蓝莓贮藏期病原真菌的分离与鉴定

为明确云南省玉溪市蓝莓采后贮藏期引起果实腐烂的病原真菌种类,以采自澄江地区的蓝莓鲜果贮藏自然发病的果实为试验材料,采用组织分离法分离培养病原菌,经形态学观察和ITS rDNA(Internal transcribed spacer)区序列测定分析,对相关病原真菌进行了分类鉴定。结果表明:从采后贮藏过程中发生病害的蓝莓果实上分离到3株病原真菌,经鉴定3株真菌分别为枝孢菌属(Cladosporium)、链格孢属(Alternaria)和匍柄霉属(Stemphylium);该研究可为澄江地区蓝莓贮藏期腐烂病害的预防和控制及进一步深入研究提供一定的参考理论依据。     

蓝莓果实潜伏侵染病原真菌的分离与鉴定

以辽宁省蓝莓鲜果为试材,采用组织分离法分离潜伏侵染果实的病原真菌,通过形态学和分子生物学方法,对病原菌进行分类鉴定,研究了真菌的潜伏侵染状况,为指导蓝莓果实病害防治提供参考依据。结果表明:辽宁省蓝莓果实普遍存在真菌潜伏侵染现象,不同品种带菌率存在差异,‘M7’带菌率较高,"布里吉塔""爱国者""奥尼尔"和"南好"带菌率较低。从8个蓝莓品种中共分离鉴定出9种潜伏病原真菌,分别为互隔交链孢霉(Alternaria alternata)、细极链格孢菌(Alternaria tenuissima)、芽枝霉属(Cladosporiumsp.)、灰葡萄孢菌(Botrytis cinerea)、黑曲霉(Aspergillus niger)、嗜松青霉(Penicillium pinophilum)、茎点霉属(Phomasp.)、毛壳属(Chatetomiumsp.)和镰刀菌属(Fusariumsp.)。其中,互隔交链孢霉(Alternaria alternata)可在多个品种中分离,为蓝莓果实主要潜伏侵染病原真菌。另外,从蓝莓果实中分离到一株葡萄有孢汉逊酵母(Hanseniaspora uvarum),该酵母对互隔交链孢霉具有良好的抑制作用。     

南瓜烂果病病原菌的分离与鉴定

采后腐烂给南瓜生产带来巨大的经济损失。为明确山东省青岛胶州南瓜果实腐烂病的病原,采用分子生物学和形态学鉴定方法,依据柯赫氏法则,对病原菌进行分离和鉴定。结果表明,从发病南瓜果实上共分离出2种菌株;经鉴定,引起南瓜果实腐烂的病原菌分别为腐皮镰刀菌(Fusanrum solani)和匍枝根霉菌(Rhizopus stolonifer)。这是我国腐皮镰刀菌和匍枝根霉菌侵染南瓜果实的首次报道。     

葡萄柚贮藏期病原细菌的分离鉴定

为明确云南省元江地区"哈路比"葡萄柚贮藏期果实病原细菌的种类,为葡萄柚的长期贮藏保鲜提供理论参考依据。以采后葡萄柚果实为试材,于室温贮藏(温度18~22℃,湿度80%~90%),从新发病的葡萄柚果实的病健交界处获取分离材料。采用组织分离法分离培养病原菌,运用传统形态学鉴定、革兰氏染色进行初步鉴定;并采用分子鉴定法进行综合鉴定。试验通过组织分离法共分离出3株病原细菌,分别命名为Y-1、Y-2、Y-3。经致病性鉴定结果表明,菌株Y-3致病性最强;经传统形态学和16S r DNA序列分析比对综合鉴定,3株细菌分别隶属于2个系统发育分支,所测得细菌菌株Y-1与Serratia marcescens DSM30121T(AJ233431)相似性为99.23%;菌株Y-2与Enterobacter asburiae JCM6051T(AB004744)相似性为97.73%,菌株Y-3与Enterobacter cancerogenus LMG2693T(Z96078)相似性为97.23%。其结果明确了元江地区葡萄柚贮藏期病原细菌的种类有粘质沙雷氏菌(Serratia)和肠杆菌属(Enterobacter),云南省元江县"哈路比"葡萄柚贮藏期的优势致病细菌为肠杆菌属(Enterobacter),这为以后葡萄柚贮藏保鲜提供了一定的理论参考依据。     

