柑橘褐斑病的病原分离和药物筛选

从云南马关近2 a来发生的一种柑橘褐斑病的病理组织中分离得到1株病原菌,依其培养性状和形态特征,初步鉴定为径点霉属,并比较了其对11种市售农药的敏感性。结果表明:氟硅唑、中生菌素、多抗霉素、丙森锌、氟菌唑、异菌脲6种药物对病菌菌丝生长的抑制活性较高,其中氟硅唑最灵敏,其EC50为0.03μg/mL;丙森锌和中生菌素次之,EC50分别为1.8μg/mL和3.14μg/mL;氟硅唑和百菌清对孢子的抑制效果较好,1μg/mL抑制率均在80%以上;丙森锌、佳爽和多抗霉素也有一定的保护作用。     

蓝莓灰霉病菌防治药剂室内毒力测定

由灰葡萄孢引起的蓝莓灰霉病是蓝莓生长和贮藏期间的重要病害,为筛选出有效防治蓝莓灰霉病的药剂,采用菌丝生长速率法测定14种杀菌剂对蓝莓灰霉病菌的室内毒力。结果表明,化学杀菌剂毒力由强到弱依次为腐霉利、嘧菌酯、吡唑醚菌酯、氟硅唑、多菌灵、己唑醇、啶酰菌胺、溴菌腈、嘧霉胺和噻呋酰胺,EC₅₀值分别为0.56、0.81、0.82、1.46、1.65、1.77、11.86、13.76、55.85和425.76 mg·L^-1;生物杀菌剂毒力由强到弱依次为丁子香酚、中生菌素、多抗霉素和井岗霉素,EC₅₀值分别为1.13、13.65、59.47和499.38 mg·L^-1。     

甜瓜枯萎病病原菌鉴定及高效低毒化学防治农药筛选

以吉林省甜瓜枯萎病重度发生区域采集的发病果实为试材，采用组织分离法对其病原菌进行分离，同时利用形态学和分子生物学鉴定，以及科赫氏法则进行致病性验证；并通过菌丝生长速率法测定了8种生产中常用的化学药剂原药对该致病菌的毒力作用，研究了高效低毒化学农药对甜瓜枯萎病室内防治效果，以期为利用高效低毒化学农药田间防治甜瓜枯萎病提供参考依据。结果表明：拟轮枝镰刀菌(Fusarium verticillioides)是吉林省甜瓜枯萎病的一种新的致病菌，供试的8种化学药剂中咪鲜胺对F.verticillioides XT1的抑制作用最好，毒力作用最强，EC₅₀值为0.029 5μg·mL^-1,其次为戊唑醇和氟硅唑，其EC₅₀值分别为0.146 7μg·mL^-1和0.190 1μg·mL^-1;咪鲜胺、戊唑醇和氟硅唑的最小抑菌药物稀释浓度(minimum inhibitory concentration, MIC)值分别为0.048、1.2μg·mL^-1和0.8μg·mL     

柑桔脚腐病菌Phytophthora parasitica杀菌剂的室内筛选

柑桔脚腐病是为害柑桔主干基部的病害.采用菌丝生长速率法对柑桔脚腐病菌寄生疫霉Phytophthora parasitica进行了21种农药的室内毒力测定.结果表明,各药剂对寄生疫霉菌丝的生长均有抑制作用,并且其抑制率与药剂浓度呈正相关.其中,毒力作用最强的是50％烯酰吗啉水分散粒剂,EC50为0.259 8μg/mL;其次是60％唑醚·代森联水分散剂、2％春雷霉素水乳剂、70％丙森锌可湿性粉剂、10％多抗霉素B可湿性粉剂、50％多·锰锌可湿性粉剂和50％醚菌酯水分散粒剂,EC50在1.0～7.7 μg/mL之间；再次是65％代森锌可湿性粉剂、10％井冈霉素水乳剂、10％苯醚甲环唑水分散粒剂、40％腈菌唑水分散粒剂、43％戊唑醇悬浮剂、25％丙环唑乳油、3％中生菌素可湿性粉剂、68％碱式硫酸铜水分散粒剂、40％氟硅唑乳油和12.5％烯唑醇可湿性粉剂,EC50在18.0～69.0tg/mL之间；较差的是50％敌克松可湿性粉剂、50％异菌脲可湿性粉剂、70％甲基硫菌灵可湿性粉剂和50％甲基硫菌灵悬浮剂,EC50在329.0 μg/mL以上,尤其甲基硫菌灵70％可湿性粉剂和50％悬浮剂的EC50分别高达979.166 5和1 713.833 0 μg/mL,不宜推荐继续用于柑桔脚腐病的防治.     

