水牛附睾尾精子的体外受精

采用肝素诱导获能 ,比较了 TAL P液和 BO液处理水牛附睾尾精子进行体外受精和细管冷冻精液体外受精的效果。结果表明 ,用 BO液和 TAL P液分别处理水牛附睾尾精子 ,受精后的卵裂率分别为 4 6 .6 7%和 5 3.73% ,发育率分别为 2 1.6 7%和 2 6 .87% ,其受精效果差异不显著。综合 2种方法 ,水牛附睾尾精子的受精率为 5 7.14 % ,受精后的卵裂率为 5 0 .39% ;发育率相对于培养卵为 2 4 .4 1% ,相对于卵裂卵为 4 8.4 4 % ;与细管冷冻精液 (5 6 .0 0 % ,5 4 .31% ,2 6 .72 % ,4 9.2 1% )相比 ,差异不显著。形态学观察还表明 ,用保温干储的方法可获得活率好、存活时间长的附睾尾精子。试验结果说明水牛附睾尾精子用于体外受精可以得到与细管冷冻精液相当的效果。     

猪卵子体外成熟方法研究

本文根据猪卵子带卵丘细胞不同,将卵子分为 A—D4级。实验表明,使用不同成熟培养时间和多次受精法,可以使处于不同发情期的卵子获得较高的体外受精率。B、C、D 级卵子(完整、部分完整或无卵丘)培养32—36小时后受精,体外受精率(2细胞率)25.60％,17.61％和15.78％。A 级卵(放射状卵丘)培养4—15小时后受精,体外受精率62.50～66.67％。在m—KRB 和 m—TCM 199培养液中添加卵泡液和 FSH 或 PMSG 可以促进卵子体外成熟,卵丘扩散成放射状。特别是用即将排卵的猪的大卵泡液和发情黄牛卵泡液,其效果更优。使用这两种培养液的平均受精率分别是19.78％和29.58％,最高30.23％和43.48％。将猪卵子移入小鼠和大鼠子宫角以及兔输卵管中进行卵子成熟培养获得成功,体外受精率分别是10.42％、28.45％和36.36％。     

金黄地鼠体外受精的初步研究

实验用ＴＹＨ、Ｔ６两种培养液做为精子获能培养液和受精培养液进行了金黄地鼠的体外受精。用经获能培养的精子分别与具卵丘和去卵丘的卵子进行受精培养。结果在ＴＹＨ中分别得到了２７．５％和３３．３％的受精率。在Ｔ６中得到了４７．２％和２６．３％的受精率；用未经获能培养的精子分别与具卵丘和不具卵丘卵子进行受精培养，结果在ＴＹＨ中得到了４１．８％和７．１％的受精，在Ｔ６中得到了４８．５％和５７．７％的受精率。实验结果说明：（１）适用于小鼠体外受精的培养液Ｔ６和ＴＹＨ并不适合于金黄地鼠，其主要原因是不能使精子有效获能；（２）卵丘细胞的存在有使受精率提高的趋势；（３）来自不同公鼠的精子的受精能力差异很大，进行体外受精时必须严格挑选公鼠     

牛卵母细胞体外成熟和体外受精技术的研究进展

论述牛卵母细胞体外成熟和体外受精的最新研究进展，包括卵丘卵母细胞复合体、卵母细胞的体内、体外成熟，以及体内、体外的异常成熟和卵母细胞的体外成熟方法，无蛋白质、无血清系统的限定性培养液的研究进展，卵母细胞体外成熟状态与标志的某些理论上的突破；体外受精中精子供体的选择、精子活力和正常形态的选择、冷冻解冻精液的体外获能、精子的体外受精力，以及体外的异常受精；还论述了牛卵母细胞体外成熟和体外受精技术在家畜育种和胚胎克隆等方面的应用前景     

猪卵泡卵母细胞的体外成熟与体外受精

本试验对猪卵泡卵母细胞不同体外成熟培养时间、不同精子获能时间、不同精卵共孵育时间对体外受精的影响进行了研究。结果表明,体外成熟培养44 h左右,精子获能时间在1～2 h之间,精卵共孵育时间在6～8 h之间,受精后卵裂率最高。     

CR1aa-卵丘细胞共培养牛体外受精卵的卵裂率及囊胚率

牛卵母细胞用5％CS的TCM－199培养液体外成熟培养（IVM）22h；以BO液＋咖啡因作精子获能处理1.5h；BO液＋BSA的培养液体外受精（IVF）5h；受精卵（含卵丘细胞）用5％CS的CR1aa培养液在5％CO2、955空气、38.5℃、饱和湿度的培养环境中体外培养（IVC）7－8d，结果受精卵裂率为72.4%（56.3%－81.0%），囊胚率23.7%(12.5%-40.9%）。     

