鸡马立克氏病活疫苗免疫效力比较试验

用ＨＶＴ冻干苗、ＨＶＴ细胞结合苗、ＣＶＩ９８８细胞结合苗、ＳＢ１＋ＦＣ１２６双价活疫苗、３０１Ｂ／１＋ＦＣ１２６双价活疫苗和Ｚ４＋ＦＣ１２６双价活疫苗等６种鸡马立克氏病（ＭＤ）疫苗免疫ＳＰＦ白来航鸡或普通伊莎鸡，用鸡马立克氏病病毒（ＭＤＶ）强毒ＧＡ株、京－１血毒以及鸡马立克氏病超强毒ｖｖＭＤＶ－Ｍｄ５毒株分别攻击进行免疫效力比较试验。试验表明，ＭＤ单价苗的免疫效力强弱顺序依次是ＣＶＩ９８８、ＨＶＴ细胞结合苗和ＨＶＴ冻干苗，这３种ＭＤ单价苗均能给免疫鸡群提供有效的免疫保护力。ＳＢ１＋ＦＣ１２６、Ｚ４＋ＦＣ１２６和３０１Ｂ／１＋ＦＣ１２６等３种ＭＤ双价苗免疫效力显著高于ＭＤ单价苗，均能给免疫鸡群提供较强的免疫保护力，并能有效地抵抗ｖｖＭＤＶ－Ｍｄ５毒株的致瘤作用。Ｚ４＋ＦＣ１２６和３０１Ｂ／１＋ＦＣ１２６ＭＤ双价苗免疫效力无显著差异     

鸡马立克氏病单价活疫苗免疫效力比较试验

用农业部南京药械厂和三家外国动物保健品公司生产的４种火鸡疱疹病毒（ＨＶＴ）冻干苗、实验室制备的ＣＶＩ９８８细胞结合苗和ＨＶＴ细胞结合苗等６种鸡马立克氏病（ＭＤ）单价活疫苗免疫１日龄ＳＰＦ白来航鸡，８日龄时用鸡马立克氏病强毒（ｖＭＤＶ）ＧＡ株攻击，同时以Ｚ４＋ＦＣ１２６双价活疫苗作对照，进行免疫效力比较试验。结果表明，６种ＭＤ单价活疫苗均能使免疫鸡群获得对ｖＭＤＶ攻击的免疫保护力，免疫效力强弱顺序依     

微量PCR检测鸡马立克氏病病毒早期感染

为了建立一种监测鸡群马立克氏病病毒（ＭＤＶ）早期感染的微量ＰＣＲ方法,根据血清Ⅰ型马立克氏病病毒（ＭＤＶ１）基因组ＢａｍＨＩ－Ｌ片段的核酸序列设计了１对寡核苷酸引物,用含０．３ＵＴａｑ酶的１０μＬ反应体系分别扩增了ＭＤＶ１型（京－１株、ＭＤ１１／７５ｃ株）、ＭＤＶ２型（ＳＢ－１株）和ＨＶＴ（ＦＣ－１２６株）的核酸,并用京－１株感染细胞ＤＮＡ作了敏感性试验。结果显示,该引物对ＭＤＶ１型病毒特异,京－１株和ＭＤ１１／７５ｃ株都扩增到４２５ｂｐ的核酸条带,而ＳＢ－１株、ＦＣ－１２６株和正常ＣＥＦ细胞的ＤＮＡ都没有得到任何条带;敏感性试验结果表明,微量ＰＣＲ能够检测到０．１ｐｇ的京－１株感染细胞ＤＮＡ;对京－１株感染鸡,在接种后第５天就能在血液细胞中检测到ＭＤＶＤＮＡ。微量ＰＣＲ可望成为监测鸡群ＭＤＶ早期感染的一种快速、有效的方法。     

不同鸡MD疫苗免疫鸡及强毒攻击后羽囊排毒规律

分别以７种鸡ＭＤ疫苗免疫ＳＰＦ鸡和狼山鸡,用琼脂扩散试验（ＡＧＰ）检查鸡群ＭＤＶ强毒攻击后不同时期的羽囊抗原,结果表明,免疫组鸡羽囊排毒高峰推迟,排毒率下降,排毒高峰维持时间短,不同疫苗免疫不同品种鸡后排毒情况有差异,ＣＶＩ９８８和两种二价苗效果优于ＨＶＴ苗。     