柑桔链格孢菌杀菌剂的室内筛选

利用菌丝生长速率法,测定了18种化学杀菌剂对柑桔链格孢菌Alternaria citri的毒力。结果表明,70%丙森锌抑菌效果最好,EC50为0.247 5μg/mL;10%苯醚甲环唑效果次之,EC50为0.346 5μg/mL;其次为50%丙环唑、27.12%碱式硫酸铜、10%井冈霉素、40%氟硅唑、70%氢氧化铜、22%抑菌唑、1.5%噻霉酮、65%代森锰锌,EC50均在2.4μg/mL以下;其余药剂效果不理想,EC50在11μg/mL以上,尤其多菌灵效果最差,EC50为911.774 7μg/mL。     

十字花科蔬菜提取物对草莓专化型尖孢镰刀菌的抑菌活性研究

为研究不同十字花科植物提取物的抑菌活性，采用菌丝生长速率法，测定芥菜、茼蒿、甘蓝、油菜和雪里蕻提取物对草莓枯萎病原菌菌丝生长的抑制作用。结果表明，5种十字花科植物提取物均对草莓专化型尖孢镰刀菌有一定抑制作用，随提取物浓度降低，抑菌率呈现降低的趋势，浓度为1 g/mL时下提取物的抑菌率可达到73.13%～82.33%。通过毒力方程的测定，茼蒿的EC₅₀为0.413 0 g/mL，对尖孢镰刀菌抑制效果最好，芥菜、雪里蕻和油菜EC₅₀为0.473 5～0.491 5 g/mL，这3种植物提取液毒力相当，甘蓝的EC₅₀最高，对病原菌抑制效果最弱。进一步可利用十字花科植物之间的化感作用合理安排与草莓轮、间作，减轻草莓枯萎病病害发生，为草莓枯萎病防治和植物源农药先导化合物的研发提供技术依据。     

湖北贝母灰霉病病原菌鉴定及防治药剂筛选

以湖北贝母病样为试材,采用组织分离法和菌丝生长速率法,明确了湖北贝母灰霉病病原菌的种类,研究了不同杀菌剂对该病原菌的影响,以期为病害的科学防控提供参考依据。结果表明：湖北贝母灰霉病的致病菌属葡萄孢属(Botrytis sp.),是一种尚未报道过的新种。病原菌BMXTX2菌丝生长的最适pH为4,最适温度为20℃,最适碳氮源分别为葡萄糖和牛肉浸膏。室内毒力测定结果表明,430 g·L^-1戊唑醇悬浮剂、8%氟硅唑微乳剂和500 g·L^-1氟啶胺悬浮剂3种化学杀菌剂的抑菌效果较好,EC₅₀值分别为0.15、0.48、0.98 mg·L^-1;1%蛇床子素水乳剂和80%乙蒜素乳油2种生物杀菌剂对病原菌的抑菌效果较好,EC₅₀值均小于10 mg·L^-1,也可作为备选药剂。该研究首次明确了湖北贝母灰霉病的病原菌,并筛选出5种有较好抑菌效果的杀菌剂,为湖北贝母灰霉病的田间防控提供了参考依据。     

