中药成分复方的佐剂作用及其与中药复方的功效比较

分别用淫羊藿多糖（EPS）加蜂胶黄酮（PF）、黄芪多糖（APS）加入参皂甙（GS）制成2个中药成分复方（cCHMI1,cCHMI2）,同时用相应的淫羊藿、蜂胶、黄芪和人参的提取物制成相应成分含量相同的2个中药复方（cCHM1,cCHM2）。试验1用2个中药成分复方（对照组为生理盐水）分别配合兔瘟灭活苗免疫家兔,于免疫后第0、3、7、10、14、17、21、28、35、42天用血凝抑制试验法测定血清抗体效价的动态变化;试验2将4个复方分别与灭活的新城疫强毒混合制成疫苗免疫雏鸡,以油佐剂苗、无佐剂苗和生理盐水为对照,分别于免疫后第7、14、21、28、35、42天用MTT法和血凝抑制试验法检测外周血淋巴细胞增殖和血清抗体效价的动态变化。结果表明,2个中药成分复方能显著提高家兔血清的兔瘟抗体效价,cCHMI1的效果优于cCHMI2;4个复方均能显著促进雏鸡淋巴细胞增殖和提高血清抗体效价,效果与油佐剂苗相当,中药成分复方稍优于中药复方。     

复方中药成分与IL-2的免疫协同作用及对鸡细胞因子表达的影响

以淫羊藿多糖加蜂胶黄酮（方1）、人参皂苷加黄芪多糖（方2）组成2个复方，各加IL-2配合新城疫苗免疫雏鸡，分别于免疫后第7、14、21和28d用微量法检测血清抗体效价的动态变化；同时将2个复方各分3种剂量加入到培养的鸡外周血T淋巴细胞中，分别培养7和24h后用半定量RT-PCR方法检测淋巴细胞IL-2和IFN-γ的mRNA表达的变化。结果表明，2个复方单用或与IL-2合用均能显著提高抗体效价，而复方与IL-2的免疫协同作用不明显；方1的3个剂量和方2的高剂量能显著促进IL-2的基因表达，而2个复方的3个剂量能显著促进IFN-γ的基因表达，解释了复方中药成分与IL-2免疫协同作用不明显的原因。     

中药成分复方对免外周血淋巴细胞增殖、IFN-Y和IL-10的mRNA表达以及兔出血症疫苗免疫效果的影响

[目的]研究两个中药成分复方(cCHMIs)的免疫增强作用和机理.[方法]选择黄芪多糖、淫羊藿多糖、蜂胶黄酮和人参皂苷4种中药成分组成两个复方,用MTT法和荧光定量RT-PCR法测定它们对兔外周血淋巴细胞增殖和IFN-y.IL-10 mRNA的表达影响;并将两个复方作为佐剂,配合兔出血症疫苗免疫幼兔,以铝胶苗和无佐剂苗为对照,分别于免疫后7、14、21、35、49 d用MTT法和血凝抑制法测定外周血淋巴细胞增殖和血清抗体的动态变化,于免疫后63 d测定免疫器官指数和攻毒保护率.[结果]两个复方在体外均可以显著促进淋巴细胞增殖,提高淋巴细胞IFN-Y、IL-10mRNA的表达;作为佐剂,两个复方可以显著提高免疫兔的血清抗体效价,促进体内淋巴细胞增殖,显著促进圆小囊、肠淋巴结等免疫器官的发育,有较高的攻毒保护效果.[结论]两个复方中药成分具有较强的免疫增强作用,可被开发成新型的免疫增强剂.     

