香荚兰细细胞培养及产香兰素研究初报

香荚兰的幼茎在ＭＳ＋ＢＡ１μｇ＋ｍＬ＋ＮＡＡ５μｇ／ｍＬ培养基上培养４０ｄ,其表面形成白色,块状的愈伤组织。愈伤组织在ＭＳ＋２,４－Ｄ１μｇ／ｍＬ＋ＢＡ１μｇ／ｍＬ＋ＮＡＡ４μｇ／ｍＬ＋２．５％ｓｕｃｒｏｓｅ的半固体培养基上快速增殖培养。     

红麻韧皮纤维产量简易预测的研究

红麻株高（ｈ，ｃｍ）和基部离地面１０．０－１２．５ｃｍ部位的茎粗（ｄ，ｃｍ）是预测单株产量（ｙ，ｇ）可靠的性状。发现了ｙ＝０．１（ｄ／２）~２ｈ可估计单株干皮产量，ｙ＝０．０５６（ｄ／２）~２ｈ可估计单株纤维产量。该式简单易行，快速而较准确，可对不同类型品种各生长时期的单株和群体产量进行预测。在田间只要测量株高和茎粗，查看根据本公式编制的一本“红麻产量预测查对表”，便知其单株的干皮和纤维产量。     

红麻韧皮纤维产量简易预测的研究

红麻株高（ｈ，ｃｍ）和基部离地面１０．０－１２．５ｃｍ部位的茎粗（ｄ，ｃｍ）是预测单株产量（ｙ，ｇ）可靠的性状。发现了ｙ＝０．１（ｄ／２）＾２ｈ可估计单株干皮产量，ｙ＝０．０５６（ｄ／２）＾２ｈ可估计单株纤维产量。该式简单易行，快速而较准确，可对不同类型品种各生长时期的单株和群体产量进行预测。在田间只要测量株高和茎粗，查看根据本公式编制的一本“红麻产量预测查对表”，便知其单株的干皮和纤维产量。     

小麦幼穗离体培养一步再生全苗影响因素的初步研究

以京花 １ 号、晋 ２１４８、西安 ８ 号、豫麦 ３５ 号、豫麦 １８ 号、豫麦 ２５ 号和 Ａｌｏｎｄｖａｓ ７ 个不同小麦品种的幼穗进行离体培养,培养基与培养环境共分 ４ 种组合：① Ｍ Ｓ＋ Ｋ Ｔ １ ｍ ｇ／ Ｌ＋ ２,４－ Ｄ ０．５ ｍ ｇ／ Ｌ,照光 １１ ｈ／ｄ;② Ｎ６＋ Ｋ Ｔ １ ｍ ｇ／ Ｌ＋ ２,４－ Ｄ ０．５ ｍ ｇ／ Ｌ,照光 １１ ｈ／ｄ;③ Ｍ Ｓ＋ Ｋ Ｔ ０．２ ｍ ｇ／ Ｌ＋ ２,４－ Ｄ２ ｍ ｇ／ Ｌ,照光 １１ ｈ／ｄ;④ Ｍ Ｓ＋ Ｋ Ｔ １ ｍ ｇ／ Ｌ＋ ２,４－ Ｄ ０．５ ｍ ｇ／ Ｌ,照光 ２４ ｈ／ｄ。另在 Ｍ Ｓ＋ Ｋ Ｔ １ ｍ ｇ／ Ｌ＋２,４－ Ｄ ０．５ ｍ ｇ／ Ｌ 培养基中加入青霉素,使之成为含青霉素分别为 ５、１０、２０、４０、６０ 和 ８０ 万单位／ Ｌ 的系列培养基,以不含青霉素的培养基为对照,将豫麦 ２５ 号品种的幼穗分别培养于其中,照光 ２４ ｈ／ｄ。培养１０ 周后对各培养组合的材料进行观察统计。结果表明,组合处理①使 ７ 个小麦品种幼穗中的 ６ 个通过一步培养再生出全苗;在青霉素为 １０ 万单位／ Ｌ 的培养基中,豫麦 ２５ 号的幼穗也经一步培养再分化出全苗;而处理②、③、④均不能通过一步培养再分化出全苗。因此     