柑桔轮斑病菌2个菌株对杀菌剂敏感性的差异分析

为了筛选出柑桔轮斑病菌的有效防治药剂，采用菌丝生长速率法测定了29种杀菌剂对分离自重庆的WZ1菌株及分离自陕西的DS3菌株的抑制效果，并对2个菌株的β-微管蛋白(β-tubulin)基因序列及编码的氨基酸序列进行比较。结果表明，在29种药剂中，咪鲜胺、双胍三辛烷基苯磺酸盐、氟硅唑和双胍·咪鲜胺对WZ1和DS3菌株的有效中浓度(EC₅₀)<0.1 mg/L,抑制作用均强；苯醚甲环唑·氟唑菌酰胺、丙环·嘧菌酯、氟唑菌酰羟胺·苯醚甲环唑、烯肟·戊唑醇、苯甲·烯肟、吡萘·嘧菌酯、苯甲·嘧菌酯、苯醚甲环唑、氟唑菌酰羟胺·咯菌腈、唑醚·戊唑醇、氟吡菌酰胺·肟菌酯和戊唑醇对WZ1和DS3菌株的EC₅₀<1 mg/L,抑制作用较强；DS3菌株已经对甲基硫菌灵和苯菌灵产生了抗药性，相应的EC₅₀分别为3 596.628 4和115.555 2 mg/L;DS3菌株对氟啶胺、抑霉唑，WZ1菌株对代森锰锌的敏感性下降较明显，可能存在抗药性风险。DS3菌株β-tubulin基因第599位碱基由T突变为A,相应β-tubulin第20...     

引致桂花叶斑病的葡萄座腔菌生物学特性及药剂毒力测定

以桂花为试材,利用组织分离法分离桂花叶斑病菌,并对其进行形态特征鉴定和rDNA-ITS序列分析,研究了该病原菌的生物学特性及其对9种杀菌剂的敏感性。结果表明:该病原菌为葡萄座腔菌;光照对病原菌的生长无明显影响;菌丝生长的最适温度20~30℃;最适pH6~9;最适碳源为葡萄糖、蔗糖和麦芽糖;最适氮源为硝酸钾和天冬酰胺。9种杀菌剂对桂花叶斑病菌的生长均表现出抑制作用,其中苯醚甲环唑、戊唑醇和氟硅唑的毒力最强,EC50分别为0.6839、0.8754、1.2236μg/mL;百菌清毒力最弱,EC50为57.0778μg/mL。     

海南省火龙果溃疡病菌对吡唑醚菌酯敏感性分析

【目的】监测分析海南省火龙果溃疡病菌对吡唑醚菌酯的敏感基线及敏感性水平。【方法】采用菌丝生长速率法测定吡唑醚菌酯对海南省8个火龙果种植市(县)采集到的59株火龙果溃疡病菌的EC₅₀值,采用R语言进行数据分析。【结果】吡唑醚菌酯对供试菌株的EC₅₀范围为0.2540~2.2233μg·mL^-1,EC₅₀均值为0.9841μg·mL^-1;以58株菌株EC₅₀连续性正态分布时的均值0.9627μg·mL^-1作为海南省火龙果溃疡病菌对吡唑醚菌酯的敏感基线,海南省火龙果溃疡病菌均对吡唑醚菌酯表现为敏感;除乐东和白沙地区间敏感性差异显著外,其他地区间敏感性差异均不显著。【结论】海南省火龙果溃疡病菌对吡唑醚菌酯的敏感性差异较小,对吡唑醚菌酯仍较为敏感。     

万寿菊精油杀菌素对西瓜枯萎病菌的抑菌作用及对西瓜幼苗的影响

采用田间试验和生物测定方法,研究了人工合成的万寿菊精油杀菌素对西瓜枯萎病菌和西瓜幼苗生长的影响。结果表明:0.5μg/mL万寿菊精油杀菌素24、48、72、144 h的抑制率分别为100%、76.7%、59.9%、56.8%;当浓度大于1.5μg/mL时抑制率达100%;10μg/mL万寿菊精油杀菌素处理西瓜幼苗的致萎指数得到显著降低,差异达显著水平(P<0.05);20μg/mL万寿菊精油杀菌素处理的西瓜枯萎病菌,大分子量的蛋白含量增多,小分子量的蛋白含量减少,但过氧化物酶的条带数没有变化;50μg/mL万寿菊精油杀菌素处理的西瓜苗叶片中3d后MDA含量减少差异显著(P<0.05),4d后过氧化物酶活性逐渐升高差异达显著水平(P<0.05),5d后差异极显著(P<0.01)。含药培养基上生长的西瓜枯萎病菌的果胶酶活性降低,呼吸强度明显提高,细胞膜通透性增大,几丁质酶活性稍高于对照。此杀菌素可用以预防和控制西瓜枯萎病,为西瓜枯萎病的综合防治提供一种新的方法和途径。     

Effects and mechanisms of shikonin on the radiation sensitization of human ovarian cancer cell line SKOV-3

