抗氧化剂对家畜精液冷冻保存效果的影响研究进展

家畜精液保存在畜牧生产实践中具有十分重要的意义,随着家畜人工授精技术的广泛应用,精液冷冻保存技术研究也更加深入。精液在冷冻保存的过程中,精子细胞会产生过量的活性氧,活性氧与精子细胞膜上的不饱和脂肪酸易发生氧化反应,破坏精子结构和功能的完整性,导致精液品质下降。抗氧化剂具有清除活性氧自由基的作用,可消除精液冷冻过程中所产生的过量活性氧,保护精子细胞免受氧化应激损伤,进而提高精液品质。本文主要对精子冷冻氧化性损伤机制及常用抗氧化剂进行综述,并对抗氧化剂的应用前景进行展望,以期为更进一步提高家畜精液冷冻保存品质,发挥良种优势提供理论依据与参考。     

浅析抗氧化剂对猪精液保存的影响因素

近年来，随着畜牧业的发展，家畜精液保存技术在生产实践中发挥着重要作用。在精液保存过程中，体内外环境的差异打破了精子所处环境的动态平衡，保存期间产生大量的活性氧（reactive oxygen species，ROS）。过量的ROS会与精子质膜发生氧化反应，破坏精子的功能和结构完整性，使其活力和质量降低，影响受胎率。为了降低ROS对精液的损伤，加入外源抗氧化剂可以有效抑制和清除ROS，避免精子细胞受到破坏，进而提高精液品质。文章对抗氧化剂的作用机制、抗氧化剂的种类以及在猪精液保存上的应用等方面进行综述。     

抗氧化物质对提高家畜冻精受精能力的研究进展

超低温冻存技术将低温生物学与生殖生物学紧密结合在一起,并在生命科学领域得到了广泛应用。在生殖生物学领域,配子与胚胎的超低温冻存有着广阔的研究前景。目前,常用于家畜繁殖育种的冷冻精液包括常规冻精液和性控冻精,精液经冷冻解冻,尤其是性控冻精在制备时经稀释、染料、激光、分离加压、冷冻以及受精时精液解冻等过程,均会产生大量活性氧(ROS)。ROS破坏精子内部抗氧化防御体系平衡,精子发生氧化应激损伤,造成精子质膜脂质过氧化(LPO)、DNA损伤、凋亡等,影响精子受精能力及受精卵的发育。内源性抗氧化剂不足,补充外源性抗氧化剂成为必然选择。近年来,抗氧化物质在家畜常规冻精中的研究日益增多,但在性控精液中研究很少。本文综述了番茄红素、抗坏血酸、白藜芦醇、褪黑素这几类抗氧化物质对降低家畜常规冻精及性控冻精氧化应激损伤作用机理的研究进展,以期筛选出高效的抗氧化剂以提高冻精质量。     

动物精液质量检测方法研究进展

家畜精液质量的检测对于人工授精技术和体外受精技术的应用具有重要意义。目前,在人类生殖临床和畜牧生产中,评定精液质量的方法大多是几个指标联合检测,使得精液质量评价的结果更加科学和准确。文章综述了近年来家畜精液质量检测的新技术、新方法和新进展,以便较确切的反映精子的质量与受精能力。     

公猪精液质量与精子脂质成分相关性研究

【目的】建立公猪精液品质与精子脂质成分之间的相关性,为公猪精液品质准确评价提供支撑。【方法】本研究采集了大白和长白等代表性品种公猪的精液,使用计算机辅助精子分析(computer-assisted sperm analysis, CASA)系统对精子密度、精子活力、精子畸形率和精液体积等精液品质指标进行检测。根据精子活力将精液样品分为正常活力(≥70%,n=11)和低活力(<70%,n=11)两组,利用UPLC-Q-Exactive-Orbitrap/MS对两组精子样品进行非靶向脂质组分析。采用t检验(t tests)、偏最小二乘判别分析(partial least squares discriminant analysis, PLS-DA)和相关性分析(correlation)等统计分析方法对脂质组学检测结果进行多元化分析。根据对分类具有重要贡献的变量(variable important in projection, VIP)值>1和错误发现率(false discovery rate, FDR)<0.05的双重标准进行筛选,得到两组精子样品之间差异脂质分子。【结...     

