鹅源新城疫病毒云南流行株免疫交叉保护试验

用分离的鹅新城疫病毒KM2007株尿囊液制成油乳剂灭活苗,和NDV油乳剂灭活苗分别接种10日龄未免疫雏鸡和未免疫雏鹅,并设非免疫对照组。免疫后21 d,试验组和对照组每只鸡和鹅分别注射0.1 mL鹅新城疫病毒KM2007株尿囊液10-1稀释液,结果对照组鹅和鸡分别出现典型的鹅新城疫和鸡新城疫的症状和病理变化,而试验组鹅和鸡全部健活。结果表明,鹅新城疫病毒KM2007株油乳剂灭活苗及NDV油乳剂灭活苗均可保护鹅和鸡免受鹅新城疫病毒野毒的攻击。     

广东省新城疫病毒地方强毒株的分离鉴定

从广东省各地方分离10余株地方强毒株，对其中的五株地方强毒株进行了分离鉴定，将各毒株病肝研磨离心后取上清，绒毛尿囊腔接种9-11日龄的鸡胚，鸡胚接种后36-42h死亡，鸡胚全身出血，含病毒的尿囊液红血球凝集效价（HA）为1：9^9-1:2^15，并能被ND阳性血清特异性抑制，却不能被AIVH5亚型血清所抑制，用自己设计的特异性检测引物，对五个毒株进行了PCR鉴定，可扩增出特异性的目的条带，再结合临床症状和剖检病变，可初步判定为新城疫病毒，为以后进行广东省新城疫病毒分子流行病学研究打下了基础。     

山东省鸡新城疫病毒弱毒株的初步分离

某鸡场饲养的罗曼产蛋鸡群爆发了典型的新城疫,采集病料接种１１日龄ＳＰＦ鸡胚进行病毒分离。经致鸡胚病变,回归试验、血凝和血凝抑制试验结果表明,所分离到的病毒系鸡新城疫病毒弱毒株,定名为ＮＤＶ－Ｓ１。     

新城疫病毒强毒株的分离鉴定

鸡新城疫是危害我国养禽业的一种严重的烈性传染病。经过多年的综合防制 ,已经基本控制了该病的爆发 ,典型新城疫的发生已逐渐减少。但是 ,1999年 10月以来 ,一些地区相继发生一种以呼吸道、消化道黏膜出血为典型症状并致部分鸡死亡的急性传染病 ,严重影响了该地区养鸡业的发展 ,给养鸡户造成很大的经济损失。为了尽快查明病因 ,以便制定有效的防制措施来控制该病的流行 ,我们对该地区采集的病料进行了病原分离鉴定 ,并对分离毒株的生物学特性进行了测定 ,现将试验方法和结果报道如下。1　材料和方法1.1　材料SPF鸡胚 ;1日龄SPF雏鸡 (自…     

鹅源新城疫病毒云南流行毒株的鉴定理化试验

用分离病毒KM2007株的尿囊液经氯仿,乙醚,甲醛处理后的病毒液接种9日龄鸡胚,并设对照组;病毒液密封于封闭的小试管中,分别置于100℃1min、2min;56℃5mi n、10min、30min、45min和60min,并迅速冷却,按常规处理接种9日龄鸡胚。结果经氯仿,乙醚,甲醛处理过的病毒液接种的鸡胚全部健活,对照组全部死亡,说明分离病毒对氯仿,乙醚,甲醛敏感。病毒热稳定性试验结果显示：100℃1min,2min;56℃45mi n和60min,鸡胚全部存活,血凝价消失;其他组别的鸡胚部分死亡,血凝价下降,说明病毒对热敏感。     

鹅源新城疫病毒自然弱毒株的分离与鉴定

从江苏省某健康鹅群分离并筛选出一株病毒,经鸡胚传代培养和血清学试验,证明该毒株为新城疫病毒。应用电镜技术、生物学特性检测对其进行鉴定,结果表明:该毒株MDT为146.4h,ICPI为0.375,参照判定标准,确定该毒株为NDV弱毒株。通过RT-PCR方法,扩增出该毒株F基因,并进行克隆和序列测定,其F蛋白裂解位点的序列为112G-K-Q-G-R-L117,符合典型的NDV弱毒株的特征,从基因和分子水平上进一步证明该毒株为NDV弱毒株,通过绘制的系统发育进化树进行分析,表明该毒株为F基因Ⅰ型新城疫病毒,并将该毒株暂命名为G0405。     

