,发现较多的病原菌冬孢子。根据病原菌形态,鉴定为我国进境植物检疫一类危险性病菌———小麦印度腥黑穗病菌ＴｉｌｌｅｔｉａｉｎｄｉｃａＭｉｔｒａ。随后将样品送南京动植物检疫局,由王良华和吴新华复核无误。发现疫情后,我局按有关规定立即对该面粉进行了封存,并对染疫的场地作消毒处理。截获小麦印度腥黑穗病菌,在防城口岸尚属首次。防城局截…     

面粉中小麦印度腥黑穗病菌的检疫鉴定

面粉中小麦印度腥黑穗病菌检疫的关键要点是分离孢子.为此,本文就如何从面粉样品中简便、快捷地分离与获得干净冬孢子进行了研究,并根据获得孢子多少与难易情况,采用30个孢子直径统计法和套式PCR检测法.与常规方法相比,这2种方法可以使检测时间缩短4～10倍.在样品中孢子极少的情况下,采用套式PCR检测方法,仅2个孢子就能作出定性判断,可以有效地避免小麦印度腥黑穗病菌漏检,进而提高口岸疫情检出率.     

TaqMan-MGB探针在小麦印度腥黑穗病菌和黑麦草腥黑穗病菌鉴定上的应用

根据小麦印度腥黑穗病菌Tilletia indica和黑麦草腥黑穗病菌T.walkeri核糖体ITS序列设计了两对通用引物和两条特异性探针,建立了小麦印腥印度腥黑穗病菌Tilletia indica和黑麦草腥黑穗病菌T.walkeri的实时荧光PCR检测方法,检测的灵敏度为1个冬孢子.这种检测方法可以直接用于样品小麦印腥和黑麦草腥黑穗病菌冬孢子的快速检测,整个检测过程缩短至1天.     

广州新沙口岸于麦麸中检出小麦印度腥黑穗病菌

<正>2015年1月广州新沙口岸于进境马来西亚麦麸中检出检疫性病原真菌小麦印度腥黑穗病菌(Tilletia indica Mitra),检疫性杂草具节山羊草(Aegilops cylindrica Horst)及其他有害生物共21种次,涉及麦麸252.540 t,货值61872.3美元。小麦印度腥黑穗病菌多数在运输工具检疫过程中于食品舱内面粉中检出,极少于货检中检出,该次于进境马来西亚麦麸中检出小麦印度腥黑穗病菌属全国口岸首次在麦麸中截获。     

应用聚合酶链反应技术鉴定印度腥黑穗病菌

用一对专化于印度腥黑穗病菌的引物Ｔ１１７Ｍ１（５＇－ＴＣＣＣＣＴＴＧ－ＧＡＴＣＡＧＡＡＣＧＴＡ－３＇）和Ｔ１１７Ｍ２（５＇－ＡＧＡＡＧＴＣＴＡＡＣＴＣＣＣＣＣＣＴＣＴ－３＇）可特异地扩增印度腥黑穗病菌产生一段８２５ｂｐ的产物，而稻粒黑粉病菌则不能被扩增。实验还表明，用聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法检测灵敏度可达到１００个未萌发的冬孢子，这为进口粮印度腥黑穗病菌的检疫提供了有力工具。     

小麦矮腥黑穗病在无积雪条件下发病的研究

小麦矮腥黑穗病在无积雪条件下发病的研究王圆俞晓霞（农业部植物检疫实验所１０００２９）小麦矮腥黑穗病ＴｉｌｅｔｉａｃｏｎｔｒａｖｅｒｓａＫｕｈｍ（简称ＴＣＫ）是我国进境植物检疫一类危险病害，病菌冬孢子能在土中存活６～７年，甚至长达１０年之久。冬孢子可随...     

