黑龙江省马铃薯早疫病菌生物学特性研究

[目的]明确黑龙江省马铃薯早疫病菌(Alternaria solani)生物学特性的多样性.[方法]通过平板培养研究分离自黑龙江省马铃薯早疫病菌菌株的生物学特性.[结果]各分离株在PDA培养基上菌落生长速度、颜色、形态、成带现象等差异较大.其中的5个代表性供试菌株在PDA、CMA、OA培养基上生长较好,均能在10～35℃生长,但最适温度有一定的差异;供试菌株均能在pH 4～10的条件下生长,最适pH为6～8;光照对各分离株菌落生长有促进作用,各菌株对pH、光的反应不完全一致.[结论]说明黑龙江省马铃薯早疫病菌的生物学特性具有明显的遗传多样性.     

马铃薯炭疽病发生情况及室内药剂筛选

近年来,在甘肃省定西市马铃薯产区发现一种新病害:马铃薯炭疽病。2009-2011年7-10月,对不同品种、不同栽培措施以及不同土壤类型的马铃薯种植地块炭疽病发生情况进行了调查,定西市马铃薯炭疽病平均发病率高达12.6%,‘黑美人’、‘克新1号’和‘新大坪’发病率都高于50%,其中,地膜栽培发病率高于露地,沙质土壤高于黏土。为了有效控制炭疽病,本研究在室内选取7种杀菌剂,采用生长速率法进行药效评价。结果表明:75%肟菌.戊唑醇可湿性粉剂、250g/L嘧菌酯悬浮剂、25%溴菌腈可湿性粉剂3种杀菌剂的EC50较低,分别为5.039 3、5.448 3g/mL和5.538 6g/mL;其次是23%络氨铜水剂、80%百菌清可湿性粉剂、10%苯醚甲环唑水分散粒剂,EC50分别为6.082 8、6.300 8、6.884 9g/mL;EC50最大的是70%丙森锌可湿性粉剂,其值为9.200 3g/mL。     

9种杀菌剂对西瓜炭疽病菌的室内毒力测定及配比试验

为筛选防治西瓜炭疽病的高效低毒杀菌剂, 缓解和治理生产中病菌对药剂的抗性, 在室内离体条件下采用生长速率抑制法及孢子萌发抑制法测定了9种杀菌剂对西瓜炭疽病菌( Colletotrichum orbiculare )的毒力。结果表明, 嘧菌酯、咪鲜胺和甲基硫菌灵对病原菌菌丝生长的EC50在0.093 3~0.118 2 mg/L之间, 均小于1 mg/L, 表明西瓜炭疽病菌对上述杀菌剂比较敏感; 百菌清、烯肟菌酯和戊菌唑的EC50在2.310 1~5.925 9 mg/L, 病菌对药剂的敏感程度相对较低; 代森锰锌、恶霉灵和多菌灵的EC50分别为36.876 3、74.466 6和99.898 5 mg/L, 抑菌活性较差。孢子萌发试验中, 嘧菌酯、咪鲜胺和甲基硫菌灵对病菌孢子萌发的抑制活性最高, EC50在0.069 4~0.167 2 mg/L之间; 百菌清、烯肟菌酯、代森锰锌的抑制活性次之, EC50在1.853 0~9.503 9 mg/L之间; 多菌灵的抑制活性相对最低, EC50为99.335 3 mg/L。将两种不同作用机理的杀菌剂嘧菌酯与咪鲜胺按照2∶1的比例混配, 联合毒力测定和评价结果表明两者混配对抑制西瓜炭疽病菌具有增效作用。     

