法氏囊活性肽对禽流感H5N1亚型灭活疫苗的免疫增强效果

将7日龄黄羽肉鸡250羽分为5组,即对照组、常规疫苗剂量配合法氏囊活性肽组、常规疫苗剂量减半配合法氏囊活性肽组、生理盐水组和法氏囊活性肽组,每组50羽。通过血凝抑制试验测定血清抗体水平及计算法氏囊指数等试验方法,研究法氏囊活性肽和禽流感H5N1灭活疫苗配合应用的免疫效果及法氏囊活性肽对母源抗体的影响。结果显示,29日龄后,常规免疫剂量配合法氏囊活性肽组的法氏囊指数和血清抗体滴度显著高于对照组(P<0.05),而常规剂量减半配合法氏囊活性肽组与对照组在法氏囊指数和血清抗体滴度上差异不显著(P>0.05);法氏囊活性肽组的母源抗体滴度比生理盐水组高1.5~2个滴度。说明法氏囊活性肽对禽流感疫苗有免疫增强作用,疫剂量减半配合法氏囊活性肽应用可达到常规疫苗免疫效果,法氏囊活性肽对母源抗体有维持作用。     

法氏囊活性肽对传染性法氏囊病毒弱毒疫苗的免疫增强效果

将7日龄黄羽肉鸡300只均分为5组,即对照组、常规疫苗剂量配合活性肽组、常规疫苗剂量减半配合活性肽组、生理盐水组和活性肽组。通过间接ELISA测定血清抗体水平及计算法氏囊指数等试验方法,研究活性肽和传染性法氏囊弱毒疫苗联合应用的免疫效果。结果表明:常规免疫剂量配合活性肽组和疫苗剂量减半配合活性肽组的法氏囊指数显著高于对照组,常规免疫剂量配合活性肽组的血清抗体滴度显著高于对照组,而常规剂量减半组与对照组在血清抗体滴度上差异不显著。说明活性肽对传染性法氏囊弱毒疫苗有免疫增强作用,疫苗剂量减半配合法氏囊活性肽应用能达到常规疫苗免疫效果。     

法氏囊活性肽对鸡传染性法氏囊病弱毒疫苗免疫效果的影响

将不同剂量的法氏囊活性肽 (BS)冻干粉与鸡传染性法氏囊病 (IBD)弱毒疫苗混合 ,对 2 1日龄SPF鸡滴鼻点眼 ,另设免疫对照组和生理盐水对照组 ,于免疫后 7d、10d、14d、2 1d、2 8d、45d、6 0d、75d和 90d采血 ,测定AGP抗体效价 ,并于免疫后 7、14、2 1、2 8d ,每组剖杀 2只 ,计算试验组囊指数与空白对照组囊指数之比 (BBIX) ,免疫后 30d用IBD JS株攻毒。结果表明 :免疫后 7d ,0 48mgBS IBD弱毒苗组AGP抗体阳性率为 5 2 9% ,比免疫对照组高 2 5 % ,BBIX数值也稍大 ;免疫后 45d抗体水平达到高峰时 ,0 96mgBS IBD弱毒苗组的抗体效价比免疫对照组高2个滴度 ,BBIX数值也稍大于免疫对照组。 30d后攻毒 ,各免疫组的攻毒保护率均为 10 0 %。整个试验期间 ,1 92mgBS IBD弱毒苗组的AGP抗体效价及BBIX数值与免疫对照组相比差异不显著。结果表明 :BS在增强机体免疫应答、提高对法氏囊的保护及损伤后的修复作用方面与其剂量有一定的关系。     

囊素肽对禽流感(H9N2)油乳剂灭活疫苗免疫效果的影响

为研究囊素肽对禽流感(H9N2)油乳剂灭活疫苗免疫效果的影响,将200只鸡分为疫苗组、疫苗+囊素组、囊素组和对照组,每组50只。从13日龄起每7 d测定其法氏囊指数、禽流感(H9)HI抗体水平。结果表明：囊素肽能提高禽流感(H9N2)油乳剂灭活疫苗免疫后的抗体水平,并延长高水平抗体的维持期,能显著地促进法氏囊的生长发育。     