鹅源新城疫病毒云南流行株动物回归试验

用分离的鹅源新城疫病毒KM2007株尿囊液分别接种25日龄非免疫雏鹅和25日龄非免疫雏鸡各20只,对照组每只鸡肌肉注射生理盐水。结果试验组鹅和鸡分别出现典型的鹅新城疫病和鸡新城疫的临床症状和病理变化,对照组全部健活。从发病及死亡鹅和鸡的脑/脾中分离到病毒。试验结果表明,分离病毒KM2007株与鹅自然感染发病的病原一致。     

鸽新城疫病毒弱毒株的分离与鉴定

对某鸽场送检的6只通过病理剖检疑似新城疫(ND)的病鸽进行实验室诊断,包括细菌分离、新城疫病毒荧光RT-PCR检测、SPF鸡胚分离与鉴定,并测定其鸡胚分离物F3代EID50和ICPI.结果为内脏病料新城疫病毒荧光RT-PCR检测为阳性;SPF鸡胚分离到一株有血凝活性的病毒,经HA和HI鉴定为NDV,其F3代血凝价为1∶26,EID50为107.63,ICPI为1.19.根据病鸽的临床症状、鸡胚分离物EID50和IC-PI,确定该鸽新城疫病毒分离株为弱毒株.     

新城疫病毒山东强毒株的分离鉴定

从山东流行烈性传染病的鸡群中分离出7株具有血凝活性的病毒，该7株病毒的血凝活性均能被新城疫La Sota株标准阳性血清所抑制，但病毒不能被中和，仍能致死鸡胚。经分离鉴定，分离毒均为新成疫病毒株。通过鸡胚半致死量（ELD50）、最小致死量致鸡胚的平均时间（MDT）、1日龄雏鸡脑内致死指数（ICPI）、6周龄雏鸡静脉致死指数（IVPI）、血凝解脱及血凝素稳定性等试验表明：7株分离病毒均为新城疫病毒强毒性，其毒力与标准强毒株F48E9株相似。     

一株新城疫病毒弱毒株的分离鉴定

于１９９６年８月从长春地区－－养鸡场分离到一株新城疫病毒,该毒株经过鸡胚传代培养,病毒形态学观察,血凝谱测定、鸡胚平均致死时间试验、鸡脑内致病指数试验、脉致病指数试验及１入毒试验等生物学特性结果表明该新城商株为弱毒株。     

新城疫病毒西藏分离株的生物学特性鉴定及遗传进化分析

从西藏病死藏鸡中分离到具有血凝活性的病毒、经血凝抑制试验、电镜观察、PCR扩增和测序鉴定为新城疫病病毒(NDV),通过动物致病性试验证明该病毒对鸡具有致病性;分离毒株毒力测定结果显示,MDT为120h,EID50为10-8.44、IVPI为0.5、ICPI为0.6,均符合NDV弱毒株特征。血凝解脱及血凝素热稳定性试验显示:各分离株的血凝解脱时间短,血凝素热稳定性较差,符合NDV弱毒株的特征。F基因的序列测定遗传进化分析表明,西藏分离毒株之间的核苷酸序列具有99%的同源性,与疫苗株LaSota的同源性为90%;与国内标准强毒株F48E8同源性为81%。推导其氨基酸序列分析表明,各分离株的F蛋白的裂解位点氨基酸112 G-K-Q-G-R-L117,具有NDV弱毒株特征,与毒力测定结果相符。本研究首次报道了NDV西藏分离毒株遗传进化情况和生物学特性情况,为进一步研究高海拔、缺氧环境下NDV生物学特性变化研究奠定了基础。     

重组新城疫病毒载体疫苗研究进展

新城疫病毒(NDV)作为疫苗载体可以在宿主的呼吸道组织细胞中有效复制,诱导产生针对外来抗原的局部和全身免疫反应。NDV的基因组较大,可以很好地容纳外源基因。作为RNA病毒,与宿主细胞发生DNA重组的可能性较小。由于宿主范围的限制,人群中没有预先存在的NDV抗体,NDV对人类来说相对安全。因此,NDV作为一种疫苗载体颇受关注。论文简要论述了NDV的生物学特征,外源基因的插入方式,重点阐述了重组新城疫病毒载体疫苗的研究进展,以期为设计其他有效的兽用和人用活载体疫苗提供参考。     