红托竹荪腐烂病初探

近几年红托竹荪(Dictyophora rubrovolvata)腐烂病(rot disease)发生频繁,对采集的患病样品进行显微观察和病原菌分离,并对分离出的病原菌进行了分子鉴定和致病性研究。结果表明,在患病样品组织上分离到的细菌和其它真菌,优势菌株分别属于芽孢杆菌属(Bacillus sp.)细菌、肠杆菌属(Enterobacter sp.)细菌和伯克霍尔德菌属(Burkholderia sp.)细菌,并非致病菌,回接试验检测无致病性,初步推断出该病害不是由细菌或真菌侵染引起的。     

8种常见芽菜致病微生物的分离鉴定

对目前产业化程度较高的黄豆、黑豆、豇豆、萝卜、蕹菜、花生、黄秋葵、向日葵等8种芽菜患病植株上的致病微生物进行分离、纯化,共得到24株细菌菌株和8株真菌菌株;利用真菌ITS和细菌16Sr DNA通用引物,分别对分离得到的细菌和真菌基因组进行分子生物学鉴定。结果表明:24株细菌分属8个属,分别为克雷伯氏菌属(Klebsiella)、肠杆菌属(Enterobacter)、假单胞菌属(Pseudomonas)、不动杆菌属(Acinetobacter)、果胶杆菌属(Pectobacterium)、短稳杆菌属(Empedobacter)、戴尔福特菌属(Delftia)、从毛单孢菌属(Comamonas);24株细菌均为革兰氏阴性菌,除果胶杆菌属外,其余都不是典型的植物病原菌;其中不动杆菌属、肠杆菌属、克雷伯氏菌属和假单胞菌属的细菌出现在2种或2种以上芽菜上;另外4个属的细菌则只出现在1种芽菜上,呈现出寄主的专化性。8株真菌分属3个属,分别为镰刀菌属(Fusarium)、链格孢属(Alternaria)和根霉属(Rhizopus);其中根霉属和链格孢属的真菌分别只出现在萝卜芽菜和蕹菜芽菜上,其他6种芽菜上分离得到的真菌菌株均属于镰刀菌属。分离菌株回接试验结果表明,所有菌株均能对芽菜造成不同程度的腐烂症状,生产过程中环境微生物污染同样能致芽菜腐烂病发生。     

扩增核糖体DNA限制性分析(ARDRA)研究刺芹侧耳细菌病原菌

为分析刺芹侧耳(Pleurotus eryngii)工厂化栽培中发黄腐烂子实体的细菌组成,构建16SrDNA文库,利用限制性内切酶MspI和RsaI分别对随机克隆进行酶切筛选,并测定代表性克隆16SrDNA序列,BLAST分析结果表明刺芹侧耳子实体病状组织中存有两类菌群,分别为假单胞菌和芽孢杆菌属。同时,对刺芹侧耳子实体病状组织中的细菌进行分离培养、致病性测定、16SrDNA鉴定及BLAST分析,病原细菌与恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)的同源性较高,其作为引起刺芹侧耳工厂化栽培细菌性病害的病原菌在国内外尚属首次报道。     

短波紫外线(UV-C)结合冰温贮藏对蓝莓采后保鲜效果的影响

以蓝莓果实为试材,研究了5kJ·m~(-2) UV-C、冰温贮藏(-2±0.5)℃及其联合处理对蓝莓果实采后贮藏期间呼吸强度、失重率、腐烂率、超氧化物歧化酶(SOD)活性、抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性和苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性的影响。结果表明:与对照组(未处理蓝莓果实)相比,各处理组均能有效抑制蓝莓呼吸强度、失重率和腐烂率的上升,提高SOD、APX和PAL活性。其中,5kJ·m~(-2) UV-C和冰温贮藏(-2±0.5)℃联合处理对蓝莓果实的保鲜效果更显著。     

蓝莓采后病害病原菌分离鉴定及抑菌药剂筛选

以麻江蓝莓采后贮藏病果为试材,采用形态学、rDNA-ITS序列对比的方法,对病原菌的生物学进行鉴定,并通过离体试验的方法,研究了不同杀菌剂对蓝莓主要致病菌的室内毒力,以期为麻江蓝莓采后病害防控提供参考。结果表明:蓝莓采后腐烂病原菌菌株种类为灰葡萄孢菌(Botrytis cinerea)、青霉(Penicillium)、拟盘多毛孢(Pestalotiopsis cocculi)、香灰菌(Xylaria sp.)、木霉菌(Trichoderma longibrachiatum)、粪壳菌纲藻(Sordariomycetes sp.),其中灰葡萄孢菌(Botrytis cinerea)、青霉(Penicillium)、拟盘多毛孢(Pestalotiopsis cocculi)为主要致病菌。通过对青霉(Penicillium)室内毒力结果表明,10余种杀菌剂中以咪鲜胺对蓝莓采后腐烂病原菌主要致病菌蓝莓采后腐烂病原表现出较强的抑菌活性,其EC_(50)值分别为0.007 9μg·mL~(-1),推荐作为蓝莓田间防控的有效药剂。     

