PCR-RFLP分析用的梨基因组DNA提取

采用改良CTAB法,提取了23个梨品种基因组DNA。结果表明:所提取DNA产率在200μg/g鲜叶以上,大部分梨品种OD260/OD280在1.8左右,用于PCR-RFLP分析时,PCR扩增产物谱带清晰,且PCR扩增产物能被相应的限制性内切酶酶切。     

成熟石榴叶片DNA提取方法研究

[目的]为了从成熟石榴叶片中提取高质量、高产量的基因组DNA。[方法]针对成熟石榴叶片含多糖、多酚的特性,用改良CTABI及改良CTABⅡ法分别提取2个品种（墨石榴和青皮软籽石榴）的成熟石榴鲜叶、冻叶、干叶基因组DNA,并通过琼脂糖凝胶电泳、紫外分光光度计、酶切鉴定。【结果]改良CrABⅡ法提取的基因组DNA电泳时点样孔干净,无拖带,OD260nm／OD280nm为1．7—1．9,酶切完全,其质量、产量都高于改良CTABI法。[结论]改良CTABⅡ法是提取成熟石榴叶片中高质量、高产量基因组DNA的有效方法。     

悬铃木叶片DNA提取方法研究

以悬铃木组织培养苗叶片为材料,比较了提取叶片DNA的4种方法:SDS-Ⅰ,SDS-Ⅱ,CTAB-Ⅰ,CTAB-Ⅱ,并用紫外光谱吸收、凝胶电泳、限制性内切酶酶切、RAPD等方法进行鉴定.研究结果表明,4种方法提取的DNA的得率约为0 347～0 518μg·mg-1,分子量约为23kb,均可被酶切.此外,CTAB-Ⅰ和CTAB-Ⅱ提取的DNA可用于RAPD分析.综合考虑得率、纯度等因素,作者认为CTAB-Ⅱ法可作为悬铃木叶片DNA提取的最佳方法.     

梅花基因组AFLP银染反应体系的建立和优化

采用改进的SDS DNA提取方法从梅花的嫩叶和老叶中提取获得总DNA .所得DNA样品的OD2 6 0 OD2 80 值在1 7～ 1 9之间 ,琼脂糖凝胶上主带清晰、较少降解、样品纯度高、蛋白去除干净且得率高 .该体系对原提取程序作了多处简化 ,使操作简便、快捷、高效 ,适合于梅花DNA提取 ,所提取的DNA样品不含PCR反应抑制剂及其他酶反应抑制剂 ,可被限制性内切酶MseⅠ和EcoRⅠ完全酶切 ,适合AFLP PCR反应应用 ,得到清晰的指纹式样 .     

改良CTAB法提取菠萝DNA

采用改良CTAB法提取菠萝叶片叶基、叶尖和叶中部及幼根等部位的DNA,各个部位DNA的OD260／OD280比值为1．72～1．88;OD260／OD2301．45～2．11;提取产量为5．584—24．325μg／g（鲜重）;各个部位DNA提取产量大小排序为：叶基、心叶〉叶中部、叶尖〉幼根。本方法提取的菠萝DNA质量较高,可用作于SRAP分析。     

改良CTAB法提取薰衣草基因组DNA研究

[目的]寻找高效、快速的薰衣草（Lavandula pedunculata）基因组DNA提取方法。[方法]通过改良CTAB法提取薰衣草3个品种的基因组DNA。[结果]经检测,所提样品OD260/OD280值在1.85左右,得率为454.50～1 093.35μg/ml,电泳条带清晰,无明显的拖尾现象;Eco RI酶切基因组DNA图谱表明,提取的DNA能被限制性内切酶完全酶切;以提取的DNA为模板,用1对随机引物进行RAPD-PCR,发现检测条带清晰,说明获得的DNA质量较高,可以满足相关的分子生物学研究需要。[结论]该研究可以为薰衣草分子生物学的后续试验的开展奠定理论基础。     

基因组DNA的提取及RAPD条件优化

提取了木奈基因组 DNA,并以其为模板对影响 RAPD扩增的重要参数进行优化试验 ,以期建立木奈 RAPD反应的优化体系 .结果表明 ,PCR扩增体系最佳条件是 :2 0 μL体积中 ,2 0 0 μmol·L- 1 d NTP、2 .5 mmol· L- 1 Mg Cl2 、0 .2 μmol· L- 1随机引物、2 5 .0 ng·μL- 1 DNA模板、1 -2 U Tag酶     