中药成分复方对兔外周血淋巴细胞增殖、IFN-γ和IL-10的mRNA表达以及兔出血症疫苗免疫效果的影响

【目的】研究两个中药成分复方（cCHMIs）的免疫增强作用和机理。【方法】选择黄芪多糖、淫羊藿多糖、蜂胶黄酮和人参皂苷4种中药成分组成两个复方,用MTT法和荧光定量RT-PCR法测定它们对兔外周血淋巴细胞增殖和IFN-γ、IL-10 mRNA的表达影响;并将两个复方作为佐剂,配合兔出血症疫苗免疫幼兔,以铝胶苗和无佐剂苗为对照,分别于免疫后7、14、21、35、49 d用MTT法和血凝抑制法测定外周血淋巴细胞增殖和血清抗体的动态变化,于免疫后63 d测定免疫器官指数和攻毒保护率。【结果】两个复方在体外均可以显著促进淋巴细胞增殖,提高淋巴细胞IFN-γ、IL-10 mRNA的表达;作为佐剂,两个复方可以显著提高免疫兔的血清抗体效价,促进体内淋巴细胞增殖,显著促进圆小囊、肠淋巴结等免疫器官的发育,有较高的攻毒保护效果。【结论】两个复方中药成分具有较强的免疫增强作用,可被开发成新型的免疫增强剂。     

4种中药复方对小鼠的免疫增强作用

通过4种中药复方对小鼠的脾脏指数、体重、腹腔巨噬细胞吞噬指数和吞噬率、溶血素、溶血空斑、淋巴细胞增殖、血清中一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)、自然杀伤细胞(NK细胞)的影响作用,测得不同中药复方与对照组的差异。结果表明,复方1对小鼠的脾脏指数、腹腔巨噬细胞吞噬率和吞噬指数、血液中溶血素水平差异显著,复方2对小鼠的脾脏指数、腹腔巨噬细胞吞噬率、血液中溶血素和溶血空斑差异显著;复方3对小鼠吞噬指数、血液中溶血素和溶血空斑、淋巴细胞增殖(ConA)差异显著;复方4对小鼠的脾脏指数、腹腔巨噬细胞吞噬率和吞噬指数、血液中溶血素和溶血空斑、淋巴细胞增殖(LPS)、血液中NO和NK细胞均差异显著。不同中药复方中复方4的免疫增强作用最强。     

复方中药组方对鸡新城疫疫苗免疫增强效果的研究

为研究黄芪、党参、仙鹤草、茯苓、金银花、黄芩、板蓝根、甘草8味中药组成的复方中药组方对鸡新城疫疫苗的免疫增效作用。将14日龄非免疫海兰褐蛋雏鸡400羽随机分为5组,第1组为空白对照组,第2组为疫苗对照组,第3～5组为试验组。除空白对照组外,其余各组雏鸡均在14日龄时首免鸡新城疫活疫苗(Clone 30株),28日龄时重复免疫;在首次免疫同时,第3～5组试验组饮水中加入复方中药组方提取液,添加量分别为0. 5%,1%和2%,连用14 d。然后分别于免疫前和免疫后7、14、21、28和35 d,各组随意挑5羽鸡进行采血,用HA-HI试验(微量法)方法测定鸡新城疫抗体效价,MTT法测定外周血淋巴细胞增殖效果;免疫后35 d,各组随意挑5羽鸡,称取体重、剖杀、摘取法氏囊和脾脏并称重,测定法氏囊指数和脾脏指数。结果显示饮水中添加1%复方中药组方提取液的试验组抗体效价、外周血淋巴细胞增殖、法氏囊指数和脾脏指数均明显高于免疫对照组。研究结果表明由黄芪、党参、仙鹤草、茯苓、金银花、黄芩、板蓝根、甘草8味中药组成的复方中药组方提取液对鸡新城疫疫苗具有免疫增效作用。     

黄芪多糖和氧化苦参碱协同增强鸡新城疫疫苗免疫效果研究

【目的】研究黄芪多糖(Astragalus polysaccharides,APS)和氧化苦参碱(Oxymatrine,OM)对新城疫疫苗免疫的影响。【方法】将14日龄非免疫罗曼蛋公鸡550羽随机均分为11组,1~9组分别为OAP(以OM与APS质量比为6∶4配成)、OM和APS的高(4mg/mL)、中(2mg/mL)、低(1mg/mL)剂量组,10组为免疫对照组,11组为空白对照组。除空白对照组外,各组试验鸡只均于14日龄首免NDV-Ⅳ系疫苗,28日龄重复免疫。在首次免疫的同时,1~9组分别口服高、中、低剂量药物,免疫对照组和空白对照组口服等量生理盐水,每天1次,连续3d。分别于14,21,28,35和42日龄采血,用MTT法测定T淋巴细胞增殖的变化,用β-微量法测定血清抗体效价变化。于14,21,28和35日龄,每组随机抽取鸡4羽,称体质量,剖杀,摘取法氏囊和脾脏并称质量,计算免疫器官指数。【结果】OAP、OM、APS高、中剂量在各时间点均能促进T淋巴细胞增殖;OAP高、中剂量组在各时间点抗体效价显著高于免疫对照组;OAP高、中、低剂量组在各时间点的脾指数和法氏囊指数均显著高于免疫对照组(OAP低剂量组35日龄除外)。【结论】黄芪多糖和氧化苦参碱能协同增强鸡新城疫疫苗的免疫效果。     