Objective: To investigate the radiosensitizing?effect and the underlying mechanism of shikonin on the human ovarian cancer cell line SKOV-3. Methods: The viability of SKOV-3 cells after treating with different concentrations (0,5,10,20,40,8 0 and 120 μg/mL) of shikonin was measured by MTT assay; The survival rate of SKOV-3 cells after treating with different doses(0,2,4,6 and 8 Gy) of x-ray radiotherapy was testet by clone forming assay.The SKOV-3 cells were divided into 4 groups: the Control group (Control group), the Shk group (8μg/mL Shk treatment), the 8 Gy group (8 Gy X-ray radiotherapy treatment) and the Shk + 8 Gy group (8 Gy μg/mL Shk treatment for 48 hours, followed by 8 Gy X-ray radiotherapy treatment). The cell cycle was examined by PI staining using flow cytometry and the phosphorylation of PI3K and AKT levels were analyzed by western blotting in each group. Results: In the ranged of 0-80μg/mL, shikonin decreased SKOV-3 cell viability in a concentration-dependent manner（P<0.05）. The value of IC50 was 38.54±0.57 μg/mL. Compared with radiotherapy alone, the survival curve was markedly shit to the left after shikonin combined radiotherapy（P<0.05）. The value of radiotherapy sensitization ratio (SER) was 1.45±0.05. Moreover, Compared with 8 Gy alone group, the percentage of G2/M phase and the phosphorylation levels of PI3K and AKT were decreased in Shk+8 Gy group（P<0.05）. Conclusion: Shikonin could increase the radiosensitivity of SKOV-3, and the mechanism may be related to attenuat radiation-induced the G2/M phase arrest and inhibition of PI3K/AKT signaling pathway.     

10种杀菌剂对芝麻立枯病菌的室内毒力测定

为筛选出防治芝麻立枯病的高效杀菌剂,采用菌丝生长速率法测定10种杀菌剂对芝麻立枯病菌的抑制作用。室内毒力测定结果表明:氟硅唑对芝麻立枯病菌的抑制效果最好,EC50值最小,仅为0.5751 mg/L,其次为吡唑醚菌酯,EC50值为0.9199 mg/L。啶酰菌胺和多菌灵对立枯病菌也有较强的抑菌效果,EC50值分别为1.3770 mg/L和1.5138 mg/L。氟硅唑和吡唑醚菌酯抑菌效果显著,可作为芝麻立枯病的首选药剂。     

辣椒素抑菌作用的初步研究

以小米椒为原料,选取95％的乙醇作为提取剂,采用超声波法提取辣椒素,并用滤纸片法和二倍稀释法研究了辣椒素对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、青霉和黑曲霉的抑菌作用。结果表明：提取液中辣椒素的含量为1．116mg／g。辣椒素提取液对大肠杆菌的抑制效果比枯草芽饱杆菌要好,且辣椒素对大肠杆菌最低抑菌浓度为57．54μg／mL,对枯草芽孢杆菌的最低抑菌浓度为115．08μg／mL。辣椒素提取液对青霉、黑曲霉没有抑菌作用。含有95％乙醇辣椒素提取液的抑菌效果好于辣椒素浓缩液和95％乙醇。     

樟芝发酵液和液体发酵菌丝体提取物对SPCA-1细胞的体外抑制作用

樟芝(Taiwanofungus camphoratus)发酵液和经95％乙醇浸提后的菌丝体醇提物分别用石油醚和氯仿进行分级提取,得到石油醚和氯仿提取物.对不同提取物进行体外抑制SPCA-1肺癌细胞增殖实验,发现各提取物均可抑制SPCA-1细胞的增殖,其中发酵液石油醚提取物抑制作用最好,IC5.为62.5 μg/mL,发酵液和菌丝体氯仿提取物的抑制作用较好,IC50分别为120.9和109.5 μg/mL,菌丝体石油醚提取物的抑制作用较差,在25～150 μg/mL作用浓度下,抑制率低于20％.各提取物对SPCA-1细胞凋亡和生长周期作用的测定结果表明,各提取物在肺癌细胞SPCA-1中通过诱导细胞凋亡及S期周期阻滞来表现其抑制作用.     

