保护性抗原和保护性免疫应答的特性

疫苗的保护性免疫应答，可能是由于循环抗体（体液）、激活的致性Ｔ淋巴细胞（细胞免疫）、粘膜表面的分泌型ＩｇＡ（粘膜免疫）的作用或是这些因素的联合作用，一般而言，体液免疫在抗本身性病素，细胞感染和抵抗毒素引起的疾病的保护中特别重要；细胞免疫在抗细胞内细菌、病毒感染，真菌病和原虫病的保护中特别重要，而分泌型ＩｇＡ的重要性则在于能抵抗病原吸附在上皮表面所引起的细菌病和病毒病以及抵抗毒素在粘膜表面引起的疾病     

鸡新城疫病毒抗原超滤技术研究

应用分子筛过滤技术超滤浓缩鸡新城疫病毒,并就ＮＤＶ抗原量对鸡免疫应答的和了动态研究,试验结果显示,将ＮＤＶ对外开放尿囊毒浓缩４倍体积,ＨＡ效价提高了２个滴度,病毒回收率达１００％;病毒活性亦未发生改变。免疫１１天后,ＮＤ浓缩苗和ＮＤ－ＩＢＤ二联苗组鸡的ＮＤ－ＨＩ抗体水平远远高于免疫对照组,差异极显著。结果表明,所建超滤技术适用于ＮＤＶ怕的浓缩应用;适量增另ＮＤＶ怕量能够加快鸡的体液免疫应答,增强鸡     

感染IBDV雏鸡免疫器官对颗粒抗原的免疫应答

对１日龄感染和未感染传染性法氏囊病毒雏鸡接种小鼠红细胞后，免疫中枢器官（法氏囊、胸腺），外周免疫器官（脾脏），以及消化道和呼吸道相关的局部免疫组织（盲肠扁桃体、哈德尔腺）中浆细胞、ＡＮＡＥ＾＋Ｔ细胞、淋巴细胞数的变化及其分布进行了检测。结果表明：１日龄雏鸡感染传染性法氏囊病毒后，其免疫器官组织对小鼠体液免疫和细胞免疫应答均明显降低。     

多头绦虫抗原特性的研究：———绵羊免疫及感染后的细胞应答反应研究

分别用多头蚴原头节抗原、原头节排泄分泌抗原、囊壁抗原、囊液抗原对绵羊免疫注射３次,以及攻击感染多头绦虫虫卵后,运用酸性α－醋酸萘酯酶染色法及姬姆萨染色法研究了外周血液Ｔ淋巴细胞、Ｂ淋巴细胞、嗜酸性粒细胞及淋巴细胞的应答反应。结果表明,绵羊感染多头绦虫虫卵后外周血液中Ｔ淋巴细胞数量增加,Ｂ淋巴细胞数量减少,感染后第５周到第６周Ｔ淋巴细胞数量达到峰值,此后开始下降,第３２周时趋于正常,淋巴细胞总数在感     

病毒干扰抗原递呈途径和细胞杀伤作用的研究进展

从病毒干扰宿主免疫细胞对病毒抗原的摄取、递呈和杀伤等方面阐述了病毒抗感染免疫应答的研究进展。探讨了病毒感染宿主后，病毒对机体细胞免疫应答的抑制、对各种免疫杀伤细胞功能的阻断以及在宿主体内延续感染的机制。     

用聚乙酸乙烯酯胶乳制备猪瘟免疫监测抗原的研究

以聚乙酸乙烯酯胶乳为微载体，以犊牛睾丸细胞培养的猪瘟兔化弱毒为抗原，研制猪瘟聚乙烯乙烯酯胶乳免疫监测抗原，用于快速检测猪瘟免疫抗体和猪瘟母源抗体。     

猪瘟病毒E2蛋白抗原表位的表达与免疫活性研究

以猪瘟病毒全长基因组质粒为模板,PCR扩增出E2囊膜糖蛋白上A/D抗原区B细胞表位878aa～938aa;PCR扩增片段连接到pET-32a( )载体构建pET-AD原核表达质粒,将阳性质粒转化到BL21大肠埃希菌中诱导表达,以Ni-NTA亲和柱纯化,纯化后的蛋白进行Western blot鉴定。结果表明,重组质粒pET-AD在BL21大肠埃希菌中可以高效表达,表达的蛋白质经纯化后仍然有反应原性。     

