文冠果败育花药和花粉发育的解剖学研究

通过对文冠果败育花药及花粉发育进行显微结构的观察,发现：败育花药缺少唇细胞;绒毡层细胞延缓解体;花粉外壁始终连续,且此处有某些物质填充,花粉内壁很厚;花粉细胞质中细胞器明显减少,淀粉粒数量少,这些异常现象影响花粉的正常发育。     

山核桃雄蕊发育的解剖学研究

利用石蜡制片技术从显微水平上跟踪了山核桃Carya cathayensis雄蕊发育过程,以掌握山核桃的生殖发育规律。研究表明:①3月下旬在雄花原基顶部形成雄蕊原基,4月中旬形成雄蕊并进一步分化。②4月下旬,花药内形成花粉囊,花粉母细胞减数分裂形成四分体,四分体解体产生单胞花粉粒,中层和绒毡层在花粉发育过程中逐渐消失。③5月上旬形成2-胞花粉粒,花粉散出,花序凋谢。④建立了山核桃雄蕊发育外部形态与解剖构造之间的对应关系。图1表2参18     

芸苔属两个雄蕊心皮化雄性不育系特性及遗传分析

【目的】研究不结球白菜雄蕊心皮化雄性不育系HGMS和甘蓝型无花瓣油菜雄蕊心皮化雄性不育系AMS的特征,探讨雄蕊心皮化突变机理。【方法】以HGMS和AMS为试材,进行形态特征、同工酶分析及其杂交研究。【结果】系内不育株HGMSa和AMSa均具有明显的雄蕊心皮化形态特征,且雄蕊心皮化器官酯酶、过氧化物酶同工酶酶带与雌蕊酶带相同。系内可育株HGMSb和AMSb雄蕊发育正常,但存在花瓣有、无的显著差异。相互杂交研究表明,引起HGMS和AMS雄蕊心皮化突变的基因位点是相同的。HGMSb调控花瓣、雄蕊发育的单基因与AMSb调控雄蕊发育的单基因虽然存在形成花瓣功能的明显差异,但具有相同的作用位点,对HGMSa和AMSa雄蕊心皮化性状均具有恢复作用。【结论】HGMSa和AMSa具有相同的雄蕊心皮化特征,而且引起雄蕊心皮化突变的基因位点是相同的。     

新质源雄性不育烟草MS革新3号雄蕊发生的细胞学观察

雄性不育烟草MS革新3号的雄性败育时期发生在雄蕊原基分化后至孢原细胞形成前,在开放花朵中很少能见到退化的雄蕊,偶或有退化雄蕊的,也没有正常花药的形成,仅有退化花丝和畸形萎缩花药,花药内空无一物。与正常烟草(保持系)子房由2心皮组成不同,雄性不育烟草MS革新3号子房绝大多数都由3心皮组成。     

几个甘蓝型油菜细胞质雄性不育系与保持系雌、雄蕊发育动态的比较

在初花期对几个甘蓝型油菜 (BrassicanapusL .)细胞质雄性不育系与相应保持系的雌、雄蕊及花药发育动态进行了观察。结果表明 ,不育系与保持系间在雌蕊发育过程中差异相对较小 ,仅在花蕾发育后期表现出一定的差异。到开花前 ,不育系的雌蕊略长于保持系。而雄蕊则在蕾长 3～ 4mm时期开始表现出较明显的差异 ,花药则在蕾长 1mm后开始表现出差异。临花前 ,不育系雄蕊及花药明显短于保持系 ,一般仅为保持系的 1/ 2左右。在不育系的花蕾中 ,雌蕊与雄蕊长度间在蕾长 3～ 4mm时开始表现出明显的差异 ,这时 ,雌、雄蕊长度差异可达 0 5～ 1mm ,可以用肉眼直接剥蕾观察出来。这时可以作为不育系田间早期育性识别的大致时期     