一种适合MSAP分析谷物干种子的DNA提取方法

甲基化敏感扩增多态性(MSAP)是DNA甲基化的主要研究技术,获得高质量的DNA是MSAP分析的基础。针对玉米Zea mays(L.)等干种子富含多糖、蛋白质且与核酸结合紧密等特点,采用改良的CTAB-SDS法对其基因组总DNA进行提取,对DNA进行质量检测,使用限制性内切酶Eo RI和Hpa II酶切,进行MSAP分析。结果表明,改良CTAB法可从玉米等干种子中获得纯度高、完整性好的总DNA,其OD260 nm/OD280 nm处于1.86,OD260nm/OD230大于2.00,产率达1.8μg/mg,多糖、蛋白质和RNA等杂质被去除干净,无降解现象,所提取的DNA可被等限制性内切酶完全双酶切,进行MSAP分析得到大量清晰稳定的多态性条带。结果表明改进的CTAB-SDS法更适合于干玉米种子高质量总DNA的提取。     

不同方法对石榴叶片DNA提取效果的影响

以4个石榴(PunicagranatumL )品种为实验材料,用SDSⅠ,SDSⅡ,CTABⅠ,CTABⅡ4种方法提取石榴叶片DNA 结果表明,SDS法提取得率为500～600μg·g-1,但OD值偏低,为1 50～1 70;RAPD分析无扩增;CTAB法所得DNA得率为200～500μg·g-1,OD值为1 80～1 90;RAPD分析扩增带清晰CTABⅠ和CTABⅡ相比,操作简单、省时,得率高,综合考虑CTABⅠ是石榴叶片DNA提取的最佳方法     

改进的CTAB法提取蔓茎堇菜基因组DNA

研究了蔓茎堇菜（Viola diffusa Ging．）基因组DNA的分离提取方法。在细胞核裂解之前,除去细胞质中的多糖等杂质,然后采用CTAB法分别从野生植株叶片、组培植株叶片、愈伤组织及悬浮培养细胞4种新鲜材料中成功地分离提取了蔓茎堇菜基因组DNA。所提取的DNA,链长度均大于48kb,OD260/OD280比值为1．8～1．9,产率为219．8-300．5μg／g,可直接用于限制性内切酶酶切,并适用于RAPD分析。     

氯虫苯甲酰胺在大豆植株中的内吸传导特性

 【目的】明确新型杀虫剂氯虫苯甲酰胺在植株内的内吸传导特性, 为合理使用氯虫苯甲酰胺防治蔬菜、水稻等害虫策略的制定提供科学依据。【方法】采用水培法和涂药法分别研究氯虫苯甲酰胺在大豆植株中是否具有内吸传导特性。以乙腈为溶剂,超声波处理提取大豆植株中的氯虫苯甲酰胺,经预净化,由高效液相色谱（带二极管阵列检测器）检测分析氯虫苯甲酰胺在大豆植株中各部位的分布状况。【结果】采用水培法处理,培养液中氯虫苯甲酰胺的浓度为50 μg·mL-1时,24 h后大豆茎杆和叶片中的含量分别为15.22和4.73 μg·g-1,48 h后大豆茎杆和叶片中的含量分别为8.71和7.96 μg·g-1;当培养液中氯虫苯甲酰胺的浓度为200 μg·mL-1时,24 h后大豆茎杆和叶片中的含量分别为18.52和11.95 μg·g-1,48 h后大豆茎杆和叶片中的含量分别为16.45和17.88 μg·g-1。采用浓度100 μg·mL-1药液涂药处理大豆中部成熟叶片时,24和48 h后检测发现处理叶片以上部位的叶片中氯虫苯甲酰胺的含量分别为16.55和20.79 μg·g-1,处理叶片以下部位未检测出氯虫苯甲酰胺;在大豆顶端生长点叶片涂抹浓度100 μg·mL-1药液时,在生长点以下部位的叶片中均未检测出氯虫苯甲酰胺。【结论】研究结果表明氯虫苯甲酰胺在大豆植株内具有优异的自下而上的内吸传导特性。     

