胎儿三毛滴虫和猪三毛滴虫的染色体数目

胎儿三毛滴虫和猪三毛滴分离物在Ｄｉａｍｏｎｄ′ｓ培养 培养基加入不同浓度的秋水仙素,置３７℃下孵育６－８ｈ,运用低渗溶胀技术处理,用光学显微镜观察这两种三毛滴虫的染休要现,胎儿三毛滴虫和猪三毛滴虫的双倍体染色体数目是２ｎ＝１０。     

胎儿三毛滴虫研究进展

胎儿三毛滴虫(Tritrichomonas foetus,T.foetus)是一种寄生于多种不同宿主的原虫,主要引起牛和猫的毛滴虫病,也可作为猪和犬的一种共生毛滴虫。其中,牛毛滴虫病是一种经性传播的疾病,主要导致牛不孕、流产等,而猫毛滴虫病是猫的一种新发胃肠道疾病,主要引起猫的慢性大肠腹泻,两者均呈全球分布,在兽医临床上具重要意义。近年来,陆续从一些患有肺炎或急性呼吸综合征的患者体内分离到了T.foetus或T.foetus样的毛滴虫,暗示胎儿三毛滴虫可能具有一定的人兽共患潜力。论文从病原学、分类地位、致病性、流行情况、诊断及防控等方面对T.foetus的研究进行综述,以期为T.foetus的深入研究提供参考。     

胎儿三毛滴虫研究进展

胎儿三毛滴虫病是世界乳牛业中的重要疾病,我国尚缺乏报道。本译文对我国乳牛业发展具有参考意义。牛精液中可能含有各种微生物,这在公牛或牛精液的国际贸易中,已列为一项重要的检疫项目。这类微生物种类繁多,有病毒     

猪腹泻病例中三毛滴虫感染情况调查

猪三毛滴虫是肉足鞭毛亚门、动物鞭毛虫纲、毛滴虫目、毛滴虫科的一种原虫.该虫对猪的危害主要表现在两个方面:一方面可导致母猪阴道炎,这在一些文献中有过报道[1-2];另一方面可导致小猪出现顽固性腹泻和死亡,这在国内外文献中很少有学者报道,也很少有人去研究它.     

猫源胎儿三毛滴虫的形态学观察及分子鉴定

旨在进一步鉴定从1例长期慢性腹泻猫粪便中新分离到的1株毛滴虫,分别对其进行了分离与体外培养、形态学观察及18S rRNA基因序列相似性分析。形态学观察结果显示,分离株毛滴虫呈梨形或纺锤形,且具有3根前鞭毛和1根后鞭毛,为胎儿三毛滴虫形态结构。18S rRNA基因序列与GenBank中三毛滴虫基因序列比对及系统进化树结果显示,分离的猫源毛滴虫序列与胎儿三毛滴虫MH400076.1处于同一分支,且相似性达到了99%。综合判定,从患有长期慢性腹泻猫的粪便中分离到的毛滴虫为胎儿三毛滴虫。     

猪附红细胞体几种染色方法的比较

为了筛选出比较理想的染色方法,使猪附红细胞体病的诊断和研究得到可靠的技术保证,本试验对附红细胞体病猪的同一份血液样本,分别采用了12种染色方法进行染色,并比较其染色效果。结果显示,丫啶橙染色和姬-瑞氏混合液染色效果最好,其次为亚伯特氏、瑞氏和姬姆萨氏等染色方法。     

利用CTC染色进行猪精子不同体外获能方法的比较

为了探讨不同方法对猪精子体外获能的影响,本试验以猪的新鲜精液为研究对象,分别经肝素上游法、钙离子载体诱导法和咖啡因诱导法进行精子不同获能时间的处理,并利用金霉素荧光染色法（chlortetracycline,CTC）对其获能效果进行检验。结果表明,采用肝素上游法孵育40 min处理后,精子的获能比例显著高于其他各处理组（P<0.05）,说明肝素上游法可以较好地诱发猪精子在体外获能。     