西葫芦雄蕊与雄配子体发育的研究

西葫芦（ＣｕｃｕｒｂｉｔａｐｅｐｏＬ．）雄蕊５枚，由（２）＋（２）＋１的三体组成，花丝粗短，各花药具２个花粉囊，呈Ｓ形弯曲。横切面观察，有３０个花粉囊分布其表面。药隔发达；造孢细胞分裂仅２～３次，小孢子母细胞减数分裂基本同步，四分体时胼胝质壁发达。为四面体型排列，胞质分裂为同时型，小孢子大而明显；雄配子体球形，外壁厚具刺，萌发孔多个，具盖状结构，属于２－细胞型。     

烟草雄蕊特异表达启动子TA29的克隆及序列分析

采用SDS法提取烟草(Nicotiana tabacum)叶片总DNA,根据GenBank中相关序列设计并合成1对特异引物,通过PCR扩增获得一特异片段,并将其连接到pMD8-T载体上进行克隆测序.结果表明:该片段全长543 bp,与GenBank中报道的序列(AX012339)存在1个碱基的差异,同源性达99.8％;同时,采用生物软件对其进行序列分析,发现该片段含有启动子必备的核心元件:1个TATA-box、8个启动序列元件[PyPyAN (T/A) PyPy]以及1个CAAT-box、1个Cap site、1个I-box等元件,还存在与花粉特异性调控相关的AGAAA和GTGA等2个元件,推测该序列功能与雄蕊特异表达启动子TA29功能相同,从而为后期植物表达载体的构建及转基因奠定了基础.     

甘蓝型油菜RGCMS雄性不育系的花器形态及花药发育的解剖学研究

花器形态和花药发育的解剖学观察表明 ,RGCMS S45A和RGCMS 117A中表现波里马细胞质雄性不育 (polCMS)的植株 ,其花器形态和花药发育的解剖学特点与polCMS相同 ,即在高温条件下 ,花瓣较小 ,表现彻底不育 ,无花粉囊的分化 ;在低温条件下 ,花瓣变大 ,表现部分雄性不育 ,可分化出 1～ 4个花粉囊 ,并产生一定数量可育花粉。表现核质不育 (RGCMS)的植株 ,在高温条件下 ,花瓣小 ,表现彻底的polCMS不育 ,无花粉囊的分化 ;在低温条件下 ,花瓣变大 ,也表现彻底雄性不育 ,具有核、质不育的共同特点 ,每个花药可分化出 1～ 4个花粉囊 ,但无可育花粉 ,其雄性败育时期和特点与S45A和 117A相同。     

GST-GnRH/TRS融合蛋白(包涵体)的分离、纯化与复性研究

以人工合成的促性腺激素释放激素(Gonadotropin releasing hormone,GnRH)/转运肽(TRS)基因与表达载体pGEX-6p-1相连的重组子(pGE-G)作为研究对象,转化大肠杆菌BL21(ED3)plyS。本文对GST-GnRH/TRS/BL21(DE3)plyS工程菌的GST-GnRH/TRS重组产物进行了诱导表达和分离纯化的研究,结果表明,该工程菌用LB培养基在30℃扩增至OD590为0.6左右,加IPTG(终浓度为0.2 mmol/L)诱导3.5h,此时GST-GnRH/TRS的表达量可占菌体总蛋白的33.3%。重组产物绝大多数以IBs形式存在于菌体中。工程菌经溶菌酶破碎、高速离心,得IBs粗制品后,再用8 mL 1%(V/V)Triton X-100变性溶解IBs,离心取上清,进行Glutathione Sepharose 4B柱一步法亲和层析,得到了纯度较高的GST-GnRH/TRS融合蛋白,为进一步研究和实际应用奠定基础。     

