双峰驼精清及其活性组分和馏分色氨酸含量的测定

应用岛津荧光分光光度计,测试了公驼精清、活性组、馏分以及诱导排卵因子的色氨酸含量。结果证明公驼精清和活性组,馏分含微量色氨酸;排卵因子是否含色氨酸详见讨论。     

双峰驼精清诱导排卵活性因子的HPLC分离纯化及生物活性测定

利用C8柱经HPLC对QHyper D柱分离的驼精清活性组分F3和F5进行分离纯化，大鼠垂体组织培养，RIA测定培养液中LH和FSH的浓度。实验结果表明，F3和F5经过HPLC纯化后，各得到4个组分，分别以F3－1－F3－4和F5－1－F5－4表示。其中F3-3和F5－3可引起体外培养的大鼠垂体LH的释放显著增加，但均未引起FSH发生明显变化。用C18柱经HPLC或毛细管电泳对F3－3进一步纯化，无论在HPLC或毛细管电泳仪中，F3－3均呈现两个波峰，而且间隔非常靠近，说明F3－3至少是由两种分子特征非常相似的物质组成。     

双峰驼精清诱导排卵因子的研究进展

双峰驼具有独特的繁殖生理机能，是季节发情、诱导排卵的动物。文章对双峰驼繁殖特性和卵泡发育及诱导排卵因子的发现、分离和纯化、部分生物学性质等方面的研究进展进行了简要综述。     

双峰驼精清诱导排卵活性成分的DEAE—纤维素柱层析分离及其生物活性

选用DEAE－纤维素离子交换柱对双峰驼精清进行分离，各层析组分用于大鼠垂体组织体外培养，并给母驼肌注有活性的组分，以RIA法测定垂体组织培养液和母驼血浆中LH及FSH的浓度。结果表明，驼精清经DEAE－纤维素柱分离后可得到5个蛋白组分（L1－L5），其中L3在大鼠垂体培养时引起LH释放明显增加（P＜0．05），FSH则无明显变化。给卵巢上无大卵泡发育的母驼肌注有活性的组分L3，可引起血浆中LH明显升高，FSH也无变化。由此表明，L3在体内外试验中均具有引起LH释放的生物活性，它可能是诱导排卵的活性因子或其成分之一。     

双峰驼精清诱导排卵活性因子的阴离子交换柱Q Hyper D层析分离及生物活性鉴定

利用阴离子交换柱QHyperD对双峰驼精清进行分离 ,大鼠垂体组织培养及母驼肌注活性组分 ,RIA法测定垂体组织培养液和母驼血浆中LH及FSH的浓度。实验结果表明 ,驼精清经QHyperD柱层析后 ,共得到 6个组分 (F1～F6 ) ,其中F3和F5在大鼠垂体组织培养实验中具有生物活性 ,可引起LH的明显释放 (P <0 .0 5 )。在体实验时给卵巢上有成熟卵泡的母驼分别肌注F3或F5 ,肌注后 5～ 7h ,LH的释放也明显增加 (P <0 .0 5 )。F3可引起母驼发生排卵 ,F5则不能 ,说明F3可能就是驼精清中的诱导排卵活性因子或其成分之一。另外 ,无论是F3或是F5 ,在体内外实验中均未能引起FSH的分泌发生显著变化     

双峰驼诱导排卵因子结构的研究

应用岛津紫外分光光度计系统地扫描并记录了公驼精清，各活性组分以及诱导排卵因子的紫外吸收光谱。扫描结果证明：公驼诱导排卵因子（OIF）在精清内相对稳定的原因，是OIF在精清内由多层分子量不同、性质各异的蛋白质所包裹，从而证明了我们以前的推测。     

双峰驼精清蛋白图谱及分子量的测定

采用ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳观察了双峰驼精清及其对照组牛，羊，猪精清电泳蛋白图谱，测定了各蛋白组份的分子量。结果表明，双峰驼精清在分子量７２３９０－１２８３１Ｄ间形成１７条蛋白区带，在７２３９０－４３１７７Ｄ间，与牛，羊，猪精清蛋白图谱相似；但在较小分子量中，在分子量为４０６８５，２０８４４－４３１７７Ｄ间，与牛，羊，猪精清蛋白图谱相似；但在较小分子量中，在分子量为４０６８５，２０８４４及１５６     

双峰驼诱导排卵因子活性位序列测定与肽链结构研究

应用高效液相色谱仪、蛋白顺序仪和傅里叶变换离子回旋共振质谱仪等仪器，纯化并测试了公驼诱导排卵因子(OIF)的部分活性序列和降解过程。结果表明，公驼OIF是单链多肽，分为活性序列和相对稳定固定序列两部分，N—端的活性位序仅为6个残基：赖氨酸-缬氨酸—丙氮酸—苯丙氨酸-丝氨酸—苏氨酸。该因子的氧化降解过程在冰冻条件下是由氨基酸侧链基团的氧化和肽链的断裂共同引发的。     

