褪黑素在牛卵母细胞体外受精中的抗氧化作用

为探讨褪黑素(MLT)对牛卵母细胞成熟、精子获能和胚胎发育的抗氧化效果。在体外培养液中添加10-9 M MLT,以评估牛卵母细胞成熟率及胚胎发育效果;同时利用目测法、低渗膨胀法、JC-1和考马斯亮兰染色法评估不同浓度MLT(0 M、10-3 M、10-4 M和10-5M)添加在牛精子获能液经上游法处理45min后对精子质量的影响。结果表明:与对照组相比,添加10-9 M MLT既可显著提高牛卵母细胞的成熟率(62.5%vs 77.8%)(P0.05),又可明显刺激受精后胚胎体外发育的卵裂率(53.2%vs 67.6%)(P0.05)和囊胚率(20.3%vs35.4%)。在精子获能液中添加10-4 M MLT上游处理45 min后,其精子活力(84.6%vs71.6%)、质膜完整率(88.8%vs 75.2%)、线粒体高膜电位百分率(83.0%vs 70.2%)和顶体完整率(87.0%vs 74.4%)均显著高于对照组(P0.05)。这些结果有助于优化IVF技术体系,利于体外胚胎生产效率提高。     

添加褪黑素对牛精液品质的影响

为探讨褪黑素(melatonin,MLT)在牛精液保存中的抗氧化作用,本研究利用目测法、低渗膨胀法和考马斯亮兰染色法分析了不同MLT浓度(0、10^-3、10^-4和10^-5 mol/L)和不同孵育时间(1、4和8 h)对精子活力、质膜和顶体完整性的影响。结果发现,与对照组相比,在稀释液中分别添加10^-3和10^-4 mol/L MLT均可显著提高精子活力、质膜完整率和顶体完整率(P＜0.05),且10^-3 mol/L MLT添加效果最佳;MLT(10^-3 mol/L)组在27 ℃孵育1、4 h后,其精子的活力、质膜完整率和顶体完整率均显著高于对照组(P＜0.05)。因此,添加10^-3 mol/L MLT可明显改善牛精液品质,提高牛精液的保存时间和保存质量。     

褪黑激素的ELISA测定方法

褪黑激素是由动物脑部的松果体细胞在暗环境所分泌的吲哚类激素，它的前体是5-羟色胺(5-HT)。早在20世纪20年代，McCord和Allen观察到牛的松果体的提取物能使某种小蝌蚪皮肤黑色素发生凝聚反应而褪色变白，因而得名褪黑激素(Melatonin简MEL，MLT，MT)。直到1959年Lemer等才鉴定了它的化学结构：N-乙酰-5-甲氧基色胺。 之后随着对它研究的深入渐渐阐明了其化学特点，褪黑激素为色氨酸衍生的小分子，浅白色固体结晶，无电性激素。     

褪黑素对动物生殖的影响

褪黑素(melatonin,MLT)是松果腺细胞(pinealocyte)合成的吲哚胺类激素中生物活性最高的一种神经激素,调节着体内的多种生理活动。人们对松果体的认识经历了一个漫长的时期,Axelrod和Nurtman于1965年提出“MLT假说”,认为MLT的分泌受环境光照的控制,自然界光照的变化不仅影响松果体的分泌,而且还间接影响哺乳动物的生殖系统。近年来,随着神经内分泌学的研究发展,荧光免疫、层析和放射免疫测定等生物学新技术的应用,在MLT生物合成、生理机能、受体类型和分布等方面取得了新的突破,MLT在畜牧业动物生产方面的应用也日益广泛。1MLT的作…     