咯菌腈与苯醚甲环唑等三种药剂复配对马铃薯早疫病菌（Alternaria solani）的联合毒力

采用菌丝生长速率法测定咯菌腈分别与丁香菌酯、吡唑醚菌酯或苯醚甲环唑3种药剂复配对马铃薯早疫病菌(Alternaria solani)的联合毒力,以Wadley公式评价咯菌腈与其他3种药剂复配对抑制早疫病菌菌丝生长是否有增效作用。通过田间试验验证咯菌腈与其他药剂有增效作用的桶混产品对马铃薯早疫病的防治效果。结果表明,咯菌腈与上述3种药剂按9种配比混合均无拮抗作用(增效系数均大于0.5),咯菌腈与苯醚甲环唑以5∶1复配有明显的增效作用(增效系数SR 2.02),与丁香菌酯或吡唑醚菌酯的9种配比混合物有加和作用(SR介于0.5与1.5之间)。在田间咯菌腈与苯醚甲环唑以5∶1桶混,并以105g/hm2的剂量施用,防效可达85%以上、增产率40%以上,显著高于同浓度单剂的防效和增产率。     

抑制番茄早疫病菌活性化合物的 高通量筛选方法研究

以OD 630 值作为评价指标,在高通量筛选设备上建立了番茄早疫病菌Alternaria solania的高通量定量筛选方法,并对嘧菌酯、百菌清、 NFDA1 醚唑、霜脲氰、甲霜灵、代森锰锌、福美双和咪鲜胺8种常用杀菌剂对番茄早疫病菌孢子萌发和菌丝生长的抑制效果进行了评价,结果与孢子萌发法和目测筛选法所得结论基本一致。     

马铃薯早疫病菌对咯菌腈的敏感基线及其对不同药剂的交互抗性

采用菌丝生长速率法测定了河北省马铃薯主产区的122株早疫病菌Alternaria alternata对咯菌腈的敏感性,并测定了紫外诱导的15个抗咯菌腈突变菌株及其3个敏感亲本菌株对咯菌腈、异菌脲、腐霉利、苯醚甲环唑、吡唑醚菌酯的敏感性。田间马铃薯早疫病菌群体对咯菌腈保持高度敏感,122株早疫病菌对咯菌腈的EC₅₀值在0.0025~0.0857 μg/mL之间,平均值为0.0404±0.0171 μg/mL,相差34.87倍,呈近似正态分布,可作为早疫病菌对咯菌腈的敏感基线。此外,咯菌腈与吡唑醚菌酯和苯醚甲环唑之间无交互抗性关系,而与异菌脲和腐霉利之间存在正交互抗性关系。在田间药效试验中,50%咯菌腈WP施药量为105、115 g/hm²时,对马铃薯早疫病防效达80%以上,显著高于常规药剂80%代森锰锌WP 1 350 g/hm²和25%丙环唑EC 37.5 g/hm²的防效。表明咯菌腈可作为吡唑醚菌酯和苯醚甲环唑的替代药剂用于马铃薯早疫病的防治。     

马铃薯早疫病病菌ISSR-PCR反应体系优化

为了应用ISSR分子标记技术分析马铃薯早疫病病菌遗传多样性,采用单因素水平对影响ISSR反应的Mg~(2+),d NTPs、Taq DNA聚合酶、引物浓度及引物退火温度等条件进行了优化,建立了适宜于早疫病病菌的ISSR最佳反应体系。25μL的反应体系中,Mg~(2+)2.0 mmo1/L,d NTPs 0.15 mmol/L,Taq DNA聚合酶0.75U,引物0.40μmol/L;从30条ISSR引物中筛选出10条多态性较好的ISSR引物,并确定了各条引物的退火温度。结果为应用ISSR分子标记技术研究马铃薯早疫病病菌遗传多样性奠定了基础。     

7种杀菌剂对金钱树疫病病原菌的室内毒力测定

采用室内生长速率法测定了7种杀菌剂对金钱树疫病病原菌棕榈疫霉(Phytophthora palmivora Butler)的抑制作用.结果表明:0.15%四霉素水剂的抑制效果最好,EC50值为0.0457μg/mL,EC90值为0.2174μg/mL;其次为6.25%精甲·咯菌腈悬浮种衣剂和50%烯酰吗啉水分散粒剂,抑菌效果显著,前者的EC50值为0.0758μg/mL,EC90值为2.4683μg/mL,后者的EC50值为0.3407μg/mL,EC90值为2.0794 μg/mL;22.7%二氰葸醌悬浮剂、80%代森锰锌可湿性粉剂和50%氟码·乙铝可湿性粉剂对菌丝生长也有一定的抑制作用,其EC50值分别为0.1382 μg/mL、2.3796μg/mL和5.4602μg/mL;72.2%霜霉威盐酸盐水剂的抑制效果最差,EC50值为498 μg/mL.在供试的7种杀菌剂中,性价比以80%代森锰锌可湿性粉剂最高,其次为50%烯酰吗啉水分散粒剂.     

