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1.
超排山羊卵巢卵母细胞体外成熟和体外受精的研究 总被引:4,自引:0,他引:4
以TCM199+10mmol/LHEPES+青霉素(6mg/L)+链霉素(5mg/L)为基础培养液(BM),再分别加入不同成分,配成5种卵母细胞成熟液:(A)BM+10%EGS;(B)BM+10%EGS+HCG(2.5mg/L);(C)BM+10%EGS+HCG+E2(1mg/L);(D)BM+10%FCS+HCG+E2;(E)BM+10%EGS+HCG+E2+颗粒细胞(1.5×106~3.0×106个/mL)。在38.5℃、5%CO2下培养26h,排卵后第1天卵巢卵母细胞体外成熟率分别为67.67%(20/30),60.42%(29/48),83.67%(41/49)和80.82%(59/73),排卵后第5天卵巢卵母细胞,在培液D中体外成熟率为71.43%(45/63)。排卵后第1天的98枚卵巢卵母细胞,体外成熟体外受精卵裂率为21.43%,21枚2细胞胚移植5头受体获2头羔羊。研究表明,超排山羊卵巢卵母细胞经体外成熟可获得大量廉价的成熟卵母细胞,并可通过体外受精获得试管山羊 相似文献
2.
实验用PMSG或PMSG+HCG处理或未经激素处理的海狸鼠8只,共获卵巢卵母细胞138枚。激素处理对获取卵巢卵母细胞的数量没有影响,而对体外成熟发育至卵丘扩展和半成熟阶段有促进作用。三种不同培养液(Whiten+FCS;TCM199+PMSG+FCS;TCM199+HCG+FCS)共培养125枚卵母细胞,培养后卵丘扩展率及半成熟率分别为56.5%,45.7%,47.6%和21.7%,12.3%,9.5%,以Whiten液较高(分别为56.5%和21.7%),但只有TCM199+PMSG+FCS组有2枚卵母细胞出现第一极体。结果表明海狸鼠卵母细胞与其它啮齿动物的卵母细胞一样,能够在体外培养成熟,完成第一次减数分裂,排出第一极体 相似文献
3.
BFF,rbGH对牛卵泡卵母细胞体外受精后发育的影响 总被引:12,自引:3,他引:9
利用屠宰黄牛卵巢,对2~5mm卵泡卵母细胞的体外成熟(IVM)、体外受精(IVF)、受精卵的体外培养(IVC)进行了系列研究。结果表明,在成熟培养液中单独添加10%D0ECS(发情当天牛血清)获得了卵泡卵母细胞受精后较高的卵裂率(64.7%)、桑椹胚发育率(39.9%)和囊胚发育率(24.8%),说明在成熟培养液中单独添加D0ECS是可行的;在含10%D0ECS的成熟培养液中再添加10%或20%BFF(牛卵泡液),均能提高受精卵的卵裂率以及桑椹胚和囊胚的发育率,以添加20%BFF效果较好,其囊胚发育率(35.0%)显著高于对照组(24.8%,P<0.05);在卵泡卵母细胞成熟培养系统和受精卵共同培养系统中添加10μg/L重组牛生长因子(rbGH),虽对体外受精卵的卵裂率无显著影响(P>0.05),但能显著提高卵裂胚的囊胚发育率(P<0.05) 相似文献
4.
猪核移植重组胚胎的发育能力 总被引:1,自引:0,他引:1
以McGrath-Solter(1983)提供的去(注)核方法,将猪胚胎的单个卵裂球细胞注入去核的次级成熟卵母细胞,借助电融合的方法(AC;5V,1.5MHz,12-15s;DC:2kV/cm,40μs。电激活/融合液:0.3mol/L甘露醇+-.1mmol/LMgSO4+0.1mmolCacL2+7.5mg/mlCCB)融入受体胞质构成重级胚,体外培养(培养液为改衣TCM-199;培养条件为5% 相似文献
5.
用屠宰场绵羊卵巢和附睾进行胚胎体外生产的研究 总被引:3,自引:0,他引:3
研究了从屠宰场得到的绵羊卵巢可采集的A级卵母细胞数在不同月份的变化规律及运用屠宰场母羊的卵母细胞、公羊的附睾精子生产早期胚胎的可行性。结果表明在我国新疆地区,9、10两个月份每个卵巢得到的平均A级卵母细胞数显著高于其它月份(P<0.05),是进行绵羊体外受精研究的理想季节。卵巢卵母细胞经成熟培养后与附睾精子体外受精30h后,入孵卵母细胞在M199+FCS和M199+FCS+CCs培养液中的卵裂率分别为22.4%和44.5%;继续培养4~7d,卵裂胚发育为16-细胞以上的比例分别为63.2%和83.9%,差异极显著(P<0.01)。 相似文献
6.
