糙皮侧耳HMG-box转录因子分析与候选基因克隆表达

在糙皮侧耳(Pleurotus ostreatus)的全基因组中鉴定出14个高速泳动蛋白(high-mobility group box,HMG-box)的编码基因(PoHMG1～PoHMG14),对其进行特征、结构与系统进化分析,发现所有的HMGbox转录因子蛋白的三级结构高度相似,相对分子质量为6893.79～60397.29,蛋白PoHMG6、PoHMG11、PoHMG12与PoHMG13之间的亲缘关系较近。基于糙皮侧耳在菌丝、原基、幼嫩子实体和成熟子实体时期的转录组数据,对筛选到的转录因子基因PoHMG11进行克隆分析并探究其功能及表达特性,发现该基因全长序列1 517 bp,编码489个氨基酸,含有一个HMG-box结构域。通过大肠杆菌原核表达载体体外诱导表达出相对分子质量为5.5×104的蛋白,该重组蛋白在1 mol·L^-1 IPTG、25℃诱导表达6 h时表达量最高。利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析糙皮侧耳在菌丝、原基、幼嫩子实体和成熟子实体阶段PoHMG11基因的相对表达量,发现该基因在成熟糙皮侧耳子实体中的表达量比其他生长发育时期显著...     

糙皮侧耳凝集素基因Plectin的克隆和表达分析

基于cDNA末端快速扩增(RACE)技术克隆了两个糙皮侧耳凝集素基因Plectin1和Plectin2。结构分析显示Plectin1和Plectin2基因全长分别为1 371和1 359 bp,二者均含有5个外显子和4个内含子;Plectin1开放阅读框长1 134 bp,编码377个氨基酸,Plectin2开放阅读框长1 122 bp,编码373个氨基酸。Southern杂交试验证实Plectin1和Plectin2在糙皮侧耳基因组中均只有1个拷贝。利用qRT-PCR分析了Plectin1和Plectin2在糙皮侧耳不同生长阶段的表达量,结果显示Plectin1和Plectin2分别在成熟子实体阶段和幼嫩子实体阶段表达量最高,这表明Plectin1和Plectin2基因可能在糙皮侧耳子实体生长发育中起到一定的调控作用。     

糙皮侧耳漆酶基因的克隆及在粟酒裂殖酵母中的表达

利用RT-PCR技术,从糙皮侧耳(Pleurotus ostreatus)总RNA中克隆漆酶基因(Lac),再通过NheⅠ酶切位点与粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)表达载体pESP-2连接,构建酵母真核表达载体,利用电转化方法转化粟酒裂殖酵母SP-Q01细胞,并在SP-Q01中进行表达分析,最后用愈创木酚法测定表达产物的酶学活性。漆酶基因在构建的表达载体重组SP-Q01细胞中得到表达,酶学活性达到89.37 U/L。     

糙皮侧耳对秸秆木质纤维素降解能力的研究

为了更好地探明各糙皮侧耳(Pleurotus ostreatus)菌株对秸秆的利用潜力,筛选出更佳适用于秸秆栽培的糙皮侧耳菌株.以18株糙皮侧耳菌株为供试材料,采用平板筛选法对各菌株的纤维素、半纤维素和木质素利用能力进行分析,通过比较不同糙皮侧耳菌株降解木质纤维素能力的差异,获得能够高效降解秸秆的菌株.综合各菌株对纤维...     

超声波法提取糙皮侧耳菇柄中水溶性膳食纤维工艺研究

以糙皮侧耳(Pleurotus ostreatus)下脚料——菇柄为试验材料,利用超声波法提取其中水溶性膳食纤维,采用正交试验L9(34)对菇柄水溶性膳食纤维的提取工艺进行优化.结果表明,菇柄水溶性膳食纤维提取工艺的最佳条件为:超声波时间20 min,超声波功率为450 W,溶剂用量为20 mL/g,提取温度为70℃.该工艺条件下,水溶性膳食纤维粗品SDF得率为11.32％,SDF中可溶性膳食纤维含量为80.68％.     

