核桃细菌性黑斑病的研究进展

[目的 ]由核桃细菌性黑斑病菌引起的黑斑病严重威胁着我国核桃产业的健康发展,掌握该病的危害症状、病原以及防治措施,明确未来研究的热点、难点和重点十分重要。[方法 ]基于文献计量法,通过对国内外文献数据库中有关核桃细菌性黑斑病的文献开展分析。[结果 ]前人的研究主要集中在病害的危害症状、病害循环及防治方法等方面。关于该病菌的研究尚缺乏诸如分泌蛋白、致病机制、互作机制等分子生物学方面的研究以及病菌早期快速检测、全程绿色防控等常规性的研究报道。[结论 ]核桃细菌性黑斑病的病原主要为树生黄单胞菌胡桃变种Xanthomonas arboricola pv. Juglandis,该病的危害程度受环境湿度影响较大,防治的关键时期是核桃的展叶期和花期等,主要选择铜制剂+代森类、抗生素类+代森类等类型的混合药剂。未来应关注核桃细菌性黑斑病菌的致病因子和致病机制研究,为病菌早期快速检测和全程绿色防控提供理论基础。     

核桃腐烂病的发生和综合防控研究进展

核桃腐烂病是新疆核桃产区常见的真菌病害,随着核桃种植面积的扩大,病害的发生有逐年加重的趋势,给核桃产业造成严重损失。为了进一步为核桃腐烂病的研究和生产防治提供参考依据,本文对近年来核桃腐烂病的症状、危害、病原菌、侵染循环、发病因素和综合防治措施等方面的研究进展进行了综述,认为将来核桃腐烂病菌的生物防治将成为一个十分重要的研究方向。     

核桃楸叶乙醇提取物的抑菌活性及活性成分分析

采用常规提取法浸提核桃楸叶的抑菌活性成分。研究结果表明,核桃楸叶乙醇提取物及其乙酸乙酯萃取相对杨树叶枯病菌和樟子松枯梢病菌有抑菌活性,核桃楸叶乙醇提取物及其乙酸乙酯萃取相对杨树叶枯病菌的最低抑菌质量浓度(MIC)为3.12 g/L,对樟子松枯梢病菌的MIC为6.25 g/L。采用GC-MS分析了核桃楸叶乙醇提取物中乙酸乙酯萃取相经柱层析后集分I和集分II的化学组成和相对含量。分析结果表明,乙酸乙酯萃取相中主要活性成分为相对含量较高的5-羟基-1,4-萘醌(胡桃醌)、D-阿洛糖、5,8-二羟基-1,4-萘醌、1,5-萘二酚、2,3-二氢苯并呋喃、7-甲氧基-1-四氢萘酮、1-萘酚、8-羟基-2-甲氧基-1,4-萘醌和4-甲基-2,6-二羟基喹啉等。     

腐烂病菌、溃疡病菌侵染早期新疆杨叶片组织光合响应特征的比较

【目的】研究杨树腐烂病菌和溃疡病菌胁迫下新疆杨的光合响应特征,探讨新疆杨在2种病菌胁迫下的响应差异,为阐明杨树腐烂病和溃疡病发生的病理生理机制提供理论依据,也为杨树溃疡类病害的控制提供参考。【方法】以1年生新疆杨为植物材料,采用枝干表皮微环割方法接种杨树腐烂病菌及溃疡病菌,研究接种后3～9天的新疆杨叶片气体交换特征及叶绿素荧光特征,比较2种病害真菌胁迫下的光合响应特征、水分利用效率(WUE)的差异。采用回归分析方法分析净光合速率、气孔导度、蒸腾速率、胞间CO_2浓度等指标之间的关系。【结果】接种后3～9天,腐烂病菌、溃疡病菌均显著抑制新疆杨叶部组织净光合速率、气孔导度、蒸腾速率、光系统Ⅱ的最大光化学效率(F_v/F_m)、实际光化学效率、电子传递效率以及光化学淬灭系数等生理参数。腐烂病菌胁迫显著降低新疆杨水分利用效率,但是溃疡病菌胁迫对水分利用效率没有影响。腐烂病菌改变新疆杨的气孔导度-胞间CO_2浓度的相关关系,在气孔导度极低的情况下诱导胞间CO_2浓度显著增加,腐烂病菌主要以非气孔限制方式抑制新疆杨的光合作用。溃疡病菌不改变新疆杨的气孔导度-胞间CO_2浓度的相关关系,胞间CO_2浓度与气孔导度正相关,溃疡病菌以气孔限制方式抑制光合作用。【结论】F_v/F_m并不能反映植物遭受的所有生物胁迫,F_v/F_m为0.75～0.85也不能作为植物未受到环境胁迫的确切标准。杨树腐烂病、溃疡病发生早期,新疆杨气体交换及叶绿素荧光特征具有显著差别。相比较于溃疡病菌,腐烂病菌胁迫对新疆杨光合作用具有更大的抑制作用,腐烂病菌显著降低而溃疡病菌胁迫不改变新疆杨叶片WUE,这可能是腐烂病害比溃疡病害更易于在干旱地区发生以及该地区腐烂病危害更为严重的重要生理原因。     