双峰驼诱导排卵因子氨基酸组成的分析

分别测定了纯化的公驼精清诱导排卵因子的活性和固定部分肽类的小肽氨基酸组成,证明活性位序易降解,这一特性与所含的丝氨酸,谷氨酸,甘氨酸等有关。     

哺乳动物精清诱导排卵活性蛋白质研究

在动物的精清里包含一些与动物生殖生理活动密切相关的活性蛋白和多肽。驼科动物的双峰驼、美洲驼、羊驼和澳洲考拉等哺乳动物精清中含有类似促性腺激素释放激素(GnRH)作用的活性蛋白质,诱导排卵因子(ovulation inducing factor,OIF),它能引发外周血液中促黄体素(LH)峰浓度的出现和诱发母畜排卵。OIF被认为是一种新的生物活性蛋白质或潜在的新型激素。甚至报道在牛等自发排卵动物以及人精清中也存在类似的活性蛋白。这类因子的发现对于哺乳动物生殖生理及繁殖的深入研究具有重要的意义,有助于动物克服繁殖障碍及繁殖疾病的治疗等。     

双峰驼诱导排卵机理的研究Ⅲ--双峰驼诱导排卵因子分布与代谢途径的研究

从公驼精清内经DEAE－DE52柱上分离的诱志排卵活性蛋白（Ovulation-inducing bioactive protein,OIP)应用^125I标记后输入母驼阴道，通过血液循环到达垂体。经测定，OIP遍布母驼体内各脏器，其中以垂体、肝脏、心脏、舌肌等浓度较高，而在眼角膜、耳尖部以及被毛中含量很少。消除半衰期长达72.6h，其代谢主要经肝胆排泄，也有部分活性蛋白通过泌尿、生殖道排泄。     

Separation and Purification of Ovulation-inducing Factors in the Seminal Plasma of the Bactrian Camel (Camelus bactrianus)

Ovulation in the Bactrian camel depends upon ovulation-inducing factors in the seminal plasma. The present study was conducted to isolate and purify the bioactive fractions from the seminal plasma of these camels. The seminal plasma was fractionated by anion-exchange chromatography, and six fractions were obtained. The bioactive potential of each fraction was estimated from its effect on rat pituitary tissue cultured in vitro and by the effect of an intramuscular injection of the fraction into female camels in vivo. Both the third fraction (F3) and the fifth fraction (F5) stimulated the release of LH in vitro and in vivo. In addition, female camels ovulated within 48 h after intramuscular injection of F3. However, neither F3 nor F5 had any significant effect on the secretion of FSH, either in vitro or in vivo. When F3 was further fractionated into four subfractions, the third subfraction (F3-3) still stimulated the in vitro release of LH, but not of FSH. An attempt to further purify the ovulation-inducing factors in F3-3 failed owing to the similarity of the molecular characters.     

双峰驼髋关节解剖特征

运用大体解剖学方法,结合活体Ｘ射线透视及光学摄影术,观察了双峰驼的髋关节。与马、牛、羊、猪、犬及人的对等器官比,双峰驼的髋关节囊纤维层增厚,形成髂股、坐股及耻股３条韧带,分别类似于人的同名韧带;关节囊纤维层有少量弓形及半环形纤维,但未形成轮匝带;股骨头韧带始于髋臼切迹及髋臼窝,与人（始于髋臼横韧带及髋臼切迹两侧）、马（始于近髋臼切迹的耻骨下沟）均不同;髋关节无副韧带（与牛同）。     

建立双峰骆驼自然保护区的思考

从世界双峰驼和我国双峰驼养殖数量的变化趋势着手,结合我国生态保护政策,分析了如何保护我国双峰驼资源的问题,并提出了在双峰驼核心产区建立双峰驼自然保护区的建议。     

双峰驼乳中乳铁蛋白的体外抗菌活性及影响因素

采用试管二倍稀释法测定了双峰乳中驼乳铁蛋白(CLF)的抗菌活性.结果表明,CLF对大肠埃希菌的最小抑菌浓度(MIC)为3 mg/mL,对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度为2 mg/mL,与溶菌酶联合应用,则能明显增强其抗菌作用.CLF的抗菌活性还与其铁饱和度密切相关,随着铁饱和度的增加其抗菌活性明显下降.葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、牛血清白蛋白(BSA)、尿素和硫酸铵在0 mg/mL～10 mg/mL的质量浓度范围内,对CLF的抗菌活性影响不大.而NaCl或KCl的浓度为25 mmol/L～100 mmol/L,MgCl2或CaCl2的浓度为1.0 mmol/L～5.0 mmol/L时,CLF的抗菌活性则会明显降低.经较低温度加热处理后CLF能很好的保持其活性;而经较高温度加热处理会使CLF变性并失去抗菌活性.不同pH条件下的抗菌试验结果表明,当pH在7.5～8.0时CLF的抑菌效果最好.     

