薄皮甜瓜高效再生体系的建立

对"G24"和"甘甜一号"薄皮甜瓜材料5～7d苗龄的子叶、下胚轴、根尖、真叶以及不同6-BA浓度下不定芽诱导情况进行了研究,建立了高效稳定的再生体系并对生根以及移栽等条件进行了初步研究。结果表明:2份薄皮甜瓜材料在不定芽的诱导方面差异不大,"G24"不定芽的发生频率达到97.2%,"甘甜一号"为91.6%;最适宜作为甜瓜组织培养的外植体材料为子叶近胚轴端,其不定芽诱导率可达95%以上;不定芽诱导中最适6-BA浓度为1.0mg/L。     

抗生素对甜瓜植株再生的影响

在建立以农杆菌介导的表达ACC脱氨酶基因的甜瓜遗传转化体系过程中，进行了抗生素影响甜瓜植株再生试验。结果表明：卡那霉素对甜瓜愈伤组织、不定芽分化及生根均有明显的抑制作用，75mg/L的卡那霉素可作为今后甜瓜遗传转化筛选转化体和非转化体的临界浓度；200－400mg/L浓度范围内的氨苄青霉素能够很好地抑制农杆菌过度生长造成的污染，但对甜瓜植株再生的影响较小。     

甜瓜再生体系的建立

以‘鑫福999’甜瓜5 d龄无菌苗的子叶、下胚轴、真叶为外植体,研究了添加6-BA、IAA和2,4-D的培养基对愈伤组织诱导、丛生芽的发生和丛生芽生根的影响。结果表明:诱导愈伤组织的最适外植体为子叶,由子叶诱导的愈伤组织生长速度最快、品质最好、数量最多,最适愈伤组织的诱导培养基为MS+IAA 0.5 mg/L+6-BA 2 mg/L。最适宜诱导丛生芽的外植体为子叶,最适丛生芽诱导培养基MS+6-BA 1.0 mg/L,最适生根培养基为MS培养基。     

不同类型甜瓜高效再生体系的建立

以厚皮甜瓜(Cucumis melo ssp.melo var.cantalupensis,C.melo ssp.melo var.ameri)、厚薄皮甜瓜(C.melo ssp.melo var.inodorus)和薄皮甜瓜(C.melo ssp.agrestis var.chinensis,C.melo ssp.a...     

甜瓜高效不定芽再生体系的建立

对8个基因型甜瓜再生能力进行研究,筛选出再生能力较强的基因型,并以其为材料对外植体类型,不定芽诱导、伸长和不定根诱导3个阶段植物生长调节剂的类型与质量浓度进行优化筛选,旨在建立甜瓜高效的不定芽再生体系。结果表明,不同基因型间再生能力存在差异,2个厚皮甜瓜基因型B8、P110和1个薄皮甜瓜基因型IVF05再生能力较强,其中B8再生效果最好;以B8材料为基础建立再生体系,发现不定芽诱导能力最高的外植体为子叶近胚轴端,不定芽诱导阶段最适的培养基为MS+1.0 mg·L^-16-BA+1.0 mg·L^-1ABA,不定芽诱导率96.7%;不定芽伸长和不定根诱导最适的培养基分别为MS+0.1 mg·L^-16-BA和1/2 MS+0.5 mg·L^-1IBA,获得的再生苗生根率达93.3%。     

丽格海棠高效再生体系的建立及对抗生素敏感性研究

以丽格海棠叶片和叶柄为外植体,通过离体培养分化成苗以及对卡那霉素和头孢霉素的敏感性实验,建立了农杆菌介导的稳定、高效的基因转化受体系统.结果表明:丽格海棠的最适生芽培养基为MS 6-BA0.5 rag/L NAA0.05 mg/L KT0.1 mg/L,不定芽的最适生根培养基为1/2MS IBA0.2 mg/L NAA0.15mg/L;75 mg/L卡那霉素可以完全抑制叶柄的生芽,100 mg/L卡那霉素可以完全抑制叶片的生芽,75 mg/L卡那霉素完全抑制不定芽的生根,头孢霉素浓度小于等于250 mg/L时对生芽和生根的影响不大.     