山羊免疫弓形虫代谢分泌抗原后的免疫应答

将山羊随机分为6组,即E／SA纽、E／SA＋cpG组（未乳化）、E／SA＋CpG组、E／SA＋IL-2组、E／SA＋IL-2＋CpG组、对照组,每组3只,分别于免疫前、免疫后第2周、免疫后第4周、感染后第1周及感染后第2周采集山羊外周全血及涂血片,IHA法检测抗体滴度的动态变化;ELISA法检测IFN-γ、TNF—a、IL-2、IL-4的表达水平;ANAE染色法检测T淋巴细胞的动态变化。结果显示,免疫后各免疫组的IFN-γ、TNF-a、IL-2、IL-4及T淋巴细胞水平显著高于对照组（P〈0．05）,各免疫组的抗体水平均高于对照组。结果表明,E／SA可引起IFN—γ、TNF—a、IL-2、IL-4、T淋巴细胞及抗体水平的升高,说明E／SA免疫后可引起山羊较强的细胞免疫和体液免疫应答。     

鸡瘦素蛋白输卵管特异性表达载体的构建及其表达的研究

研究旨在利用生物反应器原理获得大量的、供实验研究的人瘦素蛋白。根据GenBank公布的人瘦素蛋白基因序列(登录号为NM000230)设计一对特异性引物,构建鸡输卵管瘦素特异性表达载体pOV3-OB,将重组质粒采用PEI包裹后翅静脉注射试验用鸡,收集蛋清并检测瘦素蛋白表达情况。结果显示:通过Western-blot检测,瘦素蛋白发生特异性表达。人瘦素蛋白可以在鸡输卵管中实现暂态表达,本研究为该蛋白的获取及其生物活性的研究奠定基础。     

利用家蚕生物反应器生产基因工程疫苗的研究

本文就家蚕核型多角体病毒BmNPV的生物学特性及其作为表达载体的优点、家蚕生物反应器的原理、生产程序、特点、优化表达策略以及在基因工程疫苗生产中的应用作了较为详细的阐述。     

影响家蚕表达外源基因效率的几个重要因子的比较研究

本研究以重组病毒rSj14NPV为感染病毒,通过比较纯化蛋白的产量,对家蚕作为生物反应器生产基因工 程产品的适宜蚕品种与相关的重组病毒接种技术进行了比较研究。研究结果表明:871×872、秋风×白玉为表达 Sj14的适宜蚕品种;重组病毒接种量与蛋白表达量有关,适宜接种量为4～5μL/蚕;适宜接种时间以5龄2日龄为 优;以家蚕表达外源基因,最好将重组病毒以家蚕细胞复苏后再接种家蚕以保证获得较高的表达效果。     

家蚕微粒体 GST 的鉴定与序列分析

微粒体 GSTs(microsomal glutathione S-transferases,mGSTs)是广泛分布于动物、植物、细菌等生物体中的多功能酶类,具有对药物解毒和抗氧化等功能。作为一类膜蛋白,在研究手段上难于胞质型 GSTs(cytosolic GSTs),迄今为止在昆虫中较少展开功能研究。本研究在基因组水平对家蚕 mGSTs 进行了分析,共鉴定出 BmmGST1和 BmmGST2两个基因,它们位于家蚕15号染色体,呈串联排列,无内含子插入。BmmGST1和 BmmGST2编码的蛋白分别含有151和150个氨基酸残基,分子量为16.9 kD 和16.7 kD。进化分析表明,家蚕 mGSTs 可能是由于世系特异扩增而产生的两个拷贝。分析表达序列标签证实 BmmGST1在5龄3 d 幼虫的翅原基、丝腺和卵巢组织表达。基于组织和发育时期芯片,BmmGST2在各组织和发育期均有表达信号。家蚕与其他昆虫、大鼠的 mGSTs 序列高度保守,是否也有类似于哺乳动物中的功能值得进一步研究。     

氟中毒对桑蚕碱性磷酸酶活性及蚕体重的影响

本文通过添食NaF的方法，探讨了氟中毒对天体重及中肠组织ALKP酶活性的影响，蚕品种之间的耐氟性存在显著差异，氟中毒后蚕体重显著降低，NaF对中肠组织ALKP酶有明显的抑制作用，氟中毒后蚕体重变化与中肠组织ALKP酶活性的变化相关性密切，具有同步性，1％Ca^2 对氟化物抑制作用有一定的缓解作用。     

家蚕Alltostatin及Allatotropin的基因组鉴定与表达特征分析

抑咽侧体神经肽(Allatostatin,AS)和促咽侧体神经肽(Allatotropin,AT)是控制昆虫保幼激素合成的激素.本研究应用BlastP程序,鉴定了家蚕基因组中的AS及AT,并发现它们只有一个拷贝.利用家蚕表达特征的全基因组芯片数据,调查了AS及AT在家蚕的组织和发育表达特征.结果发现,AS在5龄3天至上蔟的发育阶段以及5龄3天的头部组织表达,相反,AT则没有表达,这与保幼激素的活动规律较一致.但AS在中肠的高表达是否有特殊的功能,还有待进一步研究.这些分析为我们深入研究AS及AT在家蚕中的调控机制奠定了基础.     