PCR法检测血清I型马立克氏病病毒及其敏感性试验的研究

以人工合成的针对血清Ｉ号马立克氏病病毒（ＭＤＶ１）Ａ抗原基因（ｇＡ）部分序列的两端寡聚核苷酸为聚合酶链反应（ＰＣＲ）的引物，分别对马立克氏病病毒血清Ｉ型（京－１株，ＭＤ１１／７５Ｃ株）；２型（ＳＢ－１株）；３型（火鸡疱疹病毒的ＦＣ１２６株）毒株和ＧＡ株ＢａｍＨＩ Ｂ片段的ＰＡＣＹ１８４克隆重组质粒ＤＮＡ进行基因扩增反应及其敏感性试验。结果表明，该引物不仅对ＭＤＶ１具有较强的特异性，而且由此引物引导     

马立克氏病病毒囊膜糖蛋白B抗原Ⅰ型特异性和群共同性决定簇的单克隆抗体

用能表达马立克氏病病毒（ＭＤＶ）糖蛋白Ｂ（ｇＢ）的重组杆状病毒感染的Ｓｆ９细胞免疫小鼠，制备针对ＭＤＶｇＢ的单克隆抗体。以Ⅰ型马立克氏病病毒ＧＡ株感染的鸡胚成纤维细胞作为检测抗原，同时以免疫荧光试验（ＩＦＡ）和酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）来筛选杂交瘤细胞，结果获得了ＩＦＡ和ＥＬＩＳＡ均为阳性的２株单克隆抗体细胞株，定名为ＢＡ４和ＢＤ８。在ＩＦＡ和免疫沉淀试验中，单抗ＢＤ８与Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型ＭＤＶ均呈阳性反应；单抗ＢＡ４只对Ⅰ型ＭＤＶ（包括ＣＶＩ９８８疫苗株）呈阳性反应。免疫沉淀反应进一步确证２株单抗识别的是ＭＤＶ糖蛋白Ｂ抗原。     

表达马立克氏病病毒CV1988／Rispens糖蛋白B重组鸡痘病毒的免？…

用表达马立克氏病病毒（ＭＤＶ（Ｉ型疫苗株ＣＶ１９８８／Ｒｉｓｐｅｎｓ糖蛋白Ｂ（ｇＢ）基因的重组鸡痘病毒（ｒＦ－ＰＶ－ｇＢ／Ｒ）和鸡痘病毒（ＦＰＶ）疫苗株２８２Ｅ４免疫１日龄不同品种的鸡,来评价２种病毒株的安全性及免疫母源抗体的商品是我毒性,而对无毒源抗体的ＳＰＦ鸡的毒性则不同。斑点杂交和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交产,ｆＦＰＶ－ｇＢ／Ｒ中无氨苄青霉素的抗性基因。     

对几种血清I型鸡鸡马立克氏病疫苗的比较性评估

本文比较了４种血清Ｉ型马立克氏病（ＭＤ）单价弱毒疫苗其及其与血清ＩＩ型和ＩＩＩ型病毒混合多价疫苗在安全性及效力方面的差异,以０．２ｍｌ的剂量皮下接种１日龄母源抗体阳性的雏鸡。接种后５天,所有的疫苗接种鸡及时对照鸡都用ＭＤ强毒株－Ｍｄ－５或ＲＢ１／Ｂ株攻毒。血清Ｉ型单价疫苗的保护指数由５６至８０以上不等。Ｉ型毒＋ＨＶＴ（ＩＩＩ型）疫苗的保护指数亦有很大的提高。用ＨＶＴ＋ＳＢ－１或ＨＶＴ＋３０１Ｂ／１     

应用聚合酶链反应鉴别诊断马立克氏病病毒及免疫效果监测

应用３对引物建立了３套聚合酶链反应检测体系。用该技术分别检测马立克氏病毒１型，３型毒株，并能鉴别１型致癌性强毒株和非致癌性弱毒株；可从强毒感染 病鸡病变脏器和弱毒免疫的ＳＰＦ雏鸡不同时期采集的弱髓中检测到ＭＤＶ１型病毒的ＤＮＡ；可鉴别强毒发病鸡羽髓和弱毒免疫鸡羽髓。以羽髓为检测材料，应用上述ＰＣＲ技术可以ＭＤＶ１型弱毒疫苗免疫鸡群进行免疫效果监测。     