猪卵母细胞在玻璃化冷冻液中的培养效果 总被引:3,自引:0,他引:3
本试验的目的是要选择较好的用于猪卵母细胞玻璃化冷冻的玻璃化冷冻液,玻璃化液由TCM-199、mPBS、Kiev液分别加20%的犊牛血清与3种抗冷冻剂(丙三醇、1,2──丙二醇和乙二醇)组成。猪卵母细胞采自屠宰厂的卵巢并培养在TCM-199+20%犊牛血清、mPBS+20%犊牛血清和Kiev+20%犊牛血清中,在37℃、湿度100%条件下培养至少5个小时。5小时后逐渐加入抗冷冻剂,使其终浓度达50%。培养5分钟后,将猪卵母细胞依次移至抗冷冻剂浓度为25%,12.5%和0%的培养液中,培养5分钟,而后进行台盼蓝死活染色。结果表明猪卵母细胞在各组培养后的存活率没有显著性差异(P>0.05),但乙二醇结果优于其它抗冷冻剂,而TCM-199好于其它两类培养液。 相似文献
7.
将出生后50~70日龄的羔山羊,经超数排卵处理以后,从卵泡中抽取卵母细胞,取外观形态正常的卵母细胞分成五组,在含有10%胎牛血清(FCS)的TCM-199培养液中分别经12、16、18、20和24h的体外成熟培养后进行体外受精,探索不同体外成熟培养时间对体外受精及卵裂率的影响。另外,在成熟用培养基内还分别添加了发情母羊血清(ENGS)和FCS以观察其培养效果。结果表明,经过12~24h体外成熟培养的卵母细胞,在体外受精后的48h检查卵裂率分别为10%、37.1%、50.0%,41.2%和25.0%,卵母细胞经体外成熟培养16~20h的卵裂率显著高于12h和24h的卵裂率。在成熟培养基内分别添加ENGS和FCS,其体外受精卵的卵裂率分别为60.3和46.8%,卵裂率在添加两种血清的培养基之间无显著差异。 相似文献
8.
将采自肉联厂屠宰车间的牛卵巢中的卵母细胞置于TCM-199+10%ECS(0d)+FSH(1万IU/L)+LH(5mg/L)中培养成熟,用含0.3%透明质酸酶的消化液将卵母细胞周围的卵丘细胞去掉,并以7.5mg/L的CB液处理后,用微吸管吸去透明带内的第一极体及极体下面的部分卵母细胞质,然后将经体外受精并发育至8~16细胞期胚胎的卵裂球注入去核卵母细胞的卵周隙中,再将移核胚置于电融合槽内进行融合(电场强度为1200V/cm,持续时间为80μs,1次脉冲刺激)。将融合的胚胎移入生长有单层贴壁颗粒细胞的发育培养液(TCM-199+10%牛血清)中培养,观察移核胚的融合率及发育率,部分去核卵母细胞经染色后观察去核率。结果表明:(1)移核胚的融合率为86.9%(53/61);(2)发育至2~8细胞期的胚胎占培养的移核胚胎总数的21.3%(10/47);(3)卵母细胞的去核率为68.2%(45/66)。 相似文献
9.
本研究观察了不同超排处理方法对羔山羊卵母细胞体外成熟及体外受精的影响,并将体外受精胚胎进行了移植,以便探讨利用羔山羊卵母细胞生产体外受精胚胎的技术途径。对2~4月龄羔山羊用FSH、FSH+LH(静脉注射)和FSH+LH(肌肉注射)三种方法进行超排处理,平均分别回收16.0、20.3和15.0枚卵母细胞。将这些卵母细胞进行20~24h的成熟培养后,其成熟率分别为45.5%,44.4%和76.5%。成熟卵母细胞经体外受精,体外发育培养后其2~4细胞胚胎的发生率分别为5.6%a、6.7%和31.7%b(b,vs,a,P<0.05)。将9枚2~4细胞期胚胎移植给6只受体母羊,结果有2只妊娠并产羔2只。 相似文献
10.
受精用液种类对牛狼母细胞体外受精的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
比较了应用改良Tyrode's液与0.6%BSA-TCM199作为受精液(实验1)、这两种受精液的不同配比作为受精液(T:BT分别为3:1、1:1和1:3;T为对照组,实验2)和在不同精时间采用不同受精液(先用T,IVF24h后改用BT或TCM199+10%发情牛血清,实验3),对经体外成熟培养(IVM)后的牛卵母细胞体外受精(IVF)效果的影响,结果,应用成分复杂的BT作为受精液,可以提高受精卵 相似文献