鸡法氏囊,新城疫同胚接种制造弱毒二联苗

鸡传染性法氏囊病（ＩＢＤ）和新城疫（ＮＤ）病毒接种同一鸡胚收种毒试制ＩＢＤ,ＮＤ二联弱毒冻干疫苗,并按《规程》方法分别检验,结果证明安全,效力均能达到合格标准,两种病毒互相不干扰体的产生。     

同胚接种IBDV和NDV制造二联弱毒苗

用鸡传染性腔上囊病病毒（IBDV）和新城疫病毒（NDV）接种同一鸡胚收取种毒，试制IBDV、NDV二联弱毒冻干疫苗，安全性和效力检验均达到这2种单苗《规程》规定的标准，证明2种病毒在鸡体人产生互不干扰抗体。     

鸡传染性法氏囊病—新城疫二联峰胶灭活苗的研制

用自行分离鉴定的鸡法氏囊病病毒（ＤＦＣ３Ｖ株）与Ｉ型标准毒株（Ｄ７８株）和新城疫病毒（ＬａＳｏｔａ株）联合研制的蜂胶灭活苗,经实验室和田间试验证明,雏鸡肌肉或皮下注射０．５ｍｌ／只,注后７天产生免疫抗体,攻毒后保护率为６０％,注后１４天功玫毒保护率为１００％,免疫后１８０天,攻毒保护率为８０％,本苗与白油佐剂苗免疫效力对比试验结果表明,蜂胶佐剂苗免疫效和产生白油佐剂苗为快而持久,该苗保存于４～８℃     

鸡新城疫、鸡传染性法氏囊病二联活疫苗

鸡新城疫是鸡的一种急性、烈性传染病,流行于世界各地,其主要特征是呼吸困难、拉稀、神经紊乱、传播快、死亡率高。鸡传染性法氏囊病是一种危害幼鸡的急性、高度接触性、病毒性传染病,淋巴细胞,尤其是B淋巴细胞是主要的靶细胞,法氏囊是受影响最大的组织。在易感鸡群中疾病是突然     

法氏囊活性肽对新城疫弱毒疫苗免疫效果影响的研究

本研究通过鸡两次注射法氏囊活性肽后,接种新城疫弱毒疫苗,观察法氏囊活性肽对新城疫弱毒疫功免疫效果的影响,结果表明,纯化的法氏囊活性肽能够提高新城疫弱毒疫苗所诱导产生的血清抗体水平,试验组比对照线平均高１～２个滴度,使血清母源新城疫抗体水平维持较高水平,促进法氏囊的生长发育,对抗传染性法氏囊弱疫苗（ＩＢＤ）对法氏囊的损伤,和（或）促进损伤后的法氏囊的修复,对脾脏的生长发育同有影响。     

法氏囊活性肽对新城疫弱毒疫苗免疫效果影响的研究

本研究通过给鸡两次注射法氏囊活性肽后,接种新城疫弱毒疫苗,观察法氏囊活性肽对新城疫弱毒疫苗免疫效果的影响,结果表明：纯化的法氏囊活性肽能够提高新城疫弱毒疫苗所诱导产生的血清抗体水平,试验组比对照组平均高１～２个滴度;使血清母源新城疫抗体水平维持较高水平;促进法氏囊的生长发育,对抗传染性法氏囊弱毒疫苗（ＩＢＤ）对法氏囊的损伤,和（或）促进损伤后的法氏囊的修复,对脾脏的生长发育没有影响。     

