黄瓜老化种子基因组DNA的损伤与修复的RAPD研究

应用RAPD技术对人工老化和PEG处理的黄瓜种子进行扩增多态性DNA分析.建立了黄瓜种子基因组DNA的损伤及其修复的RAPD指纹图谱.在92条引物中有22条可应用于老化种子的研究.16条可应用于PEG处理种子的研究,并从中找出了6条引物S190、S300、S359、S475、S1140、S2144用来比较黄瓜老化种子及其修复的RAPD扩增带型的变化.结果发现,人工老化处理的黄瓜种子的DNA带减少甚至消失.而PEG渗调修复后的黄瓜老化种子DNA带重新出现或者与对照基本相同,从而建立了黄瓜老化种子基因组DNA的损伤与修复的RAPD指纹图谱.     

黄瓜种子的人工老化及基因组DNA的提取

在模拟高温(40℃)、高湿(RH 100%)条件下,研究了人工加速老化的黄瓜种子生活力与活力指标的变化,并分别提取老化程度不同的黄瓜种子基因组DNA(老化时间分别为1～15 d)进行质量检测.研究结果表明,黄瓜种子经老化处理后,DNA的量没有明显差异,但是DNA的分子量大小随老化程度的增加有明显下降的趋势.说明黄瓜种子的基因组DNA在人工老化的过程中发生了一定的降解,DNA受到了某种程度的损伤.老化时间越长,DNA损伤越严重.     

芥菜种质资源的RAPD和ISSR分析

利用RAPD和ISSR标记对28份芥菜种质资源进行遗传多样性分析,20个RAPD引物共扩增出162条清晰的谱带,其中140条显示多态性,平均每个引物扩增出7.0条多态性谱带.18个ISSR引物共扩增出143条清晰的谱带,其中多态性谱带124条,平均每个引物扩增出6.9条多态性谱带.基于RAPD和ISSR两种标记,利用UPGMA分别构建了28份芥菜资源的聚类树状图.结果表明,RAPD和ISSR分别聚类以及两种标记混合聚类均将28份芥菜种质分为3类:第Ⅰ类群中包括了15份种质;第Ⅱ类群中包括了9份种质;第Ⅲ类群中包括了4份种质.     

基于ISSR不同繁殖方式半夏的遗传多样性研究

以半夏人工种子苗、组培苗和实生苗为试材，采用ISSR分子标记方法，研究了不同繁殖方式半夏的遗传多样性，以期为促进半夏规模化生产提供参考依据。结果表明：从18条引物中筛选出8条多态性较好的ISSR引物，共扩增出条带109条，多态性百分比75%。Nei′s基因多样性范围为0.097 6～0.748 0,大小按顺序排列为人工种子>大田>组培；Shannon多样性指数范围为0.108 1～0.348 2,大小按顺序排列为大田>组培>人工种子；3种繁殖方式之间存在有38.03%的遗传分化；对不同繁殖方式半夏之间的遗传距离分析发现，组培半夏和大田半夏的亲缘关系比人工种子和大田半夏的更接近；聚类分析显示，人工种子半夏和组培半夏聚为一类；大田居群不同叶型遗传多样性分析，芍药叶型和桃叶型半夏亲缘关系最为接近，五叶半夏遗传分化最强。因此，人工种子半夏的基因多样性比组培及大田半夏的基因多样性丰富，半夏人工种子比组培苗更适合用于大田实际生产。     

