LAMP技术及其在微生物检测中的应用

近年来,随着食品安全事件的频繁发生,食品安全问题受到了越来越多的重视。然而,在食品微生物检测过程中,传统的检测方法已经远远不能满足微生物快速、简易、高特异性的鉴定要求。随着分子生物学技术的发展,核酸扩增法已经被广泛应用于病原微生物的鉴定,LAMP法（即环一媒恒温核酸扩增方法）就是近几年发展起来的新技术之一。     

饲料产品质量安全检测技术新进展

饲料检测新技术的发展和研究为保证饲料质量和饲料安全提供技术支持。文中介绍了饲料检测技术的研究现状及饲料检测技术的发展方向。重点介绍了近几年化学分析技术和生物技术在饲料检测中的应用。其中化学分析检测技术中介绍了光谱技术、色谱技术和质谱确证技术在饲料分析中的应用,生物技术检测技术主要介绍了免疫学检测方法、以DNA为基础的检测方法和微生物分析检测方法。     

核酸探针检验技术在兽医诊断中的应用

随着核酸探针制备、杂交与标记技术的不断深入发展和探针诊断试剂的商品化、核酸探针诊断技术在兽医诊断领域得到了日益广泛的应用。本文拟就核酸探针在病原体的检测、微生物分型与致病微生物鉴定、细胞培养中污染微生物检验、食品检验及致病机理研究几个方面的应用做了介绍。     

基因芯片技术及其在微生物检测中的应用

基因芯片技术是20世纪90年代发展起来的一门高新技术。应用该技术可以对大量的遗传信息进行快速、高通量、并行检测,解决了传统检测方法中遇到的难题,已广泛应用于基因表达分析、突变检测、核酸多态性分析、基因测序和药物筛选等几乎所有的生物学研究领域。作为一种高通量的基因检测方法,基因芯片技术在微生物检测和鉴定方面的应用越来越多,具有巨大的应用潜力。文章简要介绍了基因芯片技术的基本概念和技术流程,综述其在微生物检测和鉴定中的应用。     

多重PCR-膜芯片技术快速检测饲料中6种致病微生物

本实验基于多重PCR与膜芯片核酸杂交技术，旨在构建同时检测饲料及原料中6种致病微生物的检测方法，并对方法的特异性、检出限及适用性进行了验证。结果表明：该方法具有良好重复性、再现性和特异性，综合检出限为培养前1～5 CFU/mL（核酸样本为0.01 ng/μL），可实现对沙门氏菌、大肠埃希氏菌O157:H7、金黄色葡萄球菌、志贺氏菌、单核细胞增生李斯特氏菌、副溶血性弧菌等6种致病微生物的高通量检测，检测结果与标准方法一致。多重PCR-膜芯片技术可成为饲料及原料中微生物污染快速、高通量筛查新的技术手段。     

基质辅助激光解析电离飞行时间质谱在动物病原菌检测中的应用

应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）技术,对厦门口岸进口的1000多份动物及其产品的样品进行致病菌的检测和鉴定,共检出20多种致病菌,并对这些菌株同时用传统生化鉴定方法进行确认。结果表明MALDI-TOF-MS对未知细菌进行鉴定,较传统方法更加快速、准确,而且可以进行高通量检测,可以广泛应用于口岸动物检疫以及微生物检验实验室的日常检验。此外,将国内分离鉴定的各种参考菌株建立的常见致病菌MALDI-TOF-MS数据库与布鲁克公司的MALDI Biotyper数据库进行病原菌鉴定的比较,结果表明,实验室自建的MALDI-TOF-MS数据库可以取得更加准确地结果。     

多重PCR技术在食品微生物检测中的应用进展

聚合酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）技术在微生物检测中具有快速、灵敏、操作简单等优点,而多重PCR检测还可以同时扩增多个目的基因,对高效快速检测具有重要意义,已经成为近几年来的研究热点。作者对近来多重PCR技术在食品病原微生物、食品非致病微生物及相关环境食品微生物中应用的研究现状,以及未来在食品检测中的应用展望进行了综述。     