鸡传染性法氏囊病细胞弱毒苗的研制

采用ＩＢＤＶ－Ｄ＿（７８）株种毒，由细胞培养研制的ＩＢＤ弱毒疫苗，经安全试验和免疫试验，证明适合本地流行毒株，试验免疫保护率１００％，对照鸡均发病。     

鸡传染性支气管炎病毒(IBV)干扰新城疫病毒(NDV)增殖现象的研究

ＩＢＶ毒株Ｈ１２０、Ｈ５２、ＭＡ５对ＮＤＶ－ＬａＳｏｔａ的干扰实验证明ＩＢＶ特异性干扰ＮＤＶ增殖。１）采取不同顺序的同胚接种法：ＩＢＶ接种之后再接种ＮＤＶ;或ＮＤＶ接种之后再接种ＩＢＶ,及ＩＢＶ,ＮＤＶ同时接种,ＩＢＶ均干扰ＮＤＶ的增殖。２）ＮＤＶ接种３６小时之内,干扰现象最为明显,Ｈ１２０,Ｈ５２的干扰能力稍强于ＭＡ５。３）ＮＤＶ血清中和实验结果显示,不同顺序同胚接种ＮＤＶ、ＩＢＶ时,ＮＤＶ－ＬａＳｏｔａ不影响ＩＢＶ的增殖能力。同胚增殖ＩＢＶ,ＮＤＶ的关键是控制ＮＤＶ、ＩＢＶ的接毒量及选择合适的收毒时间。     

共表达NDV F和IBDV VP0基因重组鸡痘病毒遗传稳定性研究

将共表达NDV F和IBDV VP0基因重组鸡痘病毒(重组鸡痘病毒vFV282)接种10日龄~11日龄SPF鸡胚,连续传10代,分别对第5、8、10代传代毒进行病毒毒价测定和PCR鉴定;重组鸡痘病毒vFV282接种鸡胚成纤维细胞,分别对第1、5、10、15、20、25、30代传代毒进行病毒毒价测定和PCR鉴定;重组鸡痘病毒vFV282翅翼刺种于鸡体上,连续传8代,对第3、5、8代传代毒进行病毒毒价测定和PCR鉴定。结果表明,重组鸡痘病毒vFV282在SPF鸡胚上传10代、在SPF鸡胚成纤维细胞传30代、在鸡体传8代后,其毒力未返强,F基因和VP0基因未发生缺失和变异。     

共表达NDV F、IBDV VP0基因重组鸡痘病毒中和抗体消长规律

将海兰褐蛋雏鸡随机分为对照组、肌肉注射组、刺种Ⅰ组和刺种Ⅱ组,用共表达NDV F和IBDV VP0基因重组鸡痘病毒进行免疫,对照组刺种生理盐水,在免疫后的第7,14,21,28,35,42,49 d和56 d采血,分离血清,用固定病毒稀释血清法测血清中抗FPV,NDV,IBDV的中和抗体效价.经分析,抗FPV中和抗体效价及抗NDV中和抗体效价免疫后14 d达到高峰,28 d后下降幅度不明显,42 d时仍保持一定水平;抗IBDV中和抗体效价免疫后21 d达到高峰, 28 d后下降幅度不明显,42 d时仍保持一定水平.     

共表达新城疫病毒F基因、传染性法氏囊病病毒VP0基因的重组鸡痘病毒的抗原性和免疫原性

以鸡痘病毒(FPV)282E4株TK基因为侧翼,将2个相同的复合启动子ATI@p7.5×20以反向方式连接,分别调控新城疫病毒(NDV)F基因和传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP0基因,得到重组转移质粒pVP0-2ATI@p7.5×20F.然后将该重组转移质粒用脂质体转染预先感染FPV 282E4株的鸡胚成纤维细胞(CEF),在经BrdU(5-溴-脱氧尿嘧啶)加压处理后的CEF上传代,用间接免疫荧光试验、Western blot检测,有2株鸡痘病毒能同时表达NDV F蛋白和IBDV VP0蛋白.用这2株重组鸡痘病毒刺种商品Leghorn雏鸡,于刺种前及刺种后1、2、3周对抗NDV特异性抗体水平和淋巴细胞转化能力检测,结果发现,重组鸡痘病毒能激发机体产生良好的免疫反应.结果表明,重组鸡痘病毒可以作为疫苗备选株进行研究与开发.     