中药复方对鸡新城疫疫苗免疫效果的影响

通过对试验鸡的免疫器官指数和不同日龄新城疫(ND)抗体水平进行检测,探讨3个不同中药复方对鸡群免疫功能的影响。选取7日龄健康蛋公雏鸡500只,随机分为10组,并于7、21日龄用La Sota活苗免疫,1～9组从7日龄开始分别用3个不同中药复方按饲料量的0.5%、1.0%、1.5%添加,第10组为不添加任何药物的对照组。用药组连续给药15 d,各组分别于21、28、35、42、49、56、63日龄采血测定新城疫血凝抑制(HI)抗体水平以及免疫器官指数的变化。结果显示,3个不同中药复方对雏鸡的ND抗体水平和免疫器官指数均有一定的提高作用,其中复方Ⅰ(1.0%剂量)的效果为最佳。     

硫酸化多糖复方和中药成分复方的鸡新城疫疫苗免疫增强效果比较

为了筛选增强免疫效果最好的硫酸化多糖复方和中药成分复方,以前期筛选出的硫酸化黄芪多糖sAPS60、硫酸化淫羊藿多糖sEPS5和硫酸化香菇多糖sLNT2组成4个复方:复方1(sEPS-sAPS)、复方2(sEPS-sAPS-sLNT)、复方3(sAPS-sLNT)、复方4(sEPS-sLNT),以及前期筛选的2个中药成分复方--复方5(EPS-PF)和复方6(APS-GS),在14日龄雏鸡接种新城疫苗时注射,分别于免疫前和免疫后7、14、21 d,每组随机抽取6羽雏鸡翼下静脉采血,用β-微量法检测血清HI抗体效价;于免疫后14、21 d每组随机抽取4羽心脏采血,用MTT法测定外周血淋巴细胞增殖;于免疫后23 d各组用新城疫病毒攻毒,攻毒后14 d统计发病率、死亡率和免疫保护率,并测定血清抗体效价.结果表明,各复方均能明显或显著提高新城疫疫苗的免疫应答,提高血清HI抗体效价,促进淋巴细胞增殖,降低攻毒后的发病率和死亡率,提高免疫保护率.复方1和复方5的作用最为显著,可分别作为硫酸化多糖复方和中药成分复方免疫增强剂的候选方.     

几种中药成分与IL-2免疫协同作用的比较

将420羽罗曼雏鸡随机均分为14组,14日龄时用新城疫Ⅳ系苗免疫,并分别肌肉注射当归多糖（CAPS）、黄芪多糖（APS）、板蓝根多糖（IRPS）、淫羊藿多糖（EPS）、蜂胶黄酮（PF）和人参皂苷（GS）6种中药成分加白介素2（IL-2）,每天1次,连用3d。分别在不同时间点检测新城疫病毒HI（NDV-HI）抗体效价,并计算免疫器官指数。结果表明,APS、IRPS、EPS、PF和GS加IL-2在免疫后7～14d都能显著提高抗体效价,APS、IRPS和EPS加IL-2在免疫后4周显著促进免疫器官发育。提示,中药成分与IL-2合用有一定的免疫协同作用。     

几种中药成分与IL-2免疫协同作用的比较

将420羽罗曼雏鸡随机均分为14组,14日龄时用新城疫Ⅳ系苗免疫,并分别肌肉注射当归多糖(CAPS)、黄芪多糖(APS)、板蓝根多糖(IRPS)、淫羊藿多糖(EPS)、蜂胶黄酮(PF)和人参皂苷(GS)6种中药成分加白介素2(IL-2),每天1次,连用3 d.分别在不同时间点检测新城疫病毒HI(NDV-HI)抗体效价,并计算免疫器官指数.结果表明,APS、IRPS、EPS、PF和GS加IL-2在免疫后7～14 d都能显著提高抗体效价,APS、IRPS和EPS加IL-2在免疫后4周显著促进免疫器官发育.提示,中药成分与IL-2合用有一定的免疫协同作用.     