马铃薯早疫病菌分生孢子萌发条件的研究

为了明确马铃薯早疫病菌分生孢子萌发的条件,研究了温度、湿度、pH、光照、营养条件等对马铃薯早疫病菌分生孢子萌发的影响。结果表明,分生孢子在水滴中于30℃1 h即可萌发,8 h后达到萌发高峰,萌发率为98.4%;萌发的最适温度为30℃;相对湿度85%以上均可萌发,水滴中萌发率最高;pH6~10的条件利于分生孢子萌发;紫外线对分生孢子萌发有抑制作用;无机氮源中的铵态氮和尿素对孢子萌发有抑制作用,有机氮源中半胱氨酸和谷氨酸对孢子萌发有抑制作用;山梨糖不利于分生孢子萌发;光照对分生孢子萌发也有抑制作用;分生孢子致死温度是57℃。     

不同杀菌剂对番茄早疫病菌的室内毒力测定

番茄早疫病由真菌茄链格孢菌侵染所致的一种病害,也是武汉地区番茄生产中发生最为普遍的一种病害,5月下旬到6月,是早疫病发生高峰期,发病严重时引起落叶、落果和断枝,对产量影响很大,常年减产20%～30%,严重时达50%以上,甚至绝收.     

马铃薯早疫病病原菌鉴定及其对不同药剂的敏感性

 为了明确马铃薯早疫病病原菌及其对不同药剂的敏感性,2009~2011年从河北省5个县采集180个早疫病样,以常规方法进行分离与纯化。根据病原菌的形态特征和致病性,结合其rDNA-ITS区域的序列分析对病原菌进行鉴定,并采用菌丝生长速率法测定病原菌对不同药剂的敏感性。结果分离到两种菌（A、B）,分离比例为4:6。致病性测定证实分离菌A和B均为马铃薯早疫病病原菌。经形态学鉴定,初步认定A为茄链格孢（Alternaria solani）,B为链格孢（Alternaria alternata）。采用通用引物ITS1/ITS4对病原菌A和B的rDNA-ITS序列区扩增并测序,通过与GenBank数据库比对,A与A.solani同源性为98%,B与A.alternata 的同源性达100%。两种病原菌对咯菌腈、吡唑醚菌酯、啶酰菌胺、苯醚甲环唑等药剂的敏感性差异极显著,而对异菌脲的敏感性差异不显著。因此,将河北省马铃薯早疫病菌鉴定为茄链格孢（A.solani)和链格孢（A.alternata）,二者对同一药剂的敏感性不同。     

Effects of inoculum concentration, wetness duration and plant age on development of early blight (Alternaria solani) and on shedding of leaves in tomato plants

Effects of inoculum concentration, wetness duration and plant age on the development of tomato early blight were evaluated in relation to host susceptibility under controlled environmental conditions. The main effect of early blight was premature defoliation, which was linearly related to the percentage of leaf area showing symptoms. As ln(inoculum concentration, conidia mL⁻¹) increased from 6·2 to 11·5, the percentages of leaf area affected and of defoliation increased linearly. Four h of leaf wetness after inoculation were sufficient to initiate the disease on plants of hybrid Skala RZ but not on those of cv. Rio Rojo, for which at least 6 h leaf wetness were needed. As wetness duration increased up to 24 h, there was an increase in the percentage leaf area showing symptoms and in the percentage of defoliation, but thereafter there was no significant increase in either parameter. Tomato plants were susceptible to Alternaria solani at all growth stages, but susceptibility increased as plants matured. There were no significant differences in susceptibility between tomato cultivars and hybrids.