牛卵母细胞体外成熟和体外受精技术的研究进展

论述了牛卵母细胞体外成熟和体外受精的最新研究进展，包括卵丘母细胞复合体、卵母细胞的体内、体外成熟、以及体内、体外的异常成熟和卵母细胞的体外成熟方法，无蛋白质、无血清系统的限定性培养液的研究进展，卵母细胞全外成熟与标志的某些理论上的突破性；体外受精中精子供体的选择、精子活力和正常形态的选择冷冻解冻精液的体外获能、精了的体外受精力，以及体外的异常受精，还论述了牛卵母细胞体外成熟和体外受精技术在家畜育种     

家兔卵子体外受精研究

从供体母兔输卵管冲取成熟的卵母细胞,与体外获能的附睾精子或射出精子体外受精。三种获能方法分别是 His-DM 法、肝素法和附睾精子 DM 预培养法,获能精子与卵母细胞体外受精后的2-细胞胚胎发育率分别是36.37%(24/66)、12.57%(13/102)和35.33%(53/150)。体外受精后体外发育到2-至4-细胞期胚胎经移植给7只同期发情受体母兔,结果有2头怀孕并产仔9只,胚移产仔率为28.57%(2/7),移入胚胎成仔率为11.39%(9/79)。     

动物繁殖生物技术中体外受精的操作及其影响因素

20世纪60年代初，人们以家兔、小鼠等为实验材料，进行大量基础研究，在精子由最初在同种或异种雌性生殖道孵育获能，发展到用溶液、卵泡液，子宫内膜提取液或血清在体外培育获能，最后用化学成分明确的溶液培养获能。同时通过射出精子和附睾精获能效果的比较研究，人们发现射出精液中含获能因子，并认识到获能的实质是去除精子表面的去能因子。这些理论和方法上的成功推动了体外受精技术发展。     

半胱氨酸对猪卵母细胞体外成熟、体外受精及GSH水平的影响

体外受精技术也称胚胎生产技术（invitro production,IVP）,包括卵母细胞的体外成熟、精子的获能、卵子的体外受精和受精卵的体外培养等几个连续的过程。半胱氨酸是GSH的前体物质,在牛体外胚胎生产过程中疏基复合物能增加细胞内GSH的合成,在受精和胚胎的开始阶段保持高浓度GSH可以增加发育率。试验的目的是评价半胱氨酸对猪卵母细胞的成熟率、受精率及成熟培养时期卵母细胞内GSH水平的影响,现报道如下。     

牛卵用精子注入法受精

将体外获能处理的牛精子显微注入体外成熟的牛卵质中,以检验这样受精的卵子能否经历正常的原核形成和卵裂发育。从未经激素处理的卵巢上吸取直径为2—5mm 卵泡中的卵子,在改良的 TCM—199液中培养24～25小时,199液中含有50μg/ml 的丙酮酸钠、2.6mg/ml 碳酸氢钠、5.5mg/ml 葡萄糖和50μg/ml 的硫酸庆大霉素。培养液使用时添加20％(v/V)经热处理灭活的20日龄小牛血清,100μg/ml 的 LH 和1μg/ml 的17—β雌二醇。培养结束后的卵子用透明质     

绵羊体外受精技术条件优化的研究

探讨了卵泡液、受精时间和季节对绵羊卵母细胞体外培养效果的影响。从屠宰场采集羊卵巢,抽取卵巢表面2mm-6mm的卵泡卵母细胞,进行体外成熟培养;卵母细胞成熟后,与处理后的精子共同培养进行受精。结果表明,在卵母细胞成熟培养液中添加绵羊卵泡液（SFF）组的卵裂率和囊胚发育率均优于添加同等浓度的牛卵泡液（BFF）组;受精22、18、12h组的卵裂率分别为64.85%、54.39%、48.72%,受精22h和18h组间差异显著（P〈0.05）,受精22h组和12h组间差异极显著（P〈0.01）。秋季绵羊体外受精的卵裂率和囊胚率均高于夏季,差异显著（P〈0.05）,但秋季与春季相比差异不显著（P〉0.05）。因此,进行绵羊卵母细胞体外成熟培养时,培养液中添加SFF;受精时,精卵共培养时间为22h的效果较好。在绵羊的繁殖季节秋季进行体外受精较春季和夏季的结果好。     

兔体外受精的研究

为完善家兔体外生产胚胎技术，采用FSH＋HCG法处理48只母兔，获得卵母细胞.采用获能的精子与卵母细胞进行体外受精，使用TCM199为基础液进行受精卵的体外培养.结果显示：平均每只供体兔可获得30.69枚可用卵母细胞.屠宰法获得的精子获能以后与卵母细胞进行体外受精，卵裂率达65.51%，囊胚发育率18.04%.自然射出法获得的精子获能以后，与卵母细胞进行体外受精，卵裂率达66.33%，囊胚发育率17.83%.屠宰法与自然射出法获得的精子获能以后卵裂率和囊胚发育率差异不显著.     

