紫外分光光度法测定盐酸沙拉沙星原料的含量

建立紫外分光光度法测定盐酸沙拉沙星原料的含量。用0.1mol/L NaOH溶液为溶剂,在274nm波长处测定吸收度。结果沙拉沙星对照品质量浓度在2.4～12.0μg/mL范围内与吸收度呈良好的线性关系,线性回归方程A=0.089C+0.05,r=0.9999(n=5);平均回收率为99.74%,RSD=0.40%(n=5)。本方法操作简便、快捷、经济、结果准确,可用于盐酸沙拉沙星原料的含量测定。     

盐酸沙拉沙星在蛋鸡体内的血液动力学的研究

为研究盐酸沙拉沙星在蛋鸡体内血液动力学 ,选用成年健康蛋鸡 6 5只进行试验。按 10mg/kg体重口服给药后 ,测定血清中盐酸沙拉沙星的含量。结果表明 :盐酸沙拉沙星在血液中经时过程符合一级吸收一室模型 ,其理论方程为Cb=1.0 36 (e-0 .173 5t-e-2 .0 57t)。Ka 为 1.6 0 2 5h-1、Cmax为 0 .74 2 9μg/mL、tmax为 1.5 80 7h。由抗生素后效应及药动学参数 ,建议临床给药口服方案为 10 .12mg/kg。     

沙拉沙星、二氟沙星直接竞争化学发光酶联免疫检测方法的建立

为快速检测食源性动物中沙拉沙星及二氟沙星的药物残留,将沙拉沙星单克隆抗体(SAR-Ab)与辣根过氧化物酶(HRP)偶联得到酶标抗体(McAb-HRP),从而建立直接竞争化学发光酶联免疫(dc-CLEIA)检测方法。结果显示:经紫外扫描鉴定,McAb-HRP偶联成功;以包被抗原(SAR-1-OVA)浓度1.25μg/mL,McAb-HRP稀释比1∶8 000作为最佳工作条件,从而建立了dc-CLEIA分析法;精密度的平均批内批间变异系数均低于7%;建立的标准曲线呈线性关系,线性范围为0.312～20 ng/mL,回归方程式y=-0.373x+0.688(R~2=0.985),经计算其灵敏度IC_(50)为3.19 ng/mL;除二氟沙星外与其他氟喹诺酮类药物的交叉反应率均低于8%,与其他种类的抗生素均无交叉反应;沙拉沙星和二氟沙星在鸡肉样品中的最低检出限分别为1.25、1.36μg/kg;沙拉沙星和二氟沙星在鸡肉样品中的添加回收率分别为88.2%～108.3%、93.36%～102.7%,且其变异系数均≤13.4%。结果表明:此方法不仅快速且灵敏度高,可作为沙拉沙星及二氟沙星药物残留的定量检测方法。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定鸡蛋中沙拉沙星残留的研究

建立了鸡蛋中沙拉沙星残留检测的液相色谱-串联质谱法。样品经1 mol/L磷酸和乙腈提取后,饱和正己烷除脂净化,以0.1%甲酸溶液和乙腈为流动相,液相色谱-串联质谱法测定,内标法定量。试验结果表明：沙拉沙星在1～25 ng/mL浓度范围内线性关系良好,相关系数r大于0.999。沙拉沙星在鸡全蛋及其蛋清、蛋黄中的检测限均为0.5μg/kg,定量限为1μg/kg。沙拉沙星在1、10、20μg/kg浓度添加水平内的平均回收率范围为97.0%～105.4%,批内、批间相对标准偏差在1.3%～10.3%范围之间。本方法适用于鸡全蛋及其蛋清、蛋黄中沙拉沙星残留量的测定。     