宁夏‘灵武长枣’采后病原真菌的分离与鉴定

为明确宁夏地区‘灵武长枣’采后病原真菌类型,以‘灵武长枣’为试材,利用常规组织分离法从‘灵武长枣’腐坏组织中分离真菌菌株;根据柯赫氏法则对分离菌株进行致病性检验;经形态学特征和真菌rDNA-ITS序列分析对‘灵武长枣’采后病原真菌进行鉴定。结果表明,从‘灵武长枣’腐烂组织中共分离出9类真菌菌株,其中5类是引起宁夏‘灵武长枣’采后腐烂的病原真菌,分别鉴定为交链格孢(Alternaria alternata)、灰葡萄孢(Botrytis cinerea)、米根霉(Rhizopus oryzae)、出芽短梗霉(Aureobasidium pullulans)和球派伦霉(Peyronellaea glomerata)。其中,出芽短梗霉(A.pullulans)和球派伦霉(P.glomerata)首次从‘灵武长枣’腐烂组织中分离得到,为后续的‘灵武长枣’采后保鲜研究奠定了基础。     

一株动性杆菌的生理学特性研究及其鉴定

从新疆泥火山样品中分离得到1株细菌ljh-5,经过16SrDNA分子鉴定,该菌株与动性杆菌属(Planomicrobium)的相似度最高为90%,结合菌株、菌落特征及其生理生化特性,初步鉴定该菌为动性杆菌属新种。并对该菌株生长特性进行研究。     

甜瓜细菌性软腐病病原鉴定

近年来,浙江义乌等地的甜瓜(CucumismeloL.)果实上普遍发生一种外观褐色小斑,果肉水渍状腐烂现象,局部田块发病率高,损失严重。为确定病原,从病果上分离到4个细菌菌株,分别定名为M1、M2、M3和M4。烟草过敏性反应和致病性测定表明M2和M4不具致病性,而M1和M3在烟草上能引起典型的过敏性坏死反应,接种甜瓜24h内即导致果实的明显腐烂,所引起的腐烂症状与田间发病果实一致。对M1和M3进行培养性状、革兰氏染色、形态学和鞭毛观察、马铃薯薯块腐烂试验,以及16SrRNA基因测序和比较,结果证明该病害是由软腐欧氏杆菌软腐亚种Erwiniacarotovorasubsp.carotovora引起。     

冬枣炭疽病病原鉴定

冬枣炭疽病主要危害冬枣果实,可导致果实腐烂和提早落果,使品质下降,产量降低.2008～2010年对山东滨州不同冬枣园区冬枣炭疽病病果进行分离、回接和再分离,依照柯赫氏法则进行判断.结果表明:冬枣炭疽病病原为胶孢炭痘菌(Colletotrichum gloeosporioides).     

花椒根部腐烂病原菌的分离与鉴定

我们在江津发现九叶青花椒根部腐烂后导致果实脱落。为此,开展了该病原的分离鉴定。结果表明,该真菌属于腐皮镰刀菌[Fusarium solzni（Mart．）Szcc],引起九叶青花椒根腐。     

辽东地区蓝莓根际土壤线虫的营养类群结构

【目的】针对辽东地区蓝莓根际土壤线虫的营养类群进行研究。【方法】利用比较形态学分类方法对辽东地区蓝莓根际土壤线虫的主要属种进行了分类鉴定。【结果】共鉴定出土壤线虫9806条,分属19个科29个属。其中食细菌线虫类群(bacterial feeder,BF)和植物寄生线虫类群(plant parasitic feeder,PP)较多,食真菌线虫类群(fungi feeder,FF)较少,杂食-捕食性线虫类群(omnivore-predators feeder,OP)数量最少;非植物寄生线虫属18个,植物寄生线虫属11个,植物寄生线虫属占总调查属数量的1/3以上,尤其是垫刃线虫属(Tylenchus)、伪垫刃线虫属(Nothotylenchus)的线虫检出频率较高,分别涉及蓝莓的10个和7个品种,占调查蓝莓品种总数的83%和58%。【结论】辽东地区蓝莓根际土壤中植物寄生线虫数量超出土壤线虫正常范围的阈值。     