MALDI-TOF质谱技术及Biotyper数据库在养殖场空气微生物鉴定中的应用

以16SrRNA测序法为标准方法,利用MALDI-TOF质谱技术及Biotyper数据库对某猪场210株空气分离株进行鉴定及准确率分析。结果显示91.0%的菌株被准确鉴定到种水平,95.7%被准确鉴定到属水平。研究表明MALDI-TOF质谱技术可以快速准确检测空气微生物,为养殖场环境质量监测提供了新的技术支持。     

食品微生物快速检验有新招

食品微生物快速检验方法及发展趋势国际研讨会6月7日在京召开,国内外专家介绍了目前国际通行的食品安全检测理念、方法和检测设备。世界500强企业美国杜邦公司将最新研制出的BAX全自动病原菌检测系统和全自动微生物基因指纹鉴定系统,介绍给国内检验行业。BAX系统是全球第一台利用多聚酶链式反应技术检测病原菌的商品化仪器,能够快速、准确地检测原料、食品、饲料及环境样品中的目标菌,已被欧美使用。全自动微生物鉴定系统则是全球唯一的自动化DNA指纹仪器,它为致病菌、有害生物体、质控菌株等建立了一个全自动基因指纹库,用于鉴定、鉴别…     

单增李斯特菌检测方法的最新研究进展

单增李斯特菌（LM）是人畜致病菌。近年来,因食品污染LM而导致的食物中毒事件日渐增多,因此LM的检测技术就显得越来越重要。LM检测技术主要有传统分离与鉴定方法、显色培养基快速鉴定技术、全自动微生物分析系统、分子生物学方法、免疫学方法。     

多聚酶链反应—核酸分子杂交技术的新进展

近年来,随着核酸分子杂交技术的广泛应用与发展,打破了传统的微生物检定方法,使对某些病原微生物的诊断达到了特异、敏感、简便、快速的目的,解决了不易和难于培养以及混杂有其它杂菌标本的微生物检测问题。但是核酸分子杂交检测技术的     

改良环介导等温扩增技术在病原检测中的应用

环介导等温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)是一种新型体外等温扩增特异核酸片段的技术,该技术具有高效、快速、特异、低廉、操作简单和结果可视化判定等优点,在基层现场检测中得到广泛应用。传统的LAMP技术已成功应用于病原微生物的快速检测、食品卫生检测、肿瘤检测、原位扩增和胚胎性别鉴定等方面。随着LAMP技术在样本处理、引物设计、特异性产物可视化检测方面日臻完善,改良后的LAMP技术将向多个方向发展,逐步应用于病原微生物活性检测、遗传病和传染病早期诊断等方面。文章就近年来改良LAMP技术原理、特点及在病原检测中的应用进行综述。     

分子生物技术在牛奶微生物群落研究中的应用

目前,奶牛乳房炎病原学研究的主要方法为对牛奶中的微生物进行传统的分离鉴定。由于这些微生物的形态过于简单,可提供的信息少,而且很多无法进行纯培养,传统方法已无法满足对其群落进行全面的客观认识。随着现代分子生物学技术的发展,随机扩增多态性DNA标记、变性梯度凝胶电泳、单链构象多态性检测、实时荧光定量PCR、核酸探针等技术为牛奶中微生物群落的研究提供了更为有效、直观的方法,更进一步揭示了牛奶中微生物的种群结构。     

生物传感器技术及其在检测动物性产品中药物残留的应用前景

在饲料中添加禁用的化学物质造成的动物性产品中有害物残留超标是一个世界性的难题 ,它严重地威胁着人类的健康 ,破坏生态环境 ,制约经济的发展。药残现象如此严重的原因之一是检测技术和手段不够有效和先进。目前 ,国内外检测食品中残留物的技术主要有 :(1)仪器分析法。 2 0世纪 90年代以来 ,仪器分析领域一些新技术被应用于激素、抗生素、农药残留的检测。主要包括现代光谱技术、现代色谱分析技术 (如超临界流体色谱、高效液相色谱、气相色谱、凝胶渗透色谱等 )、波谱与色谱联用技术 (如气相色谱 -质谱联用技术、液相色谱 -质谱联用技术 )…     