用酶联免疫吸附试验法检测印楝愈伤组织中的印楝素含量

用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ＤＡＳ－ＥＬＩＳＡ）检测印楝（ＡｚｄｉｒａｃｈｔａｉｎｄｉｃａＡ．Ｊｕｕｓｓ）愈伤组织中的印楝素含量,成功建立了ＤＡＳ－ＥＬＩＳＡ,以牛血清蛋白为载体,用二环己基碳二亚胺合成免疫原,制备抗血清,获得效价为１：２５６０,以辣根过氧化物酶为标记酶,用“碘酸盐酸氧化法”合成酶标抗体,使用包被抗体的最适浓度为５．０μｇ／ｍＬ,标记抗体浓度为２．５μｇ／ｍＬ,可测抗原最低浓度     

BN生长调节剂浸种和叶面喷施对冬小麦生长发育及产量的影响

应用 Ｂ Ｎ－ １、 Ｂ Ｎ－ ２生长 调节剂对 冬小麦播 前浸种 和孕穗 期叶面 喷施,有 显著的 促根 （０５～２１ 条／株 ）、促叶（１７３～６ ｃｍ ２ ／倒三叶）、扩源（０９～４８ ｇ／株）、增粒（０４～２２ 粒／穗）和增重 （０５～１２ ｍ ｇ／粒）作用,增产 ５０～５７３ ｋｇ／ｈ ｍ ２ ,以 Ｂ Ｎ－ １效果最佳,适宜的浸种和叶面喷施浓度均为 ８ ｍ ｇ／ｋｇ。     

湖南省茶园土壤养分丰缺指标及配方施肥

对湖南省３６个县（市）６７个茶场的１３６份茶园土样进行了肥力水平测定。结果表明：茶园土壤ｐＨ适宜，钾素较丰富。土壤有机质含量０～２０ｃｍ土层为（２．４±０．０９）％，２０～４０ｃｍ土层（１．６０±０．０６）％。８５％的土样０～２０ｃｍ土层有机质含量超过１．５％，３８％的土样超过２．５％；４９％的土样２０～４０ｃｍ土层的有机质含量超过１．５％。全氮含量０～２０ｃｍ土层为（０．１３３±０．００４）％，２０～４０ｃｍ土层为（０．１００±０．００３）％。碱解氮含量大于１００ｍｇ／ｋｇ土的土样占７６％，２０～４０ｃｍ占４５％。全磷含量低于０．１％的０～２０ｃｍ土层达５３％，２０～４０ｃｍ土层达６２％。速效磷含量低于１０ｍｇ／ｋｇ土的频率，两土层各为４６％和６５％，显示低磷土壤较多。代换性镁含量较低，茶园严重缺镁。依据调查结果，建立了茶园土壤主要养分与茶叶产量之间的数学模型，据此提出了茶园土壤养分的丰缺指标：产量在２２５０ｋｇ／ｈｍ２干茶的茶园土壤０～４０ｃｍ土层全磷（Ｐ２Ｏ５）含量＞０．１２％，碱解氮含量＞１４９ｍｇ／ｋｇ土，速效磷含量＞３２ｍｇ／ｋｇ土，速效钾含量＞１１０ｍｇ／ｋｇ土。通过试验，确定了４种主要土类适?     

多效唑对延缓龙眼枝叶生长的效应

用多效唑对龙眼东壁品种的夏梢、秋梢幼茎进行不同浓度（５００－３００μｇ／ｍｌ）喷洒，结果表明：１．枝梢节间长度缩短，仅为对照的１／２－１／５，且随多效唑浓度的增加，其效果更显；２．低浓度多效唑喷洒可增大叶面积，高浓度喷洒则相反。各处理叶片厚度均显增加；３．处理后的第１０天和第４０天测定其叶绿素含量比对照分别提高３８．０４％和３０．１９％，且光合速率加快，１０００μｇ／ｍｌ处理的为对照的１．７倍     

红麻植株形态,性状与其倒伏关系的研究

本文以Ａ１，Ａ２等五个红麻品种为材料，测试麻茎，骨的密度（比重），茎节间长，单位长度麻骨重，麻株重心，皮骨比值，叶柄与茎夹角，髓腔径和根重与麻株倒伏的关系。结果表明：Ａ１的麻骨密度０．１５１８ｇ／ｃｍ＾３最大，其次Ａ３为０．１４７３ｇ／ｃｍ＾３，分别比Ａ５高２１．７１％，１９．３４％，茎和骨密度与品种倒伏显著正相关（ｒ＝０．９３１，０．９００）。Ａ２茎节间距平均４．５６１厘米最短；叶夹角小，平均比     