不同糙皮侧耳菌株麦秸秆全纤维降解能力对比

试验通过对13株糙皮侧耳菌株在以秸秆（应季麦秸）为主要培养基的试管中长速比较，筛选出长速明显高于其他菌株的金风9301，且其生长后的固体基质的全纤维降解率也明显高于其他菌株。该菌株对于利用富含木质纤维索的秸秆资源具有重要意义。     

糙皮侧耳PoLIM基因家族鉴定与表达分析

在NCBI、JGI数据库中检索糙皮侧耳（Pleurotus ostreatus）PoLIMs,进行生物信息学分析;测定PoLIM 1～PoLIM 6在25℃培养7 d(菌丝期),16℃培养5 d（扭结前期）、10 d（扭结后期）、15 d（原基期）、22 d（子实体期）的相对表达量以及菌丝在4℃冷胁迫12、24、48 h的相对表达量。结果表明：PoLIM1～PoLIM6的氨基酸数量为353～1 673;等电点为7.26～9.98;亚细胞定位预测均在细胞核中;有10个保守基序;启动子序列中包含光、生长素、MYB转录因子以及低温胁迫等响应元件。就相对表达量而言,PoLIM1在子实体期较高;Po LIM2在扭结后期和子实体期较高;Po LIM3、Po LIM4、Po LIM6在菌丝期较高;Po LIM5在扭结后期较高,在原基期及子实体期降低。与对照（25℃）相比,4℃冷胁迫时Po LIM1、Po LIM3、Po LIM5、Po LIM6的相对表达量升高。     

灵芝与糙皮侧耳原生质体融合子生物学特性的初步研究

以获得弱木栓质化灵芝菌株为目的，利用液体培养4d的灵芝菌丝体和液体培养3d的糙皮侧耳菌丝体为材料，在PEG-Ca^2 系统中诱导原生质体融合，获得初筛融合子19株(F1～F19)。其中，融合子F8的菌丝生长速度和生物量均接近糙皮侧耳，显微镜下，其菌丝体与灵芝和糙皮侧耳的均不相同，木栓质化程度大于糙皮侧耳，小于灵芝。     

日光温室黄瓜平菇复合栽培技术研究

采用随机区组试验研究了不同菌袋摆放方式和数量对目光温室黄瓜和平菇复合栽培产量及经济效益的影响.结果表明:在黄瓜行间卧式横向摆放菌袋优于立放覆土栽培,横向摆放2层菌袋,对黄瓜生长影响不大,黄瓜产量较高,平菇产量也较高,效益最高,收入比单纯种黄瓜提高45.8%.     

麦秸生料栽培糙皮侧耳试验

通过二年糙皮侧耳菌株比较试验,玉米粉添加量试验、培养料含水量试验及菌种试验,得出如下结论:麦草生料栽培糙皮侧耳的适宜菌株是SN1和CCEF89;培养料中玉米粉的最佳添加量是15％;培养料的适宜含水量是70％;宜采用麦粒菌种,菌龄以发菌到瓶底后再培养3d为宜,播种量是培养料干重的10％。     

平菇抗虫品种筛选试验

以5个本地常栽的平菇品种为试验材料,出菇期间引入双翅目害虫平菇厉眼蕈蚊,进行抗虫能力试验,结果表明品种灰平的抗虫性最好。     

平菇种质资源评价

对平菇的7个菌种进行了菌丝拮抗、长势长速、耐热性、抗霉力、生育期和生物学效率测定和分析，结果表明：7个菌种隶属与3个菌株；Pn5和Pn7的菌丝长势好、长速快、抗逆能力强、生育期短、生物学效率高．是优良菌种；Pn3和Pn4抗逆能力最差。     

香菇DNA导入平菇原生质体及转化子鉴定研究

采用氯化苄方法提取香菇总ＤＮＡ，用Ｇｅｎｅ Ｐｕｌｓｅｒ Ⅱ电击系统将香菇ＤＮＡ导入平菇单核原生质体，通过香菇ＤＮＡ的导入，利用基因互补原理获得了能出菇的转化子１－１和１３－４８，并对转化子进行了拮抗试验、菌丝生长速度分析，酯酶同工酶分析和ＲＡＰＤ分析。     

高温型平菇品比筛选试验

通过对14个平菇菌株在菌丝形态特征、子实体形成物候期、商品性及产量等方面进行对比试验,筛选出适合广东地区高温季节栽培的优良品种:P139(白色)、殷育20(灰褐色)。     

白平菇优良菌株选育研究初报

试验从 4株白平菇供试菌株中 ,通过生物学测定、出菇试验、品种对比试验等方法 ,选育出一个优良菌株———yt- 3菌株。yt- 3号菌株菌丝生长旺盛 ,抗杂能力强 ,生产周期短 ,生物转化率高 ,是供推广栽培的优良菌株。