应用PCR方法向基因内部引入序列的策略研究

应用PCR方法,利用3条引物与2个模板,分别采用一步PCR、两步PCR、三步PCR扩增策略,向cte基因内部引入一段内含子序列,以达到基因改造的目的.结果表明,利用一步PCR的策略,难以扩增得到目的基因,利用二步PCR的策略,虽然可以得到目的条带,但存在非特异扩增;通过三步PCR的策略,即第一步PCR扩增产物作为第二步...     

职高物理四课型单元教学法探讨

本文探讨了物理四课型单元教学法,即每一个章节的教学分四个步骤进行,第一步“预习辅导”,第二步“分组讨论”,第三步“解决问题”,第四步“效果检查”。四个教学步骤环环相扣,逐步深入。该教法注重学生能力的培养,取得了良好的教学效果。     

农村基层民主定事六步工作法

本文主要介绍了实行六步工作法的重要意义;六步工作法的指导思想和基本原则;六步工作法的适用范围;六步工作法的内容;六步工作法的成效。     

心语

※人的一生很像是在雾中行走:远远望去,只是迷蒙一片,辨不出方向和吉凶。可是,当你鼓起勇气,放下忧惧和怀疑,一步一步向前走去的时候,你就会发现,每走一步,你都能把下一步路看得清楚一点。"往前走,别站在远远的地方观望!"你就可以找到你的方向。     

7步洗手法

正[第1步]双手合并,掌心对掌心揉搓[第2步]手指交错,掌心对手背搓擦[第3步]手指交错,掌心对掌心搓擦[第4步]双手互握,互相揉搓指背[第5步]拇指在掌中转动,两手互换[第6步]指尖揉搓掌心,两手互换[第7步]握住手腕揉搓,两手互换     

改进天平调平器

在使用物理天平测量物体质量时,调节底座水平是第一步,也是非常重要的一步。这一步调得如何,关系到实验的准     

苹果潜隐性病毒一步三重检测体系的建立与优化

【目的】在两步单重检测体系基础上,建立能同时检测苹果茎痘病毒(ASPV)、苹果茎沟病毒(ASGV)和苹果褪绿叶斑病毒(ACLSV)的一步三重检测体系,以简化苹果潜隐性病毒检测方法。【方法】以携带ASPV、ASGV、ACLSV的苹果优系‘浓果-25’组培苗为试材,比较一步单重、一步两重和一步三重RT-PCR 3种检测体系的检测效果,对一步三重检测法中的退火温度、反转录时间、延伸时间、循环数和引物加量进行优化,并用带毒情况不同的苹果田间根茎叶、组培苗、脱毒苗对优化后的RT-PCR一步三重检测体系进行验证。【结果】一步单重RT-PCR体系一次只能检测1种病毒,一步两重RT-PCR体系一次能同时检测2种病毒,一步三重RT-PCR体系一次能同时检测3种病毒。优化后的一步三重RT-PCR检测体系为:50℃反转录20 min;94℃预变性20 min;94℃变性30 s,53～56℃退火30 s,72℃延伸30 s,30个循环,引物加量为各病毒上、下游引物(10μmol/L)各1.0μL,无需进行终延伸。优化后的一步三重检测体系验证结果与两步单重检测结果一致,初步证明该检测体系合理。【结论】建立了苹果潜隐性病毒一步三重检测体系,该体系能同时对苹果样品中ASPV、ASGV和ACLSV 3种病毒进行检测。     

家庭理财五步走

<正>家庭理财应分步计划、严格执行:第1步,理清自己家庭的资产、负债状况,分析家庭消费模式,评估家庭的整个财务状况。第2步,确定家庭的财务目标,这个目标要定得明确、可行,并为每个目标附上相应的成本。第3步,建立家庭财务计划和预算。第4步,执行理财计划,这既需要克制和节约,又不能做"守财奴",并在执行中保持一定的灵活     

一步一颤摇曳风情

正导读:步摇是一种在发髻上饰有花钿、簪、钗等配饰所形成的一种发冠。戴上这种冠饰的女子,走起路来,一步一颤,摇曳生姿。古代女性为了扮美,创造出高髻与高冠。高髻以魏晋时期的灵蛇髻、飞天髻、凌云髻为代表,其造型夸张,样式奇异;高冠则以汉魏、六朝的步摇,元代的姑姑冠为代表。步摇就是一种在发髻上饰有花钿、簪、钗、镊子等配饰所形成的一种夸张的发冠。步摇始于汉代,最初流行于贵族女人头上。何为步摇?"步摇者,贯以黄金珠玉,由钗垂下,步则摇之之意。"     

胸怀是冤枉撑大的

当你的胸怀被冤枉一点一点撑大的时候,你的事业也就一步一步迈向成功。     

星光灿烂的京郊大地

在休闲农业发展的灿烂星空中,有一个永恒的话题——创业。创业之路是一个企业逶迤成长的路,这条成长的路上,印满了创业者一脚深、一脚浅的蹒跚足迹,一步又一步,企业的成长在创业者的脚下延伸,一步一种选择,一步一个发展。我们选取一组休闲农业创业者的故事,他们的故事或许平淡,或许简单,但是他们在梦想的指引下,在磨难     

电力系统失步运行时电流及其频率变化规律的分析

电力系统失步运行时电气量变化规律的研究是开发新型安全保护技术、自动装置和切断电器以及正确判断与处理系统失步的基础,是当前研究者特别感兴趣的课题之一.文讨论了失步运行时电压及其频率的变化规律,在此基础上,本文又讨论了失步运行时电流及其频率的变化规律.首先定性地分析,然后定量地证明,再进一步考虑电力系统实际参数的影响.为分析研究电力系统失步运行时的行为和电气量的特征的利用提供理论基础.     