维生素E对德国牧羊犬精液4℃保存效果的影响

正犬精液4℃冷藏短期保存一段时间后精子质量较好,一般使用阴道输精方式就可以获得较高的受孕率,操作上相对简单,易于掌握,成本较低,适合短距离内实现犬的人工授精。而氧化应激是在精液保存过程中使精子受精能力下降的原因之一。精子质膜包含大量的不饱和脂肪酸,易受到过氧化损伤,破坏质膜完整性,使精子细胞功能受到损伤,导致精子死亡或减少精子的活力。维生素在精液保存中的应用对于提高精子质量具有非常重要的意义。维生素E     

维生素B12、E和C在家畜精液保存中的应用

家畜精液保存时,向稀释液中添加一定量的维生素B12、E或C,在提高精液品质方面具有重要的作用。精液稀释液中添加维生素B12,具有维持精子顶体完整率,延长精子体外存活时间和提高解冻后的精子活力的作用。维生素E是重要的抗氧化剂,能通过抑制自由基的形成,阻止诱发的膜脂质发生过氧化,从而维持精子顶体膜的完整,提高精子顶体完整率和降低精子畸形率;维生素E还能防止精子发生冷休克,提高冻精解冻后的精子活力,从而提高受精率。维生素C作为抗氧化物质,能有效地防止冷冻精子磷脂发生过氧化,提高解冻后的精子活力,延长精子在体外存活的时间;维生素C的抗氧化作用还表现在能够保护精子细胞中的遗传基因DNA免受氧化破坏。     

奶牛圆形、长形、成熟精子细胞微量RNA制备和含量分析

本研究旨在探究奶牛变形精子细胞获取方法、建立稳定奶牛精子RNA提取体系及分析单个生精细胞RNA含量变化。采用激光显微捕获技术结合冰冻切片,采集奶牛圆形、长形精子细胞样品,利用附睾尾精子浮游法获得成熟精子,通过对已报道的小鼠、奶牛及人类精子RNA制备方法的尝试和比较,获得RNeasy Kit最佳奶牛精子RNA制备方法,并用PicoPure RNA Isolation Kit对圆形和长形精子细胞进行RNA制备,筛选去除白细胞、上皮细胞等体细胞污染及基因组DNA污染的反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测方法,并对生精细胞RNA含量进行单因素方差分析。结果表明,激光显微切割技术可有效捕获圆形、长形精子细胞;通过RNeasy Kit获得的牛精子RNA纯度高、质量好,单个精子RNA含量为0.023~0.025pg;同时,随精子细胞变形,其RNA含量显著降低,其中圆形精子到成熟精子RNA含量降低75倍。本研究从复杂样品取样、微量RNA细胞转录本制备与检测等方面,为精子发生与变形机理研究提供重要参考。     

应用电子计算机自动化分析家畜精液品质

<正> 家畜精液检查的目的是鉴定精液品质优劣,也就是给精液定一个应用标准。常规的精液品质检查包括精液量、精子密度、精子活力(率),精子细胞形态等,其检查过程较为复杂和费时,且常规的检查方法对活力的评定只是主观的估价,不是客观的测定。另外,常规方法不能测定详细的精子运动情况,对精子运动特性的客观测定方法,过去是利用照像技术,分析精子的运动轨迹,如用暗视野定时曝光技术和显微摄像技术等。但是这些技术非常烦琐复杂和费时。     

羊冷冻精液生产过程中的质量控制

羊冷冻精液人工授精，是家畜繁殖技术上的一次飞跃。但如何获得优良的羊冻精，保证较高的受胎率，仍是羊冷冻精液生产中的一个重大课题。笔者通过多年羊冷冻精液生产，从提高羊冻精质量方面，谈点粗浅看法。 1 原精液质量的控制 1．1 种公羊饲养管理的好坏，将直接影响原精液的质量，这是很重要的。 1．2 人工授精要求卫生条件特别高，杂质、污垢、微生物、微量药品等均严重危害精子的生命，而导致不孕。所以凡接触……     