三聚氰胺在鸭蛋中的沉积和消除规律的研究

本试验旨在研究日粮中添加不同水平的三聚氰胺(melamine,MEL)在鸭蛋中的沉积和消除规律.选用体重为(1.66±0.16)kg和产蛋率为(75.15±3.29)%的19周龄健康金定产蛋鸭756只,随机分成7个处理,每个处理设6个重复,每个重复18只.7种试验日粮的MEL添加水平分别为:0、1、2、5、25、50和100 mg/kg.各处理分别连续饲喂含不同水平MEL的日粮21 d(沉积试验),随后改喂基础日粮21 d(消除试验),试验期共42 d.于沉积和消除试验的第1～11天、第13天、第15天、第17天和第21天分别测定鸭蛋可食部分中的MEL和三聚氰酸(cy-anuric acid,CYA)含量.结果表明,0～5 mg/kg的4个处理之间鸭蛋中MEL含量差异不显著(P>0.05),25～100 mg/kg的3个处理之间差异极显著(P<0.01),且均极显著高于0～5 mg/kg的4个处理(P<0.01);鸭蛋MEL含量(Y,mg/kg)与日粮MEL添加水平(X,mg/kg)的关系方程为:y=0.0121X+0.0165(R2=0.9994),MEL由日粮到鸭蛋中的生物富集系数为0.0121;通过鸭蛋排出的MEL(Y,mg/d)与蛋鸭摄人的MEL(X,mg/d)拟合的曲线为:Y=0.2618X+0.0947(R2=0.9999),MEL由蛋鸭到鸭蛋的母体转移系数为0.2618.日粮MEL添加水平越高,鸭蛋中的消除半衰期越短,完全消除需要的时间越长;5、25、50和100 mg/kg处理鸭蛋中的MEL含量(Y,mg/kg)随时间(X,d)消除方程分别为:Y=0.0802X-0.747(R2=0.7775)、Y=0.3268X-1.1608(R2=0.9871)、Y=0.5912X-1.3403(R2=0.9922)和Y=1.2004X-1.3956(R2=0.9883),根据上述方程计算各处理鸭蛋中MEL完全消除时间分别为3.48、7.81、9.31和14.61 d;鸭蛋中未检测到CYA.结果显示,MEL在产蛋鸭日粮中浓度越高,其鸭蛋中沉积最越大,消除时间越长.     

埋植褪黑激素对非繁殖季节和田羊公羊血清激素的影响

为了探究外源性褪黑激素(MLT)对非繁殖季节和田羊公羊血清激素的影响,试验选择20只和田羊成年公羊,于6月1日随机分为4组,分别给予生理盐水处理(对照组,2 mL/只)和不同剂量的MLT缓释剂埋植处理(处理组,分别为10 mg/只、20 mg/只、30 mg/只)。结果表明:外源性MLT明显提高了和田羊公羊夜间血清MLT水平,且存在剂量效应。低剂量的外源性MLT没有引起血清睾酮水平的较大日波动,而中(20 mg/只)、高(30 mg/只)剂量的外源性MLT能够引起血清睾酮水平的较大日波动。三种剂量的外源性MLT均未对和田羊公羊血清促黄体生成素(LH)和卵泡刺激素(FSH)水平及日变化产生明显影响。     

添加褪黑素对牛卵母细胞及其ICSI操作后胚胎发育效果的影响

为探讨抗氧化剂褪黑素(MLT)对牛卵母细胞体外成熟及胞浆单精子注射(ICSI)显微操作后早期胚胎体外发育的影响。在牛卵母细胞体外成熟培养液中,分别添加0 M、10~(-10) M、10~(-9) M、10~(-8) M MLT,通过统计核成熟率,评估不同浓度的MLT对牛卵母细胞体外成熟的影响。于24h后收集核成熟的牛卵母细胞进行显微操作,同时在显微操作液中分别添加0 M、10~(-10) M、10~(-9) M、10~(-8) M MLT,经体外培养后评估MLT对ICSI处理后胚胎体外发育的影响。结果表明:与对照组相比,在成熟液中添加10~(-9) M MLT(73.8%vs 81.3%)(P0.05)可显著提高牛卵母细胞成熟率;同时在显微操作液中添加10~(-9) M MLT,与对照组相比,牛卵母细胞ICSI后胚胎体外发育的卵裂率(81.3%vs 85.5%)差异不显著(P0.05),但囊胚率(14.3%vs 22.6%)显著提高(P0.05)。因此,添加10~(-9) M MLT有助于优化ICSI技术体系,提高显微授精后胚胎体外生产效率。     

