5-羟色胺在动情周期大鼠子宫中的分布

【目的】研究5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)在不同动情周期SD大鼠子宫中的分布情况和变化规律,探讨5-HT在雌性生殖系统中的作用。【方法】采用阴道涂片法鉴定动情周期,选取均为正常动情周期的20只雌性SD大鼠,将其分为动情前期、动情期、动情后期和动情间期4组,处死各组大鼠,取子宫制作石蜡切片,经免疫组织化学超敏SP法染色后,观察5-HT在不同动情周期大鼠子宫中的分布及变化规律。【结果】5-HT免疫阳性产物在子宫各层中均有不同程度的分布,其中主要存在于子宫内膜上皮细胞、子宫腺上皮细胞、血管内皮细胞、基质细胞以及子宫内膜固有层中的胚性结缔组织细胞中。子宫内膜固有层以椭圆形状和圆形的5-HT阳性细胞为主。此外,还有一些呈细丝状、串珠状的5-HT阳性神经纤维分布于子宫内膜固有层。环行肌层多为细丝状和串珠状且粗细不等的5-HT阳性神经纤维。纵行肌层5-HT阳性产物呈点状、细丝状、椭圆形状和串珠状分布。子宫内膜和肌层5-HT阳性产物在动情期和动情间期均呈强阳性表达,而在动情前期和动情后期均呈弱阳性表达。【结论】5-HT在不同生理时期大鼠子宫中的表达分布存在一定规律性,可能与其生理调节功能有关。     

神经肽Y在动情周期大鼠子宫中的分布

【目的】研究神经肽Y(Neuropeptide Y,NPY)免疫反应阳性物质在大鼠动情周期子宫中的分布情况及其变化规律。【方法】采用阴道涂片法鉴定发情周期,选取情期正常的20只雌性大鼠,均分为动情前期、动情期、动情后期和动情间期4组,处死各组大鼠,取子宫制作石蜡切片,经免疫组织化学SP法染色后,观察NPY在大鼠动情周期子宫中的分布及变化规律。【结果】在内膜层,大多数NPY免疫阳性产物位于细胞中,小部分位于点状和细丝状纤维中。在肌层,NPY免疫阳性产物主要位于NPY纤维中。NPY免疫阳性产物相对表达量的t检验结果表明,子宫内膜NPY在动情期和动情间期的表达较动情前期显著减少(P0.05),较动情后期极显著减少(P0.01);子宫肌层NPY在动情后期的表达较动情期显著回升(P0.05),在动情间期的表达较动情后期极显著减少(P0.01)。【结论】NPY在不同生理时期大鼠子宫中的表达分布存在一定规律性,可能与其生理调节功能有关。     

S100蛋白在动情周期大鼠子宫中的分布

【目的】研究S100蛋白在动情周期SD大鼠子宫中的分布情况及其变化规律。【方法】采用阴道涂片方法将16只雌性SD大鼠分为动情前期、动情期、动情后期和动情间期4组,处死各组大鼠取子宫制作石蜡切片,采用免疫组织化学超敏感法(Streptavidin-Peroxidase,SP),研究S100蛋白在大鼠动情周期子宫中的分布规律。【结果】S100蛋白免疫阳性产物在各期子宫各层中均有不同程度的分布,主要定位于子宫内膜上皮细胞、腺上皮细胞、基质细胞、血管内皮细胞、血管平滑肌细胞、肥大细胞、平滑肌细胞及成纤维细胞中。S100蛋白免疫阳性产物在动情周期子宫内膜、肌层和外膜中的表达变化规律一致:动情前期着色最弱,动情期着色最深,动情后期着色变浅,动情间期着色又加深,表达呈双峰变化趋势。【结论】S100蛋白在动情周期SD大鼠子宫中的表达具有一定规律,可能受性类固醇激素的调节。     

