奶牛新鲜和冷冻胚胎分割移植试验

用简单方法,分割7～8日龄新鲜牛胚胎(1分为2),裸半胚成对移植给66头受体,90天妊检,移植妊娠率为56.1％(37/66)。除6头流产和尚有5头待产外,已有26头受体产犊35头,其中有9对同卵双胎,双胎率为34.6％(9/26),半胚产犊率为29.2％(35/120)。对影响成对半胚移植妊娠率和半胚产犊率的诸多因素如胚胎质量,胚胎在体外停留时间、胚胎发育阶段、受体牛品种、黄体状况等进行了较系统的研究。同时对冷冻胚胎进行了分割试验,移植妊娠率为45.5％(5/11),已产3头犊牛。对快速冷冻和常规冷冻胚胎分割后的移植妊娠率进行了比较,分别为25.0％(1/4)和57.4％(4/7)。     

奶牛冷冻胚胎分割移植效果探讨

分割加拿大奶牛冷冻胚胎 ,借荷斯坦牛受体移植。共分割冷冻胚胎 1 5枚 ,分割为裸半胚 30个 ,分割成功率 1 0 0 %。移植受体 2 7头 (其中移植一对半胚的受体 3头 ) ,移植妊娠 1 4头 ,受体移植妊娠率51 .85% ,产犊 1 4头 ,半胚产犊率为 4 6 .6 7% ,按未分割的整胚计算 ,产犊率达到 93.34 % ,比整胚移植产犊率还提高 1 8.34个百分点。移植半胚生产 1头犊牛需胚胎 1 .0 7枚 ,比整胚减少 0 .2 6枚 ,降低成本1 51 0 .6 0元。说明胚胎分割是降低成本 ,扩大卵源 ,增加良种牛数量的有效方法。     

奶牛分割胚胎移植黄牛效果观察

用便携式分割仪在现场分割7日龄鲜胚。二枚半胚成对移植给172头黄牛受体．受体移植妊娠率50％(86／172），现已有68头受体产犊91头．其中23对为同卵双胎．双胎率33．8％(23／68)。对分割胚胎的移植妊娠率产犊率、妊娠期、季节、黄体状况等多种因素进行了研究和比较，结果表明差异皆不显著。     

奶牛冷冻胚胎分割和分割后半胚冷冻技术

用简易分割方法,分割奶牛冷冻胚胎16枚,获得半胚32枚,分割成功率为100％(16/16),可移植半胚29枚,移植于16头受体牛,到第3个情期未返情者经直肠检查有6头妊娠,妊娠率为37.5％(6/16)。其中,在分割前或者分割后经恢复培养0.5～2h再移植的10头受体牛,5头妊娠;而未经恢复培养,分割后直接移植的6头受体牛中,只有1头妊娠。移植后3个月,直肠检查确定2头流产。已有1头受体黄牛生出1头奶牛牛犊(母)和1头受体奶牛产1头奶牛牛犊。其余的2头妊娠受体牛将于9月份产犊。此外,用简易分割法分割奶牛胚胎5枚,得到半胚10枚,裸半胚直接冷冻,解冻后回收可移植半胚5枚,移植于4头受体牛,无一头妊娠。结果表明,冷冻胚胎的分割半胚优于分割后冷冻半胚移植效果;冷冻胚胎分割前或者分割后恢复培养移植优于未经恢复培养而直接移植;简易分割法可应用于冷冻胚胎的分割。     

牛半胚冷冻技术的研究

哺乳动物的半胚冷冻技术,是在胚胎分割和冷冻技术的基础上逐渐发展起来的.牛半胚冷冻的意义在于获得不同年龄的同卵孪生牛犊,以加速对优良种牛的选育.Lehn—Jenson首次获得了牛半胚冷冻的同卵孪生犊;Niemann、Brem对分割半胚的冷冻技术进行了深入的研究,取得了一定的成果.本实验采用简易分割方法获得牛半胚,对牛分割半胚冷冻的移植效果作了观察,现简报如下.     

影响和牛双半胚移植妊娠率因素分析

研究和牛胚胎不同胚龄和移植方式对分割双半胚移植妊娠率的影响。结果表明:致密桑椹胚、早期囊胚、囊胚分割后双半胚移植妊娠率分别为60.2%、53.8%和50.0%,随着胚龄的上升妊娠率有下降趋势,各组间无显著差异(P0.05);移植到受体牛同侧子宫角双半胚妊娠率高于子宫角双侧各移植半枚分割胚和整胚(58.6%、41.7%、51.2%)(P0.05),双侧移植双犊率显著高于单侧移植和整胚移植(85.7%、36.9%、0%)(P0.01)。     

移植奶牛胚胎冷冻解冻后分割成的 二分胚生产同卵双生犊牛的实验

对解冻后品质优良的A级囊胚进行分割,并将二分胚移植生产同卵双生犊牛。结果表明,9枚A级囊胚切割成18枚半胚,胚胎分割成功率100%（9/9）。单胚移植受体6头,妊娠2头,妊娠率33.3%;双半胚移植6头,妊娠2头,妊娠率33.3%。     