不同繁殖节律母牦牛冷暖季血浆褪黑激素RP-HPLC测定

为研究不同季节、不同繁殖节律和繁殖活动期与静止期成年母牦牛血浆MLT分泌水平的差异,应用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)检测成年母牦牛血浆 MLT 浓度.供试母牦牛63头,分为A、B、C 3组,每组21头.A组:1年1胎,繁殖活动期;B组:2年1胎,全奶,繁殖静止期;C组:2年1胎,半奶,繁殖活动期.在暖季的7月21-23日和冷季的11月21-23日,自然光制:12.00L:12.00D和14.65L:9.35D,日落前2 h开始采血,持续50min,颈静脉采血每头20 mL,肝素抗凝,离心取血浆.1年1胎母牦牛血浆MLT浓度((68.90±5.82) pg/mL)高于2年1胎全奶个体((44.38±2.61)pg/mL) (P< 0.01)和2年1胎半奶个体((57.51±3.82)pg/mL)(P<0.05);母牦牛血浆 MLT 浓度暖季高于冷季(P<0.05),表明其具有季节波动,并提示除光照外牦牛 MLT 分泌还与气温等环境因子有关;母牦牛血浆 MLT 浓度繁殖活动期高于繁殖静止期(P<0.05).母牦牛MLT分泌存在季节波动,母牦牛季节性繁殖和繁殖节律受到MLT水平的影响.     

外源性RFRP-3和MLT对雄鼠初情期生长及繁殖性能的影响

【目的】探究外源性RF-酰胺相关肽3(RF-amide related peptide 3,RFRP-3)和褪黑素(melatonin, MLT)对雄性昆明小鼠初情期生长、繁殖性能的影响及两者之间的关系。【方法】以初情期雄性昆明小鼠为研究对象,单独给予雄鼠生理盐水、外源性RFRP-3或MLT以及混合给予RFRP-3、MLT,检测其对雄鼠平均增重、平均采食量、料重比、睾丸发育情况,血清生长激素(growth hormone, GH)、黄体生成素(luteinizing hormone, LH)水平,以及生长、生殖相关基因表达的影响。【结果】外源性RFRP-3能抑制雄鼠GH基因表达,并抑制体重增长,提高料重比;而外源性MLT促进雄鼠GH基因表达,使体重增长较快,料重比降低;RFRP-3和MLT共同处理下,GH基因表达增加,体重增长速度与单独给予MLT组接近。RFRP-3可抑制褪黑素受体1A(melatonin receptor 1A,Mtnr1A)、LH基因表达及睾酮分泌,小鼠睾丸各级生精细胞和间质细胞数量减少;MLT可促进Mtnr1A、LH基因表达及睾酮分泌,睾丸间质细胞密度极显著增加(...     

褪黑激素对生殖的调控机理及其在动物繁殖中的作用和应用前景

褪黑激素(melatonin,MLT)是松果体分泌合成的一种激素.随着荧光免疫层析、放射免疫等技术的深入,使MLT的研究取得了很大的发展.本文详细介绍了MLT对生殖的调控机理及其在动物繁殖中的作用和应用前景.     

放射配体受体分析法对日本血吸虫体内 5-HT受体的测定

采用放射配体-受体分析法(RLBA)测定了日本血吸虫体内5-羟色胺(5-HT)受体及螺环哌啶酮(spiroperidol)对5-HT受体与3H-5-HT结合反应的影响。结果证实:日本血吸虫体内存在5-HT受体,与配体5-HT可进行饱和的、特异的结合,其Scatchard图呈下凹曲线,表明5-HT受体的复杂性和不均一性。其最大结合容量(Bmax)为210.4fmol/mgprotein,解离常数(Kd)为0.585pmol/L,螺环哌啶酮对3H-5-HT与受体的结合无影响,计算Bmax为270.3fmol/mgprotein,Kd为0.327pmol/L,与前值比较,差异不显著(P>0.05)。     

