基因工程抗体的研究进展

基因工程抗体的研究进展李学伍（河南省农业科学院畜牧兽医研究所，郑州４５０００２）胡士云刘凤翱（开封市畜牧局）李济宾（河南省农业厅）１基因工程抗体的诞生Ｍｏｒｉｓｏｎ１９８４年等首次报道人鼠嵌合抗体在骨髓瘤成功表达，标志着基因工程抗体的诞生。Ｊｏｎｅｓ...     

基于文献计量分析的我国基因工程抗体研究现状

以1994～2010年的《中国期刊全文数据库》作为数据来源,采用文献计量学方法对我国基因工程抗体研究文献的数量、年份分布、文献作者、作者的合作度、作者单位、载文期刊的分布和文献主题分布进行统计分析,揭示十多年来我国基因工程抗体研究的现状和发展趋势,为我国基因工程抗体研究及信息交流提供参考依据。     

牛冠状病毒4H12/1D4单链基因片段在大肠杆菌中的表达

用ＥｃｏＲＩ酶切ＰＲ５Ｂ４质粒，采用“Ｖ”字形内槽电洗脱法回收约０．８０４Ｋｂ牛冠状病毒基因工程抗体４Ｈ１２／１Ｄ４单链基因片段，并将其插入载体质粒ＰＥＴ－１７ｂ的ＥｃｏＲＩ位点构成重组质粒ＰＥＴ－Ｄ４，将重组质粒转化ＤＨ５α感受态细胞，在ＩＰＴＧ的诱导下表达，细菌裂解物经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳筛选，发现含ＰＥＴ－Ｄ４细菌经诱导新增一条约２８ＫＤα蛋白带，该蛋白带与设计基因工程抗体的大小相符，经光密度扫描，表达量约占菌体总蛋白的１４％     

植物抗体的研究进展

单克隆抗体（ｍＡｂ）在医学、农业和科学研究领域中得到广泛的应用,但迄今为止ｍＡｂ主要是通过杂交瘤技术生产的,此方法存在成本高、工艺复杂等缺点。基因工程技术的飞速发展为ｍＡｂ的生产提供了一条新的途径,即通过基因工程技术生产重组或基因工程抗体,有人也称之...     

烟草医药基因工程研究进展

就转基因烟草的表达系统、烟草生物反应器的特点及其应用于药用蛋白、抗体以及疫苗等基因工程药物生产方面取得的进展进行了综述,并展望了烟草在基因工程药物开发中的应用前景。     

基因工程在植物根结线虫防治中的应用

综述基因工程在植物根结线虫防治中的应用。介绍了利用基因工程获得抗虫植物,实现对根结线虫防治的策略：植物抗体策略,蛋白酶抑制剂策略,抗线虫取食位点策略,抗虫基因的克隆以及RNAi技术的利用等。展望了抗虫基因的克隆和RNAi技术在根结线虫防治方面的研究前景。     

抗体检测技术在基层畜牧业生产中的指导作用

本文主要根据作者自身工作经验,从抗体检测技术原理,基层常用的抗原抗体反应实验,以及抗体检测技术在指导畜牧业生产中的重要作用等方面进行阐述,说明了抗体检测技术在制定免疫程序、疾病诊断、疫苗评估及免疫效果评价等领域发挥着积极的作用。     

农药抗体制备技术研究进展

综述了农药多克隆抗体、单克隆抗体、重组抗体和人工模拟抗体制备技术研究进展,分析了农药抗体制备技术面临的问题及发展前景。     

Cre-loxp系统在构建大库容噬菌体抗体库中的应用

以杂交瘤细胞技术为基础的单克隆抗体技术已经得到了广泛的应用,但此技术所得抗体要经过动物免疫、细胞融合以及克隆,选择周期长、过程复杂.近年来,噬菌体抗体(Phage antibody libraries)技术发展迅速,用该技术可以不经免疫即可得到大量的抗体,实现抗体的快速、大量制备.一个有效的抗体库至少要达到109的库容量,抗体库的库容量越高,抗体的亲和性越高.Cre-loxp体内重组系统可以有效增大抗体库的库容性,保证库多样性,因此为高容量抗体库的发展提供了有利的工具.本文介绍了抗体库、Cre-loxp系统以及其在构建大容量抗体库中的应用.     

纳米抗体技术及其在食品安全检测中的应用

骆驼科动物自然产生的仅由重链组成的抗体称为重链抗体,其中由单个可变结构域组成的称为重链抗体可变区(VHH),也被称为纳米抗体(Nb)。从生物学、免疫遗传学再到医学各个领域的潜在应用来说,纳米抗体具有常规抗体无可比拟的优点,可识别常规抗体不能识别的结构以及隐蔽表位。此外,它还具有高稳定性(耐高温、耐酸碱)、易表达等优点。这些优良特性可使其达到常规抗体无法实现的分析或诊断。因而,纳米抗体成为检测食品中非法添加剂、农药残留及农产品污染的理想抗体。主要论述纳米抗体技术以及在食品安全检测方面应用的最新进展和目前所面临挑战,为纳米抗体更好的应用于食品里的细菌和真菌毒素以及农药残留和农产品污染检测提供借鉴。     

抗呋喃它酮代谢物衍生物单链抗体-碱性磷酸酶融合蛋白表达条件的优化

[目的]优化基因工程菌的诱导表达条件,以提高抗呋喃它酮代谢物衍生物单链抗体-碱性磷酸酶融合蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达量.[方法]采用液体发酵法培养抗AMOZ衍生物单链抗体-碱性磷酸酶融合蛋白的基因工程菌,分别研究不同宿主菌、培养基、初始pH、诱导时期、诱导时间和蛋白诱导表达剂异丙基硫代半乳糖苷(isopropylβ-...     