抗菌药对马立克氏病活疫苗毒性的作用

用不同剂量的青霉素钾、硫酸链霉素、硫酸卡那霉素、硫酸庆大霉素和恩诺沙星等５种常见抗菌药加入ＨＶＴ冻干菌、ＣＶＩ９８８细胞结合苗和Ｚ４＋ＦＣ１２６双价活疫苗中,作用１ｈ后,分别取样计数,研究其对马立克氏病（ＭＤ）疫苗的毒性作用。结果表明：５种抗菌药加入ＭＤ疫苗稀释液后,ｐＨ值变化较大,ＭＤ疫苗空斑数显著减少,以至使ＭＤ疫苗失效。     

马立克氏病病毒囊膜糖蛋白B抗原I型特异性和群共同性决定簇的…

用能表达马立克氏病病毒（ＭＤＶ）糖蛋白Ｂ（ｇＢ）的重组杆状病毒感染的Ｓｆ９细胞免疫小鼠，制备针对ＭＤＶｇＢ的单克隆抗体，以Ｉ型马立克氏病病毒ＧＡ株感染的鸡胚成纤维细胞作为检测抗原，同时以免疫荧光试验（ＩＦＡ）和酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）来筛选杂交瘤细胞，结果获得了ＩＦＡ和ＥＬＩＳＡ均为阳性的１株单克隆抗体细胞株，定义名ＢＡ４和ＢＤ８。在ＩＦＡ和免疫沉淀试验中，单抗ＢＤ８与Ｉ，ⅡⅢ型ＭＤＶ均呈阳     

鸡马立克氏病的免疫预防

马立克氏病（ＭＤ）是严重危害养鸡业的疾病之一。７０年代以来，火鸡疱疾病毒（ＨＶＴ）疫苗的问世，使得本病造成的损失大大降低。但近年来，世界各地相继发现了强毒力的马立克氏病病毒（ＶＭＤＶ）及毒力极强的马立克氏病病毒（ｖｖＭＤＶ），疫苗免疫失败屡屡发生，给本病的防制带来了新的挑战。一、疫苗的种类目前常用的ＭＤ疫苗可分为三种类型。Ｉ型疫苗：为人工培育致弱的疫苗，如ＣＶ１９８８、８１４株；Ⅱ型疫苗：为自然筛选的无毒株疫苗，如ＳＢ－１、Ｚ４株；血型疫苗：即ＨＶＴ疫苗。另外，还有二价和三价疫苗，如ＳＢ－１＋Ｈ…     

鸡马立克氏病Z4＋Fc126双价活疫苗配比试验

本研究用不同剂量的Ｚ４和Ｆｃ１２６配制成鸡马立克氏病双价活疫苗做配比试验。２个试验８种配比的Ｚ４和Ｆｃ１２６双介活疫苗免疫易感鸡，攻毒保护试验结果表明，Ｚ４无论与Ｆｃ１２６细胞结合毒还是与Ｆｃ１２６冻干毒配成双价活疫苗，均能给免疫鸡群提供坚强的免疫保护力，Ｚ４与Ｆｃ１２６间存在很强的免疫协同作用，即使Ｚ４剂量小至仅占疫苗病毒ＰＦＵ总数的１０％，这种协同作用仍能使免疫鸡群产生较强的免疫保护力。     

马立克氏病病毒血清2型与3型之间的保护协同机理

应用马立克氏病病毒（ Ｍ Ｄ Ｖ）２ 型 Ｚ４ 株和 ３ 型 Ｈ Ｖ Ｔ 联合和单独免疫鸡，结果表明，双价疫苗免疫的鸡，其 Ｈ Ｖ Ｔ 病毒血症与单独 Ｈ Ｖ Ｔ 免疫鸡相比，差异不显著，但是联合免疫能诱导机体产生更强的抗 Ｍ Ｄ Ｖ１型的细胞和体液免疫应答。疫苗保护试验进一步证实，双价疫苗明显优于单价疫苗，能显著减少 Ｍ Ｄ Ｖ 强毒在体内生产性感染和潜伏感染的水平，减少 Ｍ Ｄ 的肿瘤发生率。     

多聚酶链反应区分血清Ⅰ型MDV强弱毒株

选用血清Ⅰ型马立克氏病病毒（ＭＤＶ＿１）基因组中位于１３２ｂｐ正向重复序列两侧的２段寡聚核苷酸为多聚酶链反应（ＰＣＲ）的引物，分别对Ⅰ型ＭＤＶ强毒株（京－１株）和弱毒株（Ｍｄ１１／７５Ｃ株）的核酸进行基因扩增。结果显示：该弱毒株核酸基因中含６个或更多个拷贝数的１３２ｂｐ正向重复序列，而强毒株核酸基因中仅含２个，相同引物对Ⅱ型、Ⅲ型ＭＤＶ（ＳＢ－１株，Ｆｃ１２６株）和禽网状内皮组织增生病病毒（ＲＥＶ）核酸作ＰＣＲ扩增，未检出任何核酸片段。     

