黄瓜种子的人工老化及基因组DNA的提取

在模拟高温(40℃)、高湿(RH 100%)条件下,研究了人工加速老化的黄瓜种子生活力与活力指标的变化,并分别提取老化程度不同的黄瓜种子基因组DNA(老化时间分别为1～15 d)进行质量检测.研究结果表明,黄瓜种子经老化处理后,DNA的量没有明显差异,但是DNA的分子量大小随老化程度的增加有明显下降的趋势.说明黄瓜种子的基因组DNA在人工老化的过程中发生了一定的降解,DNA受到了某种程度的损伤.老化时间越长,DNA损伤越严重.     

黄瓜老化种子基因组DNA的损伤与修复的RAPD研究

应用RAPD技术对人工老化和PEG处理的黄瓜种子进行扩增多态性DNA分析.建立了黄瓜种子基因组DNA的损伤及其修复的RAPD指纹图谱.在92条引物中有22条可应用于老化种子的研究.16条可应用于PEG处理种子的研究,并从中找出了6条引物S190、S300、S359、S475、S1140、S2144用来比较黄瓜老化种子及其修复的RAPD扩增带型的变化.结果发现,人工老化处理的黄瓜种子的DNA带减少甚至消失.而PEG渗调修复后的黄瓜老化种子DNA带重新出现或者与对照基本相同,从而建立了黄瓜老化种子基因组DNA的损伤与修复的RAPD指纹图谱.     

甘蓝种子的人工老化及其生物学效应

以"强力50"甘蓝种子为试材,研究了3种不同人工老化方式(高温高湿老化法、甲醇老化法、热水老化法)处理不同时间后对甘蓝种子的萌发特性和相对电导率、可溶性糖含量、可溶性蛋白质含量以及丙二醛含量的影响,以期为采用最合适的人工老化条件提供参考依据。结果表明:3种老化方式均显著降低了甘蓝种子的发芽率、发芽势、发芽指数和活力指数,显著延长了平均发芽天数,且影响程度随着处理时间的延长而增大,其中甲醇老化法和热水老化法对甘蓝种子发芽指标影响的变化幅度更大;3种老化方式均使甘蓝种子浸出液的相对电导率显著增大,显著降低了甘蓝种子的可溶性糖、可溶性蛋白质和丙二醛含量。种子发芽指标和生理指标的相关性分析结果表明,各项种子发芽指标和相对电导率、可溶性蛋白质含量、可溶性糖含量以及丙二醛含量均显著相关,同时分析了不同人工老化方式引起甘蓝种子活力下降的原因。     

大白菜种子人工老化及劣变的生理生化分析

研究了大白菜种子人工老化过程中所发生的一系列生理生化变化。结果表明：随着种子老化加深,种子活力指数、ＰＯＤ、ＳＯＤ、脱氢酶、酸性磷酸酶、脂肪酶活性逐渐降低,ＭＤＡ及芥子碱含量逐渐增加,且品种间有差异。认为大白菜种子人工老化及劣变的主要机制在于膜过氧化作用加剧。     

适于ISSR-PCR扩增的百合基因组DNA的提取

为了方便稳定地获得适合于ISSR-PCR扩增的高质量百合基因组DNA,以卷丹百合为试材,在传统的CTAB法基础上进行了改良和优化,筛选出较理想的DNA提取方法.结果表明:用改良CTAB法提取的百合基因组DNA电泳条带清晰,无降解现象,OD260/OD280值在1.7～2.0之间,用于ISSR-PCR扩增时其稳定性和可重复性都很好,说明DNA纯度和产率完全满足百合ISSR-PCR扩增分析的要求,为百合属植物遗传多样性分析和品种分子鉴别等研究奠定了基础.     

芥菜种质资源的RAPD和ISSR分析

利用RAPD和ISSR标记对28份芥菜种质资源进行遗传多样性分析,20个RAPD引物共扩增出162条清晰的谱带,其中140条显示多态性,平均每个引物扩增出7.0条多态性谱带.18个ISSR引物共扩增出143条清晰的谱带,其中多态性谱带124条,平均每个引物扩增出6.9条多态性谱带.基于RAPD和ISSR两种标记,利用UPGMA分别构建了28份芥菜资源的聚类树状图.结果表明,RAPD和ISSR分别聚类以及两种标记混合聚类均将28份芥菜种质分为3类:第Ⅰ类群中包括了15份种质;第Ⅱ类群中包括了9份种质;第Ⅲ类群中包括了4份种质.     