抗体工程的研究进展

根据当前抗体工程在食品科学方面的最新研究进展，并综合抗体工程的一些传统技术及抗体食品与传统抗体工程的比较，综合阐述了抗体是食品的发展潜力，并展望抗体食品的一些发展趋势。     

鱼病诊断技术

鱼病防治技术是水产养殖业的重要组成部分,鱼病诊断技术又是鱼病防治的基础,近年来国内随着鱼病防治工作的加强,人类医学上和动物医学上的一些技术用于鱼病的诊断。鱼病诊断技术正在向健康、快速、准确的方向发展。目前主要有以下几种诊断技术。1.荧光抗体技术(FAT、免疫荧光技术)在免疫学、生:是物化学和显微镜的基础上建立起来的一项技术。以荧光色素标记病鱼的抗原或抗体,与其相应的抗原或抗体相结合,在荧光显微镜下呈现一种特异性的荧光反应。该技术的优点是:特异性强,敏感性高,检出速度快。缺点是:非特异性染色尚未完全解决,结果判断…     

浅析抗体检测技术在动物疫病预防中的应用

近年来,畜牧产品的需求量不断增加,然而动物疫病的存在严重威胁到人类的生命健康,因此国内学者对动物疫病的监测与防控工作越来越重视,并推出抗体检测技术以实现有效防控。通过对抗体检测技术进行概述,从诊断、质量评估、疫病监测与防控等方面对抗体检测技术的应用做出具体探讨。     

抗O型口蹄疫病毒猪源单链抗体的筛选

为获得抗O型口蹄疫病毒(FMDV)高亲和力猪源单链抗体(scFv),建立抗原抗体(Ag-Ab)共表达细菌展示文库,抗原为FMDV结构蛋白VP1、抗体为高免猪抗体文库。采用细菌展示与流式细胞术结合方法,筛选出14株抗FMDV的scFv。将筛选获得scFv构建至pET28a载体中,经E. coli Rosetta表达,目的蛋白长度约为30ku,与scFv分子质量相符。Western blot结果表明,14株scFv均可与VP1特异性结合。ELISA结果表明,14株scFv均可与灭活O型FMDV特异性结合。应用共表达细菌展示技术,可避免抗原制备,简化操作流程,适用范围广泛;应用流式细胞仪筛选抗体库,可实现准确、快速、高通量筛选。抗FMDV猪源scFv研究可填补同源基因工程抗体空白,为进一步筛选中和抗体奠定基础。     

谈抗体检测技术在动物疫病防控中的应用

从疫苗诊断、动物疫病监测、免疫质量评估、动物重大疫情预警、动物重大疫痛防控成效认证方面介绍了抗体检测技术在动物疫病防控中的应用,以期推广抗体检测技术,为动物疫病防控提供强有力的帮助。     

噬菌体抗体库的构建及抗猪脂肪细胞膜单抗的筛选

 用猪脂肪细胞以免疫删减法免疫小鼠，取其脾细胞，RT-PCR扩增抗体重链可变区（VH）和轻链可变区（VL）基因，克隆入噬菌粒表达载体pCANTAB5E中，构建单链抗体（ScFv）文库。用猪脂肪细胞，对其进行3轮吸附-洗脱-富集，筛选抗猪脂肪细胞膜单抗。经ELISA检测，51/96克隆具有与猪脂肪细胞结合活性，阳性率为53%，与猪肝细胞则成阴性反应，初步证明了单抗的特异性，为猪脂肪细胞膜单抗的制备提供了一种新的方法。     

新型基因工程亚单位菌苗对猪传染性胸膜肺炎的保护效力研究

 利用分泌毒素ApxⅠ、ApxⅡ、ApxⅢ的重组表达产物和胸膜肺炎放线杆菌7型菌，研制了一种新型的基因工程亚单位菌苗并对此疫苗的免疫效力进行了研究。利用该疫苗免疫断奶仔猪，间隔3周加强1次，同时设空白对照组和一种商品化的三价细菌灭活苗组。首免后每周采血检测ApxⅠ、ApxⅡ、ApxⅢ的ELISA抗体和7型菌的血凝抗体，第2次免疫两周后用猪胸膜肺炎放线杆菌1型菌株进行气管攻毒。从攻毒后症状、细菌分离、抗体检测、死后剖检对免疫效果进行评价。结果显示亚单位菌苗对于猪传染性胸膜肺炎有显著的保护力，能明显减轻临床症状和降低肺部损伤，效果优于商品化的细菌灭活苗。     

新城疫卵黄抗体与血清抗体的效价比较

本试验通过测定新城疫卵黄抗体,种鸡群血清抗体，不同日龄雏鸡母源抗体，说明可以卵黄抗体水平推测种鸡群血清抗体和不同日龄雏鸡母源抗体水平，以便及时免疫。     

农药广谱特异性抗体制备技术研究进展

基于抗原-抗体特异性结合反应的农药免疫学检测技术的发展已经日趋成熟,能够帮助实现农药多残留免疫检测的广谱特异性抗体制备技术成为研究热点之一.本文介绍了农药广谱特异性抗体的原理及其常用的3种制备途径,包括选择共性结构半抗原制备抗体,独特型抗体和重组抗体.并对有机磷、拟除虫菊酯、氨基甲酸酯三大类农药的广谱特异性抗体制备及免疫多残留分析技术的研究现状作一综述.