主要农作物种子中转基因成分筛查策略

在农作物种子监管中,大量的样品需要进行转基因成分检测,建立快速、准确、低成本的转基因成分筛查方法十分必要。对玉米、大豆、水稻、棉花、小麦等主要农作物的转基因研发及商业化情况进行分析,分别建立了各主要农作物转基因成分筛查策略和检测线路图。建立的方法可以对农作物种子中的转基因成分实现快速、准确和高效的筛查检测。     

快速检测试纸条法检测转基因玉米种子的原理及步骤分析

为了确保玉米种子用种安全,严厉打击非法生产经营转基因种子。通过快速检测试纸条法对杂交玉米种子进行转基因成分检测,以期为实验室研究提供依据。     

转基因大豆种子、豆粕定性PCR检测方法的研究与应用

利用定性PCR检测方法,以大豆凝集素基因(Lectin)为内标基因,检测了转基因大豆种子、豆粕中的四个外源基因:35S-CTP基因、Cp4-epsps基因、nos终止子基因、CaMV35S启动子基因,并通过酶切(XmnI)验证试验验证了定性PCR检测结果的准确性,建立了定性PCR检测转基因大豆种子、豆粕的方法,利用市场上抽检到的大豆种子、豆粕样品,进行了实际检测工作.     

玉米种子生产基地品种转基因成分快速检测的策略

近年来,种子监督管理过程中发现部分地区存在非法繁育转基因作物的现象.为了打击转基因玉米非法繁育的行为,更好地保障农业转基因安全,对玉米种子生产基地的品种进行转基因成分的现场快速检测十分重要.本研究检索已知商业化转基因玉米的外源目的基因信息,构建了转基因玉米常用外源目的基因数据库,建立了玉米品种转基因成分快速检测的策略.研究发现,利用Cry 1 Ac/Ab、CP 4 EPSPS、Pat/Bar3个快速检测试纸组合可完成20个转基因玉米转化事件的现场快速检测.     

抗除草剂基因在黄瓜杂种纯度快速鉴定上的应用研究

黄瓜抗除草剂转基因T0植株经除草剂抗性筛选,连续2代自交获得T1和T2种子;分别对T1植株进行bar基因PCR检测和T2植株Southern杂交检测,证明bar基因已整合到黄瓜染色体上;以非转基因黄瓜为对照,摸索出田间抗性鉴定和室内种子抗性鉴定的除草剂临界浓度;从田间和室内筛选除草剂抗性纯合性转基因株系3个;以表现较好的2个抗性纯合转基因株系为父本,与非转基因母本杂交,获得F1种子,并在室内进行了杂交种纯度鉴定,鉴定效率达100％。建立了一套在种子发芽阶段或2片真叶期进行黄瓜杂交种纯度鉴定的新技术。     

常用的转基因种子检测方法

本文主要介绍了几种常用转基因种子的检测方法,主要包括定性PCR检测方法、实时荧光定量PCR检测方法、特异蛋白检测法和生物表现型检测法,并简要介绍了这些方法的应用和优缺点,可供转基因种子检测研究参考。     

谷物中掺杂油菜籽的转基因成分检测

杂质是谷物及其加工产品中转基因成分污染的一个重要来源,本文对来源于进境谷物中的50份油菜籽样品进行了转基因成分（gox基因、pat基因和bar基因）检测.通过常规定性PCR检测,在31份样品中检出转基因油菜籽,检出率为62%.本研究使用ABI 7700定量PCR仪对油菜籽样品DNA进行了实时荧光PCR定性检测分析,在32份样品中检出含有转基因油菜籽,检出率为64%.在今后要加强进出口谷物中杂质作物的转基因成分检测.     