不同法氏囊病活疫苗对鸡法氏囊发育的影响和对新城疫免疫效果影响的评价

评价常用的6种IBD疫苗株对鸡法氏囊发育的影响和对新城疫免疫效果影响,为临床选用疫苗提供参考.将SPF鸡分成6个试验组和1个对照组,每组25只.7日龄时,试验组分别用A80株、D78株、B87株、KS96株、MB株和2512株滴口免疫,每只鸡各1羽份.各组分别在免疫后4 d、9 d、20 d随机抽取5只鸡计算法氏囊指数.各组于IBD免疫后14 d用La Sota株活疫苗点眼、肌肉注射La Sota株油佐剂灭活疫苗各1羽份,对照组同时进行免疫.免疫后每隔7 d检测1次NDV抗体.42日龄时各组以鸡新城疫强毒F48E9攻击,观察攻毒保护效果.结果表明:27日龄A80、D78、B87和KS96组法氏囊指数和对照组相比差异不显著(P>0.05);MB和2512与对照组之间差异极显著(P<0.01).A80、D78对ND疫苗诱生机体产生抗体的影响小(P>0.05);MB、2512对ND抗体影响大,抗体水平显著低于对照组(P<0.01);B87、KS96对ND抗体生成有一定的影响,和对照组相比低1个滴度左右,但从统计分析来看影响较小(P>0.05).用F48E9攻毒,结果显示A80、D78、B87、KS96和对照组保护率均为100%,而MB株组保护率为80%,2512株组保护率为70%.A80、D78、B87和KS96这4株疫苗株对法氏囊的发育影响很小;MB和2512对法氏囊发育有明显的抑制作用.MB和2512对新城疫的免疫保护有较大影响,而弱毒A80、D78以及中等毒力的B87、KS96对新城疫的免疫保护影响轻微.     

法氏囊细胞培养上清的免疫活性

地氏囊细胞培养上清经浓缩、心心后,分别进行溶血空斑形成试验和鸡ＤＮⅣ系免疫试验,结果表明：法氏囊细胞培养上清能够显著提高ＳＲＢＣ免疫小鼠脾细胞的ＰＦＣ数目（Ｐ〈０．０１）,对雏鸡ＮＤⅣ系免疫有促进作用,与免疫对照组相比,ＨＩ抗体水平平均提高１个滴度,证明体外培养的法氏囊细胞的能力分泌免疫活性因子。     

商品化鸡传染性法氏囊病三价活疫苗对新城疫疫苗免疫效果影响的试验

试验用商品化鸡传染性法氏囊病三价活疫苗3倍、4倍和5倍剂量分别免疫10日龄法氏囊非免疫雏鸡,免疫后3d、7d、21d剖杀,观察法氏囊的变化;免疫后7 d接种ND疫苗,接种ND疫苗后14 d和21 d分别采血进行ND HI抗体的测定。结果显示,IBD三价活疫苗5倍免疫剂量可引起法氏囊不可逆损伤,并对ND的HI抗体产生干扰作用。     

鸡法氏囊提取物的组分分析及其活性测定

应用薄层层析技术分析鸡法氏囊提取物的组分 ,并用体内和体外免疫试验测定其活性。实验结果表明 ,相对分子质量为 10 0 0以下的鸡法氏囊提取物中共有 9种成分的氨基酸或小肽 ,其中第 3组分与囊素标准品具有相同的迁移率(0 6 9)。适当浓度的囊素和法氏囊提取物均能促进杂交瘤细胞分泌抗体 ,与对照组相比差异显著 (P <0 0 5 ) ;2 5mg·mL-1提取物具有相当于 1μg·mL-1囊素的促杂交瘤细胞抗体分泌活性。法氏囊提取物与猪瘟疫苗同时注射 ,可显著提高接种猪产生特异性抗体的能力 ,其免疫增强作用与剂量有关     

外源性核酸对感染法氏囊病毒雏鸡免疫功能的影响

300只20日龄健康海兰白雏鸡随机分为6组,Ⅰ组为对照组,Ⅱ~Ⅵ为试验组,Ⅱ、Ⅴ组饲料中添加0.1%核酸,Ⅲ和Ⅵ组饲料中添加0.2%核酸,Ⅳ、Ⅴ和Ⅵ组于27日龄感染法氏囊病毒,研究核酸对人工感染法氏囊病毒雏鸡免疫功能的影响。试验结果表明:饲料中添加不同剂量的核酸均可提高鸡免疫器官法氏囊和胸腺指数,降低感染法氏囊病毒雏鸡的死亡率,且呈一定的量效关系;明显提高T淋巴细胞转化率、血清中免疫球蛋白IgA、IgG的含量及SOD活性,降低血清中MDA的含量,并对鸡血清中UA水平亦有一定作用,其中以添加0.2%的核酸的作用效果最好。     