甘蓝种子的人工老化及其生物学效应

以"强力50"甘蓝种子为试材,研究了3种不同人工老化方式(高温高湿老化法、甲醇老化法、热水老化法)处理不同时间后对甘蓝种子的萌发特性和相对电导率、可溶性糖含量、可溶性蛋白质含量以及丙二醛含量的影响,以期为采用最合适的人工老化条件提供参考依据。结果表明:3种老化方式均显著降低了甘蓝种子的发芽率、发芽势、发芽指数和活力指数,显著延长了平均发芽天数,且影响程度随着处理时间的延长而增大,其中甲醇老化法和热水老化法对甘蓝种子发芽指标影响的变化幅度更大;3种老化方式均使甘蓝种子浸出液的相对电导率显著增大,显著降低了甘蓝种子的可溶性糖、可溶性蛋白质和丙二醛含量。种子发芽指标和生理指标的相关性分析结果表明,各项种子发芽指标和相对电导率、可溶性蛋白质含量、可溶性糖含量以及丙二醛含量均显著相关,同时分析了不同人工老化方式引起甘蓝种子活力下降的原因。     

利用刃天青试剂快速检验普通白菜种子活力的研究

为了探索简单、快速、非破坏性检测普通白菜种子活力的方法,以苏州青、上海青种子为试材,44℃条件下人工老化处理0、2、4、6 d,测定种子活力指标及刃天青浸泡液颜色变化、吸光度,并进行相关性分析。结果表明:2个普通白菜品种的种子活力变化趋势相同,均随着种子老化程度的增加发芽率、发芽指数、活力指数明显下降;随着种子老化程度的加剧,刃天青浸泡液颜色从蓝色到粉色再到无色,吸光度亦明显下降;老化种子的发芽率与刃天青浸泡液吸光度、蓝色孔比例呈极显著正相关,相关系数均在0.96以上;老化种子的活力指数、发芽指数与刃天青浸泡液吸光度呈显著或极显著正相关。     

催芽处理对芥菜种子萌发的影响

芥菜是闽西北冬季种植的主要蔬菜品种之一，一般在8月以后种植，近几年随着高海拔山区（海拔800m）蔬菜基地的建立，芥菜播期提前。芥菜种子存在一定的休眠期，提前播种，没有突破休眠期，往往造成芥菜种子发芽率偏低，给生产造成损失。芥菜种子休眠与种子干燥程度、晒种方法、贮藏条件有关。一般芥菜收种后阴干，种子休眠期很短；而收种后晒干，种子出现明显的休眠。通过催芽处理，打破休眠，提高发芽率，为高海拔山区提前播种生产具有重要意义。     

芥菜类蔬菜种子休眠破除技术的研究

采用常温、低温和变温处理的方法对5个芥菜变种开展了种子休眠敏感性试验,试验结果表明,在各芥菜变种材料开花期和采收期一致的情况下,以芥菜完成后熟(2017年采收)的种子为对照(CK),常温下进行种子发芽率测试,结球芥菜、茎瘤芥菜和大头菜无休眠现象,大叶芥菜17W170与分蘖芥菜17W306与各自对照间有显著差异;具休眠现象的芥菜种子,低温3 d处理及干燥种子变温处理可明显提高芥菜类种子发芽率。因此,芥菜类蔬菜不同变种存在不同程度的休眠,而低温和变温处理是打破芥菜类蔬菜种子休眠的实际有效方法。     

桦褐孔菌菌株遗传多样性的ISSR分析

应用ISSR(inter-simple sequence repeat)分子标记技术对21株不同来源的桦褐孔菌(Inonotusobliquus)菌株进行DNA指纹图谱分析,结果表明:从60条引物中筛选出11条ISSR引物对桦褐孔菌基因组DNA进行了ISSR-PCR扩增,共扩增出DNA谱带183条,其中多态性谱带169条,多态位点百分率为92.3%,遗传相似系数变化范围为0.605～0.880。在遗传相似系数为0.763时,可将21个桦褐孔菌菌株划为6大类群,菌株聚类结果与菌株的地理分布有关。     

大白菜种子人工老化及劣变的生理生化分析

研究了大白菜种子人工老化过程中所发生的一系列生理生化变化。结果表明：随着种子老化加深,种子活力指数、ＰＯＤ、ＳＯＤ、脱氢酶、酸性磷酸酶、脂肪酶活性逐渐降低,ＭＤＡ及芥子碱含量逐渐增加,且品种间有差异。认为大白菜种子人工老化及劣变的主要机制在于膜过氧化作用加剧。     