中药成分与新城疫病毒感作后对病毒感染活性的影响

将5种浓度的当归多糖、黄芪多糖、板蓝根多糖、淫羊藿多糖、蜂胶多糖、淫羊藿黄酮、蜂胶黄酮、黄芪皂苷和人参皂苷分别与新城疫病毒La Sota株混合感作144 h和272 h后,加到已培养36 h的鸡胚成纤维细胞(CEF)中，继续培养72h，采用中性红染料吸收法测定CEF增殖变化,判定中药成分对病毒感染活性的影响。结果表明，所有中药成分几乎所有浓度均影响或显抑制病毒的感染活性，且与感作时间有一定的相关性。     

中药复方多糖对不同MHC B-LβⅡ基因型蛋鸡禽流感抗体效价的影响

【目的】研究肌注中药复方多糖对不同MHC B-LβⅡ基因型蛋鸡血清中禽流感抗体效价的影响。【方法】试验采用PCR-SSCP方法将500羽京红1号蛋鸡按不同基因型分组,再将各基因型组分成高、中、低剂量中药复方多糖组和空白对照组。各组试验鸡分别于8日龄肌注50、25和12.5 mg/mL中药复方多糖和生理盐水,0.2 mL/只,连续7 d,于27、35、42、49日龄从各组随机抽取5只试验鸡,翅下静脉采血并分离血清,用微量血凝抑制试验(HI)检测血清中H5与H9亚型禽流感抗体效价。【结果】免疫前,各剂量中药复方多糖组H5N1 Re-6和H9N2母源抗体平均效价高于对照组,且高剂量AA和BC基因型鸡血清中H5N1母源抗体效价显著高于对照组(P0.05);免疫后7 d,AA基因型鸡高、中、低剂量组的H5亚型禽流感抗体效价均显著高于对照组(P0.05),BC基因型鸡高剂量组H5亚型禽流感抗体效价显著高于对照组(P0.05),BC基因型鸡高、中、低剂量组H9亚型禽流感抗体效价显著高于对照组(P0.05);免疫后14 d,AA基因型鸡高、中剂量组H5亚型禽流感抗体效价显著高于对照组(P0.05),BB基因型鸡中剂量组显著高于对照组(P0.05),BC基因型鸡中剂量组H9亚型禽流感显著高于对照组(P0.05);免疫后21 d,BC基因型鸡高、中剂量组H5亚型禽流感显著高于对照组(P0.05),BC基因型鸡高剂量组显著高于对照组(P0.05)。【结论】不同剂量中药复方多糖均能不同程度的提高各基因型蛋鸡血清中H5和H9亚型禽流感抗体效价,且以中剂量和高剂量效果好。     

复方中药提取物抗白色念珠菌活性及其主要成分

研究由苦参、土茯苓和白鲜皮组成的复方中药提取物的抗白色念珠菌活性及主要成分。采用肉汤微量稀释法,测定复方中药提取物对白色念珠菌的抗菌活性,并采用化学方法对中药复方提取液进行成分预试。结果显示,提取物具明显的抑制白色念珠菌生长的活性;经理化鉴别试验显示,该复方提取物主要含有多糖、黄酮、生物碱三大类成分。表明多糖、黄酮和生物碱这三大类成分可能是复方提取物发挥抗白色念珠菌活性的重要成分,但确定其发挥作用的具体成分还需进一步的研究。     

复方中药降血脂作用及减肥作用的研究

研究一种复方中药对小鼠的降血脂作用及减肥作用。分别在常效、预防、拮抗和治疗4个阶段末,测定对照组和药物组小鼠血清中甘油三酯(TG)、总胆固醇(TCH)和高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)的浓度;测量两组小鼠的体质量和体脂质量,计算脂肪系数;取小鼠腹部肠系膜脂肪组织做石蜡切片,观察脂肪细胞差异。常效和预防阶段,药物组TG、TCH浓度有所降低但不明显(P>0.05);在拮抗和治疗阶段,药物组TG、TCH浓度显著低于对照组,而HDL-C浓度显著高于对照组(P<0.01);给药后,药物组小鼠的体质量和脂肪系数显著降低(P<0.05),且肠系膜脂肪细胞明显缩小。该复方中药具有显著的降血脂及减肥作用。     