生物反应器中PRRSV TJM株在Marc-145细胞上最佳增殖条件研究

为了在Marc-145细胞上获得更高滴度的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)TJM株,对细胞培养条件、细胞接种量、微载体的用量以及病毒培养时间等条件进行了优化。结果表明,利用生物反应器悬浮培养Marc-145细胞在血清为金源康且含量为10%、培养基为DMEM、细胞接种密度为20~30细胞/球、微载体为5 g等条件下生长状态最好;病毒最佳培养时间为27~36 h,病毒增殖效果好且能够达到最高的病毒滴度。本试验为微载体培养条件下大规模生产PRRSV-TJM株疫苗奠定了一定理论基础。     

蜘蛛丝的结构性能及表达策略研究进展

蜘蛛丝是一种天然蛋白质纤维,具有高强度、高弹性、高断裂能等机械性能以及显著的可降解性、组织相容性等生物学特性,在生物医学、材料、纺织和军事装备等领域均有重大潜在应用价值。利用原核或真核表达系统表达蜘蛛丝蛋白可以大量获取蜘蛛丝。综述了蜘蛛丝蛋白序列结构特征以及蜘蛛丝蛋白在大肠杆菌、酵母、植物、动物细胞、家蚕等表达系统中的表达策略研究进展,并重点阐述应用家蚕表达系统表达蜘蛛丝蛋白的策略,可供规模化生产蜘蛛丝蛋白参考。     

SW-BSA人工抗原疫苗对家兔的免疫效果

SW-BSA人工合成抗原与白油制成疫苗免疫家兔,饲喂甘肃棘豆后制备免疫血清,分别进行间接ELISA试验、SW浓度的测定、血清生化指标测定试验,并进行组织病理学检查。结果表明,免疫攻毒组家兔的临床中毒症状比攻毒对照组出现时间延迟30d,血清中SW浓度比攻毒对照组延缓21d达到较高水平,血清中AST、ALP、LDH、BUN活性比攻毒对照组延缓31d达到较高值,ALT的活性与攻毒对照组相比没有显著差异,血清α-甘露糖甙酶活性比攻毒对照组延缓28d下降到较低值。攻毒组家兔各器官组织的病理变化主要是以细胞呈现急性中毒性缺血缺氧和空泡变性为特点。结论得出SW-BSA人工合成抗原疫苗对攻毒家兔有一定的保护作用。     

Oral Bioavailability of Quercetin in Horses

Quercetin, one of the most abundant flavonoids in plants, is discussed with respect to health-promoting effects like antioxidative and anti-inflammatory properties. Although most claims regarding biological effects of flavonoids are based on in vitro and ex vivo studies, the use of flavonoid-containing supplements in humans and companion animals has increased in recent years. Flavonoid-containing supplements are also offered for pet and livestock nutrition. However, any systemic effect of a substance within a living subject depends on its bioavailability. Therefore, the aim of the present study was to gain information on the oral bioavailability of quercetin in horses. Four Icelandic horses with a mean body weight (BW) of 315 ± 25 kg (mean ± standard error [SEM]) were fed a test meal (crimped oats 1 g/kg BW) with the addition of quercetin (20 mg/kg BW). Blood samples were collected directly from the jugular vein before and after ingestion of the test meal for 24 hours, and flavonoid content was analyzed by high-performance liquid chromatography. Quercetin was the main metabolite in plasma with intact flavonol structure after β-glucuronidase/sulfatase treatment of blood samples. The area under the plasma concentration–time curve of quercetin accounted for 88% of total flavonols. Forty-seven percent of the quercetin detected in plasma after ingestion of the test meal was not conjugated. In addition to quercetin, the quercetin derivatives isorhamnetin (methylated) and kaempferol were detected in plasma. Although quercetin is orally bioavailable in horses, similar to other monogastric species, the plasma metabolite pattern differs from those found in species investigated previously (rat, dog, pig, and human).     

人脑源性神经营养因子基因(hBDNF)在转基因家蚕丝腺中的特异表达

家蚕丝腺具有强大合成与分泌蛋白质的能力,利用其作为生物反应器生产高附加值外源蛋白有着广阔的市场前景。以人血白细胞基因组DNA为模板,扩增并克隆了人脑源性神经营养因子基因(hBDNF)核苷酸序列。序列分析表明,克隆的hBDNF核苷酸序列与已发表序列(GenBank登录号:NM_170735)的同源性为100%。随后采用家蚕丝胶基因(Ser1)启动子,以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)为筛选标记,将hBDNF构建到piggyBac转座表达载体并注射入家蚕早期胚胎,在G1代筛选获得了54头转基因阳性个体。经分子检测证实,hBDNF已整合到家蚕基因组并在丝腺有较高水平的特异表达。