Assessment of genetic purity of tomato (Lycopersicon esculentum L.) hybrid using molecular markers

Three DNA molecular marker systems, RAPD, ISSR and SSR, were used to test seed genetic purity of two commercial hybrid tomato (Lycopersicon esculentum L.) cultivars ‘Hezuo 903’ and ‘Sufen No. 8’. Genomic DNA from the two F₁ hybrid cultivars and their corresponding parental lines was screened with 218 RAPD decamer primers, 54 ISSR primers and 49 SSR primers. Among the 321 primers, 4 primers for ‘Hezuo 903’ and 3 for ‘Sufen No. 8’, which could produce both female and male parent-specific markers, were selected for testing the genetic purity. A total of 210 hybrid individuals of each cultivar were analyzed using the identified primers. The combined results of the marker analysis showed that eight of the 210 F₁ plants in ‘Hezuo 903’ and 13 of 210 in ‘Sufen No. 8’ were false hybrids, and the overall genetic purity of the two F₁ hybrid seed lots was 96.2 and 93.8%, respectively. This study showed that RAPD and SSR markers could provide a practical and efficient tool in quality control of the tomato commercial hybrid seeds.     

钙对根际低氧胁迫下黄瓜幼苗根系呼吸代谢的影响

 采用营养液水培, 研究了根际低氧胁迫下Ca²⁺对两个耐低氧能力不同的黄瓜品种根系呼吸代谢的影响。结果表明: 与耐低氧能力较弱的‘中农8号’相比, 耐低氧能力较强的‘绿霸春4号’根系LDH活性增加幅度较低, 乳酸含量较少, ADH活性增加幅度较大, SDH和IDH活性降低幅度较小。低氧胁迫下, 营养液加钙处理能够提高根系SDH、IDH和ADH活性, 降低LDH活性和乳酸含量; 而低氧缺钙处理表现出相反的结果。这表明, 低氧胁迫下, Ca²⁺能提高根系乙醇发酵能力, 降低乳酸发酵, 使植物保持有氧呼吸代谢, 从而缓解低氧胁迫对植株的伤害。     

五个野生木耳属菌株的ISSR分析

以7个栽培菌株为参照,采用ISSR分子标记技术对5个野生木耳属菌株进行分析,使用NTSYSpc2．1生物软件对12个供试菌株进行聚类分析,构建系统树。试验筛选出了11个扩增谱带清晰、多态性好的ISSR引物,共扩增出78条清晰易辨的多态性谱带。聚类分析结果表明,利用ISSR技术可将全部供试材料区分开,遗传相似系数变异范围为0．108~0．822,在相似系数为0．51时,12个菌株聚为6个群,其中5个野生菌株各自聚为不同类群,遗传差异较大。     

山楂（Crataegus pinnatifida Bge.)遗传多样性的RAPD和ISSR标记分析

 利用RAPD和ISSR标记对35份山楂（Crataegus pinnatifida Bge.）资源进行了DNA多态性分析。12个RAPD引物共扩增出110条清晰的谱带,其中89条显示多态性,平均每个引物扩增出7.4条多态性谱带。13个ISSR引物共扩增出110条清晰的谱带,其中94条显示多态性,平均每个引物扩增出7.2条多态性谱带。基于RAPD和ISSR标记,利用UPGMA分别构建了35份山楂资源的聚类树状图。距离系数分别为0～0.62（RAPD）和0～0.64（ISSR）,表明山楂具有较高的遗传多样性。     

ISSR分子标记分析杏鲍菇菌株遗传差异研究

试验应用ISSR技术分析了杏鲍菇生产性菌株的DNA序列多态性,从20个引物中筛选出11个ISSR引物对12个杏鲍菇生产性菌株基因组DNA进行PCR扩增。结果表明,这些杏鲍菇菌株遗传相似系数为0.68～1.00。采用平均分类法UPGMA分析表明,在遗传相似系数为0.83处可将这12个杏鲍菇生产性菌株分成3类。     