广西部分地区猫隐孢子虫、十二指肠贾第虫、三毛滴虫分子流行病学调查

为了解广西部分地区猫隐孢子虫、十二指肠贾第虫和三毛滴虫的感染情况和基因型,试验采集南宁市、桂林市、柳州市、梧州市和河池市各宠物医院、流浪动物中心及送检的新鲜猫粪便样本300份,基于隐孢子虫SSU rRNA和gp60基因,十二指肠贾第虫bg、tpi和gdh基因及三毛滴虫ITS基因采用PCR方法对粪便DNA进行PCR扩增,阳性样本进行测序分析,构建遗传进化树。结果表明：共检测出22份隐孢子虫、24份十二指肠贾第虫和41份三毛滴虫阳性样本,阳性率分别为7.3%、8.0%和13.7%。幼猫三种原虫阳性率均显著高于成年猫(P<0.05),腹泻猫的阳性率显著高于未腹泻猫(P<0.05),雄性猫三毛滴虫的阳性率要显著高于雌性(P<0.05)。检测出的隐孢子虫都为猫隐孢子虫(Cryptosporidium felis,C.felis),根据gp60基因进行亚型分型,鉴定出ⅩⅨa和ⅩⅨc两种亚型。十二指肠贾第虫共鉴定出集聚体F、B和F+B三种基因型,其中集聚体F为优势基因型。说明广西部分地区猫普遍存在隐孢子虫、十二指肠贾第虫和三毛滴虫的感染,且感染的虫种和部分基因型为人兽共患型,由于宠...     

猪嗜血支原体病原染色检测法的比较研究

为检测猪嗜血支原体(M.suis)感染,本研究对传统血涂片吖啶橙染色方法进行改良,建立了快速检测M.suis的血液吖啶橙染色方法。结果显示,血液吖啶橙染色法的染色时间比传统血涂片吖啶橙染色法和姬姆萨染色法分别节省约30 min和1 h。利用血液吖啶橙染色法、血涂片吖啶橙染色法、姬姆萨染色法及PCR法对200份临床血液样品进行检测,结果显示,阳性检出率依次为64.5%、59.5%、48%及68.5%。3种染色方法与PCR的符合率分别为87%、77%、59.5%;与PCR结果相比,前两种染色方法差异不显著(p0.05),后者差异极显著(p0.01)。结果表明,血液吖啶橙染色法优于其他两种染色方法,具有操作简单快速、准确度高、检出率高等优点,适用于临床上对M.suis感染快速定性检测和流行病学调查研究。     

猪附红细胞体染色方法的研究

应用姬姆萨氏、瑞氏以及吖啶橙染色液对13例疑似附红细胞体病猪的血涂片进行染色检测,比较其优缺点。结果表明,3种方法均可检测出附红细胞体,但吖啶橙染色法的检出率更高,是一种更有效的染色方法。     

猪支原体不同靶基因PCR检测方法的比较

为筛选出检测猪支原体更为特异、敏感的PCR检测方法,本试验分别以16S rRNA、50S rRNA和膜蛋白OxaA为靶基因进行PCR检测,并从其敏感性、特异性和临床样本检出率等方面进行了比较。结果显示,以膜蛋白OxaA和16S rRNA为靶基因的PCR方法敏感性最高,最小检测DNA量为1.86 fg/μL,而以50S rRNA为靶基因的PCR方法最小检测DNA量为18.6 fg/μL;3种靶基因引物均扩增不出大肠杆菌、猪链球菌、猪肺炎支原体、牛附红细胞体等基因片段,具有较好的特异性;通过对临床60份血液样本的检测结果表明,以膜蛋白OxaA基因设计的引物检出率最高,为25%(15/60),明显高于16S rRNA基因的21.6%(13/60)和50S rRNA基因的18.3%(11/60)。本试验为猪支原体病的诊断及流行病学调查提供了更为敏感、特异的检测技术。     

猪链球菌2型荧光PCR检测方法与常规检测方法的比较

为验证猪链球菌2型荧光PCR检测方法对临床样品检测的敏感性和适用性以及该方法所拥有的独特优点,分别用荧光PCR法、常规PCR法和细菌分离法对人工感染猪链球菌2型的小鼠肝脏和发病猪的心、肝、脾、肾等实质器官和血液、喉拭子进行抗原检测。结果显示,荧光PCR法检出率为70.8%,明显高于普通PCR法（检出率为20.8%）,也高于常规细菌分离法（检出率为45.8%）。由于临床样品常常会被其他细菌污染,细菌分离法很难准确分离到链球菌。但荧光PCR法不受其他细菌污染的影响,对实验室培养的猪链球菌2型菌液,该方法检测滴度可达10-6/0.1mL（42～52 CFU/0.1 mL）,而普通PCR方法检测滴度仅为10-4。     

A comparison of the infectivity of Trichuris suis ova embryonated by four different methods

Four methods for embryonating the eggs of Trichuris suis in the laboratory were compared. Eggs were mixed with moist vermiculite (method 1) or were suspended in a 0.2% potassium dichromate solution that was either aerated (2), non-aerated (3) or deoxygenated (4). It was shown that differences in the method of culture profoundly affected the ability of the fully developed eggs to hatch and the parasites to become established in pigs. Of the four methods compared, ova of highest infectivity were produced after culture in moist vermiculite.     