盐酸沙拉沙星胶囊对家蚕细菌性败血病的防治研究

盐酸沙拉沙星胶囊是以兽用喹诺酮类药物盐酸沙拉沙星为主要成分制成的蚕用抗菌药剂。盐酸沙拉沙星胶囊对家蚕细菌性败血病的防治效果试验表明,用100mg/L盐酸沙拉沙星药液给感染卒倒芽孢杆菌的4龄起蚕连续添食3d(第1天添食24h,第2、3天每天添食6h),对家蚕败血病的防治效果与用500mg/L盐酸诺氟沙星药液、125mg/L盐酸环丙沙星药液添食的防治效果无明显差异(P0.05);用400mg/L盐酸沙拉沙星药液给感染灵菌的4龄起蚕连续添食3d(添食方法同上),对家蚕败血病的防治效果明显优于用500mg/L盐酸诺氟沙星药液、250mg/L盐酸环丙沙星药液添食的防治效果(P0.05),与用500mg/L盐酸环丙沙星药液添食的防治效果无明显差异(P0.05)。盐酸沙拉沙星对卒倒芽孢杆菌、灵菌的最低抑菌浓度分别为1.25、5μg/mL,最低杀菌浓度分别为5、10μg/mL。分别给4龄、5龄家蚕添食400、800、1200、2000mg/L的盐酸沙拉沙星药液,对家蚕的生长发育、茧质和丝质均未见明显不良影响(t检验,P0.05),且不存在明显的剂量-反应关系。分别给5龄第4天家蚕添食剂量为5、10、20mg/kg的盐酸沙拉沙星后,药物在蚕体内吸收良好,血药浓度-时间曲线符合一级吸收的一室开放式模型。研究结果显示,盐酸沙拉沙星胶囊对卒倒芽孢杆菌或灵菌感染引发的家蚕细菌性败血病具有明显的防治效果,并且对家蚕安全无害。     

猪排泄物中麻保沙星和盐酸沙拉沙星HPLC方法的建立

本研究建立了检测猪排泄物中盐酸沙拉沙星(Sarafloxacin,SAR)和麻保沙星(Marbofloxacin,MBF)2种氟喹诺酮类药物残留的高效液相色谱法,将采集的样品用甲醇:冰乙酸:去离子水=6:1:3的提取液进行提取,提取液用空气吹干。目标化合物采用HPLC-FLD检测,流动相为甲醇-柠檬酸溶液(0.05 mol/L),流速1 mL/min,进样量10μL,柱温35℃,荧光激发波长278 nm,发射波长495 nm。结果表明,SAR最低检测限为0.043 8μg/mL,MBF最低检测限是0.010 5μg/mL,猪排泄物中SAR和MBF在0.02～20μg/mL范围内呈良好的线性关系,R^2分别是0.999 9和0.999 8,猪排泄物中SAR的回收率是75.33%,MBF的回收率是82.05%,相对标准偏差小于10%,该方法对样品的前处理简单,对分析样品较为灵敏,可以对其检测分析提供参考。     

普多沙星凝胶剂的制备及质量控制

普多沙星是一种专用于犬、猫细菌感染的新型动物专用氟喹诺酮类药物,以普多沙星为主药,以羧甲基纤维素纳、甘油、丙二醇的用量及pH为考察因素,以凝胶剂的涂展性、均匀度、离心性为指标进行综合评分,筛选优化处方,制备普多沙星凝胶剂,并对其进行质量控制研究。采用紫外分光光度法测定普多沙星的含量。优化处方为CMC-Na 50g/L、甘油160mL/L、丙二醇200mL/L、pH 6.7。检测波长282nm,普多沙星在2μg/mL～10μg/mL与吸收度呈良好的线性关系,R2=0.999 7,平均回收率为98.02%,RSD=0.15%(n=5),所制得的凝胶稳定性良好,无变化。表明该凝胶剂制备方法简单,稳定性好,质量可控,各项指标符合凝胶剂的质量标准。     

HPLC-DAD法检测马波沙星片中马波沙星氧化物的研究

建立并验证了高效液相色谱法测定马波沙星片中马波沙星氧化物含量的方法。试验采用十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以辛烷磺酸钠磷酸盐缓冲液-甲醇-四氢呋喃(65∶32∶3)为流动相,流速1.0 m L/min,柱温30℃,检测波长为210～400 nm。试验结果表明:马波沙星氧化物在0.5～100μg/m L范国内线性良好,R^2=0.9997,平均回收率为95.9%(n=9),RSD≤1.5%。方法检测限为0.2μg/m L,专属性好,可用于马波沙星片的质量控制。     

盐酸沙拉沙星在肉鸡组织中的残留

建立了肉鸡组织中盐酸沙拉少星的HPLC测定方法，并测定了肉鸡单次内服（每1kg体重10mg)和连续5d混饮（每1L饮水50mg）给药后组织中的沙拉沙星残留特征。组织样品用乙腈-氨水匀浆，离心后取上清液用正已烷-乙醚除脂，水相用磷酸酸化后作HPLC检测。色谱柱为Hypersil C18柱，此外检测波长280nm。流动相为乙腈-2%西丁基溴化铵（体积比10：90），用磷酸调pH值至2.5。肝脏、肾脏、肌肉中沙拉沙星的检测限为0.05μg/g，组织样品回收率均大于90%。鸡单次内服盐酸沙拉沙星后，24h内各组织中均可检出药物，48h后肝脏、肾脏、肌肉中药物残留量均低于0.05μg/g；混饮停药后，6h内肝脏、肾脏中可检出残留药物，12h后3种组织中残留量均低于0.05μg/g。结果表明，盐酸沙拉沙星的肉鸡组织中消除迅速，连续治疗剂量用药后组织中无药物蓄积。     