一种高质量枇杷基因组DNA提取方法

针对枇杷叶片富含多糖、多酚及其它次生代谢物质的特点,采用改良CTAB法,通过对抽提液、沉淀液和解离缓冲液进行逐步筛选,对其基因组总DNA进行提取,并对DNA进行电泳检测、含量测定和ISSR分析。结果表明:该方法从‘大五星’枇杷幼叶、成熟叶片、花药、组培苗,与幼果中的胚珠,以及栎叶枇杷的幼叶与成熟叶片7种材料提取的基因组总DNA纯度和完整性都较好,OD260/OD280值均在1.8~2.0之间,无降解现象,RNA去除干净,能被限制性内切酶完全消化;其ISSR分析条带清晰,多态性好,表明此方法提取的枇杷基因组总DNA质量较高。     

黄瓜种子人工老化过程中生理生化变化研究

为探明黄瓜种子活力下降和种子老化过程中生理生化变化规律,采用高温高湿老化法,研究了黄瓜种子老化过程中的一系列生理生化变化.试验结果表明,随着老化时间延长,黄瓜种子发芽势、发芽率和发芽指数呈下降趋势,种子浸出液相对电导率和丙二醛(MDA)含量升高,种子脱氢酶活性、过氧化物酶(POD)活性以及可溶性蛋白含量下降.细胞膜脂质...     

莴笋种子人工老化及膜脂过氧化研究

莴笋是菊科的一年生或二年生蔬菜。其种子一般于 5月采收 ,8月～ 1 1月播种 ,必须经过一段时间的贮藏。贮藏过程中要经历高温高湿季节 ,容易老化引起活力下降 ,降低种子的播种品质。本试验采用高温高湿人工老化的方法对莴笋种子进行处理 ,通过测定莴笋种子人工老化前后的种子活力指数 ,SOD(超氧化物歧化酶 )、POD(过氧化物酶 )活性及种子中MDA(丙二醛 )的含量 ,研究莴笋种子人工老化过程中活力变化及膜脂过氧化作用。1　材料与方法1 .1　材料由重庆科光种苗有限公司提供的同年产的3个莴笋品种种子 (尖叶、二白皮、挂丝红 )。1 .2　方法…     

果梅基因组DNA提取方法的比较及ISSR分析

以果梅品种鸳鸯梅、皇后梅和肖山选的幼嫩叶片为试材,提取果梅的DNA.针对果梅组织细胞体内含有较多的酚类、糖类及萜类等次生代谢物质的特点,采用传统的CTAB法、改良的CTAB法和改良的SDS法提取果梅基因组DNA,并比较其提取效果.结果表明:改良的CTAB法可获得高质量、高得率的基因组DNA,OD260/280比值在1.80左右.通过基因组DlNA-ISSR分析,完全满足试验要求.并进一步对改良的CTAB法的关键步骤作出具体的分析讨论.     

人工老化和PEG渗调修复对黄瓜种子浸泡液电导率及种子萌发的影响

采用人工老化不同时间（1-13 d）后25%PEG渗调修复24 h的黄瓜种子,测定2种条件下种子浸泡液电导率的变化和种子萌发情况。测定结果显示,老化时间越长,老化种子浸泡液的电导率越大,种子的发芽率、简化活力指数和活力比减小;PEG渗调后,其电导率均下降,简化活力指数和活力比都有所提高,但是发芽率变化不大。因此,PEG处理老化种子可以一定程度上修复细胞膜,降低膜的通透性,促进种子的萌发。     

ISSR分子标记分析杏鲍菇菌株遗传差异研究

试验应用ISSR技术分析了杏鲍菇生产性菌株的DNA序列多态性,从20个引物中筛选出11个ISSR引物对12个杏鲍菇生产性菌株基因组DNA进行PCR扩增。结果表明,这些杏鲍菇菌株遗传相似系数为0.68～1.00。采用平均分类法UPGMA分析表明,在遗传相似系数为0.83处可将这12个杏鲍菇生产性菌株分成3类。     