胡椒叶片营养诊断采样方法的研究

以印尼南榜为材料，进行胡椒叶片营养诊断采样方法研究。结果表明：当叶片所带花穗出现绿色小果占其长度１／３－１／２时，该叶片完全稳定（叶片从出鞘到完全稳定需要３０￣３５ｄ），从叶序算，它是倒数第２片时，此时倒数第１片嫩叶长３．０￣４．５ｃｍ、宽２．０￣２．５ｃｍ。以位于植株中部、阳面、短枝上的带花穗完全稳定叶为最佳采样叶；一年中以３￣４月和９￣１０月为采样时间。一天中除１２：００－１４：００时外，其它     

草海桐链格孢叶斑病菌生物学特性及杀菌剂的室内筛选

西沙群岛草海桐链格孢叶斑病发生普遍,前期笔者鉴定了该病的病原菌为长柄链格孢菌（Alternaria longipes）。为进一步明确该病原菌的生物学特性及其对杀菌剂的敏感性,采用生长速率法对长柄链格孢菌的生物学特性进行了初步研究,并测定了苯醚甲环唑等13种杀菌剂对该病原菌的室内毒力。结果表明：该菌菌落最适生长培养基为马铃薯葡萄糖固体培养基（PDA）,其次是马铃薯蔗糖固体培养基（PSA）;适宜生长温度范围为25~30℃,最适生长温度为28℃;适宜生长pH为5.0~7.0,最适pH为6.0;最佳碳源为蔗糖,而果糖不利于菌落生长;最佳氮源为甘氨酸,而尿素不利于菌落生长;光照时间对菌落生长无显著影响。室内毒力测定表明,苯醚甲环唑水分散粒剂的抑菌效果最好,EC₅₀值为0.15 μg/mL,其次是氟硅唑乳油、己唑醇悬浮剂和戊菌唑乳油,其EC₅₀值分别为0.37、0.44和0.51 μg/mL,嘧菌酯悬浮剂和多菌灵可湿性粉剂的抑菌效果最差,EC₅₀值均大于3000 μg/mL。     

茶丽纹象甲白僵菌广东分离株的鉴定及生物学特性研究

通过形态学鉴定和rDNA-ITS序列分析,明确了从广东英德茶园中采集到的一株寄生茶丽纹象甲的白僵菌为球孢白僵菌,并命名为Bb1-1。为明确该菌株的生防潜力,以本实验室保存的2株茶丽纹象甲高毒力球孢白僵菌菌株（XJBb3005和XJBb3008）为参考菌,研究了菌株Bb1-1的生长速率、产孢量、孢子萌发率、耐热力和抗紫外能力等生物学特性,并测定了该菌株在25℃、29℃和32℃下对茶丽纹象甲的毒力。结果表明,3个菌株的生长速率、孢子萌发率和抗紫外能力没有明显的差异;3个菌株产孢量大小顺序为XJBb3005>Bb1-1>XJBb3008;但Bb1-1具有最强的耐热力。在25℃下,3个菌株对茶丽纹象甲成虫的累积校正死亡率之间差异不显著,都超过93.94%;但在高温（29℃和32℃）下,菌株Bb1-1对茶丽纹象甲的杀虫毒力优于两个参考菌株,处理7βd累计校正死亡率分别为90.91%和80%,LT₅₀分别为3.83βd和5.28βd。鉴于菌株Bb1-1耐热力较强,且在高温下对茶丽纹象甲成虫具有较好的杀虫毒力,将在今后该虫的生物防治中发挥重要的作用。     

防治大豆疫霉根腐病的药剂筛选

采用实验室测定和温室盆栽方法研究了8种杀菌剂对大豆疫霉菌(Phytophthora sojae)菌丝生长和繁殖的影响及它们对大豆疫霉根腐病的接种防治效果。结果表明,50%烯酰吗啉可湿性粉剂、97%甲霜灵可湿性粉剂和58%甲霜灵锰锌可湿性粉剂对大豆疫霉菌的菌丝生长和繁殖具有很好的抑制作用,该3种药剂能够明显抑制菌丝生长,抑制中浓度(EC50)值依次为0.1208μg/mL、0.1563μg/mL和0.3603μg/mL。浓度为10.0μg/mL时,对孢子囊形成和萌发的抑制率均为100%,对卵孢子形成抑制率分别为64.5%、59.5%和55.0%。接种防治试验结果显示,以上3种药剂喷药后7d防效依次为73.4%、68.8%和60.5%,其余的5种杀菌剂防治效果相对较差。     