西部高校创建种子病原检测实验室的机遇与对策

种子病原检测是衡量种子质量的重要指标之一，通过对目前种子质量监督存在问题的分析，阐述了在全国第二大制种基地河西走廊高校建立种子病原检测实验室的意义，以及建立该实验室面临的人才、科技、地域、信息等优势的机遇。抓住机遇，提出加大投资力度，稳定检测人员，开发研究快速、准确检测病原的新方法、新技术，建立适应国际种子贸易要求的标准化实验室的对策。     

玉米预防转基因漂移试纸条快速检测方法

本研究旨在使用试纸条检测方法在玉米苗期从常规玉米育种材料中发现转基因植株,以预防非预期的转基因漂移。以转基因和非转基因玉米为材料,以笔者过去开展转基因玉米材料筛选的经验总结为基础,开发出试纸条快速检测方法。本研究介绍了检测所需用品和取样方法,并且详细讨论了样品数量、操作步骤及注意事项等。还具体演示分析了2个典型检测案例的过程和结果。本方法的操作步骤简便易学,适合专业和非专业育种者或检测人员对田间材料在自查或检验中使用。熟练掌握试纸条快速检测法,能有效筛查和预防由于花粉或种子非预期混杂造成的转基因漂移。     

主要农作物种子转基因检测方法及应用

每年我国进口大量的转基因大豆、玉米等农产品,目前也正在研发多种转基因农作物新品种。按照我国和国际有关法律法规,需对农作物的种子和加工制品进行转基因成分检测,确定为非转基因产品或将转基因成分标识后才可以进入市场流通,对于正在研发的转基因新品种也需通过检测进行监管。对我国主要农作物种子转基因检测方法的实际应用进行了综述,包括种子产品抽样、核酸定性、定量检测(通用元件检测、品系特异性检测等)、蛋白定性检测(试纸条快速检测)等方法。旨在为有关农作物种子生产、经营、产品加工和管理及研发工作者提供相关技术信息。     

转基因抗虫棉种子室内筛选

为了对转基因抗虫棉后代进行简单、快速、准确地鉴定和筛选，利用 Bt-CryI Ab/Ac 试纸条法、硫酸卡那霉素浸种法对转基因和非转基因棉花种子进行鉴定和筛选。结果表明：3 种不同品牌的转基因试纸条检测结果完全一致，均能快速、准确地检测出转基因和非转基因棉花种子。利用 5000mg/L 的硫酸卡那霉素将棉花种子浸泡 48h 并持续培养 10d，通过观察棉花种子的发芽率及侧根生长情况也可有效筛选出转基因抗虫棉，但此种方法较试纸条法检测周期长，而且存在试验误差，影响试验准确率。因此，转基因试纸条法是一种更为快速、简单、准确的鉴定和筛选转基因抗虫棉植株的方法。     

转基因作物种子检测技术研究进展

检测转基因作物的实质是对目的基因的整合状态、转录和翻译水平以及转基因在作物中的特征表现进行识别及验证。目前对转基因作物种子检测包括聚合酶链式反应(PCR)检测技术、酶联免疫吸附测定(ELlSA)和生物学分析三种主要的方法。本文就其特点及相关研究进展作一介绍。     

转基因作物种子现状及检测技术研究

转基因技术在近年得到了很大的发展,相应的农作物面积也逐渐加大,因此极大地提高了作物种子的使用量和营业额。转基因作物的大面积生产,不仅促进了农业的发展,而且让农业发展面对更多的挑战和难度。世界各国主要通过加强和完善转基因作物种子检测技术的研究应对这些挑战。对转基因作物种子的优缺点及各种检测技术进行了叙述。     

基于花粉介导法转化的玉米自交系抗病植株的获得

【研究目的】将几丁质酶基因导入玉米自交系,获得抗玉米丝黑穗病的转基因植株。【方法】采用花粉介导法进行转化,获得的种子及后代植株检测方法包括：潮霉素抗性筛选、PCR扩增、Southern blot杂交分析以及田间抗病鉴定。【结果】通过转化获得种子43粒,对种子进行潮霉素抗性筛选得到9株抗潮霉素植株;经PCR检测,Southern blot杂交分析得到5株转基因植株。田间抗病鉴定结果显示,转基因植株或株系的丝黑穗病抗性提高1～2级。【结论】花粉介导法转化玉米自交系是获得抗病育种材料的一条快捷、有效的途径。     

饲料及饲料添加剂转基因成分检测及对策分析

饲料及饲料添加剂转基因检测是转基因检测难点之一.该文就深圳出入境检验检疫局对饲料及饲料添加剂的检测情况进行了总结和分析,并对该类样品转基因检测存在的问题及其相应的对策进行了探讨,对今后饲料及饲料添加剂的转基因检测工作有参考和借鉴作用.     