杨树溃疡病、苹果轮纹病等病原菌的ITS-rDNA-RFLP解析

该文从ITS-rDNA—PCR—RFLP方面揭示了杨树溃疡病菌与苹果干腐病菌、轮纹病菌、流胶病菌之间的划分分子依据，干腐病菌和轮纹病菌形成特征性带谱，干腐病菌和轮纹病菌均具有120bp的特征性谱带，且轮纹病菌具有210bp的特征性谱带；流胶病菌具有210bp的特征性谱带而无100bp的特征性谱带，杨树溃疡病菌既无120bp，也无210bp的特征性带谱。     

松树脂溃疡病菌的风险分析及应对策略

松树脂溃疡病菌是严重为害松树的一种林木病原真菌,文章从该病菌的国内分布状况、潜在经济危害性、寄主植物经济重要性、传播扩散可能性和危险性管理难度等方面进行了定性和定量分析,结果表明:松树脂溃疡病菌在我国属于高度危险性的有害生物,需加强对该病菌的检疫封锁及监测,防止其入侵与危害。文章最后提出了防止其入侵及发生为害的应对策略。     

核桃楸叶乙醇提取物的抑茵活性及活性成分分析

采用常规提取法浸提核桃楸叶的抑菌活性成分。研究结果表明，核桃楸叶乙醇提取物及其乙酸乙酯萃取相对杨树叶枯病菌和樟子松枯梢病菌有抑菌活性，核桃楸叶乙醇提取物及其乙酸乙酯萃取相对杨树叶枯病菌的最低抑菌质量浓度（MIC）为3．12g／L，对樟子松枯梢病菌的MIC为6．25g／L。采用GC-MS分析了核桃楸叶乙醇提取物中乙酸乙酯萃取相经柱层析后集分I和集分Ⅱ的化学组成和相对含量。分析结果表明，乙酸乙酯萃取相中主要活性成分为相对含量较高的5-羟基-1，4-萘醌（胡桃醌）、D-阿洛糖、5，8-二羟基-1，4-萘醌、1，5-萘二酚、2，3-二氢苯并呋喃、7-甲氧基-1-四氢萘酮、1-萘酚、8-羟基-2-甲氧基-1，4-萘醌和4-甲基-2，6-二羟基喹啉等。     

湖北海棠枝干溃疡病病原鉴定及生理学特性研究

采用组织分离法对湖北海棠枝干溃疡病原菌进行分离,对病原菌进行形态学和分子生物学鉴定。结果表明:从海棠枝干溃疡病菌中共分离纯化得到15个菌株,鉴定出2种病原菌,分别为海棠轮纹病原菌Botryosphaeria dothidea;海棠腐烂病原菌Valsa ceratosperma,室内人工接种苹果果实均有致病性。两种病菌随着不同温度和pH值升高而逐渐生长加速,其中腐烂病菌对温度和酸碱度的适应性更强一些。     

核桃组织培养苗嫁接技术研究

核桃属于胡桃科核桃属，是山东省重要的干果油料树种之一，常规硬枝嫁接成活率较低。适宜的温度和湿度环境，防止病菌感染，提高嫁接的工作效率和降低劳动强度是提高组织培养苗嫁接成活率不可缺少的重要条件。本试验仅对核桃组织培养苗的嫁接成活率进行了探讨，现将试验结果作一简报。     