聚乙二醇修饰蛋白的快速分离与纯化

【目的】建立聚乙二醇修饰蛋白的快速分离纯化方法。【方法】以4种聚乙二醇化药用蛋白为研究对象,采用阳离子交换树脂进行纯化。纯化条件:Hiprep 16/10 CM Sepharose FF(1 mL)预装柱;流动相:A液为20mmol/L pH4.0的醋酸缓冲液;B液为A液中加入1 mol/L NaCl;B液以0~100%离子强度线性梯度洗脱100 min,流速0.2 mL/min,波长280 nm检测,收集各洗脱峰。【结果】一步纯化可将单点修饰产物与聚乙二醇、多点修饰产物以及未修饰蛋白分离开来,单点修饰产物经SDS-PAGE检测呈单一条带,经质谱检测其相对分子质量与预期相符。【结论】所建立的纯化方法可快速分离纯化聚乙二醇修饰蛋白。     

文冠果嫁接研究

[目的]研究影响文冠果嫁接成活率的主要因子,提高文冠果的嫁接成活率。[方法]对接穗采集地的温度、接穗保存时间、保存措施及嫁接手法进行了对比试验,[结果]接穗保存措施、嫁接人员操作技术和嫁接手法直接影响文冠果嫁接成活率。在一定时间和温度范围内,接穗保存时间和采集地温度对文冠果嫁接成活率影响不显著。[结论]为文冠果的选优繁优提供技术参考。     

文冠果人工林根际土壤真菌和根系内生真菌群落多样性1）

文冠果（Xanthoceras sorbifolia Bunge）根际土壤和根系内生真菌的多样性与土壤养分变化具有相关性。以人工文冠果林为研究对象,采集根际土壤和细根并提取DNA,采用Illumina Miseq高通量测序技术分析真菌rDNA的ITS1区域,同时测定了根际土壤的N、P和有机质等因子,以分析文冠果林根际土壤真菌和根系共生真菌与环境因子的关系。结果表明：①测序共获得clean reads有238．8104万个（土壤209．2113万个,根系295．9910万个）;在97％的相似度水平下,共获得1115个操作分类单元（ OTUs）：根际土壤真菌1028个,根系共生真菌514个,其中有59个OTUs鉴定为菌根真菌。在10～12年生林中,病原真菌数量较高,主要为镰刀菌属（ Fusa rium）、链格孢属（ Atl ernaria）及青霉属（ Penicillium）,可能与林地土壤肥力退化有关。②不同林龄文冠果根际土壤理化性质差异显著,1～2年生林土壤肥力较高,全氮、速效氮、全磷、速效磷质量分数分别为110．00、345．6、230．00、5．18 mg· kg－1,均高于5～7年生林和10～12年生林。随土壤肥力降低根内真菌OTUs个数递减。③1～2年生林根际土壤和根系内生真菌丰富度指数Chao1、均匀度指数ACE均最高。真菌群落多样性指数Simpson与全氮、速效磷质量分数呈正相关关系。可见,不同林龄文冠果人工林真菌群落存在差异,文冠果根际真菌群落与土壤环境因子之间具有相关性。     

文冠果造林技术研究

结合陕西省富县的生态环境特点,对文冠果造林技术进行了研究,结果表明,黄土高原文冠果造林宜采用＂阳向缓坡造林地＋鱼鳞坑整地＋轻蘸浆埂上栽植＋秋季截杆造林＂技术。该研究对文冠果在西北地区的推广应用具有重要的指导意义。     

文冠果的研究进展

综述了文冠果在繁殖技术、引种选育、生理学以及化学成分等方面的研究进展,提出了目前文冠果研究方面的不足.     