广东花生黑腐病病原菌鉴定及防治药剂的室内毒力测定

花生黑腐病是花生的重要病害,对生产造成严重影响,被列为我国进境植物检疫性病害。为明确花生黑腐病的病原菌种类和筛选有效防治药剂,采用形态学特征与分子生物学技术相结合的方法,对花生黑腐病害进行了病原菌鉴定,同时采用菌丝生长速率法测定了8种杀菌剂对花生黑腐病菌的抑制作用。结果表明：花生黑腐病害的病原菌为冬青丽赤壳Calonectria iliciola。8种杀菌剂室内毒力测定结果显示,10%戊唑醇EC对花生黑腐病菌的毒力最强,EC₅₀值为1.12 μg/mL;300 g/L苯甲·丙环唑EC、29%吡萘嘧菌酯SC、25%咯菌腈SC、15%吡唑嘧菌酯SC和22.5%啶氧菌酯SC对花生黑腐病菌也有较好的抑制作用,EC₅₀均低于10 μg/mL;30%精甲恶霉灵的抑制作用最差,EC₅₀值为76.71 μg/mL。以上研究结果可为花生黑腐病的防治提供理论依据。     

咖啡腐皮镰孢黑果病病原鉴定及其生物学特性测定

本文针对云南咖啡园在雨季出现的一种咖啡果实变黑的黑果病害进行病原菌分离,获得CPE5和CPE12菌株。这2个菌株在PDA培养基上菌落呈圆形,毡状,菌丝体灰白色,表面稀疏,背面出现浅黄色色素。分生孢子具1~8个隔膜,长6.08~65.3 μm,宽2.76~9.03 μm。小型分生孢子呈肾形,大型分生孢子镰刀型。致病性测定表明,无论是接种健康新鲜的咖啡离体叶片还是果实,产生的症状以及再分离后获得的分生孢子形态特征均与初始接种菌株的一致。分子鉴定结果表明,无论是ITS、β-tubulin、TEF、28S rDNA单个基因聚类树,还是ITS-TEF加合基因序列聚类结果均一致,表明菌株CPE5与CPE12均属于腐皮镰孢（Fusarium solani）。这是国内腐皮镰孢危害咖啡果实的首次报道。病原菌的生物学特性研究表明,咖啡腐皮镰孢菌最适宜生长的培养基是PDA和玉米粉琼脂培养基;最适生长温度为28 ℃;完全光照有利于病原菌的生长。病原菌对碳源甘露醇以及氮源牛肉浸膏、甘氨酸、尿素利用率最高;菌株在75 ℃,10 min条件下即可致死。咪鲜胺锰盐和戊唑醇2种药剂的EC₅₀值分别为1.8352 μg/mL和1.4826 μg/mL,对菌株CPE5菌丝体生长具有十分显著的抑制效果。     

甘蔗叶堆肥中3种常用杀菌剂的降解动态研究

为杀灭甘蔗叶残留病原菌且不对农田土壤造成药害,实现甘蔗叶的健康安全还田,开展了甘蔗叶堆肥中常用3种杀菌剂残留动态研究。选择多菌灵、戊唑醇、吡唑醚菌酯3种常用杀菌剂添加到甘蔗叶堆肥中,设置3个浓度5、20、50μg/g,分别在40、50、60℃下进行堆肥;首先优化液质联用参数,建立3种杀菌剂同时检测的方法,然后对降解动态进行研究。结果表明,3种杀菌剂在0.005~0.2μg/m L范围内线性关系良好,R20.999,0.1、2.0、40.0μg/g 3个浓度水平的加标回收率均在80%~105%之间,RSD10%,方法准确性和精密度良好。相同初始添加浓度时,3种杀菌剂在40℃时降解最快,表现为40℃50℃(60℃);同等温度下,当初始添加量增加时,降解速率减慢,相同初始添加浓度下降解速率随温度变高先减慢后加快;改变初始添加量对降解速率的影响更大。多菌灵降解速率明显快于其他两种杀菌剂,初始添加浓度20μg/g时半衰期为18 d左右,可以添加用来堆肥杀菌;戊唑醇和吡唑醚菌酯初始添加浓度20μg/g时半衰期大于50 d。     

配体交换色谱手性流动相法拆分和定量茶氨酸对映体

建立了配体交换色谱手性流动相法拆分茶氨酸对映体的方法。采用Polaris C₁₈柱;流动相为L-脯氨酸：Cu²⁺（摩尔比）为2:1,Cu²⁺浓度为0.5βmmol/L,pH6.8,甲醇的加入体积比为2%;波长254βnm;流速0.9βml/min;柱温30℃。L-茶氨酸的进样量在0.09542βμg~4.241βμg范围内峰面积与进样量之间线性关系良好,回收率在97.45%~100.4%之间;D-茶氨酸的进样量在0.08486βμg~4.243βμg范围峰面积与进样量之间线性关系良好,回收率在97.07%~100.1%之间。该方法通用,准确。     