重组鸡传染性法氏囊病毒VP2蛋白在多联疫苗中的免疫效果评价

旨在研究重组鸡传染性法氏囊病毒VP2蛋白在多联疫苗中的免疫效果。将50羽21日龄SPF鸡平均分为5组,分别用新流法(新城疫ND-禽流感H9-传染性法氏囊IBD)三联疫苗进行免疫,1组为非免疫对照组,2组免疫剂量0.05 mL,3组免疫剂量0.1 mL,4组免疫剂量0.2 mL,5组免疫剂量0.3。免疫后第21天采血,检测ND/H9血凝抑制抗体和IBD琼脂免疫扩散抗体。并用传染性法氏囊病毒强毒BC6/85株F₁代点眼攻毒,攻毒剂量为每只0.1 mL,观察96 h后剖检。结果表明,免疫后21 d,第5组血清中ND/H9 HI抗体分别为8.1log 2和 9.0log 2,IBD抗体4个试验组均显著高于对照组(P<0.05),5组显著高于2组。1组攻毒鸡全部发病,法氏囊外观发黄,呈胶冻样,囊内剖开有黏液,部分肉眼可见出血。1组未攻毒对照和免疫组,均未见异常,免疫攻毒保护率为100%。结果表明,重组鸡传染性法氏囊病毒VP2蛋白在三联疫苗中免疫剂量为每只0.05 mL,具有良好的免疫保护力,且不影响疫苗中其他抗原的免疫效果。     

传染性法氏囊病病毒变异E株对法氏囊淋巴细胞形态及功能的影响

利用透射电镜连续观察了传染性法氏囊病病毒变异株人工感染雏鸡后不同时期法氏囊淋巴细胞的超微结构变化,并对法氏囊内SIgM,SIgG,SIgA3种抗体生成阳性细胞数量和血液中IgM,IgA,IgG抗体水平进行检测。观察结果表明,IBDV感染后法氏囊淋巴细胞出现了严重变性、坏死,表现为核染色质浓缩、碎裂、溶解,线粒体溶解呈空泡样结构,其他细胞器破坏溶解,在法氏囊淋巴细胞、巨噬细胞、网状上皮细胞等细胞的胞浆中可见不同类型和排列方式的病毒粒子。IBDV感染后法氏囊内抗体阳性细胞数量和血清中抗体水平均呈现不同程度的下降,揭示雏鸡机体体液免疫功能严重抑制。     

中草药复方制剂对青脚麻鸡法氏囊免疫功能、抗氧化性及增殖凋亡基因表达的影响

试验旨在研究由金银花、黄连、蒲公英等药材组成的中草药复方制剂,对青脚麻鸡法氏囊组织结构、抗氧化功能、细胞因子和抗体分泌及增殖凋亡相关基因(PCNA和Caspase-3)表达的影响。采用单因子试验设计,将400羽青脚麻鸡按照体重相近原则分为对照组(基础日粮)和试验Ⅰ-Ⅲ组(分别添加0.5%、1.0%和1.5%中草药复方制剂),每组5个重复(n=20),试验期56 d。结果表明,28日龄时,添加1.0%中草药复方制剂可增加青脚麻鸡法氏囊细胞因子(IL-2和IFN-γ)、IBDV抗体和GSH-Px含量及PCNA mRNA和蛋白表达量(P0.05),降低Caspase-3 mRNA和蛋白表达量(P0.05)。56日龄时,添加1.0%中草药复方制剂可增加青脚麻鸡法氏囊IFN-γ、IBDV抗体和GSH-Px含量(P0.05),降低MDA含量及Caspase-3蛋白表达量(P0.05)。显微观察可见,28和56日龄时,添加1.0%中草药复方制剂可显著增加法氏囊小叶和淋巴小结面积(P0.05),降低法氏囊Caspas-3阳性细胞数量,说明日粮中添加1.0%中草药复方制剂对法氏囊组织结构及免疫抗氧化功能均有明显改善,对法氏囊增殖和凋亡相关基因表达有明显调控作用。文章分别从分子和组织水平揭示中草药复方制剂对青脚麻鸡法氏囊生长发育和免疫功能的影响及可能机制,为新型中草药复方制剂研发及其在青脚麻鸡生产中的应用提供科学依据。     

鸡法氏囊T区生物学功能研究初报

分别由鸡法氏囊全囊、Ｔ区、非Ｔ区的抽提物，连续９d注入雏鸡腹腔内，经实验测定，结 果表明能提高法指数的有效活性物质更集中于Ｔ区，而不是非Ｔ区。能促进体重与法氏囊重正常生理发育的活性物质亦更集中于Ｔ区。因而鸡法氏囊不仅在结构上，而且在生物学功能上分为Ｔ区与菲Ｔ区两部分，该两部分在对鸡免疫器官及体重的正影响上，形成互补关系。     