猪精子体外获能方法研究——咖啡因使用方法

猪卵子体外受精率低的原因之一是猪精子体外获能比较困难。本试验利用猪精子对去透明带仓鼠(Hamster)卵子的穿透实验,探讨了用苯甲酸钠咖啡因促进猪精子体外获能的方法。     

发情羊血清和血清白蛋白对幼龄杜寒羊体外受精效果的影响

正哺乳动物体外受精技术(in vitro fertilization,简称为IVF)是指哺乳动物的精子和卵子在体外人工控制的环境中完成受精过程的技术。它由精子采集、体外获能和卵母细胞采集、体外成熟、受精、受精卵培养等技术组成。目前已有10多种哺乳动物的"试管动物"相继出生。但在羊的体外受精技术研究中,一直存在着精子获能效果差和卵母细胞卵裂率低等问题。迄今为止,未见有关在幼龄绵羊的卵母细胞体外     

牛精子头部显微注射受精试验

牛体外受精研究发展迅速。利用体外受精技术,可使体外培养成熟的牛卵泡卵子受精,并培养发育成囊胚,将新鲜的或经过冷冻、解冻后移植给受体牛,最终获得犊牛。利用附睾尾部精子进行体外受精时,受精率在种公牛之间没有差异,而利用射出精子时个体间则差异很大。显微受精可以得到稳定而高的受精率,并缩小精子方面所引起的受精率差异。目前,显微受精有以下三种方法:透明带开孔法、卵黄周隙精子注入法、卵细胞质精子注入法。本文所报道的显微受精试验是用卵细胞质精子注入法。卵细胞质精子注入法是利用显微操作仪在显微镜下将一个精子或精     

获能液及精子密度对牛性控精子体外受精成功率的影响

本实验探讨了不同的精子获能添加物、精子密度、精子获能液对牛性别分离精子体外受精（IVF）的影响。结果表明：受精液中同时添加10μg/mL的肝素与5mmol／L的咖啡因,能促进牛性控精子体外获能与受精。精子密度在1．0×10^6个/mL时其囊胚发育率最高。用BO液和mTyrode’s液对牛性控精子进行获能和受精处理．其受精效果差异不显著（P〉0．05）,但BO液作用时间短对早期胚胎的发育影响较小,比较适合牛性控精子IVF。     

猪卵母细胞的体外成熟与体外受精的研究现状

<正> 自从张明宽(1958)首次报道兔卵子体外受精获得成功,并产下仔兔以来,30多年中,有关哺乳动物的体外受精研究已取得进展。但猪的体外受精研究较晚,直到1986年,台湾郑登贵才首次报道“试管猪”。现在我国许多教学和科研单位也在从事此项课题的研究。本文拟从猪卵母细胞的体外成熟培养、精子的体外获能和体外受精等方面,简述其研究现状。一、猪卵母细胞的体外成熟培养 1.卵子的收集母猪在宰后半小时内摘取卵巢,放入加有抗菌素的生理盐水(35～37℃),2小时内带回实验室。用2.5ml注射器从卵巢中吸取直径为2～8mm卵泡     

细胞因子对绵羊体外受精胚胎发育的影响

绵羊卵巢采自乌鲁木齐市屠宰场，卵母细胞体外成熟24－25h后，由体外获能的附睾精子授精，50h后，将卵裂至2－8细胞的绵羊胚胎移入添加了不同浓度细胞因子的培养液中继续培养，结果表明，加入5、10、15μg/ml胰岛素（Insulin)分别得到17.46%、23.81%、22.95%的囊胚率，与对照组9.52%相比差异显著（P＜0.05)。高浓度（500μg/ml)的粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（Granulocyte-macrophage colony stimulating factor,GM-CSF)可获得21.82%的囊胚率，与对照组7.27%相比差异显著（P＜0.05)。胚胎培养液中分别加入10、100、500ng/ml的白细胞介素－3（Interleukin-3,IL-3)、白细胞介素－8（IL－8）和神经生长因子（Nuclear growth factor,NGF)与对照组相比，囊胚率差异不显著。本研究表明，胰岛素、GM－CSF对绵羊体外受精胚胎早期发育有促进作用，IL－3、IL－8、NGF对绵羊胚胎的早期发育无明显作用。     

动物卵子体外受精技术研究简报

一、猪卵子体外受精技术研究进展显著在最近2次实验中,从屠宰后母猪卵巢中取出卵子并且按照卵子不同发育程度,分别在m—M199溶液中(FCS10％)进行体外成熟培养12—40小时,然后用从“老鼠猪”附睾中取出的精子进行体外受精6—10小时,受精后卵子在BMOC—2溶液中(FCS10％)再培养24—48小时。其中3个