预冷结合硅窗气调包装对蓝莓贮藏期品质的影响

以江苏省连云港市栽培的‘蓝丰’蓝莓为研究材料,采后2 h内预冷至5℃,分别装入硅窗气调大帐和普通PVC大帐内,置于0℃冷库内贮藏,研究蓝莓采后及时预冷结合硅窗气调包装处理对蓝莓贮藏期品质的影响。结果表明,与对照组相比,蓝莓果实采后及时预冷处理和硅窗气调包装均可降低蓝莓贮藏期呼吸代谢,延缓果实硬度下降,抑制可溶性固形物含量上升和花青素分解,降低果实腐烂损耗。其中采后及时预冷结合硅窗气调包装处理保鲜效果最佳,贮藏至40 d,果实腐烂率仅为6.1%,较好地保持了果实商品价值。     

蓝莓采后病害的病原鉴定及发生规律研究

【目的】明确蓝莓采后病害病原和采后病害的发生规律。【方法】从辽南地区收集7个蓝莓品种,并对其果实进行室温贮藏。待果实自然发病后,采用常规组织分离法分离致病菌并按科赫法则进行致病性测定。调查不同时间点、不同发病部位有、无果柄贮藏的蓝莓果实采后病害的发生情况。【结果】从蓝莓病果中分离得到4种致病菌,分别为灰葡萄孢菌Botrytis cinerea Pers.、链格孢菌Alternaria sp.、青霉菌Penicillium sp.和粉红单端孢菌Trichothecium roseum,它们的带菌率分别为81.85%、77.23%、62.43%和17.19%,致病性验证它们都能使蓝莓果实感病;无果柄贮藏的蓝莓果实比带果柄的采后病害发生严重,其中带果柄贮藏6d平均发病率为2.95%,而无果柄发病率达到了21.81%;不同品种果蒂痕处和果实其他部位的平均发病率分别为21.52%和5.56%;不同蓝莓品种采后病害进展较快的是‘伯克利’和‘瑞卡’,发病较慢的是‘N5’,而‘蓝丰’‘北陆’‘斯巴坦’和‘蓝鸟’发病进程居中。【结论】辽南地区引起蓝莓采后病害的致病菌分别为灰葡萄孢菌Botrytis cinerea Pers.、链格孢菌Alternaria sp.、青霉菌Penicillium sp.和粉红单端孢菌Trichothecium roseum;蓝莓采后病害的主要发病部位是果蒂痕处;对采后病害较抗病的品种有‘N5’,较感病品种有‘伯克利’和‘蓝丰’,‘瑞卡’‘北陆’‘斯巴坦’和‘蓝鸟’的抗性居中。     

兔眼蓝莓园蓝在昆明的引种表现及栽培要点

兔眼蓝莓(越桔)Vaccinium ashei Reade适宜于热带及亚热带丘陵地区种植,在我国主要适于长江流域以南、华南等地区的丘陵地带栽培[1]。云南省具有适宜蓝莓发展的生态条件,现有蓝莓栽培面积50hm2左右,并在云南澄江、江川、石林、寻甸等地设有产业化生产基地。2009年开始在滇中地区从事蓝莓引种筛选试验研究,根据两年的引种试验观察,     

CO2冲击不同时间后气调贮藏对蓝莓货架期品质的影响

以'粉蓝'蓝莓为试材,采用CO2冲击不同时间后贮藏于气调环境内60 d,出库后进行货架试验,研究各处理对蓝莓货架期品质的影响,以期为延长蓝莓的货架期提供参考依据.结果表明:通过CO2冲击后,贮藏及货架期果实品质均要好于对照组,而冲击时间不同,效果也不同;其中冲击24 h的果实表现最好,其在贮藏后的货架期腐烂率、呼吸强度、脂氧合酶(LOX)和过氧化物酶(POD)活性最低,硬度、可溶性固形物含量、花色苷含量、维生素C含量、多酚含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性能维持最高.综上,通过采后CO2冲击能有效的延长贮藏后蓝莓果实的货架期,但冲击时间不宜过长,以24 h为宜.     

防治番茄青枯病内生细菌的分离与筛选

从番茄健株根内分离获得内生细菌 ,对其进行平板拮抗番茄青枯菌试验 ,得到 18株拮抗菌。温室控病试验表明 ,0 1 144和 0 1 182号菌株的控病效果分别为 48.6 %和 42 .8%,经鉴定两者均属芽孢杆菌属 (Bacillsspp)。