猕猴桃溃疡病菌抗铜基因CopB克隆及序列分析

【目的】猕猴桃溃疡病菌通过抗铜相关基因的表达和调控而表现出一定的抗铜性,研究抗铜基因对揭示病原菌的抗铜机理、病害的灾变机理以及有效防控具有重要意义。本研究旨在明确湖南地区猕猴桃溃疡病菌抗铜基因CopB的序列结构,为进一步研究该病菌的抗铜机理及制订相关防治策略提供参考依据。【方法】利用引物copB-F/copB-R对湖南猕猴桃溃疡病菌抗铜基因CopB进行PCR扩增并进行核苷酸序列分析及编码蛋白质预测。采用BLAST进行序列比对,ProtParam分析蛋白理化性质,ProtScale预测蛋白亲疏水性,DNAMAN进行氨基酸多序列比对,MEGA5进行系统进化树分析。【结果】获得猕猴桃溃疡病菌Psa-FHHY株系、Psa-JSHY株系、Psa-JSJK株系的CopB基因片段为891 bp,编码296个氨基酸,编码的氨基酸不稳定性系数为32.29,该基因编码蛋白质的相对分子质量为31.853 kD,理论等电点为4.66,总平均疏水指数（GRAVY）值为-0.342,为亲水性蛋白。BLAST分析结果表明,所扩增的猕猴桃溃疡病菌与其它猕猴桃溃疡病菌株CopB基因相似性在98.32%以上,与其它丁香假单胞菌属的CopB基因相似性在60.57%～95.06%。【结论】湖南猕猴桃溃疡病菌抗铜基因CopB保守性强,具有较高的系统进化一致性,未出现明显变异。     

“香玲”核桃炭疽病果与健果的青皮微生物多样性比较

采用高通量测序分析"香玲"核桃炭疽病病果与健果青皮的微生物多样性,以期为病害的科学防治提供新的思路。结果表明,"香玲"核桃感染炭疽病后,病果青皮真菌多样性及优势度显著提高。相对丰度分析发现,炭疽病果不仅刺盘孢属Colletotrichum(炭疽病菌)相对丰度提高,赤霉Gibberella(赤霉病菌)、葡萄座腔菌属Botryosphaeria(干腐病菌)、链格孢属Alternaria(叶斑病菌)和月盾霉属Peltaster(煤污病菌)等病原菌的相对丰度也明显提高。在选用化学药剂防治时,需兼顾多种病原菌。对细菌而言,病果青皮中鞘氨醇杆菌Sphingobacterium、根瘤菌Rhizobium、假单胞菌属Pseudomonas等的相对丰度明显提高。可见病原菌丰度的增加,可在一定程度上提高核桃青皮益生细菌的含量。     

核桃炭疽病生物防治菌株YB-4-15的筛选和鉴定

核桃炭疽病给云南核桃产业的发展造成了严重的影响。为给核桃炭疽病生物防治制剂的开发提供理论支撑,以核桃炭疽病菌为指示菌,采用土壤稀释平板法及对峙培养法,对生防菌株进行了分离与筛选,结果表明:菌株YB-4-15、YB-8-11-1、YB-7-9-1对核桃炭疽病菌均有80%以上的抑菌活性,其中,抑菌作用最稳定、抑菌效果最佳的菌株为YB-4-15。然后对YB-4-15菌株进行了形态学鉴定和ITS分析,鉴定结果表明:YB-4-15菌株为钩状木霉菌。最后,对该木霉菌的生物学特性及次生代谢产物的性质进行了研究,结果表明:该菌最适温度为28℃,其菌丝生长对光照条件不敏感,适合在p H为4~8的PDA培养基上生长,其无菌滤液的热稳定性较差,仅在45℃及以下温度条件下才有较好的抑菌效果。     

核桃炭疽病的研究

核桃炭疽病在城口县核桃主产区发生严重，具有潜伏期长、发病时间短、爆发性强的特点。其病原无性阶段为半知菌亚门的胶孢炭疽菌Colletotrichum gloeosporioides PenzL=Glieosporium rugonmculans(Berk) Thtim，该病是核桃果实成熟后期大量变黑的主要病原。炭疽病一般以老树发病严重，主要危害果实，也危害嫩芽、枝叶。核桃的各部均有此病害发生，中下部较上部为重，树冠内部比表层发病重；核桃炭疽病在幼果期不表现症状，胶孢炭疽菌到7月初才出现于林问，8月上旬开始产生分生孢子，8月底为发病和分生孢子流行高峰期，至9月初收果前使果实迅速变黑，使果实品质大大下降。对胶孢炭疽菌Colletotrichum gloeosporioides Penz L=C．1ieosporium rugomaculans(Berk) Thtim的室内毒力测定结果显示，70％甲基托布津、百菌清、多菌灵、退菌特、乙磷铝锰锌对病菌分生孢子的萌发具有强烈的抑制作用；退菌特、乙磷铝锰锌对病菌菌丝生长的抑制作用明显。     