温度和盐度对栉江珧耗氧率和排氨率的影响

[目的]探讨温度和盐度对栉江珧耗氧率（OR）和排氨率（NR）的影响。[方法]设置5个温度梯度和5个盐度梯度,测定温度和盐度对栉江珧OR和NR的影响。[结果]在18～34℃范围内,栉江珧单位体重OR和NR均随温度升高而增加,分别为260．82～585．90μg/（g·h）和26．32～42．19μg/（g·h）,OR和NR与温度的相关方程分别为：ORT=-16．14lt^2＋197．58t＋89．29l（R^2=0．9738）;NRT=-0．6981t^2＋8．4677t＋17．792（R^2=0．9733）：在21～41盐度范围内,栉江珧单位体重OR和NR先随盐度增加而降低,在盐度31时达最小值,然后随盐度增加而升高,其变化分别为：575．82～734．40μg/（g·h）和36．78～54．45μg/（g·h）,0R和NR与盐度之间的相关方程分别为：ORs=37．929s^2一214．27s＋867．6（R^2=0．9872）;NRs=3．5442s^2-19．748s＋62．08（R^2=0．9461）;表明在正常盐度下,贝体能量消耗较低。[结论]温度和盐度对栉江珧OR和NR均有显著影响,     

甘南蕨麻猪肉用品质与营养成分研究

对甘南州12头健康蕨麻猪进行了肉用品质和营养成分的测定.结果表明:甘南蕨麻猪与当地白猪相比,大理石纹评分低1.4分(P<0.01),肌纤维直径低5.1μm(P<0.01),剪切力低2.29 kg.cm-2(P<0.01),其它肉用品质指标差异不显著(P>0.05);甘南蕨麻猪肉水分含量74.18 g.(100 g)-1、干物质25.81 g.(100 g)-1、脂肪3.65 g.(100 g)-1、蛋白质20.66 g.(100 g)-1、灰分1.14 g.(100 g)-1;K、Fe、Cu、Zn含量分别为385.50、1.06、0.271、0.40 mg.(100 g)-1;蕨麻猪肉氨基酸评分较高.综合评价认为:甘南蕨麻猪肉细嫩多汁、脂肪低、蛋白优质,矿物质含量丰富,适口性好,营养价值高,具有很高的开发价值.     

番茄早疫病菌对杀菌剂的敏感性研究

为了选择可有效防治番茄早疫病菌的杀菌剂,本文采用组织分离法从罹病叶片分离出病原菌,并通过FAO推荐的菌落直径法测定其对6种杀菌剂的敏感性。结果表明:番茄早疫病对腐霉利最敏感,其平均EC50为1.24μg.mL-1,对杀毒矾、代森锰锌中度敏感,其平均EC50分别为32.64μg.mL-1、56.38μg.mL-1。对百菌清、甲霜灵、异菌脲低度敏感,其平均EC50分别为263.68μg.mL-1、443.33μg.mL-1、605.44μg.mL-1。由此可见,腐霉利对番茄早疫病的防治在试验药剂中效果最好。     

核盘菌对几种杀菌剂的敏感性研究

为了选择防治菌核病的有效药剂,采用FAO推荐的菌落直径法研究了常用杀菌剂对核盘菌敏感性的差异。结果表明:山西五寨菌株WZ2对腐霉利、多菌灵、菌核净、福美双、乙霉威、乙烯菌核利高度敏感(EC50在0.117 0~4.965 4μg.mL-1之间);对异菌脲中度敏感(EC50为5.069 0μg.mL-1);对代森锰锌和百菌清最不敏感(EC50为20.760 0,32.107 6μg.mL-1)。内蒙古菌株NM15和NM17均对腐霉利、多菌灵、菌核净、福美双、乙烯菌核利高度敏感(EC50在0.064 0~3.059 0μg.mL-1);对乙霉威、异菌脲中度敏感(EC50为7.330 7~13.823 4μg.mL-1之间);对代森锰锌最不敏感(EC50分别为37.645 3,42.303 0μg.mL-1)。另外,菌株NM15对百菌清高度敏感(EC50为2.104 8μg.mL-1),而NM17则对百菌清中度敏感(EC50为11.777 9μg.mL-1)。并且这三个菌株对腐霉利、百菌清的敏感性差异较大,而对其他药剂的敏感性差异不大。     