雌性空怀双峰驼生殖道的形态结构

应用组织学方法观察了雌性空怀双峰驼生殖道的形态结构。结果显示，双峰驼生殖道的基本结构与其他哺乳动物相似，但微细结构有差异。双峰驼输卵管粘膜皱襞极其发达，分支多而呈复杂的网状迷路。皱襞基部的迷路酷似固有膜而存在腺体，迷路网格内常见细胞团块。虽然双峰驼怀孕时胎儿位于左侧子宫角，但左、右子宫角以及子宫体的组织结构基本相同。子宫内膜无肉阜，上皮下陷于固有膜内，形成大量长而弯曲的单管状腺。子宫颈固有膜浅层分布有许多小腺体，深层分布有成群的较大腺体。这些腺体为分支管状腺，腺上皮PAS强阳性。阴道粘膜上皮为复层上皮。从输卵管到阴道，粘膜上皮主要为单层柱状上皮，由纤毛细胞和分泌细胞组成，局部可见假复层柱状纤毛上皮。纤毛细胞由前向后逐渐减少，但在子宫颈仍可见到。粘膜上皮和腺上皮内夹有许多淋巴细胞或中性粒细胞，后段局部甚至见到这些免疫细胞浸润于上皮细胞间。固有膜内分布有大量淋巴细胞、中性粒细胞、肥大细胞、浆细胞和巨噬细胞，有时出现淋巴滤泡。     

双峰驼肝脏CYP3A亚酶活性的初步研究

CYP3A亚酶参与45%~60%常用药物的生物转化,在机体处置外源性物质的过程中发挥着重要作用。为了探讨双峰驼肝脏CYP3A亚酶活性,采用改进的钙离子沉淀法制备肝微粒悬液,并借助生物化学方法对双峰驼CYP3A亚酶活性进行了初步研究。结果表明,钙离子沉淀法制备的双峰驼肝微粒体蛋白含量为(1.541±0.264)mg/mL,CYP总酶含量为(0.412±0.063)nmol/mg,红霉素-N-脱甲基酶的活性为(1.159±0.001)nmol/(mg·min)。以上研究结果为今后借助探针药物检测双峰驼CYP3A亚酶的体外代谢活性的深入研究奠定了基础。     

双峰驼跖趾关节解剖结构

采用大体解剖学方法,研究了成年双峰驼的８个跖趾关节,并与马、牛、羊、猪、犬等动物的对等器官进行了比较。结果发现,双峰驼跖趾关节的形态结构有以下显著特征：（１）跖骨远端关节面后部有矢状嵴,近趾节骨近端关节面后部有与之相对应的矢状沟,这种结构与跖行动物和趾行动物相类似;（２）籽骨上没有对应近趾节骨近端的关节面;（３）籽骨间韧带只连接同一趾上的２个籽骨,与牛的将２趾的４个近籽骨连在一起的结构不同;（４）轴侧侧副韧带不像牛的那样与对侧的同名韧带共同起始于跖骨远端滑车间切迹,而是分别起始于此切迹的轴侧韧带窝及韧带结节;（５）轴侧侧副韧带仅为１层,而远轴侧侧副韧带分为２层;（６）籽骨直韧带、趾间趾节骨籽骨韧带及趾间近韧带均缺如。     

The Duration of Ovulation in GnRH-Treated Gilts Following Seminal Plasma Infusion

Contents: The relationship between seminal plasma infusion and ovulation time in GnRH-treated gilts was investigated. Following oestrus synchronisation with Regumate (Roussel Uclaf) and PMSG (Pregmagon Dessau) 14 gilts were injected with 75 μg GnRH (Gonavet "Berlin-Chemie") 80 h after PMSG. Seven gilts received an additional intracervical infusion of 80 ml seminal plasma 16 h after GnRH. The laparoscopic observation of follicular development and ovulation started 24 h after GnRH injection in 6 to 1.5 h intervals up to the completion of ovulation. The mean interval between GnRH and completion of ovulation was 40.1 1.6 h in gilts treated with seminal plasma and 40.8 0.7 h in control gilts. There was no additional seminal plasma related effect on the advancement of ovulation compared to GnRH only.