新疆甜瓜“皇后”再生体系的建立

以厚皮甜瓜"皇后"为试材,研究了6-BA及其与NAA、GA3组合对植株离体再生的影响,以期建立以子叶为外植体的快速高效再生体系。结果表明:甜瓜子叶用MSB+1.0mg/L6-BA诱导分化培养基,不定芽诱导率可达86%以上;培养基中添加NAA不利于"皇后"子叶不定芽的产生;产生的不定芽丛或单芽转至MSB+0.1mg/L 6-BA+0.1mg/L GA3培养基,不定芽均可伸长,且生长状况良好;再生苗转至不添加任何激素的MS培养基生根,生根率达99%。     

抗病基因VpPR10转化‘砀山酥梨’及转化条件的优化

将源自中国野生华东葡萄的抗病基因——病程相关蛋白基因导入‘砀山酥梨’,并对转化系统条件进行优化。首先将VpPR10基因重组于中间表达载体pWR-Ⅱ,得到重组质粒pWR-Ⅱ-VpPR10;继而以改进冻融法将其导入根癌农杆菌EHA105,再利用根癌农杆菌介导的叶盘转化法进行遗传转化。根癌农杆菌浓度OD600=0.5,离体叶片侵染5min,在含有100μmol·L-1乙酰丁香酮的培养基中暗处共培养48h有利于砀山酥梨的遗传转化;经PCR分析、Southern blot和RT-PCR检测,证明目的基因VpPR10已导入并整合到砀山酥梨基因组中;转化率为1.08%。     

结球甘蓝自交系YL-1的高效遗传转化体系的建立及应用

为了筛选结球甘蓝高效遗传转化受体材料,以高代自交系YL-1、21-3、12J35、650为试材,比较不同材料具柄子叶和下胚轴的再生频率差异。在4份供试材料中,YL-1为最优转化受体,再生频率显著高于其他3份材料;YL-1具柄子叶和下胚轴的再生频率无显著差异,均可用于遗传转化。进一步对YL-1遗传转化过程中光照强度、Basta除草剂浓度、农杆菌侵染浓度等关键影响因素进行优化,发现光照强度为4 000 lx时更有利于不定芽诱导;除草剂最适筛选浓度为8 mg·L~(-1);农杆菌侵染浓度OD600=0.3侵染8 min,YL-1抗性芽再生频率最高。基于建立的高效遗传转化体系,共获得47株抗除草剂植株,PCR检测显示其中12株为阳性,初步表明bar基因已转化到甘蓝中,转化率达到2.18%。利用转录组测序技术对2株PCR阳性材料进行基因表达分析,均检测到bar基因高效表达。甘蓝高代自交系YL-1高效遗传转化体系的建立可为今后结球甘蓝基因功能鉴定及重要农艺性状的改良提供基础。     

甜瓜白粉病抗病基因的定位及候选基因分析

以甜瓜高抗白粉病自交系MR-1为母本,易感白粉病自交系Top Mark为父本,构建BC_1P_2和F_2群体,经13个国际通用的甜瓜白粉病生理小种鉴别寄主鉴定,2015年东北农业大学设施园艺工程中心的白粉病发病病菌为P.xanthii生理小种1,甜瓜MR-1对P.xanthii生理小种1的抗性由单显性基因控制。通过对266个F2分离群体的抗病性鉴定和CAPS标记分析,采用复合区间作图法对甜瓜抗白粉病性状进行QTL分析,最终构建了1张包含203个CAPS标记的甜瓜遗传连锁图谱,并将抗病基因PXR定位在第12号染色体上M12-GH和M12-TE 2个标记之间,该基因与两侧翼标记间的距离分别为0.63 c M和0.42 c M,两侧翼标记间在甜瓜参考基因组上对应的物理距离为303 kb,该区域内含有60个预测基因,其中10个基因含有非同义单碱基突变。10个基因荧光定量分析结果显示,在抗病与感病甜瓜表达量存在较大差异的4个基因MELO3C002434、MELO3C002437、MELO3C002441、MELO3C002457为甜瓜白粉病抗病候选基因。     

金柑高效再生体系的建立

以金柑实生苗为试材进行试验,研究不同再生培养基和苗龄及不同暗培养时间对金柑不定茅再生的影响,建立一套高效稳定的金柑组织培养再生体系.结果表明:采用55 d苗龄的无菌苗上胚轴茎段在Ms+6-苄氨基嘌呤(6-BA)2.0 mg/L+а-萘乙酸(NM)1.0mg/L+激动素(KT)1.0 mg/L+3%蔗糖+0.8%琼脂(DH值5.7)再生培养基上,不经过暗培养直接转移至光/暗周期1 6 h/8 h条件下,为诱导金柑不定芽再生的最佳条件,再生率高达90%.     

黄瓜矮化突变体再生体系的建立

以黄瓜矮化突变体D0462子叶为外植体,以MS为基本培养基,建立黄瓜矮化突变体再生体系.结果表明:不定芽诱导最适培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA;芽伸长最适培养基为MS+0.1 mg/L 6-BA;再生植株生根培养基为1/2MS.为了控制芽伸长阶段出现的开花现象,选用6-BA浓度0.1 mg/L,光照时间8 h/d,尽可能抑制开花.     