猪链球菌通用及2型TaqMan荧光PCR检测技术建立与应用

在对设计合成的引物和6-carboxy-fluorescein(6-FAM)荧光素标记的TaqMan水解探针进行筛选的基础上,通过反应体系优化,建立了检测猪链球菌通用和2型的2种荧光PCR检测技术,实现了对猪链球菌的快速检测和定型。敏感性、特异性、重复性、感染组织模拟试验及临床样品的检测结果均表明建立的方法快速、特异、灵敏,整个检测过程(包括样品的前处理时间)可在1.5 h内完成,检测培养物和模拟组织样品的灵敏度可达10 CFU～100 CFU。     

猪附红细胞体对不同宿主红细胞的体外感染试验

本试验在猪附红细胞体体外培养的基础上,用猪附红细胞体的阳性血液体外感染家兔、昆明小白鼠、犬、羊、牛及人的健康红细胞。结果表明,上述宿主的健康红细胞均可不同程度地发生感染,其中体外感染家兔红细胞,在第36小时感染率最高,为45.0%;感染昆明小白鼠红细胞,在第24小时感染率最高,为40.3%;感染人红细胞,在第48小时感染率最高,为30.0%,呈现轻度感染;而对其他宿主红细胞,呈现一过性感染。     

一株猪源链球菌的分离鉴定及生物学特性研究

从送检的一份疑似链球菌病病死猪病料中分离出1株细菌,通过对分离菌株进行细菌的培养特性、生化试验、玻片凝集试验及PCR分型鉴定,确定为2型猪链球菌,动物致病性试验表明,1×10⁸ CFU/mL的剂量可致死小白鼠,对该分离菌株的毒力因子进行PCR检测发现,溶菌酶释放蛋白(mrp)、胞外因子(ef)和溶血素(sly)均为阳性。此菌的分离鉴定为自家灭活菌苗的制备提供了候选菌株。     

猪链球菌对氟喹诺酮类药物的耐药性与靶位突变相关性

旨在了解猪链球菌对氟喹诺酮类药物耐药性与parC、gyrA基因突变的相关性,通过微量稀释法测定34株猪链球菌对4种氟喹诺酮类药物的MIC值,采用PCR方法扩增并测序分析了临床分离的猪链球菌对氟唪诺酮类约物10株耐药株和9株敏感株的parC和gyrA基因喹诺酮耐药决定区(QRDRs).在氟喹诺酮类药物耐药菌株parC基因QRDRs发生Ser79→Phe、Arg 87→Leu的氨基酸突变,在4株高度耐药菌株gyrA基因QRDRs发生Arg66→Ser,Ser81→Arg氨基酸突变;当菌株对氟喹诺酮类药物敏感时,parC和gyrA基因的QRDR区均未有突变;而当MIC≥32 μg·L-1 时,parC的氨基酸发生了 Ser79→Phe的突变,同时发生gyrA氨基酸Arg66→Ser,Set81→Arg突变.结果表明,猪链球菌对氟喹诺酮类药物低水平类耐药是由parC单一位点突变引起,而高水平耐药是由parC和gyrA双位点突变引起.     

Differential Proteomic Analysis between Sporulated Oocyst and Unsporulated Oocyst of Cystoisospora suis

The differentially expressed proteins between sporulated oocyst and unsporulated oocyst of Cystoisospora suis strains were screened and compared. In this study, the C. suis infection model of piglets were established and a quantitative proteomic analysis between sporulated oocyst and unsporulated oocyst of C. suis were conducted by iTRAQ labeling and LC-MS/MS. Part of the iTRAQ results were validated by qRT-PCR. Total 174 proteins were identified, among which 40 proteins were differentially expressed, 38 proteins were upregulated and 2 proteins were downregulated. The differentially expressed proteins were mainly involved in metabolism, antibiotics biosynthesis, secondary metabolites biosynthesis and glycolysis/gluconeogenesis pathways. The results of this study provide reference for elucidating the developmental mechanism of C. suis sporulated oocyst and facilitated discovering a new biomarker for C. suis.     

猪囊等孢球虫孢子化与未孢子化卵囊的差异表达蛋白质组学分析

通过比较猪囊等孢球虫孢子化卵囊与未孢子化卵囊的差异表达蛋白质,以期从蛋白质组学角度研究其发育机制,并为此类球虫的发育机制及该病的免疫预防或化学防治找到新的“关键”分子奠定基础。首先建立哺乳仔猪的猪囊等孢球虫感染模型,然后运用iTRAQ技术,结合LC-MS/MS分析差异表达蛋白质,并采用荧光定量PCR验证iTRAQ数据。结果共鉴定出174个蛋白,差异表达蛋白40个,其中38个蛋白上调表达,2个蛋白下调表达,差异蛋白主要涉及代谢、抗生素的生物合成、次生代谢产物的生物合成和糖酵解/糖异生过程等通路。研究结果为阐明猪囊等孢球虫孢子化发育机制以及发现新的生物标志物提供参考。