共表达NDVF和IBDV VP0基因重组鸡痘病毒遗传稳定性研究

将共表达NDVF和IBDVVP0基因重组鸡痘病毒（重组鸡痘病毒vFV282）接种10日龄～11日龄SPF鸡胚，连续传10代，分别对第5、8、10代传代毒进行病毒毒价测定和PCR鉴定；重组鸡痘病毒vFV282接种鸡胚成纤维细胞，分别对第1、5、10、15、20、25、30代传代毒进行病毒毒价测定和PCR鉴定；重组鸡痘病毒vFV282翅翼刺种于鸡体上，连续传8代，对第3、5、8代传代毒进行病毒毒价测定和PCR鉴定。结果表明，重组鸡痘病毒vFV282在SPF鸡胚上传10代、在SPF鸡胚成纤维细胞传30代、在鸡体传8代后，其毒力未返强，F基因和VP0基因未发生缺失和变异。     

CAV基因T程亚单位苗与IBDV二联灭活疫苗的研究

IBDV为自行分离的VVIBDV COB－C1组织毒,毒价为CELD5010^5.0/0.2mL,CAV为VP1和VP2基因克隆进家蚕杆状病毒转基因载体质粒中,后经重组,筛选后获得的重组VP1和VP2基因产物,IBDV经甲醛灭活后与CAV按适当比例混合。1：4与白油佐剂研制成油包水型乳化剂二联疫苗,经安全试验、免疫保护试验证明该二联灭活疫苗安全有效,免疫种鸡群后可使其后代产生IBDV和CAV抗体,雏鸡得到较好的保护。     

七彩山鸡传染性法氏囊病及其并发感染

1998年,贵阳地区两个珍禽养殖场（A场和B场）的七彩山鸡暴发一种以急性死亡、法氏囊肿大为特征的传染病。病料对试验鸡能引起临床症状和死亡,复制出在自然病例中观察到的典型病理变化。A场无并发感染,死亡率为11．4％,死亡高峰出现在第5天;B超由于致病性链球菌的混合感染,死亡率上升到50％,死亡高峰提前到第3天,剖解病变更加复杂化,该场的致病性链球菌是加剧本病高死亡率和严惩的出血性素质的真正原因。该病毒能引起实验鸡出现临床症状和死亡,复制出在自然病例中观察到的曲型病理变化。另对两场的鸡新城疫（ND）和鸡减蛋综合症（EDS）的血清效价测定结果表明,部分鸡群的ND免疫不合格,鸡群曾被EDS病毒感染过。     

不同方法对鸡胚和法氏囊中囊病病毒抗原含量的检测比较

用单抗介导的抗原捕获－酶联免疫吸附试验（AC－ELISA），琼脂扩散试验（ACP）快速诊断试纸条（ISK）对感染同株强毒或弱毒囊病病毒（IBDV）的鸡胚和鸡法氏囊中的病毒抗原效价进行了检测比较，结果表明，上述3种方法测得法氏囊中温毒IBDV抗原效价分别为10^6.0(AC-ELISA),2^-3.0(AGP)t 10^-3.0，测得鸡胚中强毒IBDV抗原效价依次为10^-1.0,0和0。强毒株接种鸡胚后，只有第1代鸡胚组织可被AC－ELISA测到低效价的IBDV抗原，而第2代以后则未能测到病毒抗原，弱毒疫苗株IBDV感染鸡后，法氏囊中可测到低效价抗原，但感染鸡胚后则无可测性病毒抗原。     

应用Dot－ELISA快速检测传染性法氏囊病病毒

本文成功建立了斑点酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ），应用于传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）的快速检测。该方法操作简便快速、特异性好、灵敏度高。同时对深圳某鸡场发生ＩＢＤ病料进行了病毒分离，用Ｄｏｒ－ＥＬＩＳＡ检测接种鸡胚的绒毛尿囊膜裂解上清呈强阳性反应。     

应用Dot－ELISA快速检测传染性法氏囊病病毒

本文成功建立了斑点酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ），应用于传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）的快速检测。该方法操作简便快速、特异性好、灵敏度高。同时对深圳某鸡场发生ＩＢＤ病料进行了病毒分离，用Ｄｏｒ－ＥＬＩＳＡ检测接种鸡胚的绒毛尿囊膜裂解上清呈强阳性反应。