突触素在动情周期大鼠子宫中的分布

【目的】研究突触素(SYP)在大鼠动情周期子宫内的分布情况及变化规律。【方法】选择健康、未产、体质量220~250 g成年雌性SD大鼠,采用阴道涂片法鉴定其动情周期,并采用免疫组化超敏SP(Streptavidin-Perox-idase,SP)法研究突触素在大鼠动情周期子宫内分布的变化规律。【结果】大鼠子宫各层组织中均有不同程度SYP免疫阳性产物的分布,并随动情周期的变化表现出一定规律:子宫内膜着色强弱各期差别不大,黏膜上皮细胞、腺上皮细胞及血管内皮细胞基本不着色或少许胞浆淡染,但其基底面均有较深SYP免疫阳性产物分布,动情前期着色最深,动情期、动情后期、动情间期依次减弱,后2期差别不明显;肌层和子宫外膜中,动情前期着色最深,动情期着色减弱,动情后期着色最浅,动情间期表达量明显回升,后3期与动情前期相比差异均极显著(P<0.01)。【结论】突触素在动情周期子宫中的分布表达具有一定的规律,可能受性类固醇激素的调节。     

鸡肠道组织中血管活性肠肽的分布特点

为探讨鸡肠道组织中肽能神经支配的途径及其功能,运用免疫组织化学超敏SP法,对不同生长阶段鸡肠道中血管活性肠肽(Vasoactive intestinal peptide,VIP)的分布特点进行了研究。结果显示,肠壁中VIP的表达范围较为广泛,涉及黏膜上皮和固有层、肌层和外膜,尤以固有层和肌层最为典型;随着日龄增加,黏膜上皮间VIP阳性细胞数量逐渐增多;从肠道不同部位的分布来看,十二指肠中VIP的表达强于同时期其他部位,空肠中的表达次之,回肠和盲肠的表达相对较弱。黏膜固有层和肌层一直分布有染色较深的VIP阳性神经纤维,呈串珠状、细线状或膨体状。提示鸡肠道是产生VIP的又一个重要部位,肠道中的VIP可参与鸡免疫器官的功能调节,并作为一种信息分子介导神经内分泌系统和黏膜免疫系统之间的相互作用。     

鸡法氏囊中血管活性肠肽的表达特点

运用免疫组织化学超敏SP法对鸡不同生长阶段法氏囊中血管活性肠肽(VasoactiveIntestinal Peptide,VIP)的表达特点进行了研究。结果显示,法氏囊中VIP的表达范围广泛,涉及黏膜、黏膜下层和肌层,尤以黏膜上皮细胞和法氏囊小结髓质的表达为典型;随着日龄增加,黏膜上皮细胞VIP表达逐渐减弱,囊小结髓质一直保持较强的VIP阳性着色,囊小结皮髓质交界处上皮细胞层内VIP强阳性细胞有逐渐增多的趋势。鸡法氏囊中VIP阳性反应物质的广泛分布,提示法氏囊是神经系统以外产生VIP的又一个重要部位,法氏囊中的VIP可参与鸡免疫器官的功能调节,可作为一种信号分子介导神经内分泌系统和免疫系统间的相互作用。     

VIP免疫反应神经纤维在大鼠和小鼠子宫中的分布

应用免疫细胞化学技术,对大鼠和小鼠子官VIP免疫反应神经纤维的分布进行了观察。结果发现,大鼠和小鼠子宫均含有丰富的VIP免疫反应神经纤维,子宫壁各层均有分布,血管层和内膜中最多。在子宫角、子官体和子宫颈间未见明显差异。VIP免疫反应神经纤维的直径大部分为3～7μm,在肌层和内膜还见到直径6～9μm,甚至16μm以上短而粗的纤维束。VIP免疫反应神经纤维在子宫壁血管旁、上皮下和肌束间均有分布,提示VIP作为神经递质可能参与子宫功能活动的调节。     

血管活性肠肽在皖西白鹅下丘脑与垂体中的分布

【目的】对青春期和休产期皖西白鹅下丘脑和垂体中血管活性肠肽的分布与表达进行研究。【方法】采集青春期和休产期皖西白鹅的下丘脑和垂体,应用免疫组织化学PV-9000二步法并结合DAB显色技术,对血管活性肠肽的免疫反应阳性分布进行定位,并用Image-Pro Plus 6.0软件分析阳性区域的累积光密度值。【结果】血管活性肠肽免疫反应阳性细胞主要分布于青春期和休产期皖西白鹅下丘脑的弓状核、室旁核、内侧核、视上核、乳头体内侧核等处及腺垂体中;休产期皖西白鹅下丘脑和垂体中的血管活性肠肽的累积光密度值显著高于青春期。【结论】血管活性肠肽可能对皖西白鹅的休产状态有一定的调控作用。     