蜡蚧轮枝菌对西花蓟马成虫和若虫的毒力测定

利用蜡蚧轮枝菌MZ041024菌株的不同浓度孢子液对西花蓟马成虫和若虫进行室内毒力测定。结果表明:在3.6×10~8个/mL浓度下,蜡蚧轮枝菌MZ041024菌株对成虫的最高死亡率为(76.87±4.38)%,致死中浓度(4.140±0.10)×10~6个/mL,致死中时间为(5.54±0.22)d;若虫的最高死亡率为(80.95±1.71)%,致死中浓度(1.598±0.064)×10~5个/mL,致死中时间为(5.13±0.25)d,随浓度增加其杀虫速度加快,随处理时间延长其毒力增强。     

不同杀菌剂对莲藕腐败病菌的室内毒力测定及田间防治效果

人工室内接种筛选出F1和F2两个莲藕腐败病菌强致病性菌株。应用菌丝体生长速率法,测定了生产中防治莲藕腐败病常用化学农药对F1和F2的室内毒力。测定结果表明,供试药剂对该病原菌菌丝生长的抑制作用存在较大的差异,其中以硫磺多菌灵的效果最好,对2个供试菌株的EC50分别为11.22μg/mL和12.30μg/mL;其次为甲基硫菌灵,对2个菌株的EC50分别为46.06μg/mL和11.32μg/mL;腐霉利的效果最差,对2个菌株的毒力分别为303.09μg/mL和426.12μg/mL。应用室内抑菌效果较好的硫磺多菌灵和甲基硫菌灵对腐败病严重发生的藕田进行病害防治,结果显示,2种药剂对病情的发展具有一定的控制作用。     

4种食用菌硒积累能力比较与硒形态研究

对杏鲍菇(Pleurotus eryngi)i、灵芝(Ganoderma lucidum)、云芝(Coriolus versicolo)r和鸡腿菇(Coprinus coma-tus)4种食用菌进行一级液体富硒培养,采用原子荧光光谱仪(AFS)对富硒菌丝体进行总硒含量的测定,液相色谱-原子荧光光谱仪联用(LC-UV-AFS)对富硒菌丝体中硒形态进行分析,结果显示,在一级液体培养中添加50mg.L-1Na2SeO3条件下,杏鲍菇无论生物量、总硒含量还是硒利用率都是最高的,分别达到了9.8g.L-1、5 086μg.L-1和22.3%,灵芝次之,分别是6.7g.L-1、4 426μg.L-1、19.4%。硒形态分析结果揭示,在杏鲍菇菌丝体蛋白酶提取液中硒代蛋氨酸、硒代胱氨酸和硒甲基硒代半胱氨酸3种硒代氨基酸总量比较低,不足提取液总硒30%,而其他三类食用菌3种硒代氨基酸总量达到80%以上,且在4种食用菌菌丝体提取液中,硒代蛋氨酸是硒与氨基酸的主要结合形式。研究及相关文献表明灵芝是食用菌中最具潜力的富硒材料。     

硒对松口蘑深层发酵的作用研究

以松口蘑为材料,在发酵培养基中添加不同浓度的硒,测定分析了松口蘑菌丝体的生物量、多糖含量、硒的积累量。结果表明:0～40μg/mL的硒浓度对松口蘑菌丝体的生物量和多糖含量的增加都有促进作用,且随着浓度的增高促进作用加强,40μg/mL以上的硒浓度有抑制作用,随着浓度的增高抑制作用增强;硒浓度在0～50μg/mL时,硒在菌丝体中的积累量随着硒浓度的增加而增加,当硒浓度超过50μg/mL时,硒在菌丝体中的积累量开始下降。     

柑桔黑斑病菌杀菌剂的室内筛选

利用生长速率法对34种果园常用杀菌剂进行室内毒力测定。结果表明,各药剂在不同试验浓度下对柑桔黑斑病菌菌丝的生长均有不同程度的抑制作用,并且其抑制率与浓度呈正相关。其中苯醚甲环唑抑制效果最好,EC50为0.003 6mg/L;戊唑醇次之,EC50为0.126 2mg/L;其次为氟硅唑、丙环唑、甲基硫菌灵、腈菌唑、唑醚.代森联、烯唑醇、异菌脲、咪鲜胺,其EC50均在1mg/L以下。此研究为田间大面积防治柑桔黑斑病提供了参考。