鸡法氏囊中B淋巴细胞的发育

[目的]研究不同生长阶段正常鸡法氏囊内B淋巴细胞的动态变化规律。[方法]以海兰白鸡的200枚种蛋为试验材料,利用免疫组化法研究了IgM、IgG和IgA3种B淋巴细胞在法氏囊内的发育变化规律。[结果]在胚胎13日龄时,法氏囊内可检测到IgM＋和IgG＋2种B细胞,但IgM＋B细胞的数量显著高于IgG＋B细胞,而IgA＋B细胞在胚胎18日龄的法氏囊内才可检测到。随着日龄的增长,IgM＋、IgG＋、IgA＋3种B淋巴细胞整体变化呈上升趋势,并在21日龄时达到稳定。IgM＋、IgG＋、IgA＋3种B细胞分布部位相似,开始均出现在粘膜上皮内,随后分布在皮质中,而在成熟后主要分布在髓质中。[结论]在胚胎13日龄前,IgM＋B细胞可能在法氏囊内已经出现;鸡出壳后初期,法氏囊的体液免疫功能迅速增强,并在21日龄时达到成熟水平。     

中药复方制剂禽康素对鸡免疫功能的影响试验

将2周龄健康雏鸡,滴鼻免疫新城疫活疫苗,同时肌肉注射新城疫灭活疫苗,随机分为2组,试验组饲料中添加中药复方制剂禽康素,对照组饲料中不添加任何药物,连续给药14d。免疫后7、14、21d,采用β-微量血凝抑制试验检测雏鸡抗体水平,测定鸡的ERFC形成率和EAC花环形成率,计算脾脏、胸腺、法氏囊三种免疫器官指数。试验结果显示,试验组鸡和对照组相比,雏鸡抗体水平、ERFC形成率和EAC花环形成率、三种免疫器官指数均有显著提高。     

ACTH肌注建立鸡免疫抑制模型及其评价

连续7 d给鸡肌肉注射不同剂量(15、30、45 IU·kg-1·d-1)的ACTH(adrenocorticotropic hormone)后,通过生理学和免疫学指标对该模型进行了评价。结果显示,45 IU·kg-1·d-1处理组的血清皮质酮浓度、肾上腺指数均显著高于对照组(P<0.05);而血清IgG、IgA、IL-2、IFN-γ水平,胸腺、脾脏和法氏囊指数,组织IgG和禽β-防御素6生成量均显著低于对照组(P<0.05);处理组的血糖值仅在注射ACTH后2 h显著高于对照组(P<0.05),其他时间差异不显著。本研究表明,15、30、45 IU·kg-1·d-1的ACTH连续7 d肌肉注射可引起鸡应激性免疫抑制。血清皮质酮升高、肾上腺肥大和肾上腺皮质细胞增生肥大可用于评价持续应激,而血糖不适合评价持续应激;免疫抑制评价指标包括免疫器官萎缩,组织中免疫细胞数量、IgG和禽β-防御素6生成量下降,以及血清IgG、IgA、IFN-γ和IL-2水平降低。     

清凉冲剂对蛋用雏鸡免疫功能的影响

本试验选择1日龄体重(55.5±5.2)g农大三号雏鸡60只,随机分为2组。试验从第7日龄起,至49日龄时止,周期共计42 d。其中试验组饲喂中药(浓度为1 000 mg/L),添加比例为1∶1 000;对照组不喂药,常规饲养。第7,21,35,49日龄时,两组分别取5只仔鸡,心脏采血,用血凝抑制法(HI)测定各组血清NDV抗体水平;采用腹腔巨噬细胞功能测定法,计算其吞噬百分率和吞噬指数。随后剖杀取胸腺、法氏囊、脾脏等免疫器官,称量并计算免疫器官指数;试验结果显示:与对照组相比,免疫器官指数、NDV抗体水平以及腹腔巨噬细胞吞噬百分率和吞噬指数试验组均明显高于对照组(P<0.05或P<0.01)。说明清凉冲剂可以有效增强鸡的免疫功能。     

中药合剂对雏鸡免疫功能的影响

研究了中药合剂对雏鸡免疫功能及干扰素产生的影响。检测了试验组和对照组28,30,34,41,48,55日龄雏鸡血液T淋巴细胞对丝裂原ConA刺激的反应性;CD4+、CD8+T淋巴细胞亚群及CD4+/CD8+T淋巴细胞比值;ND抗体效价及胸腺、脾脏和法氏囊指数。结果表明,34~41日龄时中药合剂组雏鸡血液T淋巴细胞对丝裂原ConA刺激的反应性明显高于对照组(P<0.05);CD4+、CD8+T淋巴细胞亚群无明显变化,30~34日龄时能明显提高CD4+/CD8+淋巴细胞亚群比值(P<0.05);34~41日龄时试验组雏鸡HI抗体效价显著高于对照组(P<0.05);可使胸腺、脾脏和法氏囊指数增加,41日龄时法氏囊指数明显高于对照组(P<0.05);中药合剂对IFN具有明显的诱生作用(P<0.01),与NDV诱生组水平相当;同时可明显促进NDV对IFN的诱生(P<0.01)。结果显示中药合剂具有增强机体免疫功能及诱生IFN的能力,为该中药合剂抗NDV提供了理论依据。