香榧品种遗传变异与品种鉴定的ISSR分析

利用ISSR方法对香榧本地9个实生品种和8个优良无性系的遗传变异和品种间的遗传关系进行了分析,从50个随机引物中筛选出12条多态性引物用于正式扩增,共扩增出104个DNA片段,其中88个片段为多态性扩增片段,占总扩增片段的84.6％。根据ISSR引物的扩增图谱,确定部分供试品种的特异条带。基于Nei's遗传距离分析,利用UPGMA法构建了分子树状图。聚类结果把供试的香榧9个实生品种和8个优良无性系分为两大组,第一组包括大圆榧、米榧、旋纹榧、獠牙榧、芝麻榧、落霜榧、象牙榧,第二组包括小圆榧、茄榧和细榧优良无性系。     

我国南方长茄种质资源的ISSR标记分析

从分子水平用ISSR标记法对南方长茄资源的遗传多样性进行分析,从100个ISSR引物中共筛选出12个多态性明显、条带清晰、反应稳定的引物,对57个样品DNA共扩增出116条谱带,平均每个引物扩增出9·67条带,其中多态性位点84个(71%)。品种间遗传相似系数在0·51~0·98之间,表明茄子栽培种内品种间的遗传基础相对较狭窄。利用UPGMA聚类分析,能将57个南方长茄品种划分为6个类群,类群的划分与地方来源没有很大的关系。     

Genetic diversity of ash gourd [Benincasa hispida (Thunb.) Cogn.] inbred lines based on RAPD and ISSR markers and their hybrid performance

Ten inbred lines of ash gourd [Benincasa hispida (Thunb.) Cogn.] were crossed to produce 45 F₁ hybrids (without reciprocal) which were evaluated along with the parents for 20 growth- and yield-related traits, in a replicated field trial. High level of heterosis was observed among the hybrids for most of the traits examined, including yield. These inbred lines were analysed by using 42 RAPD primers those produced 282 DNA marker bands. A total of 130 RAPD markers were obtained with a mean of 3.1 per primer, which in combination discriminated all the inbreds from each other. Pair-wise genetic distance measurements ranged from 0.07 to 0.31, suggesting a wide genetic diversity for these inbreds. These inberds were also analysed with five ISSR primers of which four were informative. Twenty-six ISSR marker bands were generated of which 11 were polymorphic with an average of 2.80 per primers. The percentage of polymorphic bands produced were higher in ISSR markers (>80%) than generated through RAPD markers (46%). Although the results indicated significant positive correlations of genetic distance with hybrid performance and heterosis, the RAPD based genetic distance measures and use of limited ISSR markers in this present study could not effectively predict hybrid performance in this crop. The genetic variation among ash gourd inbred lines examined, herein, defined a marker array (combined ISSR and RAPD) for the development of a standard reference for further genetic analyses, and the selection of potential parents for predicting hybrid performance and heterosis.     

羊蹄甲属3种园艺树种分子鉴定及亲缘关系的ISSR分析

 利用ISSR-PCR方法对香港羊蹄甲属(Bauhinia) 中最常见3种园艺树种: 红花羊蹄甲(B. purpurea) 、宫粉羊蹄甲(B. variegate) 和洋紫荆(B. blakeana) 的遗传变异进行了研究, 从74个ISSR引物中筛选出9个多态性引物用于正式扩增, 共扩增出80条DNA带, 平均每个引物扩增的DNA带的数目为8.88条, 多态性条带数目为55条, 占总条带数的68.8%。其中, 有8个引物扩增出差异条带和特异条带,并分别能准确地鉴定羊蹄甲属3个园艺树种。本研究的结果表明, ISSR - PCR的DNA电泳谱带在检测香港羊蹄甲(B. blakeana) 品种的真实性方面非常有用。同时, 通过对3个种扩增条带的叠加性进行分析, 证实了洋紫荆杂交起源的父母本为红花羊蹄甲和宫粉羊蹄甲。