5-HT及5-HT1A受体在不同妊娠阶段大鼠子宫中的分布

 【目的】研究5-羟色胺（5-hydroxytryptamine,5-HT）及5-HT1A受体在SD大鼠妊娠期子宫中的分布情况和变化规律。【方法】选取均为正常妊娠的30 只雌性SD大鼠分为妊娠3 d、妊娠5 d、妊娠7 d、妊娠13 d、妊娠19 d及产后第1天6组,处死各组大鼠,取子宫制作石蜡切片,经免疫组织化学SP 法染色后,进行观察分析。【结果】5-HT及5-HT1A受体免疫阳性产物广泛存在于子宫内膜上皮细胞、子宫腺上皮细胞、血管内皮细胞、基质细胞、蜕膜细胞、免疫细胞及肌纤维中;5-HT在妊娠7 d和妊娠13 d着色最深,5-HT1A受体在妊娠13 d着色最深。5-HT及5-HT1A受体免疫阳性产物相对表达量的T检验表明,子宫内膜5-HT在妊娠7 d和妊娠13 d的表达较妊娠3 d、妊娠5 d和产后极显著的增加（P＜0.01）,较妊娠19 d显著增加（P＜0.05）;子宫肌层5-HT在妊娠19 d的表达较妊娠7 d显著减少（P＜0.05）,较妊娠13 d极显著的减少（P＜0.01）。子宫内膜5-HT1A受体在妊娠13 d较妊娠3 d、妊娠5 d、妊娠19 d及产后极显著的增加（P＜0.01）,较妊娠7 d显著增加（P＜0.05）;子宫肌层5-HT1A受体在妊娠13 d较妊娠各个时期极显著增加（P＜0.01）。5-HT和5-HT1A受体在妊娠期子宫中的表达,具有极显著的正相关性。【结论】5-HT和5-HT1A受体在妊娠期子宫中的表达具有一定规律,5-HT通过5-HT1A受体参与妊娠的调节。     

主动免疫血管活性肠肽对泰和鸡繁殖性能的影响

５６周龄的母泰和鸡分为３组，第１组（ｎ＝３５）用血管活性肠肽（ＶＩＰ）类似物与牛血清白蛋白（ＢＳＡ）的偶联物进行免疫，第２组（ｎ＝３３）用矿油佐剂与水的乳化物进行注射，第３组（ｎ＝３６）作空白对照。试验结果显示：与对照组相比，免疫组日抱窝率明显减少，产蛋高峰后的产蛋率明显高于对照组，且各组间蛋的受精率和孵化率无明显差异。第１、２组血浆ＶＩＰ类似物抗体及催乳素（ＰＲＬ）水平的酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测结果显示：第１组二免后ＶＩＰ类似物抗体水平最高，Ｐ／Ｎ达４９３±１１６，而第２组的检测结果为阴性；第１组免疫后的血浆ＰＲＬ水平明显低于同期的第２组。以上结果表明，在泰和鸡中主动免疫ＶＩＰ可以降低血浆的ＰＲＬ水平，减少抱窝率，提高产蛋率。     

甘加型藏绵羊发情周期内输卵管和子宫中MTR1a mRNA的表达

旨在研究褪黑素受体(MTR1a)基因在甘加型藏绵羊(Ganga Tibetan ovis aries)输卵管和子宫组织中的表达规律,选取发情周期内正常且未孕的甘加型藏绵羊32只,应用qRT-PCR方法检测输卵管和子宫组织中MTR1a基因的表达差异。结果显示:在整个发情周期中,甘加型藏绵羊输卵管和子宫中均有MTR1a mRNA表达。在发情前期、发情期、发情后期、间情期4个阶段,输卵管组织中MTR1a mRNA的相对表达量分别为0.604±0.253、 0.033±0.031、 0.202±0.151和1.000±0.221,间情期的相对表达量最高,与发情期差异极显著,与其他时期差异显著;子宫组织中MTR1a mRNA的相对表达量分别为0.188±0.086、0.525±0.347、1.878±0.209和1.000±0.094,发情后期的相对表达量最高,与其他3个时期差异极显著。发情周期内MTR1a基因在输卵管和子宫中的表达变化规律表明褪黑素(Melatonin,MT)在动物排卵、受精及早期胚胎发育过程中起调节作用。     