紫外分光光度法测定沙拉沙星可溶性粉的含量

为了快捷简便地控制沙拉沙星可溶性粉生产过程中沙拉沙星的含量，采用紫外分分光光度法测定沙拉沙星的含量，平均回收率为99．9％，RSD=0．33％，与高效液相色谱法比较结果基本一致。     

沙拉沙星在猪体内的药动学研究

7头健康杂种猪 ,按照随机拉丁方设计 ,进行静注、肌注及内服沙拉沙星 (5mg/kg)的药动学研究。血浆样品经甲醇沉淀血浆蛋白 ,高速离心 ,用反相高效液相色谱法测定猪血浆中沙拉沙星的浓度 ,MCPKP计算机程序处理血浆药物浓度 时间数据。健康猪静注给药的药时数据适合二室开放模型 ,主要药物动力学参数为t1/ 2α0 88±0 2 8h ;t1/ 2 β3 0 6± 0 5 0h ;V11 36± 0 2 4L/kg ;Vd(area) 2 5 0± 0 42L/kg ;ClB0 5 7± 0 0 7L·kg-1·h-1;AUC8 90±1 0 3mg·L-1·h。健康猪肌注给药的药时数据适合一级吸收一室模型 ,主要药物动力学参数为 :t1/ 2ka0 2 5± 0 18h ;t1/ 2ke3 5 3± 1 0 1h ;tmax0 94± 0 49h ;Cmax1 30± 0 37μg/ml;AUC 7 6 6± 1 38mg·L-1·h ;F86 48%± 15 15 %。健康猪内服给药的药时数据适合一级吸收一室模型 ,主要药物动力学参数为 :t1/ 2ka0 5 1± 0 2 9h ;t1/ 2ke6 72± 2 78h ;tmax2 45± 0 89h ;Cmax0 36± 0 2 1μg/ml;AUC　 4 5 4± 1 0 6mg·L-1·h ;F5 1 99%± 14 6 7%。沙拉沙星在健康猪体内的主要药动学特征为 :吸收迅速 ,达峰时间短 ,表观分布容积大。肌注给药吸收完全 ;内服给药吸收不完全 ,消除缓慢。     

盐酸沙拉沙星(sarafloxacin)在鸡体内的药动学和生物利用度

2组健康艾维因肉鸡各 8只 ,体重 (1.6 6± 0 .11) kg,研究了对其单剂量 (10 mg/kg,以沙拉沙星碱计 )静注和口服盐酸沙拉沙星后的药动学及其生物利用度 ,用高效液相色谱法测定血清中沙拉沙星的浓度。结果表明 :静注盐酸沙拉沙星溶液后 ,血清药物浓度经时过程符合无吸收因素二室模型 ,其消除半衰期 (t1 / 2β)、总体清除率 (CLB)、表观分布容积 (Vd)和药时曲线下面积 (AU C)分别为 (2 .6 78± 0 .5 0 6 ) h、(1.339± 0 .35 1) L/kg· h、(5 .15 9± 1.5 5 4) L/kg和(7.85 3± 1.731) mg/L· h;口服盐酸沙拉沙星片后 ,药时数据呈有吸收因素一室模型 ,其吸收和消除半衰期 (t1 / 2 ka,t1 / 2 ke)、血清峰浓度 (Cmax)、达峰时间 (Tmax)和药时曲线下面积 (AUC)分别为 (0 .2 87± 0 .117) h、(5 .381± 1.44 6 ) h、(0 .478± 0 .196 ) mg/L、(1.2 2 9± 0 .439) h和 (4 .0 6 0± 1.178) m g/L· h,生物利用度为 (5 1.70± 15 .0 0 ) %。     