中药复方制剂四种成分的TLC分析

采用不同的显色条件,通过薄层色谱法(TLC)分别对复方制剂中大黄、黄芪、苏木、柴胡进行分析鉴别,以期建立复方中药制剂中大黄、黄芪、苏木、柴胡等四种药材的鉴别方法。结果显示,四种药材荧光斑点均显示与对照品相同,因此,利用TLC法进行鉴别,方法简单可行,可信度高。     

复方中药免疫增强剂的初步筛选及其毒性作用研究

[目的]通过小鼠体内试验,初步筛选出2个中药组方的免疫增强剂,并对筛选出的组方进行毒性试验.[方法]采用碳廓清法、耳片差重法分别观察复方中药对小鼠单核巨噬细胞(Mφ)吞噬活性及二硝基氯苯DNCB所致小鼠迟发型变态反应(DTH)的影响,对筛选出的组方Ⅱ进行急性毒性和最大耐受量测定.[结果]复方中药Ⅱ组在对小鼠单核巨噬细胞(Mφ)吞噬活性的影响和DNCB所致小鼠迟发型变态反应方面均优于复方中药Ⅰ组,且组方Ⅱ按照10 000 mg/kg体重灌胃给药,无法测出LD50值.最大耐受量为60 000 mg/kg体重.[结论]中药组方Ⅱ具有免疫增强作用,而且毒性级别为实际无毒级.     

党参多糖对免疫雏鸡抗体效价和淋巴细胞增殖的影响

将280羽蛋公鸡雏随机分为7组,用鸡新城疫Ⅳ系苗和新城疫油乳剂苗进行免疫的同时,6个试验组分别口服党参多糖溶液(CPP)14.4、7.2、3.6、1.8、0.9、0.45 μg/mL,对照组口服生理盐水.各组于免疫接种后7、14、21、28、35、42 d随机采血,分离血清,测定新城疫血凝抑制抗体(ND-HI)效价;于免疫后10、20、30、40 d每组随机采血,分离淋巴细胞,用MTT法测定淋巴细胞增殖的动态变化.结果表明,CPP能明显提高新城疫HI抗体效价,促进外周血淋巴细胞增殖.     

10种中药成分对单层鸡胚成纤维细胞增殖的影响

将安全浓度范围内的黄芪多糖、当归多糖、蜂胶多糖、淫羊藿多糖、板蓝根多糖、黄芪黄酮、蜂胶黄酮、淫羊藿黄酮、黄芪皂苷和人参皂苷等 10种中药成分分别加入已培养 2 4h、刚形成单层的鸡胚成纤维细胞 (CEF)中 ,在加药后12 ,2 4 ,36 ,4 8和 6 0h用MTT法测定它们对CEF增殖的影响。结果表明 ,黄芪皂苷、黄芪多糖、板蓝根多糖和蜂胶黄酮主要表现为促进增殖 ;淫羊藿多糖主要具抑制效应 ;其他 5种中药成分在某些浓度和时间点能促进增殖 ,而在某些浓度和时间点则抑制增殖 ,并有一定的量效和时效关系。     

中药复方制剂抗猪流感病毒作用的研究

[目的]探讨中药复方制剂(金银花、连翘、薄荷、牛蒡子、桔梗、甘草、淡竹叶、淡豆豉)对感染猪流感病毒小鼠的保护作用。[方法]猪流感病毒感染小鼠4 h后给药,以死亡率、平均存活时间、肺指数、肺指数抑制率、血凝滴度、脾脏指数、胸腺指数为评价指标,观察中药复方制剂在小鼠体内的抗流感病毒作用。[结果]中药复方制剂能降低流感病毒感染小鼠的死亡率(P0.01),延长小鼠的存活时间(P0.01),降低肺指数(P0.01),降低血凝滴度(P0.01),增加胸腺指数(P0.01)。[结论]该中药复方制剂具有良好的抗猪流感病毒作用。