Seminal plasma components in camelids and comparisons with other species

Camelid semen is characterized by a highly viscous, low-volume ejaculate with a low concentration of spermatozoa that exhibit low progressive motility. The viscous seminal plasma is currently the major impediment to the development of assisted reproductive technologies (ARTs) in camelids. To advance ARTs such as sperm cryopreservation and artificial insemination in camelids, it is necessary to identify the cause of the viscosity and gain an understanding of the role of seminal plasma components on sperm function and fertility. Numerous compounds and proteins have been identified as mediators of sperm function and predictors of fertility in other livestock species, and understanding the importance of specific proteins has progressed the success of ARTs in these species. Current knowledge on the components of camelid seminal plasma is outlined, together with the implications of these components for the development of ARTs in camelids. The cause of semen viscosity, as well as proteins that are present in camelid seminal plasma, is described for the first time. Seminal plasma components are compared with those of other species to hypothesize their role in sperm function and fertility.     

动物精液品质评定方法的研究进展

人工授精和体外受精技术的广泛应用,使精液保存技术得到了快速发展。精子的质量和功能状态直接影响其受精能力。文章综合阐述了近几年动物精液品质评定的方法:精子质膜完整性检测、线粒体活性的测定、受精能力的检测和精液中酶活性的测定。     

多不饱和脂肪酸对动物精液品质影响的研究进展

多不饱和脂肪酸(PUFA)主要分为ω-3 PUFA和ω-6 PUFA,是精子质膜脂质的主要成分,对精子抗氧化、提高精子质膜流动性、维持精子结构完整性及睾酮合成等具有重要作用。不同类型PUFA对精液品质的作用有所不同,ω-6 PUFA中的花生四烯酸(AA)能够促进睾酮的分泌,但精浆中过量的AA可能诱导氧化应激;亚油酸(LA)同样可提高体内睾酮水平,共轭亚油酸(CLA)可降低精子的氧化应激;动物体内少量的二十二碳五烯酸(DPA)不仅能参与精子的运输过程,还能提高精子的抗氧化能力。ω-3 PUFA中的α-亚麻酸(ALA)具有抗氧化作用并能刺激睾酮的合成,二十二碳六烯酸(DHA)作用与ALA相似,可提高精子的抗氧化能力,同时可促进睾酮合成;二十碳五烯酸(EPA)对精子结构及睾酮合成具有调节作用。适当的ω-6/ω-3 PUFA比例对精子的活力、质膜结构、脂质组成和顶体反应均具有重要的调节作用。PUFA对精子的作用可因添加的方式、类型、ω-6/ω-3PUFA的比例及动物种类的不同而有所不同。近年来,PUFA对动物精液品质作用的相关研究取得了较大进展,但其提高精液品质的作用机制仍需进一步深入探讨。作者综述了在饲粮或精液稀释液中添加不同类型的ω-3 PUFA、ω-6 PUFA及ω-6/ω-3 PUFA比例对精子的影响,以期为深入了解PUFA在动物精液生产中的应用提供理论参考。     

ω-3多不饱和脂肪酸对公猪精液质量的影响及其机制

在规模化养猪生产中,公猪的精液品质直接影响母猪的繁殖性能,这对猪场的生产成绩非常重要.多不饱和脂肪酸(PUFA)对精子质膜的流动性和脂质过氧化反应的敏感性有重要作用,同时也影响精子的授精能力.研究表明,在公猪饲粮中添加ω-3 PUFA能提高公猪精液品质,但效果重复性还不稳定;公猪饲粮中添加ω-3 PUFA能增加猪精子中ω-3 PUFA的含量和延长精液的保存时间.本文主要综述公猪饲粮中添加ω-3 PUFA对公猪精液品质的影响及其主要的作用机制,为其在现代规模化养猪生产中有效提高精液品质、猪场生产成绩和经济效益提供参考.     