PyTPS 转化花生对其后代耐盐性和品质性状的影响

为了研究条斑紫菜TPS基因（ PyTPS）对花生种子耐盐性和品质性状的影响,利用花粉管通道法,将携带条斑紫菜PyTPS基因的pCAMBIA2300-PyTPS重组载体导入花生,获得了T0转基因植株。利用PCR对T0植株进行了检测,PCR阳性率为34．7％。将部分转基因植株的T2种子进行耐盐试验,利用半定量RT-PCR分析了PyTPS基因在转基因植株中的表达情况,并用近红外技术测定了T2种子的品质性状。结果表明,部分转基因花生种子在盐溶液中的发芽率显著提高,PyTPS基因可在有些转基因植株中表达,有的转基因植株的蛋白质、油酸、亚油酸或脂肪含量发生了明显变化。总之,条斑紫菜PyTPS基因导入花生后,既可提高转基因花生种子的耐盐性,又对部分后代种子的品质性状产生影响。     

种子含水率快速检测方法比较分析

种子含水率的准确快速测定在农业工程中具有十分重要的意义.迄今为止,国内外对含水率的测定方法和技术已进行了大量的研究和探索.通过参考大量的文献,对各种方法进行综合分析,找出各自的优缺点,以便对种子含水率的检测方法进行改进,为种子含水率快速无损检测提供新的意见,最后对种子无损检测的前景进行了展望.     

内蒙古地区番茄溃疡病菌PCR快速检测技术及22个番茄品种种子表面带菌检测

为快速检测番茄种子表面的带菌情况,以便及时有效防控番茄溃疡病,从而减少病害损失。试验用细菌基因组DNA试剂盒提取番茄溃疡病的总基因组,用通用引物进行PCR反应。以番茄溃疡病菌的DNA为模板,使用专一性引物进行PCR扩增,通过对专一性引物的筛选,最终确定了Cla F1-Cla F2为快速检测番茄溃疡病菌PCR的特异性引物。该检测方法特异性强、灵敏度高,模拟种子带菌,对浸种水的检测灵敏度达1×105CFU/m L。经PCR快速检测,22个番茄品种中只有黑贝番茄、粉红番茄和保罗塔带有番茄溃疡病菌,其余19个品种均未带菌。该方法直接对种子进行检测,不需进行病原菌分离培养,快速简便。     

转耐盐基因水稻的PCR检测方法及其分子辅助育种

研究采用改良CTAB法和磁珠自动提取法提取水稻种子基因组DNA,通过对水稻内源SPS基因、ThST3和Ubiquit-in启动子间构建特异序列进行PCR扩增,扩增产物结合排枪凝胶电泳实现快速检测。其中PCR扩增内源SPS基因的结果表明,采用改良CTAB法和磁珠自动提取法可用于市售水稻种子和转基因种子的DNA提取。实验合成的构建特异引物以及建立的PCR扩增反应体系能特异性地检测转耐盐基因水稻Theli。该方法检测灵敏度高,绝对检测低限达17.3×10-2ng,相对检测低限为0.41%,能有效地对转基因水稻ThST 3进行鉴定;稳定性好,可完全满足转基因水稻的定性检测、监督和标识管理需要。同时可用于对转基因水稻的辅助选择(MAS)育种。     

花粉管通道法转化大豆的分子表征

采用花粉管通道技术将含有gus基因的pBI121质粒DNA导入辽豆14，从处理的100朵花中获得53粒种子。经PCR检测53粒种子的幼苗，共检测出6株阳性植株。采用RT—PCR和GUS组织化学染色法对所获得阳性植株进行检测，其中2株幼苗(T0代17号和33号)均出现阳性结果，进一步对这2株阳性植株进行Southern blot检测，同样获得了阳性结果。上述检测结果表明，gus基因已整合到染色体上并得到了表达。对转基因植株后代进行了PCR跟踪检测，结果从17号株系的28株中检测出19株阳性植株，33号株系的35株幼苗中检测出17株阳性植株，表明gus基因可以在转基因植株后代遗传。本研究结果为大豆花粉管通道转化技术提供了比较充分的分子生物学证据。