褪黑素对体外培养绵羊垂体细胞分泌激素的影响

文章采用体外细胞培养和放射免疫测定(RIA)等方法,研究了褪黑素(MLT)对季节性繁殖的蒙古母羊垂体细胞分泌促卵泡素(FSH)、促黄体素(LH)和促乳素(PRL)的作用。结果表明:当单独用递增的MLT(0、10、100、1000pg/ml)处理原代垂体细胞时,伴随时间的延长FSH的分泌量极显著下降(P<0·01),但对LH的基础分泌没有影响;用10IU/ml hCG单独刺激或用不同剂量MLT与10IU/ml hCG共同刺激垂体细胞,FSH和LH的分泌都极显著高于对照组(P<0·01),但与MLT的剂量没有关系。MLT能改变抑制垂体细胞PRL的分泌,用10IU/ml HCG单独作用使垂体细胞PRL分泌减少,但这种作用可被MLT呈剂量依赖性抑制。本研究表明MLT可作用于季节性繁殖蒙古绵羊的垂体细胞并影响其促性腺激素的分泌。     

三聚氰酸水平及与三聚氰胺合用对蛋鸡肝肾损伤的研究

研究旨在探讨三聚氰酸(CYA)水平及与三聚氰胺(MEL)合用对蛋鸡肝肾的损伤。采用2×4二因子随机试验设计,MEL设0或30 mg/kg 2个添加水平;CYA设0、10、20、30 mg/kg 4个添加水平。选用产蛋率相近的78周龄罗曼粉壳蛋鸡144只,随机分成8个处理,每个处理9个重复。试验期35 d。结果表明:添加10~30 mg/kgCYA对1~21 d饲料利用率(FCR)有降低趋势(P=0.070);添加MEL显著降低了1~21 d产蛋率(HDLR)(P<0.05)。10~30 mg/kg CYA显著提高了21 d血清尿酸(UA)含量和35 d血清谷丙转氨酶(ALT)活性(P<0.05);添加MEL显著提高了35 d血清UA含量和降低了21 d血清肌酐(CRE)含量(P<0.05)。10~30 mg/kg CYA显著提高了35 d肾脏组织丙二醛(MDA)含量(P<0.05);添加MEL显著提高了肾脏组织21 d MDA,降低了35 d超氧化物歧化酶(SOD)活性(P<0.05)。单独添加10~30 mg/kg CYA蛋鸡肝细胞肿大、出现空泡变性,肾小管上皮细胞肿胀、肾小球及毛细血管充血;10~30 mg/kg CYA与30 mg/kg MEL合用肝肾的损伤加剧。结果表明,30 mg/kg CYA与30 mg/kg MEL合用对蛋鸡肝肾损伤最严重。     

褪黑素对动物生殖调控机理的研究进展

褪黑素是由松果体分泌的一种吲哚类神经内分泌激素。近年来伴随着放射免疫分析法、受体分析及分子生物学等研究方法的应用,从而使MLT的生物合成、生理功能及其对动物生殖调控机理等方面的研究越来越被人们重视,文章简要论述了MLT对动物生殖调控机理的研究进展。     

褪黑素基础上补喂来曲唑和N-甲基-D-天冬氨酸对母羊血浆繁殖激素水平的影响

试验旨在研究反季节给繁殖母羊补喂褪黑素(melatonin,MLT)及在MLT基础上补喂来曲唑(letrozole,LE)和N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartate,NMDA)对母羊血浆繁殖相关激素水平的影响,为调控母羊发情药物的开发及应用提供新思路。试验选取40只(3.0±0.5)岁经产萨福克母羊(平均体重为76.23kg±12.25kg)随机分为4组,每组10只,分别为对照组和试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组,分别饲喂基础日粮、基础日粮+MLT 10mg/(只·d)、基础日粮+MLT 10mg/(只·d)+LE 7mg/(只·d)、基础日粮+MLT 10mg/(只·d)+LE 7mg/(只·d)+NMDA 300mg/(只·d)。结果显示,与对照组相比,试验Ⅰ组母羊血浆中促卵泡素(FSH)、雌二醇(E2)、雌三醇(E3)及双氢睾酮(DHT)水平均极显著升高(P0.01),睾酮(T)水平显著降低(P0.05);试验Ⅱ组,母羊血浆MLT和LH水平均极显著升高(P0.01),FSH水平显著升高(P0.05);试验Ⅲ组,母羊血浆中MLT和促性腺激素释放激素(GnRH)水平均显著升高(P0.05)。与试验Ⅰ组相比,试验Ⅱ组母羊血浆中MLT显著升高(P0.05),LH和T水平均极显著升高(P0.01)。试验Ⅲ组与试验Ⅰ、Ⅱ组相比,FSH水平极显著降低(P0.01)。综上所述,MLT和LE对母羊繁殖相关激素的释放有促进作用,且两者结合使用可达到调控母羊繁殖相关激素水平的效果;MLT、LE和NMDA组合应用对母羊繁殖激素调控效果不佳。     

