无色孔雀石绿免疫原的合成与鉴定

用化学方法合成了硝基无色孔雀石绿（NO2-LMG），还原为氨基无色孔雀石绿（NH2-LMG），经红外光谱扫描鉴定NH2-LMG为所需化合物。氨基无色孔雀石绿经重氮法处理后与兔血清白蛋白（RSA）载体蛋白相连，通过紫外分光光谱鉴定，偶联产物与其前体物相比吸收峰发生了飘移，说明偶联成功。通过动物免疫试验和ELISA抗体特异性试验对该人工合成抗原免疫原性和与无色孔雀石绿反应原性的鉴定，表明成功合成了无色孔雀石绿免疫原。     

雌二醇人工抗原合成及其多克隆抗体的制备

雌二醇(estradiol,EST)具有很强的生理功能,对畜禽有广泛的药理作用,但是在动物食品中残留会危害人类健康。雌二醇属于半抗原生物小分子,具有免疫反应性,但不具有免疫原性。本文中雌二醇采用混合酸酐法将肟化产物与牛血清蛋白(bovine serumalbumin,BSA)偶联,同时与卵清蛋白(ovalbumin,OVA)偶联,紫外分光光度法测定其交联率。用此合成产物进行动物体免疫,获得了雌二醇的多克隆抗体。经间接酶联免疫测定,其抗血清的稀释度可以达到1:10240,证明雌二醇免疫原的合成成功,为雌二醇酶联免疫试剂盒的研究奠定基础。     

抗氯霉素单克隆抗体的制备与鉴定

本文用人工合成的氯霉素 -牛血清白蛋白 (CAP- BSA)免疫 BAL B/ C小鼠 ,通过杂交瘤技术建立了 2株分泌抗氯霉素的单克隆抗体 (Mc Ab)的杂交瘤细胞 1D1 0 和 5 E6 。经间接酶联免疫吸附试验 (ci EL ISA)检测细胞培养上清效价为 1∶ 5 12 ,诱生腹水的效价可达 1× 10 8。两株单克隆抗体的亚型为 Ig G1 ,杂交瘤染色体数目为 84～ 96条。该细胞株体外传代和冻存复苏后抗体分泌稳定。ci EL ISA检测显示其与常见抗生素及结构类似物的交叉反应小 ,其灵敏度为 0 .1ng/ ml,IC50 为 2 .38ng/ m l,这表明该单抗具有较大的应用价值     

己烯雌酚免疫抗原的合成与鉴定

通过重氮化法引入羧基,再用碳二亚胺法偶联BSA获得己烯雌酚(DES)免疫抗原.经紫外光谱、电泳图谱分析确证获得DES-BSA偶联物.间接酶联免疫法分析证明其免疫鼠所获得的抗体与己烯雌酚有良好的特异性.     

抗氯霉素单克隆抗体的制备及鉴定

用人工合成的氯霉素-人血清白蛋白(CAP-HSA)作抗原免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术建立了1株分泌抗CAP单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞1F9.经检测,其分泌的抗体亚类为IgG1,杂交瘤染色体数目84～96条,间接ELISA检测细胞培养上清效价为1256,诱生小鼠腹水的抗体效价可达16×105.该细胞连续培养生物学性状稳定,竞争间接酶联免疫吸附试验(ciELISA)显示,其与供试抗生素交叉反应小,表明该单抗具有较大的应用价值.     