LAMP技术在家禽腹泻性疾病检测中的应用

正快速检测致病微生物是控制疾病暴发的有效方法之一。目前,测病原体的传统方法耗时且劳动强度大,并且通常很容易失去最佳控制疾病的机会。因此,迫切需要一种快速检测疾病的方法。环介导等温扩增(LAMP)是近年来新建立的核酸恒温快速扩增技术。它具有高灵敏度,特异性,视觉检测和对仪器的低需求。它具有节省时间和精力等诸多优点,在分子诊断领域具有很大的潜力。目前,LAMP已被广泛用于检测各种动物病原微生物。本文主要综述了LAMP技术在家禽腹泻病原微生物检     

染色体荧光原位杂交技术的原理及其应用

荧光原位杂交是现代分子生物学及基因工程中广泛应用的新技术,它可以鉴定核酸分子之间的同源性。原位杂交技术是在核酸分子杂交基础上发展起来的一门技术,染色体荧光原位杂交技术是随着绘制高分辨人类基因组图谱需求而出现的。笔者综述了染色体荧光原位杂交技术的原理、方法,并分析了其应用前景。     

猪细菌性传染病病原检测新方法研究进展

细菌性传染病是生猪养殖业的严重威胁之一,近年来其发病情况呈现出新变化,对动物产品质量和公共卫生安全造成严重危害。对病原进行快速、准确的检测,是预防和控制猪病的有效手段,对养猪业发展和人畜健康具有重要意义。伴随生命科学技术的发展和学科间的交叉融合,传统的病原菌分离培养、普通PCR方法和早期免疫学等检测技术均朝着精确高效的方向不断发展革新,并以传统方法为基础建立了多种新型检测技术。文章重点介绍了猪细菌性传染病病原检测的几种新技术:以核酸分子生物学为基础的实时荧光定量PCR法(qPCR)、环介导等温扩增法(LAMP)、夹心DNA杂交(DNAH)等;以免疫学为基础的免疫胶体金标记技术、时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA)、免疫磁珠分离法(IMS)等;以蛋白质分子生物学为基础的细菌质谱鉴定技术;以及适用于现场快速诊断的即时检测(POCT)技术,并分析了这几种新技术的优缺点,为不同条件的检测机构和研究部门在开展猪细菌性传染病检测和研究时选择相应的方法提供一定的参考,以期在猪病预防控制中发挥更加积极的作用。     

ELISA在饲料及食品安全检测中的应用

检测食品及饲料中有害物质的方法很多,但大多数需要昂贵的仪器设备,且操作繁琐成本较高。酶联免疫吸附分析法是固相吸附技术和免疫酶技术相结合的一种方法,具有操作简便和快速准确等特点,可用于检测食品及饲料中微生物、毒素、农药残留、重金属污染及转基因产品等。     

现代仪器分析技术在食品掺假中的应用

为了适应现代社会的高速发展和生产科技的不断提高,消费者对食品品质的要求不断提高,解决已经严重影响人们正常生产生活的一系列食品质量安全事件,研究采用现代仪器分析技术,开展食品掺假分析检验,进而保障食品安全,保证食品品质。将现代分析技术应用到食品掺假检验检测中,可以更精确、更广泛、更有效地鉴定食品掺假情况。笔者对现代仪器分析技术在食品掺假中的应用情况进行分析研究。结果表明:现代仪器分析技术可在食品掺假检验中广泛应用。     

饲料微生物检测中PCR技术的研究应用

PCR技术以其高强的特异性和灵敏度以及检测速度快、准确性高等优点,已广泛地应用在食品微生物检测的各个领域,且逐步开始应用于饲料微生物检测,文章阐述了PCR技术及其在饲料微生物检测中的应用前景。