褪黑素对体外培养绵羊垂体细胞分泌FSH和LH的影响

本文采用体外细胞培养和放射免疫测定法(RIA)的方法,研究了褪黑素(MLT)对季节性繁殖的蒙古母羊垂体细胞分泌促卵泡素(FSH)和促黄体素(LH)的作用.结果表明当单独用递增的MLT(10、100、1000、2000 pg/mL)处理原代垂体细胞时,随时间的延长FSH的分泌量极显著下降(P<0.01),但对LH的基础分泌没有影响;无论用10IU/mLhCG单独刺激,还是用不同剂量MLT与10IU/mLhCG共同刺激垂体细胞,FSH和LH的分泌都极显著高于对照组(P<0.01),但与MLT的剂量没有关系.     

三聚氰胺和三聚氰酸对蛋鸡毒性效应的研究

本试验旨在探讨饲粮中单独添加三聚氰胺(melanmine,MEL)或与三聚氰酸(cyanuric acid,CYA)合用对蛋鸡健康的影响.将126只78周龄罗曼粉壳蛋鸡随机分为7个组,每组9个重复,每个重复2只鸡.组1为对照组,饲喂基础饲粮;组2～4分别饲喂在基础饲粮中添加MEL 5、15和30 mg/kg的饲粮,组5...     

褪黑素和光照对鹌鹑白细胞介素-2的影响

采用褪黑素(MLT)完全抗原主动免疫鹌鹑，在不同光照条件下饲养，研究了MLT参与神经-内分泌-免疫网络调控时对IL-2水平的影响。结果表明：主动免疫后，MLT和IL-2水平明显下降；随着光照时间的延长，IL-2水平也显著下降。一定剂量的MLT可促进机体免疫因子IL-2的分泌。     

褪黑素对体外培养绵羊垂体细胞分泌FSH和LH的影响

本文采用体外细胞培养和放射免疫测定法(RIA)的方法,研究了褪黑素(MLT)对季节性繁殖的蒙古母羊垂体细胞分泌促卵泡素(FSH)和促黄体素(LH)的作用。结果表明:当单独用递增的MLT(10、100、1000、2000pg/mL)处理原代垂体细胞时,随时间的延长FSH的分泌量极显著下降(P<0.01),但对LH的基础分泌没有影响;无论用10IU/mLhCG单独刺激,还是用不同剂量MLT与10IU/mLhCG共同刺激垂体细胞,FSH和LH的分泌都极显著高于对照组(P<0.01),但与MLT的剂量没有关系。     

体外培养法研究三聚氰胺的降解规律及其对瘤胃发酵参数的影响

本试验采用体外培养法研究三聚氰胺(Melamine,MEL)对瘤胃发酵参数的影响。MEL的添加水平分别为0、2、10、50、250和1 250mg·L-1,培养时间分别为0、1、2、4、6、8、12、24和48h,测定了培养液中MEL的浓度变化,总挥发性脂肪酸(TVFA)、乙酸、丙酸、丁酸、戊酸、异丁酸、异戊酸含量和NH3-N浓度。结果表明:MEL在瘤胃液中培养48h没有被降解(P>0.05),添加MEL降低了干物质降解率(DMD)(P<0.05),提高了丁酸的摩尔比例(P<0.05),MEL为1 250mg·L-1时会降低丙酸摩尔比例(P<0.05),提高了乙∶丙酸比值(P<0.05)。MEL抑制瘤胃微生物生长,不能作为瘤胃微生物非蛋白氮来源。