家禽附睾功能及其对睾丸后精子成熟调控机制研究进展

睾丸内的精子虽已成型,但仍需要在附睾中经过一系列修饰,使形态结构和功能进一步变化,才能获得运动和受精能力,这个过程即精子成熟。与哺乳动物相比,家禽附睾发生一定退化,但近年来越来越多的研究表明家禽附睾对精子成熟有调控作用。在畜禽良种繁育体系中,精子功能直接与繁殖效率高度关联,影响制种成本和养殖效益。因此,挖掘家禽精子功能和精液品质的调控机制,对于改善雄性不育、建立家禽繁殖性能的选育方法和改良技术具有重要的应用价值。本文将对家禽附睾功能及其对精子睾丸后成熟的作用机制研究进展进行综述,以期为进一步研究附睾的家禽繁殖性能调控机制奠定基础。     

猫人工授精技术研究进展

人工授精技术是一种较先进的辅助生殖技术,可提高繁殖育种的效益,但因猫类较独特的生殖特点,其人工授精技术发展受限。近年来,科研人员和临床工作者借鉴其他物种相对成熟的人工授精技术,结合猫类生殖特点,对猫人工授精过程中精液采集、精液品质评估、精液保存、刺激母猫排卵方式及具体的人工输精等相关技术进行了优化和创新,如开发了新颖实用的尿导管法采精技术以采集猫精液;在传统精液品质评估的基础上,配合使用荧光染色技术、流式细胞技术及体外受精技术对猫精液品质进行评估;探索不同冷冻液配方及冷冻程序对猫精液保存效果的影响,并尝试使用超快速冷冻法保存公猫遗传物质;研究使用不同种类及不同剂量的激素对诱导母猫发情和排卵效果的差异,以及不同输精部位、方法及时机对母猫妊娠结果的影响等。尽管其中一些新技术与方法已在试验动物中彰显出了其实际应用潜力,但当下依旧还存在操作相对复杂、成本较高、效果低于预期等问题,导致目前猫人工授精技术的应用较局限,不如在犬或其他动物中应用广泛,未来还需更进一步研究和探索才能满足临床实际应用的需要。文章就上述猫人工授精技术中各个方面的研究进展进行了综述,以期为该技术的进一步研究和应用提供参考。     

Evaluation of cryopreserved boar semen after supplementation sericin form silkworm (Bombyx mori) in semen extender

Boar cryopreserved semen is scarcely used for artificial insemination due to its quality which is largely reduced by membrane lipid peroxidation. This present study was designed to improve the post‐thawed boar semen quality by determining the optimal level of sericin supplementation (antioxidants) in semen extender. Five levels of sericin supplementation between 0% and 1% (w/v) were examined. Semen was frozen by the liquid nitrogen vapor method, thawed slowly at 5°C for 5 min, and used for the evaluation of sperm quality. The results indicated 0.5%–1% sericin supplementation was more effective on maintenance of sperm viability, acrosome integrity, and mitochondrial functions during freezing–thawing. Moreover, 0.75% sericin supplementation was most protective toward total sperm motility and sperm progressive motility. Additionally, 0.25%–0.75% sericin supplementation significantly suppressed increases in the index of lipid peroxidation. In conclusion, 0.75% sericin is recommended as an alternative component of the freezing extender to improve cryopreserved boar semen. However, further research using AI will be necessary to demonstrate that this indication can be applied to the production of offspring in the farms.     

冻存液添加蜂王浆主蛋白对精子品质的影响

目的 精液冷冻保存作为人工授精不可或缺的一个技术环节,对优质畜禽种群的繁衍和保存有着至关重要的意义。目前,因精液冻存时冻存液成分、冷冻方法和外部氧化应激等因素影响,导致冻存精液品质不一。蜂王浆（RJ）已被证明能提高动物精液品质,蜂王浆主蛋白（MRJPs）作为RJ主要生物活性成分物质,具有多种生物活性和抗氧化能力。方法 为提高冻存精子品质,本研究开展了在公牛精液冻存液中添加不同浓度（0 g/25 mL、0.01 g/25 mL、0.02 g/25 mL、0.03 g/25 mL、0.04 g/25 mL）的MRJPs冻干粉,对冻存48 h后解冻精子的总活力、前进性活力、畸形率等相关参数进行了观察评估。结果 添加MRJPs呈浓度依赖性方式显著降低精子总活力、快速前进性活力、缓慢前进性活力和直行性活力（P<0.05）,而且精子畸形率和精子原地移动活力与对照组相比无显著差异（P> 0.05）。结论 精液冻存液中添加MRJPs会抑制冻存精子活力,因此,对MRJPs能以何种方式提高精液品质的研究还需要进一步开展。