文冠果同源异型变异株的发现

该文对北京林业大学苗圃内发现的一文冠果的同源异型自然变异株进行了形态及解剖学观察．结果发现：这一花器官变异植株的花明显小于正常株的花,且不能完全开放,始终呈半开状．花重瓣多轮,仅具花萼和花瓣,不具雄蕊和雌蕊．因为雄蕊和雌蕊全部特化为花瓣状,部分特化的内轮花瓣上留有花药的残迹,花药内的花粉发育是不正常的．与此相关的营养体特征是变异株的叶片大,厚且颜色呈深黑绿色．     

新疆木垒县文冠果物候特征研究

[目的]主要对新疆木垒县文冠果果园的25～35 a生文冠果果树生物学特性、文冠果的物候期、开花结果习性、果实类型、树体结构等进行观察研究。[方法]采用测量法测定文冠果生育状况,即每棵树的树体结构、果实种类、种子数量。用称重法测定种子重量和单株产量。[结果]因倒春寒、春季持续低温等气候因素的影响,文冠果树芽萌动期、芽膨大期等物候期出现明显的差异,但是果实成熟期和落叶期基本一致;该园文冠果果实类型有3种:结3裂果的树占总株数88%～90%;结3裂果、4裂果的树占7%～8%;结3裂、4裂、5裂果的树占3%～4%;采取修剪技术可使文冠果产量明显提高。[结论]木垒县文冠果种植园管理粗放,产量较低,果实质量也不高,因此应制定科学合理的栽培技术和管理措施。     

文冠果组织培养的玻璃化控制研究

以文冠果的茎段为材料,通过外植体取材、培养条件、细胞分裂素质量浓度、培养基中钙质量浓度4个方面控制文冠果组织培养中的玻璃化问题。结果表明:沙藏后的种子萌发的小植株的玻璃化程度较轻于多年生植株;玻璃化程度随着光照的增加而降低,最适光照为6 000 lx;随着细胞分裂素6-BA质量浓度的增加玻璃化程度加剧,其最适质量浓度为1 mg/L;随着钙质量浓度的增加玻璃化程度抑制,当钙质量浓度为880 g/L时,效果最为明显。综合以上4个方面,基本可以控制玻璃化对文冠果组培苗的影响,从而为文冠果组织培养的产业化提供了可能。     

文冠果无性繁殖技术的研究进展

综述了国内近30年在文冠果的嫁接繁殖、扦插繁殖、组织培养等繁殖技术方面的研究进展,分析现有的技术途径的效果,明确文冠果繁殖的技术中存在的问题,同时提出今后文冠果无性繁殖技术研究的重点和发展方向,为文冠果的研究和推广应用提供参考。     

干旱荒漠区文冠果扦插繁殖技术研究

[目的]探讨干旱荒漠区文冠果的扦插繁殖技术,为文冠果的扦插繁殖、驯化栽培及园林绿化应用提供理论依据。[方法]在干旱荒漠区以文冠果和ABT2号生根粉为试材,通过采用ABT2生根粉处理文冠果嫩枝插穗、硬枝插穗、根插插穗研究了ABT2生根粉不同质量浓度对文冠果嫩枝、硬枝、根插扦插生根率的影响。[结果]文冠果嫩枝扦插、硬枝扦插、根插均以ABT2生根粉质量浓度250 mg/L处理最好,扦插平均生根率分别为48.96%、35.00%、92.86%,根插生根率明显高于嫩枝扦插和硬枝扦插。[结论]在干旱荒漠区文冠果扦插繁殖以ABT2生根粉质量浓度250 mg/L处理插穗,采取根插为最好的繁殖方法。     

文冠果雄性可育性相关cDNA片段的克隆与序列分析

针对文冠果单性雄花与两性花中存在的可育与败育两种不同类型雄蕊 ,为在分子水平上探讨雄性不育的机理 ,作者采用mRNA差别显示技术 ,分析始花期两种花药中基因的表达情况 .从雄花花药中初步筛选到N15和N2 42条与雄性可育性相关的cDNA片段 .同源性比较发现 ,N15片段与大豆质体rps12、rps7、16SrRNA、NADH脱氢酶基因共转录序列的同源性达 95 %,并与矮牵牛雄性可育系线粒体中的可育性相关基因结构吻合 ;N2 4片段的部分序列同拟南芥染色体 3中CHR3v0 7142 0 0 2基因序列的同源性为 80 %.该研究为进一步探讨育性相关基因调控文冠果育性的分子机理奠定了基础 .