MD疫苗免疫雏鸡vMDV攻击后免疫器官组织抗体生成细胞的变化

本实验用马立克氏病（ＭＤ）三价疫苗（ＳＢ－１＋８１４＋ＨＶＴ）和火鸡疱疹病毒（ＨＶＴ）疫苗分别肌肉注射免疫１日龄ＡＡ肉鸡,１５日龄腹腔注射ＭＤ强毒（ｖＭＤＶ）,攻毒后５,２５,４５和７５ｄ,以彩色免疫金银染色法检测实验雏鸡法氏囊,脾脏,盲肠扁桃体和哈德尔腺的ＩｇＧ,ＩｇＭ和ＩｇＡ抗体生成细胞的动态变化,结果发现;ＭＤ强毒攻击后,免疫雏鸡法氏囊和脾脏中ＩｇＧ,ＩｇＭ和ＩｇＡ抗体生成细胞较对照攻毒雏鸡     

鸡马立克氏病Ⅰ型弱毒株的选育

本研究利用从国外引进的鸡马立克氏病Ⅰ型弱毒疫苗株，采取回归无特定病原（ＳＰＦ）雏鸡和在细胞培养物上交替接种的方法，连续传代５次后，进行免疫效力试验的结果表明，本研究选育的ＭＤＶ－Ｇ１毒株含１０，０００和２，０００独斑形成单位（ＰＦＵ）／只鸡剂量试验组对ＭＤ的保护率均达１００％；未经选育的进口ＭＤＩ型弱毒商品疫苗２，０００ＰＦＵ／只鸡剂量试验组，对ＭＤ的保护率为８６．７％；而常规使用的ＨＶＴ商品疫苗     

马立克氏病病毒的分离与鉴定

从广西不同地区患马立克氏病的鸡群分离出１０株马立克氏病毒，命名为ＭＺ１、Ｅ１、Ｅ２、Ｅ３、Ｅ４、Ｇ２、Ｌ１、Ｇ５、Ａｎ７、Ｎ。用ＭＤＶ分型单克隆抗体对Ｅ４、Ｌ１、Ｇ２、Ａｎ７、Ｎ毒进行血清型鉴定，结果除Ｅ４疑有血清Ⅱ型与血清Ⅰ型ＭＤＶ同时存在外，其余均为血清Ⅰ型ＭＤＶ。     

液氮保存的马立克氏病疫苗与冻干保存疫苗有哪些特性

马立克氏病（ＭＤ）疫苗毒可分为三种不同的血清型，所有用于制备ＭＤ疫苗的毒株均来自于这三种血清型。血清Ⅰ型疫苗：包括全部的ＭＤ强毒和一些毒力相对较弱的病毒，血清Ⅰ型疫苗毒全部是细胞结合性疫苗毒，因此，必须超低温（在液氮中）贮存。于液氮中保存的目的是为了保持贮存期间结合疫苗毒细胞的活力，保证注射后疫苗毒的侵袭力和增殖力。如ＲＩＳＰＥＮＳＣＶＩ９８８细胞结合性疫苗。血清Ⅱ型疫苗：包括一些天然无致病性分布和广泛的ＭＤ病毒，用于制苗的毒株对于免疫鸡群具有协同保护作用，虽然这些病毒本身也能够提供部分保护作用…     

马立克氏病毒单克隆抗体的制备及应用

用ＭＤ１１／７５ｃ，ＳＢ１，ＨＶＴＦＣ１２６三个马立克氏病毒株分别兔疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠，获得１０株分泌抗马立克氏病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株，分别命名为ＦＭ３，ＦＭ１７，ＦＭ２４，ＦＭ２８，ＦＭ４２，ＦＭ４５，ＦＭ５２，ＦＭ５３，ＦＭ５４，ＦＭ１５９。这些单克隆抗体都具有免疫萤光反应特性，其腹水抗体的ＦＡ效价为１０＾３－１０＾５，其中ＦＭ３，ＦＭ４２，ＦＭ５３，ＦＭ１５９等单抗具有ＥＬＩＳＡ特性，