γ射线对小麦印度腥黑穗病菌的灭活效应

小麦印度腥黑穗病菌 Tilletia indicaMitra 是我国一类对外植物检疫对象,迄今对该病的防治仍无十分有效的措施和免疫的小麦品种。本试验应用钴—60γ射线处理小麦印度腥黑穗菌冬孢子。当照射剂量为50万拉德时,冬孢子相对死亡率为99.7%。采用将该菌冬孢子悬浮液直接涂抹在1.5%水琼脂平板上的方法,获得了21%的萌发率。     

进境小麦中沙地牧草腥黑粉菌的鉴定

从上海口岸进境的澳大利亚小麦中发现一种类似小麦印度腥黑粉病菌的腥黑粉菌冬孢子，对该菌冬孢子进行了形态学特征和PCR检测，根据结果，将这种冬孢子鉴定为沙地牧草腥黑粉菌Tilletia ehghartaTle；本研究设计了T．ehrhartaea的特异引物Eh2/Eh4，结合引物Till／Til4建立了T．ehdmrtae的套式PCR检测方法。     

应用TaqMan MGB探针检测小麦印度腥黑穗病菌和黑麦草腥黑穗病菌

 以小麦印度腥黑穗病菌9个菌株和黑麦草腥黑穗病菌5个菌株及其近似种或相关种:稻粒黑粉菌、狼尾草腥黑粉菌、狗尾草腥黑粉菌、苏玛特腥黑粉菌、狐尾草腥黑粉菌、小麦网腥黑穗病菌和小麦矮化腥黑穗病菌共9种22个菌株为研究对象,通过序列比对分析,设计了检测小麦印度腥黑穗病菌及黑麦草腥黑穗病菌的TaqMan MGB实时荧光PCR引物和探针,优化了反应条件,筛选出特异性探针,分别建立了小麦印度腥黑穗病菌和黑麦草腥黑穗病菌实时荧光单重PCR和实时荧光双重PCR检测方法,其中实时荧光双重PCR检测方法实现了在同一PCR管中仅用5μL的反应体系,进行1次PCR反应就能特异性检测出小麦印度腥黑穗病菌或黑麦草腥黑穗病菌。本研究所建立的检测方法特异性强、结果可靠、检测速度快、成本明显降低,在文际应用中具有推广价值。     

京郊小麦腥黑穗病封锁除治与综合防治技术推广

小麦腥黑穗病又称为小麦普通腥黑穗病,以区别于小麦矮腥黑穗病(ＴＣＫ)。小麦腥黑穗病菌含有毒素三甲胺,人食用混有病菌孢子的面粉,可引起泻血、吐血;吸入孢子过多,会出现呼吸器官过敏症。麦粒内或麦麸中混入的菌瘿或孢子含量过大常引起家畜中毒,如含量超过0.6%,即可引起严重中     

5种药剂对小麦光腥黑穗病菌的毒力和孢子萌发形态结构的影响

采用琼脂平板孢子萌芽法测定了卫福 200、多菌灵、烯唑醇、戊唑醇和三唑酮5种药剂对小麦光腥黑穗病菌的抑制作用和毒力,同时检测了药剂对病菌冬孢子萌发形态结构的影响。结果表明,5种药剂在一定浓度范围内对病菌孢子萌发抑制作用随着药剂浓度提高而增强,对病菌的EC50分别为 1.6102、0.3038、4.4892、1.6103和 0.3896mg·L-1,多菌灵对光腥黑穗病菌的毒力高于其它4种供试药剂。通过光学显微镜和扫描电子显微镜观察表明,药剂作用下光腥黑穗病菌孢子萌发出现3种类型畸形,导致正常发育受到抑制。     

从进境船舶食品舱面粉中检出小麦印度腥黑穗病菌

１９９７年３月,张家港局检疫人员对载有印度豆粕的进港货轮进行检疫时,发现食品舱内存有１袋尚未开封的印度面粉。开袋检查时,面粉色泽灰暗,加工粗糙,带少量麦麸,闻之略有鱼腥味,取样回实验室分离检验,检出大量小麦印度腥黑穗病菌ＴｉｌｅｔｉａｉｎｄｉｃａＭｉ...     