茼蒿素类似物对几种害虫的生物活性研究

对茼蒿素类似物的生物活性进行了研究。浸叶法处理小菜蛾 2龄幼虫 ,12号和 2 0号化合物 5d后的 LC50 值分别为 4 98.74μg· m L-1和 2 99.82μg· m L-1;对菜粉蝶 3龄幼虫处理后 6d的L C50 值分别为 655.79μg· m L-1、 4 65.74 μg· m L-1,处理后 8d的 L C50 值分别为 3 82 .12 μg·m L-1、 2 78.86μg· m L-1。以 5μg/头的 12号和 2 0号化合物注射处理菜粉蝶 5龄幼虫 ,2 4 h后试虫的校正死亡率分别为 4 5.3 4 %和 68.86%。 12号和 2 0号化合物对致倦库蚊 3龄幼虫处理后 2 4 h的 L C50 分别为 9.91μg· m L-1和 6.2 1μg· m L-1。     

光强对玉米幼苗不同叶位叶片花环结构的影响

以玉米为材料,通过观察不同光强下玉米幼苗叶片的显微结构,探讨光强和叶位变化对玉米叶片花环结构的影响。结果表明:在同一光强下,不同叶位的花环结构发育程度不同,在不同光强下,同一叶位的花环结构发育程度也不同。总体上,同一光强下,叶片的花环结构从1-5叶位逐步完善;而同一叶位的花环结构从200、1 300、1 000μmol/(m2.s)到600μmol/(m2.s)光强下逐步完善。     

水分胁迫对乐东拟单性木兰幼苗生长和生理特性的影响

[目的]考察不同水分胁迫条件下乐东拟单性木兰的生理及生长指标变化。[方法]以乐东拟单性木兰盆栽幼苗为试材,水分胁迫设5个处理,即田间持水量的10％、20％、40％、60％和80％,研究水分胁迫对乐东拟单性木兰幼苗生长的影响。[结果]乐东拟单性木兰的相对苗高增长量、相对地茎增长量、叶绿素含量及根系活力随土壤含水量提高而增加,在土壤含水量为60％田间持水量时达最大值,分别为13．67％、15．04％、1．463mg／g和50．89mg／（g·h）,之后开始下降,在土壤含水量80％田间持水量时分别降到2．88％、5．56％、1．086mg／g、25．252mg／（g·h）;叶片游离脯氨酸含量变化趋势则与之相反,在土壤含水量为60％和80％田间持水量时游离脯氨酸含量分别达到最小值0.008μg/ml和最大值0．053μg/ml。[结论]土壤含水量为印％田间持水量时较适合乐东拟单性木兰幼苗生长。     

Hg~(2+)胁迫对菠菜幼苗叶绿素含量及抗氧化酶活性的影响

[目的]探讨Hg2+胁迫与植物体内抗氧化酶变化的关系。[方法]将菠菜种植于Hg2+浓度为5、152、5、35、45 mg/L的处理液中,研究Hg2+胁迫对菠菜幼苗叶绿素含量和超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)及过氧化氢酶(CAT)活性的影响。[结果]随着Hg2+浓度的增加,菠菜幼苗叶绿素含量总体呈减少趋势,当Hg2+浓度为5 mg/L时,叶绿素含量最大,为0.79 mg/g。随着Hg2+浓度的增加,SOD、POD、CAT活性呈先升后降趋势,当Hg2+浓度为15 mg/L时,SOD、POD、CAT活性达到最大值,分别为95.2 U/ml、0.24△OD470/(g.min)、0.11△OD240/(g.min)。[结论]在逆境环境因子作用下,植物体通过自身的酶机制,可以对外界不良环境作出保护性反应。     

淡紫拟青霉FZ-0289产几丁质酶的条件优化

通过单因素和多因素正交试验对淡紫拟青霉FZ0289产几丁质酶的条件进行了研究.单因素试验表明:100目几丁质粉末对菌体产几丁质酶的诱导性最强;添加蛋白胨能使产酶高峰提前,产酶量增加.多因素正交试验表明,在添加2g·L-1100目几丁质粉末、2g·L-1蛋白胨、1g·L-1KH2PO4、0.5g·L-1MgSO4、0.2g·L-1CaCl2和0.2g·L-1NaCl的培养基中接入经马铃薯蔗糖培养基(PSA)活化10d的菌碟(接菌孢子量为6×109个·L-1,500mL摇瓶中培养体积为150mL),在28℃、150r·min-1的条件下培养3d,发酵液中几丁质酶活达到0.11U·mL-1.