氯霉素人工抗原的合成及多克隆抗体的制备

将氯霉素以重氮化方法使之分别与牛血清白蛋白(BSA)、卵清蛋白(OVA)、人血清白蛋白(HSA)载体蛋白连接．三种偶联物选择其中两个分别作为免疫原与包被原进行抗血清制备及ELISA试验，结果产生了特异性抗体。交叉试验表明：产生的特异性抗体与氯霉素反应明显，与其他类似物交叉反应不明显。     

盐酸克伦特罗免疫原的合成与鉴定

盐酸克伦特罗(Clenbuterol,CL) ,异名克喘素、氨哮素,俗名“瘦肉精”。我国农业部亦于1 997年发文明令禁止,至今每年都要开展各种打击非法生产、销售、使用盐酸克伦特罗的专项治理活动,但收效并不理想。盐酸克伦特罗屡禁不止的原因之一是目前的检测方法高效液相色谱-质谱联用法(HPLC -MS)和气相色谱-质谱联用法(GC -MS)不能适应市场监督需要快速、简便、价廉的要求。酶联免疫吸附检测法(ELISA)是一种快速检测方法,不需要复杂的仪器设备,灵敏度高,特异性强,样品前处理简单,非常适合大量样品的检测,便于现场监控。德、美等国都已将EL…     

氯霉素全抗原合成及多克隆抗体的制备

用重氮化方法将氯霉素与牛血清白蛋白（BSA）和卵清蛋白（OVA）偶联，制备免疫抗原和包被抗原，用ELISA方法进行鉴定。将偶联抗原用弗氏佐剂乳化后免疫德国大白兔。制备多克隆抗体，并用硫酸铵沉淀法初步纯化。用亲和层析法进一步纯化。用所得抗体建立竞争酶联免疫吸附分析法（ELISA）用于氯霉素检测，最低检查限为0.3ng/mL。     

氟苯尼考对氯霉素检测干扰的探讨

氟苯尼考(学名:氟甲砜霉素,Florfenicol)是新一代氯霉素类兽用合成抗菌素,其结构与氯霉素相似,但抗菌活性、抗菌谱及不良反应方面明显优于甲砜霉素和氯霉素,尤其是对某些药物(包括氯霉素和甲矾霉素)耐药菌株呈现高度的敏感性,且无潜在致再生障碍性贫血的危险,残留低,在规定休药     

磺胺二甲嘧啶免疫抗原的合成研究

试验旨在研究磺胺二甲嘧啶（SM2）免疫抗原的合成。用重氮化方法将SM2分别与牛血清蛋白（BSA）和卵清蛋白（OVA）偶联,合成了免疫抗原SM2-BSA和包被抗原SM2-OVA。紫外扫描和聚丙烯胺凝胶电泳结果表明, SM2-BSA的紫外吸收光谱与BSA、SM2相比均发生了改变,证明偶联成功,并测得SM2-BSA的结合比为13∶1;用SM2-BSA免疫BALB/c小鼠,获得了高效价和特异的多克隆抗体。结果表明,半抗原SM2和载体蛋白偶联成功,并可获得高价、敏感的多克隆抗体。     

磺胺甲恶唑人工抗原的合成与鉴定

为检测磺胺甲恶唑(SMZ)的残留,用重氮化方法将SMZ偶联于载体蛋白BSA和OVA上,合成了免疫抗原BSA-SMZ和包被抗原OVA-SMZ。经紫外扫描、SDS-PAGE电泳鉴定后,免疫BALB/c小鼠,制备多抗血清;利用间接ELISA法测定多抗血清效价,竞争ELISA测定多抗血清的敏感性和特异性。结果表明,所合成的免疫抗原效果较好,6只免疫小鼠多抗血清的效价均大于1∶1.28×104,5号小鼠的多抗血清敏感性最高,半数抑制浓度为47.1ng/mL,与其他磺胺类药物无交叉反应,具备良好的特异性。试验成功合成了SMZ人工抗原,并制得了敏感性高、特异性好的鼠源多抗血清,为SMZ单克隆抗体制备及其免疫学快速检测方法的建立奠定了基础。     