催产素受体在山羊结状神经节的分布

为研究山羊结状神经节（Nodose ganglion,NG）的神经细胞内是否具备接受催产素（Oxytocin,OT）调节的条件。选取成年山羊结状神经节,采用免疫组化 SP 法检测催产素受体（Oxytocin receptor,OTR）在结状神经节内各种结构上的分布特点,用Image-pro plus 6.0分析结状神经节神经细胞和非神经细胞结构的催产素受体表达差异性。结果表明,结状神经节内OTR免疫阳性产物分布广泛,神经细胞、过路神经纤维、血管内皮细胞、支持细胞和雪旺细胞均有不同程度的着色。神经细胞胞核和支持细胞着色最深,为棕褐色,OTR分布强阳性。大部分神经细胞胞质着色为黄褐色,OTR分布中等阳性,这部分神经细胞胞质约占神经细胞总数的78%。血管内皮细胞、细胞膜,以及一小部分神经细胞胞质着色较浅,为淡黄色,OTR分布弱阳性。神经细胞胞核的核仁呈圆形,着色极浅或不着色,OTR分布阴性。图像分析表明神经细胞胞体的相对表达量与其他非神经结构差异极显著。OTR免疫阳性产物在山羊NG中广泛表达,且主要分布在NG内脏感觉神经细胞内,提示催产素有可能作用于NG内脏感觉神经细胞,从而通过内脏反射弧传入神经纤维影响内脏器官活动,而NG可能成为OT对内脏器官进行内分泌调节和通过自主神经对内脏器官进行神经调节两者相互协调作用的节点。     

VIP基因在狮头鹅繁殖周期下丘脑-垂体-性腺轴中的表达变化

为了探索狮头鹅繁殖周期下丘脑-垂体-性腺轴中VIP mRNA的表达规律,选取产蛋期、就巢期、休产期狮头鹅母鹅各6只,采用荧光定量PCR方法分别测定了各时期下丘脑、垂体及卵巢VIP mRNA的表达水平。结果表明,狮头鹅就巢期血清催乳素(PRL)质量浓度为30ng/mL,明显高于产蛋期和休产期(P<0.01),下丘脑就巢期VIP mRNA的表达量较其他繁殖周期高(P<0.05),而垂体产蛋期VIP mRNA的表达量最高(P<0.01)。提示狮头鹅下丘脑-垂体-性腺轴中VIP mRNA的表达水平与PRL分泌密切相关,PRL是狮头鹅就巢行为维持和发展的关键激素。     

甘加藏羊发情周期和乏情期血浆T3和T4浓度动态变化及HPOA轴 DIO2和 DIO3的表达

为探讨甲状腺激素（T3、T4）及其合成酶（ DIO2、 DIO3）对甘加藏羊生殖活动的调控,本研究以发情周期和乏情期甘加藏羊（Ovis arise）为研究对象,应用酶联免疫吸附法、实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹技术检测甘加藏羊发情周期和乏情期血浆中T3和T4的动态变化、下丘脑-垂体-卵巢轴（Hypothalamic-pituitary-ovarian axis, HPOA）及甲状腺组织中 DIO2、 DIO3 mRNA和蛋白的表达。结果显示：整个发情周期和乏情期血浆中T3和T4浓度均以脉冲式和波动式交替变化,T4的浓度均显著高于T3,T3的平均浓度在发情前期最高,T4的平均浓度在发情期最高,与其他各时期比较差异均显著。藏羊发情周期和乏情期HPOA和甲状腺组织中均有 DIO2 、 DIO3 mRNA及其蛋白的表达,且差异显著;垂体、卵巢、甲状腺 DIO2 mRNA及其蛋白的相对表达量均高于 DIO3 mRNA及其蛋白的相对表达量。甘加藏羊发情周期和乏情期血浆T3、T4的浓度和 DIO2、 DIO3在HPOA及甲状腺组织中的表达呈现动态变化,表明甲状腺激素及其合成酶参与调控甘加藏羊的生殖活动。