苦苣菜再生体系建立研究

以苦苣菜的嫩茎为材料,进行愈伤组织的诱导、分化、试管苗生根、移栽及移植所需要条件的研究,并建立起苦苣菜嫩茎的再生体系。结果证明：MS＋BA0．6mg／L＋2,4-D1．6mg／L是嫩茎颗粒状愈伤组织诱导的理想培养基;MS＋AgNO3 2．0mg／L＋BA1．0mg／L＋NAA0．1mg／L是诱导愈伤组织颗粒和不定茅分化培养的理想培养基;1／2MS＋IAA0．2mg／L＋NAA0．1mg／L是试管苗生根培养的理想培养基;河沙和炉灰渣是试管苗移栽的理想基质,移栽成活率为96％和98．5％,移植到山坡上的试管苗生长旺盛,根系发达。     

网纹甜瓜网纹形成发育研究进展

优美的网纹是网纹甜瓜一个重要品质特征。本文综述了网纹甜瓜网纹形成发育过程中的果实表皮细胞特征,网纹发育相关过氧化物酶活性和相关植物激素对网纹形成的影响,并概括了影响网纹发育的相关外源因素,指出了今后的研究方向。     

甜瓜几种主要病害的杀菌剂防治效果比较研究

试验针对甜瓜叶枯病、蔓枯病、疫病、白粉病,除草剂或化学品药害等,采用不同的杀菌剂进行防治效果比较研究。结果表明:15%三唑酮喷雾对甜瓜叶枯病,70%甲基托布津+68%金雷多米尔喷雾对甜瓜苗期蔓枯病,70%甲基托布津+68%金雷多米尔+12%松脂酸铜涂茎对甜瓜成株蔓枯病,50%苯菌灵+72.2%普力克+黄腐酸硒涂茎加敷土对甜瓜疫病,5%己唑醇喷雾对甜瓜白粉病,解害灵喷雾对误用除草剂或化学品药害等控制效果明显。     

双抗虫基因转化欧美杨107的研究

以欧美杨107为试材,采用农杆介导法进行双抗虫基因(Bt Cry1Ac基因+API慈姑蛋白酶抑制剂基因)的遗传转化研究,探讨了影响欧美杨107的遗传转化的不同因素,初步建立了欧美杨107品种高效组织培养再生体系及遗传转化体系。结果表明:经PCR检测和虫试效果,证明了目的基因已经整合到欧美杨107的基因组中,从转基因株系中筛选出生长发育正常并抗虫能力强的优良株系。     

露地菊离体再生体系建立及BrDFR基因遗传转化

 以露地菊（Chrysanthemum morifolium）品种‘神韵’无菌苗叶片为外植体材料,研究植物生长调节剂配比对其愈伤组织诱导再生芽的影响,以建立离体再生体系。研究结果表明,露地菊‘神韵’在含NAA 1.0 mg · L^-1 + BA 1.0 mg · L^-1的MS培养基上获得了最高的再生芽分化率。利用已经克隆的‘津田’芜菁BrDFR基因构建非抗生素筛选的表达载体。以露地菊‘神韵’的无菌苗叶片为受体,通过农杆菌介导进行BrDFR基因的遗传转化。以载体的PMI基因为筛选标记,通过甘露糖筛选获得了‘神韵’的遗传转化再生植株。经过PCR验证和Southern杂交检测证实BrDFR基因已经整合到‘神韵’基因组中。     

露地菊离体再生体系建立及BrDFR基因遗传转化

以露地菊(Chrysanthemum morifolium)品种‘神韵’无菌苗叶片为外植体材料,研究植物生长调节剂配比对其愈伤组织诱导再生芽的影响,以建立离体再生体系.研究结果表明,露地菊‘神韵’在含NAA 1.0 mg·L-1+BA 1.0 mg· L-1的MS培养基上获得了最高的再生芽分化率.利用已经克隆的‘津田’芜菁BrDFR基因构建非抗生素筛选的表达载体.以露地菊‘神韵’的无菌苗叶片为受体,通过农杆菌介导进行BrDFR基因的遗传转化.以载体的PMI基因为筛选标记,通过甘露糖筛选获得了‘神韵’的遗传转化再生植株.经过PCR验证和Southern杂交检测证实BrDFR基因已经整合到‘神韵’基因组中.     

合欢离体培养及高效再生体系的建立

以合欢种子和当年生枝条为材料,研究了合欢离体培养及再生体系,探讨了不同激素组合对合欢愈伤组织的产生、分化及生根的影响,筛选出高效产生愈伤组织培养基为MS+BA2mg/L+KT0.5mg/L+NAA0.3mg/L;分化培养基为MS+BA1mg/L+NAA0.1mg/L;有利于生根的培养基为1/2MS+NAA0.5mg/L,以上培养基均加30g/L蔗糖、8g/L琼脂。