鲤吉陶单极虫免疫原性的研究

以鲤吉陶单极虫孢子的可溶性抗原 ,采用 B淋巴细胞杂交瘤融合技术制备了 4A8、6 B8、7B93株杂交瘤细胞 ,并用该抗原免疫新西兰白兔制备了高免血清。通过对虫体进行抗原检测、定位和 Western- blot试验 ,结果发现 :4A8、6 B8、7B9和多抗经间接 EL ISA可检出抗原的最低质量浓度分别为 0 .14、0 .2 0、0 .32和 0 .86 mg/ L;IFA定位显示 ,单、多抗检出的抗原都定位于虫壁 ,其中 4A8的抗原主要位于虫体后部 (胚核附近 ) ,6 B8和 7B9的抗原主要位于虫体前部 (极囊附近 )和极丝 ;Western- blot试验表明 ,4A8结合的抗原相对分子质量为 72 0 0 0 ,多抗结合的抗原相对分子质量分别为 5 80 0 0、70 0 0 0、880 0 0 ,3株单抗和多抗均为抗 T.kitauei的抗体 ,4A8具有明显的种、期特异性 ;自然感染该虫的鲤鱼血清中查不到循环抗体。     

多杀性巴氏杆菌毒力因子、免疫原及重要基因研究进展

多杀性巴氏杆菌可引起禽霍乱、猪萎缩性鼻炎等多种动物疫病,是重要的动物病原微生物之一。其基因组编码的多种产物在该菌的致病性及诱导免疫应答方面具有重要作用,已成为研究的热点。作者就国内外多杀性巴氏杆菌荚膜、外膜蛋白、脂多糖等毒力因子和免疫原及其相关基因的研究进展进行了简要概述。     

氯霉素人工抗原的合成及多克隆抗体的制备

将氯霉素以重氮化方法使之分别与牛血清白蛋白(BSA)、卵清蛋白(OVA)、人血清白蛋白(HSA)载体蛋白连接,三种偶联物选择其中两个分别作为免疫原与包被原进行抗血清制备及ELISA试验熏结果产生了特异性抗体。交叉试验表明:产生的特异性抗体与氯霉素反应明显熏与其他类似物交叉反应不明显。     

抗氯霉素单克隆抗体的制备及其化学发光酶免疫法的建立

以人工合成的氯霉素-牛血清白蛋白(CAP-HS-BSA)免疫Balb/c小鼠,应用杂交瘤技术获得了一株分泌抗氯霉素单克隆抗体(CAP-McAb)的杂交瘤细胞5D7,并对其进行效价、亲和力和特异性测定。结果显示,其分泌的抗体亚类为IgG1,间接ELISA检测细胞培养上清效价为1∶512,诱生的腹水经纯化后效价为1∶2×105,亲和常数为3.6×108L/mol;应用上述单抗建立的检测氯霉素的化学发光酶免疫分析法(ci-CLIA),其检测范围为0.001μg/L~10μg/L,检出限达0.0025μg/L,IC50为39.6μg/L,且与L-苯丙氨酸、L-酪氨酸、青霉素、四环素、庆大霉素等的交叉反应率均小于0.01%,可满足我国对水产品中氯霉素残留检测的要求。     

氯霉素残留的危害及其检测方法

氯霉素属广谱抗生素 ,曾在畜牧业中广为应用。但氯霉素有较强的副作用和毒性作用 ,如果氯霉素在食用动物中残留 ,可通过食物链传给人类 ,长期微量摄入氯霉素 ,不仅使人体肠道正常菌群失调 ,而且还会引起多种疾病 ,对人类的健康造成危害。世界上许多国家禁止此药用于生产食品动物 ,并规定了在畜产品中氯霉素不得检出。对于氯霉素的残留 ,存在多种检测方法 ,不同的检测方法具有不同的检出限。检测限问题已成为关注的焦点 ,发达国家对检出限的要求越来越严格     

酶联免疫法快速筛检洗洁精中的氯霉素

建立洗洁精中氯霉素检测方法(酶联免疫法).该方法使用乙酸乙酯提取,过Oasis HLB小柱净化,洗脱溶解后用缓冲液定容,荷兰氯霉素检测试剂盒检测,在1～10 μg/kg浓度范围内,该方法回收率为77％～119％,检测限为1μg/kg.