蕹菜人工种子研究

以蕹菜（ＩｐｏｍｏｅａａｑｕａｔｉｃａＦｏｒｓｋ．）小叶品种带芽节段为繁殖体，用４％海藻酸钠（加入ＭＳ基本培养基及３％蔗糖）和２％氯化钙包裹制作人工种子。结果表明，较佳繁殖体的腋芽长度为０．５～３ｍｍ的带芽节段；人工种子在ＭＳ琼脂培养基上的萌发率达引．０２％，在营养土中的成苗率为２７．５９％，幼苗移栽成活率１００％；低温（４±１℃）贮藏３０、６０和９０天后，萌发率分别为４２％、２６％和１８％。     

苹果柱型基因的ISSR分子标记研究

 以普通型苹果品种‘富士’和柱型苹果‘舞姿’以及其杂交后代的柱型与非柱型实生苗为试材, 建立了苹果的ISSR ( Inter-Simple Squence Repeat polymorphic DNA) 分子标记体系, 并将ISSR 标记用于苹果柱型基因Co 的遗传分析。结果表明, 在20μL 反应体系中各组分的用量为Taq DNA 聚合酶1U、Mg²⁺ 的浓度为2.5 mmol·L^-1 、模板DNA 用量20 ng、引物浓度0.2μmol·L - 1及退火温度52 ℃, 80 %引物具有良好的扩增能力。调整模板DNA 的用量、引物浓度及退火温度能够优化苹果ISSR-PCR 扩增体系。从所筛选的65 个引物中获得了35 个ISSR 标记, 其中33 个标记呈现1∶1 分离, 可用于苹果柱型基因的遗传分析。     

青霉素对老化雪里蕻种子发芽及幼苗生长的影响

研究了0～500 mg/L青霉素溶液对常规和老化雪里蕻种子发芽及幼苗生长的影响.研究结果表明,不同浓度的青霉素溶液对雪里蕻种子的发芽指数、活力指数和幼苗鲜干质量的影响达到极显著水平,对雪里蕻种子发芽和幼苗生长有促进作用.同时也表明不同浓度青霉素对雪里蕻老化种子活力恢复和提高有改进作用.其中300 mg/L青霉素处理的老...     

基于ISSR标记的江西野生寒兰居群遗传多样性研究

采用ISSR分子标记对江西省主要山脉12个野生寒兰居群共185个体进行遗传多样性和群体遗传结构研究。结果表明:12条ISSR引物共扩增出123个条带,其中多态性条带97个,多态性条带百分率(PPB)为78.9%。12个寒兰居群在物种水平上的遗传多样性较高,群体总观测等位基因数(N_a)为1.7967,有效等位基因数(N_e)为1.4461,N_ei’s基因多样性(H_e)为0.2649,Shannon’s信息多样性指数(I)为0.3995;在居群水平上遗传多样性较低,PPB平均值为43.97%,N_a平均值为1.4397,N_e平均值为1.2478,H_e平均值为0.1462,I平均值为0.2204;遗传分化系数(G_(ST))为0.4415,居群间基因流(N_m)为0.6325,表明居群内的遗传分化大于居群间的遗传分化;UPGMA聚类结果显示12个寒兰居群可聚为两支,第一支由资溪、武夷山大叶、武夷山小叶、崇义小叶、靖安、宜丰、井冈山、邵武大叶和邵武小叶9个居群组成;第二支由石城、安远和崇义大叶3个居群组成,聚类结果没有呈现出山脉分布的特点;Mantel检验结果表明遗传距离和地理距离之间无显著相关性(r=0.3791)。     

ISSR标记在芋遗传多样性研究中的应用前景

ISSR是在SSR基础上发展起来的一种分子标记技术,兼具SSR、RAPD、RFLP、AFLP等分子标记的优点。对运用形态学和分子生物学手段研究芋的遗传多样性进展进行了综述,并对ISSR分子标记技术在芋种质资源遗传多样性和亲缘关系、种质资源鉴定和指纹图谱构建、基因定位和分子标记辅助选择等方面的应用前景做出了分析和展望。