动物科学英语学术论文引言语料库的语步研究

运用语步分析法,依照John Swale提出的研究背景-研究空白或局限-研究目的和意义(CARS)引言三语步模式,对40篇动物科学领域的英语学术论文引言中的语步进行了基于语料库的研究。研究表明:宏观结构上,引言部分并不一定严格按照Swale的语步顺序,可以根据主题复杂度实行3个语步的循环,从而展现更清晰的逻辑框架;微观结构上,动物科学英语学术论文引言中的语态和时态已由被动态和一般过去时为主转变到主动态和一般现在时为主。此外,研究还生成了高频动词及其对应句型表,以期为动物科学学术论文二语学习者提供更细致的指导。旨在为扩充教师和二语学习者对目前有关学术论文引言语步知识,认识学术论文体裁特点的重要性提供借鉴,并为语料库在学术论文体裁研究中的应用提供参考。     

晚节不保的“小官”

“在这问只有七步的房间里，我每天不知要走多少个七步，一步一步地量着过去所犯下的罪恶……”江苏省南京市汤泉街道瓦殿村原党总支书记朱邦财在悔过书上这样写道。一个曾为新农村建设中的“领头雁”是如何蜕变成“阶下囚”的呢？     

登步黄金瓜立架和爬地栽培比较试验

以舟山地方薄皮甜瓜品种登步黄金瓜为研究对象,进行立架和爬地栽培比较试验。结果表明,登步黄金瓜立架栽培产量提高,单果重显著增大,商品瓜率提高,而果实可溶性固形物含量比爬地栽培略有下降。在舟山种植登步黄金瓜比较适合立架栽培。     

基于Windows字库的点阵数据提取方法*

 基于编程软件Delphi,介绍并实现了一种从Windows字库中提取字体信息,并将其转换为点阵数据的方法。通过使用Windows的API函数此方法共分2步,第1步从字库中提供字体数据并输出到位图,第2步从位图中提取点阵数据。     

丹酚酸B重要中间体的合成与表征

［目的］探讨二氢苯并呋喃衍生物的人工合成及其影响因素。［方法］以异香兰醛为原料,经过6步反应最终合成二氢苯并呋喃衍生物。［结果］在第1步反应中产物2溴3羟基4甲氧基苯甲醛的收率为93.2%。在第2步反应中产物2溴3甲酰基6甲氧基苯乙酯的收率为96.3%。在第3步反应中产物缩醛的收率为97.7%。在第4步反应中,以溴代苯和丙二酸二乙酯为原料,乙醇钠作强碱,CuBr作催化剂,六甲基磷酰三胺（HMPA）作溶剂,在氮气的保护下加热回流12h,产物取代苯丙二酸二乙酯的收率为39.1%。在第5步反应中产物1羟基2甲氧基6甲酰基苯乙酸的收率为95.6%。在第6步反应中产物二氢苯并呋喃衍生物为淡黄色固体,收率为65.2%,熔点为159-162℃。［结论］该研究为丹酚酸B及其类似物的合成奠定了理论基础。     

打民事官司要讲究起诉技巧

起诉是民事纠纷进入诉讼程序的第一步。这一步，影响着诉讼的进行，与当事人的合法权益息息相关．必须走好。而如何走好这一步。关键是要在起诉的时间、案由以及被告和法院的选择上讲技巧．做文章。     

菜豆荚斑驳病毒免疫捕获一步RT-PCR检测

【研究目的】建立快速、准确、简便的检测大豆种子上菜豆荚斑驳病毒的免疫捕获一步RT-PCR方法(一步IC-RT-PCR)。【方法】采用抗原捕获和一步RT-PCR相结合的方法,并通过反应条件优化,确定一步IC-RT-PCR的反应程序,同时对该方法的特异性及实际检测效果进行验证。【结果】成功建立了一步IC-RT-PCR检测菜豆荚斑驳病毒方法,能够从感染菜豆荚斑驳病毒的大豆种子上扩增出预期大小的特异性片段,而对其他病毒及健康大豆无特异性反应;应用该方法对不同产地大豆种子样品进行检测,结果从来自美国的大豆样品中检出菜豆荚斑驳病毒,检出率为50%。【结论】一步IC-RT-PCR方法可以快速、准确地检测大豆种子上的菜豆荚斑驳病毒,适用于口岸检验检疫。     

生命的执着

<正>近日,根据公司员工培训要求,要求员工看一部电视剧,剧名没什么特别,叫《士兵突击》。通过观看,发现这还真是值得一看的电视剧。第一个感受:这是一个军人,一个最普通的军人的故事,但也是民族的精英和希望的故事。故事没有多少悬念,就是一个普普通通的农村兵,从一个步兵一步步成长为一名特种部队优秀队员的故事。但是这个故事更应该是一个懵懵懂懂的男孩,在男人的世界里,一步步成长为有责任有血性的男人的