中美小麦矮腥黑穗病菌鉴定合作研究:I.自发荧光显微学特性研究

 中美双方为探讨适用于进口粮检疫的小麦矮腥黑穗病菌(Tilletia controversa Kuehn,以下简称TCK)准确简便的鉴定方法,于1989~1992年进行联合试验。本文以美国不同时期和不同地域所收集的小麦矮腥黑穗病菌(TCK)和小麦网腥黑穗病菌(T.caries Tul.,以下简称TCT)共135个菌株为材料,对这两种病菌的自发荧光显微学特性,作了比较研究,建立了数学模型,并在人工污染样品中进行了应用研究,结果表明,自发荧光显微学法和LI-F方程,可以有效地鉴别TCK或TCT菌株,但如应用于鉴别进口粮中混合的或少量的TCK、TCT冬孢子,则其准确率随孢子含量的下降而降低。     

套式PCR直接检测印度腥黑穗病菌冬孢子

用印度腥黑穗病菌冬孢子制备模板DNA ,利用印腥特异性引物T3 /T6,T3 /T4和套式PCR(nestPCR)扩增技术直接检测印腥冬孢子 ,检测的灵敏度可达 1个冬孢子。检测时间缩短为 1天。这种简单、快速、灵敏、实用和准确的PCR检测技术适用于口岸印腥检疫的需要 ,解决了常规PCR检测中DNA制备需要萌发冬孢子和检测时间长的难题。     

中美小麦矮腥黑穗病菌鉴定合作研究 Ⅰ.自发荧光显微学特性研究

中美双方为探讨适用于进口粮检疫的小麦矮腥黑穗病菌(Tilletia controversa Kuehn,以下简称TCK)准确简便的鉴定方法,于1989～1992年进行联合试验。本文以美国不同时期和不同地域所收集的小麦矮腥黑穗病菌(TCK)和小麦网腥黑穗病菌(T.caries Tul.,以下简称TCT)共135个菌株为材料,对这两种病菌的自发荧光显微学特性,作了比较研究,建立了数学模型,并在人工污染样品中进行了应用研究,结果表明,自发荧光显微学法和LI-F方程,可以有效地鉴别TCK或TCT菌株,但如应用于鉴别进口粮中混合的或少量的TCK、TCT冬孢子,则其准确率随孢子含量的下降而降低。     

γ射线对小麦矮腥黑穗病菌的灭活效应

用γ射线对２种来源的小麦矮腥黑穗病菌冬孢子进行了辐照处理。冬孢子相对死亡率和剂量的自然对数值呈直线相关。辐照剂量加大，相对死亡率上升。辐照剂量为４０万ｒｄ时即有较好的灭活效应。     

小麦矮腥黑穗病菌冬孢子的春眠

由小麦矮腥黑穗病菌 Tilletia contro-versa 引起的小麦矮腥黑穗病尚未在春小麦上发现,即使有时春季气候条件适合冬孢子萌发和侵染。每月从大田采集病穗散落在土壤中的冬孢子,经1—3年,并于室内测定萌芽力。7月到1月采集的冬孢子萌芽量     

进境合成饲料,麦糖中小麦矮腥黑穗病菌的快速检验方法

文锦渡是全国最繁忙的陆路口岸之一。合成饲料，麦糖是进境主要植物产品之一。合成饲料都有小麦的成份，都潜在我国进境植物检疫一类危险性病害－小麦矮腥黑穗病菌的可能，但，它又不同于小麦，找不到小麦矮腥的病瘿 。只能在俣成饲料中找到矮腥的孢子。目前，未有合成饲料，麦糖中ＴＣＫ的详细检验方法，这就给现场的检疫，鉴定工作带来了麻烦，本文介绍进境合成饲料，麦糖的快速检验方法，为合成饲料，麦糖中小麦矮腥黑穗病菌的检