核桃基腐病菌产生细胞壁降解酶的种类及其活性分析

通过致病力的测定筛选出两株强致病力核桃基腐病菌菌株HA-1和KY-S,通过对酶活性的分析,研究证实核桃基腐病菌均能分泌4种细胞壁降解酶(CWDEs):β-葡萄糖苷酶、多聚半乳糖醛酸酶(PG)、果胶甲基半乳糖醛酸酶(PMG)、纤维素酶(Cx)。在不同碳源培养条件下,核桃基腐病产生细胞壁降解酶的活性存在一定差异,以蔗糖为碳源时,菌株分泌的各种细胞壁降解酶活性较高。在4种培养基中,达到各酶活性高峰的时间仅为3d。在蔗糖培养基中,核桃基腐病菌产生的Cx最大酶活性为1495.5mU/mL,明显高于其他3种酶,且显著高于其他培养基产生的Cx。但在树皮为碳源的培养基中Cx的活性最低。在CMC为碳源的培养基中PG、PMG的活性最高,分别为826.5mU/mL和661.3mU/mL,此外,以果胶为碳源时产生的PMG的活性最高为1068.0mU/mL。     

用愈伤组织测定杨树对溃疡病的抗性

用溃疡病菌接种１１个杨树品种和无性系，病菌在愈伤组织上的扩展速度、愈伤组织内过氧化物酶和多酚氧化酶的活性变化幅度与各相应树种的田间抗病性有明显的相关性，可以反映出不同树种对溃疡病的抗性。     

松树脂溃疡病菌及其近缘种AFLP分析

利用AFLP分子标记技术对松树脂溃疡病菌及其近缘种进行DNA指纹分析,筛选出10对多态性较高的引物.上述引物在供试的9种17个菌株中共扩增出298条带,其中有多态性带283条,多态性位点百分率为94.97%.每对引物产生的多态性位点百分率在89.29%-100%之间,表明松树脂溃疡病菌及其近缘种间在DNA水平上存在广泛变异.根据AFLP标记结果计算松树脂溃疡病菌及其近缘种间的相似系数,对它们的亲缘关系进行定量描述.聚类分析结果表明,菌株间的聚类与生物学种分类的结果一致.分析引物E-AT/M-CAA绘制的镰刀菌AFLP指纹图谱遗传多样性,确定李瑟组镰刀菌各交配群的特异带、差异带,区分供试的7个交配群.     

用愈伤组织测定杨树对溃疡病的抗性

用溃疡病菌(Dothiorella gregaria)接种11个杨树品种和无性系,病菌在愈伤组织上的扩展速度、愈伤组织内过氧化物酶(PO)和多酚氧化酶(PPO)的活性变化幅度与各相应树种的田间抗病性有明显的相关性,可以反映出不同树种对溃疡病的抗性。     

杨树树皮中化学成分与溃疡病关系的研究(Ⅲ)——几种化学成分的季节变异及与溃疡病的关系

本文对毛白杨(Populus tomentosa)树皮中的总酚、缩合单宁类、其它酚类(水解单宁类、酚苷等)、可溶性总糖含量的季节变异及与溃疡病(Dothiorella gregaria)的关系进行了初步研究。结果表明,总酚、其它酚类对溃疡病菌起着明显的抑制作用,其季节变异与毛白杨树皮生物测定液抗溃疡病能力之间的相关性显著,缩合单宁类、水溶性总糖对溃疡病菌起着一定的促进作用,但其季节变异与毛白杨树皮生物测定液抗溃疡病能力之间的相关性不十分显著。     

拮抗细菌Bs-03菌株鉴定及抑菌活性测定

在土壤有益微生物的分离、筛选中获得一株拮抗细菌Bs-03,抑菌谱测定结果表明该菌对供试的多种植物病原真菌具有较强的抑菌活性,表现较为广谱的抑菌活性。通过对菌株的培养性状、形态特征、生理生化特性等试验项目,初步鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。采用平板对峙培养法测定Bs-03菌株抑菌活性,结果表明Bs-03对供试的14种植物病原真菌,除花生白绢病菌外,都具有抑菌活性。其中对核桃炭疽病菌、苹果轮纹病菌、黄瓜灰霉病菌、冬枣黑斑病菌效果最好,与其他处理在P0.05水平上具有显著性差异。该菌具有较好的开发应用前景。     

溃疡病侵染对6个柳树无性系丙二醛及相关酶活性的影响

以J792、J701、J335、J795、J1034、J760等6个优良乔木柳无性系1年生扦插苗为试验材料,研究了在溃疡病菌拟茎点霉侵染条件下,无性系内丙二醛及PPO、POD、PAL等相关酶活性的变化规律,对无性系抗病能力进行了系统研究.结果表明:随着溃疡病菌侵染的加剧,各项指标均呈规律性变化.通过感病指数测定,对6个无性系的抗病能力进行了综合评价.