奶牛胚胎分割试验研究

简单分割7～8天奶牛胚胎59枚(117个半胚)。裸半胚成对移给59头奶牛或黄牛,80～90天有27头(45.8％)妊娠。最后24头受体产犊34头,半胚产犊率29.1％(34/117)。有10对双胎,双胎率41.7％(10/24)。比较在不同情况下—7天或8天;晚桑椹或囊胚期;透明带软化处理或不软化处理—分割的半胚,成对移植后受体妊娠率分别是40.0％和57.9％;35.7％和54.8％;48.6％和41.7％。半胚产犊率分别是26.6％和34.2％;23.6％和33.9％;30.0％和27.7％。均无显著差异(P>0.05)。分割优质胚胎得到最好的(35.7％)半胚产犊率。半胚在体外5小时内移植有较高(30.5％)的产犊率。试验探索了奶牛半胚移给远处分散的农户黄牛的可能性。11对奶牛半胚移给11头黄牛有6头(54.5％)妊娠。最后5头受体产下7头奶牛犊,两对同卵双胎。     

移植奶牛胚胎冷冻后分割成的二分胚生产同卵双生犊牛的实验

对解冻后品质优良的Ａ级囊胚进行分割，并将二分胚移植生产同卵双生犊牛。结果表明：９枚Ａ级囊胚切割成１８枚半胚，胚胎分割成功率１００％。单胚移植受体６头。妊娠２头，妊娠率３３．３％；双半胚移植６头，妊娠２头，妊娠率３３．３％。     

奶牛四分胚分割研究

用玻璃针四等分7天的奶牛胚胎为四分(1/4)胚。同一胚胎2个四分胚装回空透明带内,另2个四分胚不装带,成对非手术移给受体奶牛。两次试验共分割胚胎(晚桑椹到囊胚期)11枚,得到42个四分胚。移植受体32头,有3头妊娠。最后,一头受体生出一对同卵双胎四分胚母犊,另一头产一四分胚母犊,均由装带四分胚发育而来。还有一头受体产一四分胚公犊,是由未装带的四分胚发育得到的。试验还分割一个8天囊胚,把一个无带四分胚先放在体外培养24小时再移入受体。结果获得一头四分胚母犊。     

牛双胎生产技术的现状

在自然状态下牛的双胎率因品种、胎次、地区的不同而异,但一般牛的双胎率为1～4％。使用胚胎移植技术可以得到较高的双胎率,从而有可能扩大肉牛生产并降低生产成本。本文就应用胚胎移植技术生产双犊的方法作一简介。一.双犊生产技术双犊生产有以下几种方法。 1.移植2枚胚胎生产双犊此法是给一头母牛移植2枚胚胎,使之一次妊娠并分娩2头犊牛。应用该项技术,受胎率和双胎率都高,这是当前双犊生产的主要方法。通过移植2枚胚胎生产双犊的方法有两种:向两侧子宫角各移植1枚胚胎或向黄体侧子宫角移植2枚胚胎。     

国内外牛胚胎移植技术新进展

牛鲜胚移植程序主要包括:供受体牛的选择准备,供体牛的超数排卵,受体牛的同期发情,冲卵,检卵及胚胎的移植。胚胎冷冻、体外受精、胚胎分割及胚胎性别鉴定等项新技术是牛鲜胚移植的深化与发展,是生物工程的基本手段。     

和牛母牛超数排卵及胚胎移植试验研究效果初报

[目的]研究和牛母牛超数排卵及胚胎移植效果。[方法]利用纯种和牛母牛作为供体,荷斯坦母牛及西杂母牛作为受体,通过供体牛的超数排卵、人工授精、采胚、胚胎冷冻及受体牛的同期发情和鲜胚移植,快速获得纯种和牛及和牛胚胎。[结果]对4头青年纯种和牛母牛进行超排,重复冲卵13头次,共采卵数122枚,其中75枚可用胚胎,可用胚率为61.5%,平均5.76枚/头次。对75头荷斯坦牛及西杂母牛同期发情,结果获得89.2%的同期发情率。67头受体牛移植了鲜胚,2个月后妊娠检查有35头怀孕,移植妊娠率为52.23%。[结论]可以利用超数排卵及胚胎移植增加和牛母牛利用效率。     

应用胚胎移植使已配南阳牛产双胎的试验研究

<正> 近年来,我国牛胚胎移植技术和以胚胎移植为基础的胚胎生物技术工程发展很快,用2枝胚胎、2枚半胚(胚胎分割)移植给受体母牛产双胎均获成功。1988年我们用已配黄牛作受体进行奶牛胚胎移植一次生下一黄一奶两头牛犊。现报告如下:1 试验材料1.1 供试牛从南阳市奶牛场和市郊农民饲养的黄     

武汉市畜牧兽医科研所将胚移技术转化为生产力

牛胚胎移植是生物工程领域的一项系列技术.目前该项技术在国外已从鲜胚移植发展到超低温冷冻保存胚胎、胚胎分割和试管牛犊等细胞工程技术,并将广泛应用于生产。我所从1979年起开展奶牛胚胎移植技术研究,目前已完成鲜胚移植、超低温冷冻保存胚胎和胚胎分割技术的实验。     