球孢白僵菌Bbchitinase 1和Bbchitinase 2在侵染宿主过程中的不同作用

球孢白僵菌（Beauveria bassiana）在宿主昆虫体壁穿透和体内定植过程中分泌了Bbchitinase 1和Bbchitinase 2两种胞外几丁质酶,但二者的作用分工尚不明确。本文通过菌株胞外总几丁质酶活性与侵染毒力的相关性分析,Bbchitinase 1和Bbchitinase 2基因表达水平与侵染毒力的相关性分析,Bbchitinase 1和Bbchitinase 2的生物信息学分析以及在侵染过程中的表达模式分析,以期明晰Bbchitinase 1和Bbchitinase 2在菌株侵染宿主过程中的作用分工。结果表明,菌株胞外几丁质酶活性与侵染毒力呈正相关,但Bbchitinase 1和Bbchitinase 2表达水平不同。菌株间Bbchitinase 1表达水平与菌株侵染毒力（MMT和LT₅₀）呈显著正相关,而Bbchitinase 2表达水平却与侵染毒力不相关。生物信息学分析结果显示,Bbchitinase 1和Bbchitinase 2具有显著的结构和功能差异,可能结合不同的配体蛋白,参与不同的代谢过程。表达模式分析结果表明,Bbchitinase 1和Bbchitinase 2基因在侵染宿主过程中均上调表达;但Bbchitinase 1仅在侵染家蚕的体壁穿透阶段显著上调表达,而Bbchitinase 2在芽生孢子生成阶段和菌丝大量增殖阶段显著上调表达。以上研究结果说明,Bbchitinase 1可能参与菌株侵染早期的侵入钉形成和体壁穿透过程,与侵染毒力呈正相关;而Bbchitinase 2可能参与侵染过程中的芽生孢子发育和菌丝大量增殖代谢调控。本研究明晰了球孢白僵菌不同几丁质酶在侵染过程中的作用分工,建立了以Bbchitinase 1基因表达水平判定菌株毒力的数学模型,为高毒、高稳定性球孢白僵菌生防菌株的筛选提供重要科学依据,对提升绿色生态防治应用效果具有重要意义。     

QuEChERS/超高效液相色谱-串联质谱法同时测定香蕉中8种植物生长调节剂残留

为了测定植物生长调节剂在香蕉中的残留,本研究建立了 QuEChERS 结合超高效液相色谱-串联质谱法同时测定香蕉中8种植物生长调节剂残留的分析方法。以1%乙酸-乙腈（V/V）为提取溶剂,样品前处理采用 QuEChERS 方法。以Agilent InfinityLab Poroshell 120 EC-C₁₈柱为分离色谱柱,甲醇和5 mmol/L 乙酸铵-0.1%甲酸缓冲溶液为流动相,0.25 mL/min的流速梯度洗脱,10 min内可实现8种目标待测物分离。8种目标待测物经超高效液相色谱-串联质谱在选择反应监测模式下测定,基质匹配标准溶液外标法定量。结果表明,在5.0~100.0 μg/kg范围内线性良好,相关系数（r²）≥0.999;检出限（LODs）范围为0.03~0.6 μg/kg,定量限范围为0.10~2.0 μg/kg。在10、20、100 μg/kg 3个添加水平范围内,平均回收率在73.5%~107.2%之间,相对标准偏差（RSD）小于11%。本方法简便、快速、便捷、灵敏、准确,适用于香蕉中8种植物生长调节剂残留的测定。本方法的建立可为植物生长调节剂在其他果蔬中的残留检测提供参考。     

灌溉与绿肥对稻田土壤甲烷释放能力的影响

 通过稻田控水可迅速提高土壤Eh值，由-206 mV升至+38 mV，土壤水溶解甲烷含量由平均5.54降至0.25 μg/mL，而且复水后甲烷含量上升极其缓慢。在持续淹灌条件下溶解甲烷含量一直处于较高水平，其峰值达到12.12 μg/mL。稻田耕层各层次进行比较，土壤溶解甲烷含量随深度增加而逐渐上升，土壤0、 5、 10和15 cm的甲烷平均含量分别为1.11、 3.38、 4.53和6.00 μg/mL。