盐酸沙拉沙星在蛋鸡体内的组织动力学的研究

为研究盐酸沙拉沙星在蛋鸡体内组织动力学，选用成年健康蛋鸡90只进行试验，按10mg/kg体重口服给药，定期采样，测定心、肝、肾脏、肌肉中盐酸沙拉沙星的含量。结果表明：心脏符合一级吸收三项指数方程。理论方程为：Ch=0.1455e^-0.0243t 2.484e^-0.54403t-2.629e^-0.8617t；肾脏符合一级吸收三项指数方程，理论方程为：Ck=1.703e^-0.126t 0.3283e^-0.2111t-2.0312e^-0.4976t；肝脏符合一级吸收二项指数方程，理论方程为：C1=6.732(e^-0.18103t-e^-0.1108t)；肌肉符合一级吸收二项指数方程，理论方程为：Cm=0.9188(e^0.1579t-e^-0.2014t)。     

盐酸沙拉沙星在鸡体内的药代动力学及残留的研究

为研究盐酸沙拉沙星在蛋鸡体内组织动力学与残留，选用成年健康蛋鸡95只进行试验。按10mg/kg体重口服给药，给药后定期采样，测定血清及心，肝，肾，肌肉中盐酸沙拉沙星的含量。结果表明：盐酸沙拉沙星在血液中经时过程符合一级吸收一室模型，主要动力学参数t1/2k3.793h,tmax1.5807h,cmax0.7429μg/ml,AUC5.3790μg/ml.h。心脏，肾脏符合一级吸收三项指数方程，主要动力学参数分别为t1/2B7.765h,40.26h,t1/2a1.6027h,4.418h,tmax1.6826h,1.9855h,cmax0.5129μg/ml,0.9090μg/ml,AUC9.0265,10.894μg/ml.hμg/ml.h。肝脏，肌肉符合一级吸收二项指数方程，主要动力学参数分别为t1/2k3.1587h,4.124h,tmax1.9764h,3.5679h,cmax3.737μg/ml,0.6956μg/ml,AUC31.354μg/ml.h,5.3269μg/ml.h。盐酸沙拉星在蛋鸡体内残留为7天。     

沙拉沙星对鸡细菌病的药效学研究

用两倍试管稀释法测得沙拉沙星对鸡白痢沙门氏菌Ｃ79.13、鸡大肠杆菌Ｏ78、鸡多杀巴氏 杆菌Ｃ４８－１的最小抑菌浓度分别为０．０７８、０．０３９、０．３１２ug/ml,明显 优于对照药物诺氟消水利生及氯霉素。沙拉沙星按高剂量（１００mg．Ｌ＾－１水）、中剂量（５０mg．Ｌ＾－１）水、低剂量（２５mg．Ｌ＾－１水）混饮,连用３天,对人工感染鸡的３种常见细菌病均可取得明显的疗效,３个剂量组对鸡白痢的治愈率分别为１００＾％     

沙拉沙星间接竞争化学发光酶联免疫检测方法的建立

为建立动物源性食品中沙拉沙星（SAR）残留的快速检测方法,本试验通过对盐酸沙拉沙星进行分子改造和偶联蛋白合成完全免疫原,免疫小鼠制备SAR单克隆抗体。通过棋盘法确定最佳包被原浓度及一抗稀释度,优化确定最佳反应条件,从而建立间接竞争化学发光酶联免疫（ic-CLEIA）检测方法,并通过灵敏度、精密度、交叉反应率、添加回收试验对该方法进行评价。紫外扫描结果显示,完全免疫原偶联成功;制备的SAR单克隆抗体效价达1：4×10⁶;包被原浓度为0.25 μg/mL,抗体稀释比为1：750 000,4 ℃包被过夜,5%脱脂乳封闭,竞争孵育1 h,酶标二抗稀释比为1：10 000,孵育1 h为ic-CLEIA最佳反应条件;建立的ic-CLEIA方法标准曲线呈线性,线性范围为0.0625~10 ng/mL,R²=0.995,灵敏度IC₅₀为1.45 ng/mL;其平均批内和批间变异系数均<10%;除与二氟沙星的交叉反应率达到98.08%以外,与其他氟喹诺酮类药物的交叉反应率均<8%,与其他非氟喹诺酮类药物均无交叉反应;SAR标准溶液的最低检测限（LOD）为0.32 ng/mL,SAR在鸡肉样品中的LOD为0.46 μg/kg;添加回收率在88.3%~106.7%范围内,其变异系数≤12.2%。结果表明,本研究建立的ic-CLEIA方法检测速度快、灵敏度高,适用于动物源性食品中SAR残留的大量检测,为SAR残留检测提供了新的方法。