山羊胚胎分割及同卵双生试验

选择山羊晚期桑椹胚、囊胚、孵出囊胚和孵出增大胚泡,用简化分割法二分。将19对裸半胚移植于18只受体羊,结果有12只妊娠,其中两只胚胎消失,两只流产,其余8只足月分娩,共产半胚羔11只。晚期桑椹胚、囊胚、孵出囊胚和孵出增大胚泡各组的半胚发育为羔羊的发育率分别为12.5％(1/8)、20％(2/10)、25％(3/12)和62.5％(5/8)。前三组均未获得同卵双生羔羊。在第四组,将4对裸半胚移植于4只受体,有3只妊娠,足月分娩半胚羔5只,其中两对为同卵双生。本研究证明,对称分割山羊孵出增大胚泡,不仅其半胚在体内仍可继续发育形成正常胎儿,而且不装透明带移植其裸半胚,仍能获得较高的同卵双生率。山羊孵出增大胚泡更适宜用简化分割法分割。     

哺乳动物胚胎分割技术研究进展

胚胎分割是指将哺乳动物的胚胎采用手术或非手术的方法从子宫或输卵管中取出，人为的利用机械或化学方法将其分割成2个或多个部分，分割后的每个部分在适宜的条件下进行体外培养、移植回受体子宫或输卵管（或不经过培养直接移植），可从1枚胚胎获得2个或多个基因型和表型一致的后代。胚胎分割技术可用于扩增可用的优良胚胎的数目和生产同卵双胎、同卵多胎的克隆动物，可用于濒危动物的保护，也可为早期胚胎遗传疾病的检查和性别鉴定等技术提供一种活体组织检查的方法。作者将介绍胚胎分割的研究进展、技术方法及其相关问题。     

不同核移植方法对牛体细胞核移植效率的影响

以牛皮肤成纤维细胞为供体细胞,比较了电融合法和细胞质内注射法2种核移植方法对体细胞核移植效率的影响.电融合法构建重组胚的效率显著低于细胞质内注射法(47.1%比89.0%,P＜0.01);重组胚培养36 h后的裂卵率和培养8 d时囊胚发育率无明显差异(76.4%比73.2%,11.2%比12.3%;P＞0.05),但相对于操作的卵母细胞总数而言,电融合法得到的总囊胚发育率显著低于细胞质内注射法(5.6%比10.9%,P＜0.01).结果表明,用细胞质内注射法进行体细胞核移植效率更高.将发育到桑椹胚和囊胚期的95枚核移植胚胎移植到33头受体牛,其中31头受体牛在移植后第2个情期前返情;1头受体牛在移植后75 d返情,但未进行直肠检查,无法确定妊娠情况;1头受体牛在移植后60 d未见返情,直肠检查确证妊娠,93 d受体牛流产.胚胎移植结果表明,用细胞质内注射法构建的体细胞核移植胚胎至少可以维持早期妊娠.     

影响牛胚胎移植妊娠率的因素

牛的胚胎移植自70年代中期国际上已从实验转入应用阶段,商业性机构纷纷建立。80年代以来,发展更为迅速,并在胚胎显微切割、基因导入和胚胎性别鉴定等技术方面取得了突破性进展。胚胎移植由许多复杂的环节组成,无论是那一个环节的疏忽,都会影响移植的效果。目前国际上非手术鲜胚移植妊娠率为60—70％,我国为50—60％,冻胚妊娠率则比鲜胚低15—20％。因此,研究影响牛胚移妊娠率的因素,对提高胚胎移植效果,降低成本,具有重要的现实意义。一,胚胎质量胚胎质量对移植能否成功关系颇大。目前胚胎质量的形态学评价及质量级别的划分是主观的,常因评定人员及实验室的不同而有差别。但一般来     

胚胎移植技术的现状与展望

统计与分析了1991－2000年国际胚胎移植状况，结果表明胚胎移植已成为畜牧产业中最活跃的领域之一，胚移比例最大的依然是牛，其它各类的动物胚胎移植，如：绵羊、山羊、猪、马、鹿、美洲驼、羚羊等，也十分活跃。牛的胚胎移植，有几个重要指标分析结果如下：（1）供体牛的品种分布基本相同，肉牛与奶牛所占比例接近，但不同国家之间差别很大；（2）每头供体所得可用胚数在5－6枚之间；（3）鲜胚移植与冻胚移植的比例基本持平，但近年来冻胚移植的比例稍大于鲜胚移植；（4）通过IVF体外方式生产胚胎数目有所增长，目前每年大约在3－4万枚；（5）妊娠率、鲜胚移植妊娠率在60％以上，冻胚移植妊娠率在50％以上，IVF体外方式生产胚胎妊娠率在40％左右；（6）胚胎移植技术的发展状况在全世界分布不均衡，北美和欧洲胚移技术最成熟；（7）胚胎贸易有所增长。最后，对该技术存在的问题与发展前景提出了探讨和展望。