乌鸡新城疫病毒中发型毒株的分离与鉴定

从发病的43日龄乌鸡群中分离到1株病毒，经鸡胚传代培养后，测定其F3代尿囊液血凝（HA）效价为2^8，HI试验中能被鸡ND阳性血清中和，鸡胚平均死亡时间（MDT）为60．8h，1日龄雏鸡脑内接种指数（ICPI）为0．8，血凝解脱时间小于10min，血凝素热稳定性差。表明该分离株为新城疫病毒中发型毒株。     

山东省鸡新城疫病毒弱毒株的初步分离

某鸡场饲养的罗曼产蛋鸡群爆发了典型的新城疫 ,采集病料接种11日龄SPF鸡胚进行病毒分离。经致鸡胚病变、回归试验、血凝和血凝抑制试验结果表明 ,所分离到的病毒系鸡新城疫病毒弱毒株 ,定名为NDV—S1。     

新城疫病毒人工感染鹅脾脏差异表达蛋白质组初步分析

脾脏是新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)感染的重要靶器官,本试验旨在从分子水平上分析NDV与宿主之间的相互作用,探寻早期基因Ⅳ型强毒Herts/33和晚期基因Ⅶ型强毒JS5/05造成鹅脾脏病变差异的相关蛋白。30日龄非免疫鹅分别人工感染NDV强毒株Herts/33和JS5/05,并于感染后36、72、108h采集2个感染组和对照组的鹅脾脏,提取脾脏蛋白,以17cm、pH5～8的IPG胶条进行二维电泳,运用PDQuest 8.0.1软件对凝胶图谱进行差异蛋白分析。结果显示:与对照组相比,Herts/33感染组和JS5/05感染组脾脏组织分别有154个和148个蛋白出现了显著的差异表达,其中有86个蛋白点是不同感染组共有的差异点,包括52个感染后上调表达蛋白点,34个下调表达蛋白点;另外,有130个差异蛋白点为NDV感染鹅后不同毒株之间产生的差异表达,包括71个感染后上调表达蛋白点,59个下调表达蛋白点。基因Ⅳ型NDV强毒和基因Ⅶd亚型NDV强毒分别感染鹅后,能引起宿主脾脏组织蛋白表达谱发生不同的改变,这为进一步研究Ⅶd亚型NDV对水禽致病性增强的机制提供了重要线索。     

鸡新城疫病毒强毒株的分离及生物学特性鉴定

用SPF鸡胚及鸡胚成纤维细胞，从病死鸡的脑组织中分离到一株病毒。此病毒能凝集鸡的红细胞，而且这种凝集可以被特异性抗血清所抑制。通过对分离株进行回归实验，MDT、ICPI、IVPI及其他生物学特性实验、空斑实验、中和试验、电镜观察等，证实该分离株为新城疫病毒强毒株。     

新城疫病毒强毒株的分离与鉴定

从发病率为１００％、病死率为９７％的鸡群中分离到１株病毒。该病毒凝集鸡红细胞的作用可被新城疫标准阳性血清所抑制,证明所分离的毒株为新城疫病毒。鸡胚半数致死量、最小致死量致死鸡胚的平均时间、１日龄雏鸡脑内致死指数、６周龄雏鸡静脉致死指数、血凝解脱及血凝素热稳定性等试验表明,分离毒为新城疫病毒强毒株,其毒力比标准强毒Ｆ４８Ｅ８株还强。血凝抑制试验和中和试验表明,分离毒的血凝性与Ｆ４８Ｅ８相同,但中和特性与Ｆ４８Ｅ８有较大差异     

新城疫病毒载体疫苗研究进展

新城疫病毒（Newcastle Disease Virus,NDV）作为载体已成功地应用于多种人类和动物疫病疫苗的研发中。大量研究表明,重组新城疫病毒（Recombinant NDV,rNDV）载体疫苗相较于传统疫苗无论在体液免疫、黏膜免疫,还是攻毒保护等方面均有较好的表现。NDV载体已成为研制安全、高效、低毒、免疫原性更佳的载体疫苗的重要工具。该文综述了利用NDV作为疫苗载体的反向遗传学技术在家禽、哺乳动物和人用新型疫苗研制方面的进展,以期为更好地利用NDV载体研制更多的疫苗提供新的思路。     

用胶体金免疫电镜技术检测新城疫病毒

本研究应用柠檬酸三钠还原法制备了20nm的胶体金颗粒标记NDV抗体,并且用直接电镜、免疫电镜和胶体金免疫电镜技术比较观察了新城疫病毒。证明胶体金免疫电镜技术作为检测NDV的检测方法具有简单、快速、准确和无污染等优点。